合并颅脑损伤的股骨干骨折修复中NGF变化的意义分析

目的研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的变化对合并颅脑损伤的股骨干骨折患者修复的影响及意义。方法随机选取33例合并颅脑损伤的股骨干骨折患者(研究组),32例单纯性脑损伤患者(脑损伤组),33例单纯性股骨干骨折患者(骨折组),检查各组患者治疗3d末、10d末、3周末、6周末血清中NGF含量变化,同时统计并比较各组患者骨折修复时间。结果 (1)各组患者随着病程加长NGF阳性细胞数均有一定程度增加。研究组与脑损伤组和骨折组相比,其含量具有显著性差异。3组中骨折组NGF阳性细胞数增加得最少,脑损伤合并股骨干骨折的患者增加的最多。(2)骨折越严重,患者血清NGF阳性细胞数越高,且研究组较骨折组显著升高。(3)与单纯性骨折患者相比,合并颅脑损伤的股骨干骨折患者骨折痊愈时间显著缩短,研究组各时间段内痊愈人数均多于骨折组。14周内研究组骨折痊愈率为100%,骨折组为97.0%。结论 NGF可促进骨折的修复,有利于患者痊愈。     

视神经不完全损伤动物模型视神经TrkA表达及局部缓释NGF对其表达的影响

目的 观察TrkA在不完全损伤视神经上的表达及医用生物蛋白胶局部缓释神经生长因子对其表达的影响.方法 雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组,损伤组双侧视神经均用动脉瘤夹临时阻断夹钳夹30 s,神经生长因子组双侧视神经均用动脉瘤夹临时阻断夹钳夹30 s后局部应用含有神经生长因子的医用生物蛋白胶,正常组不做任何处理.以RT-PCR方法检测各组伤后3、5、7、10d视神经TrkAmRNA的表达情况.结果 正常组相对值为0.44±0.06.损伤组和神经生长因子组3 d后表达有明显增高,其中损伤组第3、5、7、10天分别增高至正常的7.1、35.0、19.6和9.5倍,NGF组第3、5、7、10天分别增高至正常的8.0、32.4、20.4和8.5倍;两组之间不同时间测定值差异均无统计学意义(P>0.05).结论 视神经不完全损伤后TrkA表达短期内增高,局部应用医用生物蛋白胶缓释神经生长因子不影响其表达.     

幼龄和老龄大鼠液压颅脑伤后NGFmRNA表达差异

目的观察幼龄和老龄大鼠颅脑损伤后神经生长因子信使RNA(nerve growth factor mRNA ,NGFmRNA)表达差异,探讨老年动物中枢神经损伤后神经功能缺失较多的病理生理机制,以及改善老年颅脑损伤预后的方法.方法采用大鼠侧方液压打击颅脑损伤模型,应用原位杂交方法和计算机显微图象分析技术,比较幼龄(2～3个月)和老龄(15个月)大鼠脑损伤后12 h脑内 NGFmRNA 表达水平的差异,并用β2 受体激动剂克仑特罗(clenbuterol,CLE)作为干预手段,观察其对幼龄和老龄大鼠受损脑组织 NGFmRNA 表达的调节作用.结果液压打击伤后12 h,两组大鼠损伤脑组织NGFmRNA表达均有不同程度的增加,但是老龄鼠损伤侧大脑皮层NGFmRNA表达明显低于幼龄鼠( P <0.05);伤后立即应用CLE(0.5 mg/kg,腹腔注射)并不提高幼龄大鼠受伤脑组织NGFmRNA的表达,但可显著提高老龄鼠NGFmRNA的表达( P <0.01).结论脑损伤早期老龄鼠NGFmRNA表达较低提示老年动物受损脑组织修复能力减低,这为我们认识临床上老年颅脑损伤后神经功能缺失较多的原因提供了帮助;CLE能够增加老龄大鼠受损脑组织NGFmRNA表达并可能由此提高老年动物的神经修复能力.     

RhoE在胶质瘤组织中的表达及意义

目的探讨RhoE蛋白在胶质瘤恶性进展中的作用以及与临床预后的关系。方法应用免疫组化法检测2例正常脑组织和37例不同病理级别人脑胶质瘤瘤组织中RhoE蛋白表达情况,评估RhoE蛋白表达与胶质瘤的病理分级及临床预后的关系。结果 RhoE蛋白在正常脑组织和胶质瘤中的免疫染色评分分别为7.00±1.00和3.32±0.372。RhoE蛋白表达与胶质瘤恶性程度呈负相关,相关系数r=-0.733。RhoE蛋白免疫染色评分小于4的胶质瘤患者生存期较短(P<0.05)。结论 RhoE在胶质瘤的发生进展中呈负调控作用,RhoE的低表达与胶质瘤临床预后较差相关,其表达情况对判断胶质瘤患者的预后有一定的参考价值。     

