肾虚质大鼠免疫相关因子含量变化与肾藏象理论的相关性研究

目的:研究肾虚质大鼠血清细胞因子IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α变化情况,探讨其与肾藏象理论的相关性。方法:采用惊恐方法,建立惊恐致肾虚质的动物模型,研究肾虚质大鼠血清IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α变化情况及补肾药的干预作用。结果:与空白组相比,模型组IL-10、IFN-γ的含量均降低,IL-6、TNF-α含量升高,其中IFN-γ的降低和TNF-α的升高有统计学意义(P<0.05)。用补肾中药干预后其血清IL-10、IFN-γ的含量均升高,IL-6、TNF-α含量降低,均无统计学意义。结论:惊恐致肾虚质的动物模型,具有中医理论特色和操作的可行性。肾虚质大鼠存在着免疫稳态失衡,外周血清中细胞因子IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α的含量变化与肾虚质有一定的相关性。     

关于肾虚质实验动物模型相关问题的研究与思考

肾虚质实验动物模型的构建,有助于推动辨体论治和治未病基础研究的深入开展。通过长期对体质和辨体论治研究的积累,对肾虚质形成的主要因素、体质和证候的区别与联系、肾虚质和肾虚证的动物模型等相关问题进行了探讨,特别是对肾虚证动物造模中出现证质混用现象的原因进行了剖析,强调肾虚质实验动物模型的构建,关键是明晰肾虚质形成的主要因素,把握病理体质与证候的区别。     

“肾脾相关”的理论内涵

整体观念是中医的指导思想,认识肾脾及其相互关系也应从此出发。肾脾不单单是两个脏,它们各自都存在于一个复杂的系统即“肾藏象”和“脾藏象”中,肾脾分别是这两个系统的核心,两者关系包括经脉相通、肾阳温煦脾阳、谷气充养阳气、共主水液代谢、共司气血化生5个方面。了解肾脾的生理、病理特点及其相互关系,对指导临床实践具有重要的意义。     

菌毒炎并治法对脓毒症大鼠免疫相关基因的影响

目的：观察菌毒炎并治对脓毒症大鼠免疫相关基因的影响,探讨其免疫调节机制。方法：将大鼠分为模型组、菌毒炎组、对照组。用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症模型。菌毒炎组腹腔注射抗生素、血必净注射液,凉膈散煎剂灌胃;对照组和模型组腹腔注射生理盐水。杀死大鼠后用芯片检测肝基因,筛选差异基因,查询功能并分类。结果：检测到差异表达的已知基因48个,其中免疫相关基因7个。结论：菌毒炎并治法对于脓毒症大鼠的改善可能与其对免疫相关基因的调控有关。     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜基因表达谱特征研究

目的:运用基因芯片技术研究胶原诱导性关节炎(collagen-inducing arthritis,CIA)大鼠滑膜基因表达谱特征,探讨CIA相关致病基因。方法:选用健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为造模组、正常对照组(n=8,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。在造模成功大鼠中随机选取8只作为模型组(n=8)。于造模成功后30天,提取各大鼠滑膜总RNA,运用Illumina基因表达谱芯片分析每个样本基因变化。结果:正常组与模型组大鼠滑膜差异表达基因有271条,其中上调基因131条,下调基因140条。差异表达基因主要涉及细胞凋亡、基质金属蛋白酶、癌基因、热休克蛋白、骨桥蛋白、细胞周期、代谢、信号传导通路、趋化因子、黏附分子等。结论:CIA是一涉及多基因表达异常的自身免疫性疾病,筛选到的差异基因如上调表达基因Map3k11、Mmp8、OPN5、Rgs5、Hsph1、Ccl20、Robo4、Hyal4及下调表达基因Cabp1等,有利于阐释RA分子机制,提供RA防治新靶点。     

