九种体外培养细胞系裸小鼠移植的研究

1969年 Rygaard 等首次将人结肠癌成功地在裸小鼠传代移植。此后,各种人癌手术标本、培养细胞及其它动物肿瘤在裸鼠移植成功的报道不断涌现,使之成为肿瘤研究的十分有价值的工具。我们从85年起,将人低分化鼻咽癌上皮细胞系移植于裸小鼠,建立了人低分化鼻咽癌裸鼠移植模型,同时又将其它数种人癌细胞系相继移植于裸小鼠,进行了人癌转移机制的初步研究。此外还应外单位要求接种了三种人及大鼠的培养细胞到裸小鼠,作可移植性鉴定。现就三年多来所做的九种培养细胞系裸鼠移植的实验研究报告如下。     

裸小鼠移植瘤的转移研究

Rygaad和Povlsen 1969年首次将人结肠癌在裸小鼠移植成功,迄今大多数人恶性肿瘤均可在裸小鼠移植。大量研究表明裸小鼠人癌移植瘤是目前人体外最接近人类肿瘤的整体实验模型。但人癌裸小鼠移植后,能否保持其原浸润转移的恶性生物学行为,研究结果意见不一。利用人癌裸小鼠移植瘤模型研究人类肿瘤     

裸小鼠与人类肿瘤移植

 裸小鼠,是六十年代初发现的一种自发无毛突变种。Flanagan(1966)第一次详细描述其产生,遗传学背景和一般特征。1968年Pantelouris证实两性及任何年龄的裸小鼠出生时缺乏胸腺,故称之为“先天性无胸腺小鼠”(Athymic mice)。由于裸小鼠胸腺缺乏,细胞免疫缺陷,故可接受同种或异种的正常及恶性组织的移植。     

人结肠粘液腺癌裸鼠体内移植瘤及体外培养细胞系的建立

结、直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,近年来有日趋增多之势。建立结、直肠癌细胞系,对于研究人类大肠癌细胞的生长、发展、转移和分化、逆转的规律及调节机制,提供良好的物质基础。大肠癌细胞培养难度较大,不易成功。我们采取将病人肿瘤组织先接种于裸鼠皮下,建立裸鼠移植瘤,再将移植瘤体外培养,在国内首次成功建立了裸鼠体内移植瘤及体外培养的细胞系,命名为THC-8901,现简介于下。癌组织来源于升结肠癌患者手术切除标本,病理组织学诊断为结肠粘液腺癌I级,接种于裸鼠皮下,至今已传13代,生长稳定并已冻存,病理检查各代肿瘤细胞组织形态,均符合人结肠高分化粘液腺癌。培养癌细胞取自结肠癌裸鼠移植瘤第4代瘤     

裸小鼠体内人肝癌常位移植模型的研究

人肿瘤常位移植模型及研究肿瘤的重要方法，笔者用人肝癌裸鼠异位移植瘤株ＬＴＮＭ４，首先于１９９１年７月５日建立成功裸小鼠常位移植瘤模型。移植成功率９７．８％（８９／９１）。该模型保持了人肝癌的组织学主分泌代谢功能。应用于抗癌物肝靶向制剂的抑瘤作用研究中，显示常位移植瘤优于异位移植瘤，解决了抗肝癌靶向制剂应用研究的难题，为原发性肝癌的研究建立了最佳模型。     

六种人癌细胞系裸小鼠移植瘤转移的研究

人癌裸小鼠移植瘤是目前最接近人类肿瘤的人体外整体实验模型,但移植后能否保持其原浸润转移的恶性生物学行为,研究结果意见不一。七十年代认为人癌裸鼠皮下移植多呈“良性”局限性生长,不发生或罕见转移。八十年代以来,有人癌裸鼠移植瘤转移的报道.并研究影响人癌裸鼠移植瘤转移     

人肺癌裸小鼠移植模型在沪通过鉴定

1982年中国科学院上海药物研究所开展了人肺癌裸小鼠移植模型的研究,用上海市胸科医院提供的外科手术切除的肺癌标本,先后在裸小鼠体内建成三株皮下型移植瘤模型,即:人肺燕麦细胞癌、人肺腺癌及人肺鳞癌,至今已连续传10代、34代和21代。中科院药物所、上海市胸科医院与协作单位上海医科大学肿瘤医院病理研究室,对三株移植瘤的生长特     

人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤模型的研究

将1例人食管癌手术切除组织移植于NIH裸小鼠皮下，建立了人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤模型（Eca910709），已传25代，历时2年余传代移植成功率100％。该移植瘤病理组织学的结构与原人体肿瘤的形态相似．电镜形态属鳞状细胞癌。用地高辛标记的Alu探针及DNA－DNA原位杂交方法，证实移植癌中有Alu序列存在，表明移植瘤来源于人类组织。该移植瘤的建立将有助于食管癌病因、发病机理及治疗的研究．     