NGF联合自体骨髓干细胞动员治疗重型颅脑损伤疗效观察

目的探讨神经生长因子(NGF)联合自体骨髓干细胞(BMSCs)动员治疗重型颅脑损伤的临床疗效和安全性。方法选取60例重型颅脑损伤患者按随机数字表分为对照组(30例,给予NGF和综合康复治疗)和观察组(30例,在对照组治疗基础上加用自体BMSCs动员治疗),比较2组患者神经功能缺损评分(NIHSS)、格拉斯哥预后评分(GOS)及不良反应。结果 2组患者治疗28d的NIHSS评分均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组较对照组降低更为显著(P<0.05);观察组伤后6个月GOS评分明显高于对照组(P<0.05),外周血CD34+、CD133+占外周血单核细胞比率治疗3周时明显高于对照组(P<0.05)。2组患者均未出现明显不良反应。结论 NGF联合自体BMSCs动员及综合康复治疗可促进重型颅脑损伤患者神经损伤的修复,显著改善患者神经功能。     

人脑挫裂伤早期HMGB1的表达变化特征

目的探讨人脑挫裂伤早期HMGB1表达的变化特征。方法收集人脑挫裂伤后不同时间点挫裂伤组织的标本(正常组、6h、12h、24h、72h),4%多聚甲醛固定,冰冻切片,然后进行免疫荧光染色,统计分析各时间点HMGB1的表达情况;同时将HMGB1与神经元标志物NeuN进行共标,观察人脑挫裂伤后早期神经元损伤过程中从核内向胞浆内转移的情况。结果正常人脑组织的HMGB1表达主要集中在细胞核内,与正常组相比较,人脑挫裂伤组在伤后HMGB1阳性细胞数于12h开始下降(P0.05),并持续至72h;而HMGB1从核内转移至胞浆内的数目从6h即开始增加(P0.05),随时间增加HMGB1也随之大量转移到胞浆中,在人脑挫裂伤后24h达到高峰(P0.05)。人脑挫裂伤后早期,HMGB1主要表达在神经元中(P0.05),脑挫裂伤后神经元的数目逐渐减少(P0.05),而HMGB1从神经元核内转移至胞浆的比例在6h明显增加(P0.05),于24~72h达到高峰(P0.05)。结论人脑挫裂伤后早期神经元死亡或凋亡数目明显增加,HMGB1阳性细胞数也在损伤后减少;而HMGB1神经元从核内转移至胞浆的比例升高;HMGB1可能参与了脑挫裂伤后神经元的死亡或凋亡。     

重型颅脑损伤老年患者的护理特点及体会

目的探讨重型颅脑损伤老年患者的护理特点及护理经验。方法回顾性分析2004年1月至2006年12月收治的61例老年重型颅脑损伤患者的临床护理情况。结果61例中，痊愈31例，中残9例，重残5例，植物状态生存2例，死亡14例。结论加强临床观察、呼吸道管理、营养支持、预防并发症以及心理护理是降低死亡率及致残率的有效方法。     

探讨垂体前叶细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与脑组织神经生长因子(NGF)的表达水平在颅脑损伤中的临床意义

目的 探讨垂体前叶细胞激素、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与脑组织神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达水平在颅脑损伤中的临床意义。方法 选取2015年7月-2017年7月本院收治60例颅脑损伤患者,根据GCS评分分为轻、中和重型组; 收集患者血液和脑脊液并检测垂体前叶激素、HIF-1α和NGF水平。结果 与轻型组比较,中型组和重型组颅脑损伤患者血清内ACTH、GH、HIF-1α和NGF水平显著升高,脑脊液内HIF-1α和NGF水平显著升高,且随着疾病严重程度的加重而逐渐升高(P<0.05),而轻型组、中型组和重型组颅脑损伤患者血清内TSH和LH水平随着疾病严重程度的加重,患者血清内水平并无明显改变。结论 颅脑损伤患者血液和脑脊液内垂体前叶激素、HIF-1α和NGF水平异常升高; 患者血液和脑脊液垂体前叶激素、HIF-1α和NGF水平升高与颅脑损伤的严重程度有一定的关系。     

脑膜瘤组织中EGFR、PCNA表达及其意义

目的 探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR)表达与脑膜瘤增殖活性的关系。方法 采用LSAB免疫组化方法检测39例脑膜瘤中EGFR、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果 脑膜瘤中EGFR表达阳性率为92.3%(36/39)，不同级别脑膜瘤中EGFR表达强度的差异有显著性（P＜0.01)。PCNA标记指数（PCNA labeling index,PCNA LI)与脑膜瘤的病理分级有明显相关（P＜0.01)。EGFR与PCNA表达呈显著正相关（P＜0.01)。结论 EGFR可能在某些脑膜瘤的恶性发展中起重要作用。     