基因芯片技术研究针灸对肾阳虚证骨关节炎患者免疫相关基因表达的影响

目的:探讨针灸对肾阳虚证骨关节炎患者免疫相关基因表达的影响。方法:用基因芯片技术检测肾阳虚证骨关节炎患者及正常人的基因表达谱,以及针灸治疗显效者的治疗前后基因表达谱的变化。结果:通过基因表达谱芯片筛选出与肾阳虚骨关节炎免疫相关的基因13条,肾阳虚骨关节炎患者与正常人相比表达下调4条,上调5条。经温针治疗显效的4例患者治疗前后的基因芯片比较结果显示:NM000265、NM001838基因普遍上调,NM_001784基因普遍下调,其他基因表达无规律性变化。结论:肾阳虚证骨关节炎的发生涉及免疫相关基因表达的异常,针灸可能通过诱导或阻遏这些基因的表达发挥效应。     

藏象本质与神经内分泌免疫网络指标相关性研究

目的探讨神经内分泌免疫(NEI)网络与藏象的内在联系。方法以中国学术期刊网络出版总库中的中医学、中药学、中西医结合3个专题数据库为主要来源,检索以NEI网络相关指标为主要方法研究藏象本质的期刊文献,建立相关数据库。采用数据挖掘方法,对病位、证型、治则治法、病证结合与NEI网络指标进行关联规则分析,得到关联规则,绘制关联定向网络图。结果绘制高频病位、证型、治则治法、病证结合与NEI指标关联定向网络图44幅,得到19条关联规则。肾与肝本质研究侧重下丘脑-垂体-性腺轴、下丘脑-垂体-肾上腺轴、下丘脑-垂体-甲状腺轴,脾本质研究侧重脑肠肽相关指标,心本质研究侧重血管内皮功能相关指标,肺本质研究重点集中在体液免疫、内皮素及肿瘤坏死因子-α。结论应用数据挖掘方法探讨NEI网络与藏象的内在联系是可行的,发现了不同藏象系统间NEI网络研究的差异性,对藏象本质研究具有重要意义。     

基于治未病理论的肾藏象相关疾病防治研究

目的:基于治未病理论探讨肾藏象相关疾病的防治研究思路。方法:运用文献研究方法,探寻中医"治未病"的概念内涵,并通过对"治未病"概念内涵的认识理解,探讨肾藏象相关疾病的危害及防治意义。结论:"治未病"思想是中医疾病预防的理论核心,其主要目的就是防止疾病的发生发展,减轻疾病对人体健康的危害。肾藏象相关疾病严重影响着人体的健康,从中医治未病角度探讨肾藏象相关疾病防治的研究思路具有重要的理论价值和临床意义。     

肾虚质大鼠血清白介素水平的实验研究

目的:研究肾虚质大鼠血清IL-2、IL-10外周血含量变化情况。方法:以猫恐吓孕鼠方法造成大鼠肾虚质模型,研究其血清IL-2、IL-10水平。结果:肾虚质大鼠外周血的IL-2水平低于空白对照组(P<0.01),IL-10水平高于空白对照组(P<0.05)。提示:肾虚质大鼠的外周血白介素水平的变化是形成肾虚质大鼠免疫功能紊乱的基础之一,而经典补肾方金匮肾气丸对其免疫功能的紊乱有一定的调节作用。     

维生素D内分泌系统与中医肾藏象学说关联的理论探讨

随着维生素D内分泌系统研究的深入,维生素D内分泌系统功能出现异常表现出典型中医肾虚症状：骨骼发育不良,肾素-血管紧张素系统激活,斑秃,耳鸣耳聋,生殖能力下降,免疫力下降,呼吸道上皮异常等,结合其他资料更进一步表明,维生素D内分泌系统在体内作用与中医肾藏象非常接近,为此,维生素D内分泌系统可能与中医肾藏象相关的假说,为中医藏象物质基础研究提供了一条新的途径,用现代医学理论进一步发展中医提供了可能。     

浅析情志致病的藏象学基础及其与免疫的相关性

情志在中医学属于“神”的范畴,是人们对客观外界事物和现象的一种内心体验,反映了人的精神情志活动,中医学素以“七情”、“五志”称谓。《素问·阴阳应象大论》又言肝“在志为怒”,心“在志为喜”,脾“在志为忧”,肾“在志为恐”,可见人体内存在着承担情志活动的统一系统,这个系统以五脏为中心,五脏精气为基础,脏腑活动为契机,心(脑)神任物为中枢,外界物感为条件,四者协调统一,从而产生了各种情志变化。其属于正常的精神活动,一般不会致病,当情志活动过于剧烈或持久,超过了人体生理和心理所能承受的限度时,便会成为致病因素。情志和调,可…     