人胚鼻咽上皮裸小鼠移植初步报告

裸小鼠是胸腺先天性发育不良,细胞免疫功能缺损的小鼠,用其进行异种组织移植成功率高。从七十年代起,就有人进行了人正常组织的移植,并在此基础上开展了诱癌实验。Shimasato等用甲基胆蒽在人支气管的裸小鼠皮下移植模型上成功地诱发了鳞癌。为了深入进行鼻咽癌病因发病学和组织发生学的研究,我们开展了人胚鼻咽组织的裸小鼠移植,以期建立一个稳定的移植模型。现报告初步结果。     

人低分化鼻咽癌上皮细胞系(CNE—2Z)裸小鼠移植模型的建立及其特性研究

本文报告人低分化鼻咽癌裸小鼠移植模型的建立及其生物学特性的研究,实验动物为NC系裸小鼠(少量Swiss系),使用CNE—2 Z细胞(1×10~6/0.5ml细胞)皮下接种,历时二年,在203只动物传代30次,移植成功率为100％。组织学及超微结构显示为低分化鳞状细胞癌特征,染色体显示人类肿瘤细胞染色体,有EB病毒基因组存在及EB病毒核抗元(EBNA)、膜蛋白(LMP)表达。我们所建立人低分化鳞状细胞癌裸鼠移植模型,具有移植成功率高,呈进行性生长,恶性程度高,不会自行消退等特点,可供进一步研究鼻咽癌生物学特性及实验性治疗之用。     

多药耐药细胞系K562/A02裸小鼠皮下移植瘤模型的建立与鉴定

目的:建立一种耐药特性稳定的裸小鼠移植瘤动物模型,为进行体内肿瘤耐药机制研究和逆转药物的筛选提供实验模型和实验基础。方法:将具有典型MDR表型的K562/A02耐药细胞接种于裸小鼠右侧背侧皮下,而亲本K562细胞接种裸小鼠左侧背侧皮下,接种细胞数为1×10⁷细胞/只,观察肿瘤成瘤情况及生长特性,并比较裸小鼠移植瘤细胞和体外培养细胞对化疗药物的敏感性,同时利用RT-PCR和免疫组织化学染色对裸小鼠K562/A02移植瘤基因表型进行鉴定。结果:1)K562/A02裸小鼠移植瘤的成瘤率为100%,大约于第6～9天成瘤(体积>100mm³),敏感肿瘤生长速度与耐药肿瘤无明显差别;2)裸小鼠K562/A02移植瘤肿瘤细胞和体外培养原代细胞对阿霉素的IC₅₀分别为185.24μg/ml和235.25μg/ml,而K562/A02移植瘤肿瘤的IC₅₀分别为3.07μg/ml和3.26μg/ml;阿霉素治疗组能够明显减慢K562敏感移植瘤的生长,而对K562/A02耐药移植瘤的生长几乎无作用;3)K562/A02裸小鼠移植瘤肿瘤细胞具有mdr1/Pgp表达,而K562裸小鼠移植瘤肿瘤细胞则无mdr1/Pgp表达。结论:以K562/A02细胞建立的裸小鼠耐药移植瘤模型,仍保持近似体外的耐药活性和基因表型,为耐药机制和逆转研究提供了良好的体内模型。     

SCI-OS人骨肉瘤裸小鼠皮下移植模型的建立

骨肉瘤是骨原发性恶性肿瘤中最常见的 ,约占骨恶性肿瘤的 1/ 3,该肿瘤恶性程度高 ,预后差。因此 ,建立相应的肿瘤模型对骨肉瘤的基础和应用研究均有较大价值 [1 ]。材料与方法一、实验动物　 BAL B/ c- nu/ nu裸小鼠 ,由本所实验动物室提供 (SPF级 ,医学实验动物合格证 0 2 - 30 - 1) ,鼠龄 5～8周 ,雌雄兼用 ,每代 4～ 6只 ,饲养和实验均严格按照 SPF规范要求。二、肿瘤组织　取自上海第二医科大学口腔医学院外科手术切除标本 ,该病人为 32岁女性 ,左下颌骨长有一 5 .5cm× 4cm× 4cm大小肿块 ,病理诊断为骨肉瘤。三、肿瘤的移植和传代…     

荷人膀胱癌原位移植瘤裸小鼠动物模型的建立

目的建立模拟人的原位裸小鼠模型,评价抗人膀胱癌免疫毒素临床前的疗效。方法将体外培养的人移行细胞癌细胞系（BIU-87）原位移植于经酸处理的裸小鼠膀胱内,定期用核磁共振成像（MRI）检查,并进行解剖、组织学检查和免疫细胞化学的检测。结果在第7～36天内,成瘤率为92．9％（52／56）;其中第12～13天处死的裸小鼠中,95．2％（40／42）发展成移行细胞癌,以浅表性为主。组织学检查证实为Ⅱ～Ⅲ级;免疫细胞化学证实,该模型具有BIU-87细胞的特征。在肿瘤的发生发展中,MRI检查的结果与组织学检查的结果密切相关。接种后第7—9天可以检测出原位癌（CIS）,其后发展成乳头状瘤或浸润性疾病。结论模拟人的原位裸小鼠模型重复性好,是临床前研究膀胱灌注治疗的理想模型。     

人卵巢小细胞癌裸小鼠移植瘤细胞超微结构研究

对我所建立的人体卵巢小细胞癌裸小鼠移植瘤模型的各代移植瘤组织进行超微结构观察。发现除光镜原已看到的大、小细胞外,尚有第三种细胞。后者有核畸变,呈多形性等特征,一般大小介于大、小细胞之间,故名中间细胞。分析了三种细胞在超微结构上之异同,并讨论它们之间可能存在的关系。     

亲代L7811及体外培养小鼠白血病细胞系L7811—85...