神经生长因子及其两种脑内促生剂对老年大鼠脑内M胆碱能受体的影响

目的 观察神经生长因子(NGF)及其两种脑内促生剂丙戊茶碱(PPF)和左旋乙酰肉毒碱(ALCAR)对老年大鼠脑中M胆碱能受体的影响，进一步探讨NGF抗衰老作用的途径和机制。方法 采用放射配体结合实验检测经脑室注射NGF和分别口服PPF和ALCAR的老年大鼠(24月龄)脑组织中M胆碱能受体的数量和亲和力。结果 脑室注射NGF和口服PPF的老年大鼠脑组织中M受体的结合容量(Bmax)明显高于对照组；而ALCAR治疗组效果不明显。结论 外源性NGF和PPF可使老年大鼠脑组织中M受体的数量增多，进而改善中枢胆碱能系统的功能。     

轻型颅脑损伤对大鼠脑源性神经营养因子基因表达的影响及意义

目的探讨轻型颅脑损伤对大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响及意义.方法120只成年SD大鼠根据性别不同分为雌性对照组、雌性实验组、雄性对照组和雄性实验组,每组30只.两实验组建立侧位液压冲击轻型颅脑损伤模型.Morris水迷宫试验测试大鼠学习记忆能力,RT-PCR检测海马中BDNF mRNA的表达.结果水迷宫定位航行试验第4天,同性别大鼠实验组平均逃逸潜伏期较对照组明显延长(P＜0.05);空间探索试验同性别大鼠实验组寻找平台潜伏期较对照组明显延长(P＜0.05),穿越平台次数较对照组减少(P＜0.05);同性别大鼠实验组大脑海马中BDNFmRNA的表达显著低于对照组(P＜0.01).结论侧位液压冲击轻型颅脑损伤会降低模型鼠大脑海马中BDNF mRNA的表达,并可能因此导致大鼠学习记忆能力下降.     

神经干细胞在脑损伤模型中的迁移、成活和神经生长因子表达

目的 探讨神经干细胞在脑损伤模型中的迁移、成活和神经生长因子(NGF)表达.方法 SD大鼠30只随机分为3组:正常对照组(n=5)、损伤组(n =10)和移植组(n=15).正常对照组不做任何处理,损伤组和移植组均制备脑损伤模型,且移植组大鼠从尾静脉注入外源性神经干细胞.并观察神经干细胞在大鼠脑内的迁移和存活情况,同时通过免疫组织化学染色检测各组大鼠脑内NGF阳性细胞数量.结果 神经干细胞移植2周后,其向脑损伤区域发生迁移,并在损伤区域聚集和存活;且移植组NGF阳性细胞数目较正常对照组和损伤组显著增多(p＜0.05).结论 外源性神经干细胞经尾静脉注射移植后能自动向脑损伤区域迁移、聚集并存活,并可促进受损脑内的NGF表达.     

缝隙连接蛋白Cx43在爆炸伤兔脑组织中的表达

目的研究缝隙连接蛋白Cx43在爆炸伤脑组织中的表达。方法新西兰大白兔80只,随机分为对照组(n=10)和颅脑损伤组(n=70)。颅脑损伤组采用纸雷管制作兔颅脑爆炸伤模型,对照组不行爆炸致伤。颅脑损伤组根据处死时间再分为伤后即刻、6h、12h、24h、3d、7d、14d等7组,每组10只。采用苏木精-伊红染色、免疫组化法及Western-blot法观察各组兔脑组织病理变化及Cx43在皮质的表达。结果颅脑损伤组内各时间点Cx43表达差异显著(P0.01),随时间推移,Cx43表达逐渐增加,伤后6h即可见表达增强,3d达到高峰,14d基本正常。颅脑损伤组各时间点Cx43表达均高于对照组(P0.01)。结论颅脑损伤后Cx43表达逐渐增加,其变化规律与颅脑损伤进展的时间框架相吻合,提示Cx43参与颅脑损伤的病理形成过程,在颅脑损伤早期发挥协同杀伤效应,加重继发性脑损害。     