肾阳虚证患者血液生化、免疫指标与基因表达谱结果的对比研究

目的:对比研究肾阳虚寒证患者血液生化、免疫指标以及差异基因表达谱的临床应用价值。方法:针对一个典型肾阳虚家系15个成员,运用现代检测技术进行血液生化、免疫学指标检测,同时采用人类Oligo芯片杂交技术对其外周血单个核细胞的差异基因表达谱进行分析研究。结果:虽然每个成员分别出现了2-8项异常血液学指标,但整体而言,该家系肾阳虚患者与正常人之间在糖、蛋白质、脂类代谢上和体液、细胞免疫方面无明显差异(P>0.l);而5张芯片的杂交结果显示,共有53个基因反复出现在差异基因表达谱之中,这些基因可能在肾阳虚寒证的发生发展中起着关键性作用。结论:常规血液生化、免疫学指标对肾阳虚寒证的参考意义不太大,而芯片检测技术以及由此获得的差异表达基因谱在中医证候研究中具有潜在的临床应用价值。     

从补肾对肾虚大鼠成纤维细胞凋亡的影响看中医肾与中胚层的相关性

目的:通过补肾法对肾虚大鼠成纤维细胞凋亡的作用,探讨中医肾与中胚层的相关性。方法:采用健康15月龄老年生理性肾虚大鼠,随机分成肾虚组、补肾阴组、补肾阳组,苏木精伊红(HE)染色计数成纤维细胞数,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测成纤维细胞肿瘤坏死因子α(TNFα)、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、半胱天冬酶3(caspase-3)的积分光密度(IOD)。结果:与肾虚组比,补肾阴、肾阳组成纤维细胞数明显增多(P<0.001),同时能显著降低成纤维细胞TNFα、Bax及caspase-3蛋白的含量(P<0.001),显著增高Bcl-2蛋白的含量(P<0.05)。结论:补肾法能抑制肾虚大鼠成纤维细胞凋亡,其机制之一可能是减少TNFα生成,通过线粒体凋亡途径降低caspase-3生成和激活,导致成纤维细胞凋亡受抑。     

以药测证对肾虚和肾阳虚大鼠基因表达谱的比较研究

目的在分子水平揭示肾虚和肾阳虚内涵的异同。方法肾虚证采用自然衰老大鼠模型,肾阳虚证采用皮质酮大鼠模型,均用淫羊藿总黄酮（epimedium flavonids,EF）以药测证,分别取下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞（HPAT）组织,采用Affymetrix公司的大鼠全基因组芯片,各两次重复基因表达谱研究。结果老年大鼠和皮质酮大鼠与青年大鼠比较,在HPAT轴上首先是众多的神经递质显著下调,接下来是生长激素类和性激素类都显著下调,其表达下调的模式呈高度一致,EF能逆转上述基因的表达;但EF在皮质酮大鼠显著上调热休克蛋白（HSP）和细胞色素P450以及促甲状腺激素（TSH）大幅度上调。结论两组大鼠均具有肾虚的内涵,但肾阳的主要物质基础是甲状腺激素促进能量代谢的氧化磷酸化过程。     

小鼠胸膜间皮细胞53条免疫相关高表达基因与中医肺气学说的相关性研究

目的：研究小鼠胸膜间皮细胞免疫相关基因表达谱的状况,从而探索用现代免疫及基因芯片技术评价解释中医肺气学说的新方法。方法：取8只BALB／c小鼠胸膜组织块剪切成碎块,提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像采集与数据分析等过程获得基因表达谱。结果：共筛选出小鼠胸膜间皮细胞53条免疫相关高表达基因。其中主要有免疫应答高表达基因14条;炎性反应高表达基因6条;非特异性免疫应答高表达基因7条;免疫应答调节高表达基因4条;急性反应阶段高表达基因3条;抗原加工与提呈高表达基因2条;Ⅱ型超敏反应正向调节高表达基因．2条。结论：从现代免疫学观点及正常小鼠胸膜间皮细胞基因芯片的研究来看,胸膜间皮细胞既表达免疫相关的正向调节基因,亦表达负向免疫相关的调节基因。这不仅可为现代免疫学增添新的内容,而且对丰富中医肺气学说,研究中医肺脏的实质乃至推动中医学理论的深入研究都将具有积极意义,为胸膜的其他后续研究构建一平台,为丰富中医肺气学说与肺气的实质提供分子生物学的基础研究依据;弥补这方面的研究空白。     