L7811 was an ascitic form of lymphocytic leukemia induced by myleran in 615 mice. Under electron microscope, cytoplasmic and intracisternal type A virus-like particles were observed. L7811-85 was a cell line established in vitro from the parental in vivo L7811 line. Instead of type A particles, mature and immature type C murine virus-like particles could be observed budding from the plasma membrane to extracellular space. With the in vitro subpassage of L7811-85 cells, more intracellular and extracellular type C particles appeared with an increase in its tumorigenicity. When L7811-85 cells, were inoculated IP to normal 615 mice, ascites tumor developed. The type A virus particles appeared again budding into cisterna of endoplasmic reticulum but not to extracellular space. The mechanism of virus particle type transformation remains to be studied.     

体外培养小鼠肾脏的形态计量学研究

目的观察胚龄12、14、16、以及生后1天的肾组织体外培养的发育情况,与同期在体发育进行比较,探讨肾组织体外培养的胚龄选择。方法应用光镜连续切片技术结合体视学方法定量检测培养前、后肾组织以及各期肾小体的体积。结果胚龄12天(E12)体外培养发育情况与在体无显著差异,其余各组随胚(日)龄的增加,小鼠肾组织的体外发育呈下降趋势。结论小鼠肾组织体外培养,胚(日)龄越小其生长发育越接近在体情况,以孕12天之前较适宜。     

裸小鼠原位移植建立人肝癌高转移模型

采用组织学完整的病人标本，以裸小鼠肝被膜下植入方法，从３０例人肝癌标本中筛选出一株人肝癌高转移瘤株，在裸小鼠体内成功地建立了人肝癌高转移模型ＬＣＩ－Ｄ２０。目前该瘤株在裸鼠体内生长１年，传代１６次，其移植生长率与自发转移率达１００％，表现为区域侵犯、肝内、淋巴结和肺转移、腹腔种植与血性腹水，并保持分泌甲胎蛋白的特性。组织病理学和电镜观察，流式细胞仪ＤＮＡ相对含量分析及染色体核型分析结果表明，移植瘤细胞与来源人肝癌细胞相似。本模型为原位移植模型，移植瘤的生长与转移，完全模拟了人肝癌的自然过程，为研究人肝癌转移机制和抗转移治疗提供了一个理想模型。     

人类卵巢癌原位移植自发转移裸小鼠模型的构建

 目的　用人类卵巢癌组织块原位移植构建与人类卵巢癌最相似的裸鼠原位移植自发转移模型。方法　将人类卵巢癌高转移细胞系8910PM在裸鼠皮下注射成瘤,然后将瘤组织运用显微外科的方法植入裸鼠卵巢包膜内,原位移植成功后继续在鼠间卵巢包膜内传代,并运用透射电镜进一步验证肿瘤形成和转移效果。结果　裸鼠皮下与卵巢部位成瘤率均为100 %（分别为2／2和16／16）,原位移植瘤转移率为50 %。卵巢包膜间传代,第2代、第4代分别出现卵巢癌的肝转移,其他部位尚未见转移灶。最早成瘤时间1周,最早转移出现时间2周。在连续传代过程中移植瘤仍保持原癌组织病理形态特点及人类肿瘤染色体的特点。结论　成功构建了人类卵巢癌原位移植自发转移裸鼠模型,为卵巢癌的转移机制及治疗研究提供了一个理想的动物模型。     

熊果酸对荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤生长的影响

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制探讨.方法:采用裸小鼠背部皮下注射接种人骨肉瘤MG-63细胞的方法建立荷人骨肉瘤裸小鼠模型并给予不同剂量熊果酸[5、10、20mg/(kg·d)]和顺铂[2mg/(kg·d)]进行干预治疗,疗程5天.称取瘤重并计算抑瘤率,HE染色观察肿瘤组织形态结构改变.TUNEL染色检测细胞凋亡状况并计算细胞凋亡指数(apoptosis index,AI).免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)观察肿瘤组织中caspase-3、Bax、bcl-2蛋白表达并进行半定量分析.结果:较模型组,熊果酸干预组荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤呈现细胞皱缩、片状坏死等病理性改变,凋亡细胞数量明显增多、AI显著升高,瘤体重量显著减轻、抑瘤率显著升高,caspase-3和Bax蛋白表达显著上调,bcl-2蛋白表达显著下调,Bax/bcl-2比值显著升高,熊果酸上述作用均具有一定的剂量依赖性.结论:熊果酸可能通过促进肿瘤细胞凋亡而对荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤生长起到一定的抑制作用,其作用机制可能与熊果酸能够调节凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax、bcl-2)并提高Bax/bcl-2比值有关.