颅脑外伤后血清、脑脊液髓鞘碱性蛋白的变化及其临床意义

目的①探讨颅脑外伤后血清、脑脊液髓鞘碱性蛋白（MBP）的变化及其意义；②探讨血清、脑脊液MBP水平与伤情、CT、颅内压（ICP）、脑灌注压（CCP）的关系。方法采用免疫组化法测定90例颅脑损伤病人伤后24h内、3d、7d时的血清、脑脊液MBP水平，并结合颅脑损伤程度、CT、ICP、CPP进行分析。结果①颅脑损伤病人血清、脑脊液MBP浓度升高的程度与脑损伤程度密切相关；②血浆、脑脊液MBP水平随ICP增加而升高，随CPP增高而降低；③血清、脑脊液MBP水平随CT图像改变而变化。结论监测血清、脑脊液MBP浓度，联合CT、ICP、CPP等指标，可更准确地判断病情。     

Exogenous NGF restores endogenous NGF distribution in the brain of the cognitively impaired aged rat

Alzheimer's disease and normal aging may impair retrograde transport of nerve growth factor (NGF) from cortical areas to basal forebrain cholinergic neurons. We demonstrate a relationship between performance in a spatial reference memory task and NGF distribution in the aged rat brain. In addition, exogenous NGF restored endogenous NGF distribution in cognitively impaired aged rats. These data suggest that NGF administration restores utilization of endogenous growth factor in the brain of cognitively impaired aged rats.     

NGF receptor immunoreactivity in aged rat brain

The cellular distribution of nerve growth factor (NGF) receptor (NGFR) immunoreactivity in 3 cholinergic nuclei (medial septal nucleus, nucleus of the diagonal band and nucleus basalis magnocellularis) of the aged rat brain was compared to that of young-adult animals. In young-adult rats, NGFR immunoreactivity was strong in the neuronal body and in the whole dendritic tree. In aged animals, NGFR immunoreactivity was weak in both cell body and dendrites and was practically absent in the dendrite's distal portion. The loss of dendritic NGFR may play a critical role in the decline of neuronal function in the aging brain.     

Molecular forms of NGF in human and rat neuropathic tissues: decreased NGF precursor-like immunoreactivity in human diabetic skin

Precursors of NGF have been shown to be the predominant forms of this neurotrophin in human brain and peripheral tissues, and proNGF has been shown recently to preferentially bind p75NTR with high affinity. In our studies of human and rat skin and nerve extracts, a 53 kDa band was detected by Western blot using antibodies against rhNGF or prepro-NGF (-91 to -60), that could correspond to a previously described modified prepro-NGF-like molecule. The relative optical intensity of the 53-kDa bands was markedly reduced in skin extracts from patients with subclinical diabetic neuropathy (diabetic: 1.5, 1.0-8.0, n = 6; controls: 52.0, 23.0-85.0, n = 6, p = 0.0022) but was increased in extracts of inflamed colon from patients with Crohn's disease (inflamed: median 12.0, range 0.1-12.0, n = 11: controls: 0.1, 0.1-3.0, n = 8, p = 0.0055). Antibodies to both rhNGF and prepro-NGF immunostained basal keratinocytes in tissue sections of normal human and rat skin showed accumulation of immunoreactivity in nerve fibers distal to sciatic nerve ligation in rats. Prepro-NGF antibody immunostained rat large/medium sensory neurons, whereas only small sensory neurons were stained with antibodies to mature rhNGF, suggesting that prepro-NGF may be preferentially taken up and transported by p75NTR. The different molecular forms derived from prepro-NGF are likely to be of importance in sensory mechanisms, and deserve further investigation.     

Radioimmunoassay for mouse nerve growth factor (NGF). Effects of thyroxine administration on tissue NGF levels

A sensitive and specific radioimmunoassay (RIA) has been developed for β-nerve growth factor (NGF) purified from the submaxillary gland of the adult male mouse. The RIA is sensitive to 13 pg/assay tube with an intra-assay coefficient of variation of 7% and an interassay coefficient of variation of 11.8%. Of thesubstances tested for immunological cross-reactivity in the RIA, only mouse epidermal growth factor caused significant displacement of the radiolabeled ligand; 11% at a dose of 10 μg/ml. Mouse tissue extracts diluted out parallel to the standard curve. The effects of altered thyroid function on tissue NGF concentration in adult male mice were studied using the RIA. Thyroxine administration (25 μg T4 i.p. daily for 12 days) caused significant increase in submaxillary gland and liver NGF content and concentration (P<0.001) compared to controls but had no significant effect on heart and kidney NGF levels. Propylthiouracil treatment (0.05% PTU in the drinking water for 21 days) led to a marked increase in thyroid gland weight (550% of control) but had no significant effect on NGF concentration in any of the organs studied with the exception of kidney where a 75% reduction in NGF concentration was observed. These studies indicate that thyroid hormones increase NGF content and concentration in the submaxillary gland and liver of adult male mice and are suggestive of increased NGF synthesis. Thyroid hormones may therefore play an important regulatory role in NGF metabolism in peripheral tissues of the adult mouse.