基于血清激素水平和基因差异性表达探讨老年性聋与中医肾虚的相关性及其物质基础

目的:探讨中医肾虚与老年性聋的相关性及其物质基础。方法:纯音测听检测听功能;肾虚症状评分表测定研究对象肾虚积分;化学发光法检测血清甲状腺激素(T3、T4)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇含量;基因表达谱芯片检测全基因组基因表达,筛选差异表达基因;实时定量PCR验证差异表达基因。结果:老年性聋组患者肾虚积分明显高于对照组(P0.01),Pearson相关分析表明肾虚积分与听阈呈正相关,相关系数为0.766,P=0.000。老年性聋组血清T3和T4水平与对照组比较有下降趋势,但无统计学意义;ACTH和皮质醇水平明显低于对照组,且差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。基因表达谱芯片检测结果显示,糖皮质激素受体调节相关基因RGS2、ARL8B、IL11RA、Cdc42和TSC22D3表达有明显变化,实时PCR检测结果显示,老年性聋组TSC22D3基因表达明显低于对照组(P0.05),表达水平为对照组的0.2倍。结论:老年人听力损失与肾虚积分呈正相关,糖皮质激素及其受体是中医肾虚与老年性聋相关的物质基础之一,其中TSC22D3基因发挥重要作用。     

肾虚质大鼠学习记忆能力与海马NMDA受体表达的实验研究

目的观察肾虚质大鼠学习记忆能力与海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体表达变化,探讨"肾藏志"中医学理论的物质基础与神经生物学机制。方法将40只SD大鼠随机分为模型组、左归丸、右归丸组及空白组(产自正常孕鼠),每组10只,采用"猫吓鼠"经典造模法制备先天不足加后天失养复合型肾虚质仔鼠模型。对仔鼠恐吓同时开始给药,左归丸、右归丸组分别给予左归丸混悬液0.1875 g/mL、右归丸混悬液0.0938 g/mL灌胃,空白组及模型组给予等量生理盐水灌胃,每日1次,每周用药5天,连续2个月。通过Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法检测海马组织NMDA受体亚基NR2A、RN2B蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组Morris水迷宫实验潜伏期及总路程增加(P0.05);与模型组比较,左归丸及右归丸组上述指标均降低(P0.05)。与空白组比较,模型组海马组织NMDA受体亚基NR2A、NR2B蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,左归丸、右归丸组NR2A及NR2B蛋白表达明显升高(P0.05)。结论肾虚质大鼠学习记忆能力退化且海马NMDA受体表达低下,补肾药物左归丸、右归丸可上调NMDA受体表达,提高其学习记忆能力,从而改善肾虚质脑功能退化状态。     

对于藏象学说的形成及其中的“脾”“肾”二脏与现代医学生理学相关部分联系的思考

中医学理论与现代医学理论有极大的区别 ,这种区别不仅体现在两种医学体系在认识疾病上的不同 ,也体现在对人体生理解剖理解上的巨大差别。譬如 ,中医学是按整体 -脏腑 -四肢百骸 -筋肉皮毛的顺序来认识人体结构功能的 ;而现代医学则是按细胞 -组织 -器官 -系统 -人体的顺序来认识人体结构功能的。一种理论体系是从整体到局部 ,另一种理论体系是从局部到整体 ,哪种认识更科学 ?如果按从整体到局部的顺序 ,人体的很多细微结构及功能可能很难认识 ;但如果按从局部到整体的顺序 ,那么人体的诸多联系又可能不被认知。因为人体的所有结构功能错综…