NK细胞抑制CD34^＋早期急性髓系白血病细胞克隆形成

目的 探讨同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的克隆抑制效应.方法 免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞杀伤后的克隆形成,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较.结果 急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3-CD16 CD56 细胞)纯度为(93.2±3.7)%.不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均能抑制其克隆形成.随着效靶比的增高,其克隆抑制率随之增高(P＜0.05).同一效靶比时,NK细胞对KG1a的克隆抑制率低于K562,差异有显著性(P＜0.05).结论同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的克隆形成具有一定的抑制作用.     

同种异体 NK 细胞对 CD34+CD38-早期急性髓系白血病细胞的体外杀伤作用

目的：探讨同种异体NK细胞对CD34＋CD38－早期急性髓系白血病细胞（ KG1a细胞）的体外杀伤作用。方法免疫磁珠法分离5例健康志愿者外周血的NK细胞,分别用乳酸脱氢酶杀伤实验（ LDH法）、流式仪检测细胞凋亡及甲基纤维素克隆形成实验观察NK细胞在不同效靶比（1∶1、5∶1、10∶1、20∶1、40∶1）浓度对KG1a细胞的体外杀伤作用,取单纯培养的KG1a细胞作阴性对照。结果急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34＋CD38－细胞比例为（97.2±3.1）％,分选后的NK细胞CD3－CD16＋CD56＋细胞纯度为（93.5±3.2）％。5个效靶比NK细胞对KG1a细胞均有杀伤作用,且均能抑制其克隆形成,随着靶效比的升高,其杀伤活性及克隆抑制率也随着升高（P＜0.05）。 NK细胞与KG1a共培养后的细胞凋亡率均比阴性对照高（P＜0.05）,但到20∶1的靶效比浓度后并不随着浓度的升高而升高（P＞0.05）。而随着效靶比增加,NK细胞对KG1a细胞的克隆抑制作用也越强,各效靶比浓度间的差异均有统计学意义（ P＜0.05）。结论通过抑制CD34＋CD38－早期急性髓系白血病细胞的增殖和诱导细胞凋亡,同种异体NK细胞能有效杀伤CD34＋CD38－早期急性髓系白血病细胞。     

同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应

目的 探讨同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应.方法 免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,乳酸脱氢酶释放法测定不同效靶比时NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞KG1a的杀伤活性,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞的克隆形成抑制率,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较.结果 急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3CDl6 CD56 细胞)纯度为(93.2±3.7)%.不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均有杀伤活性,均能抑制其克隆形成.随着效靶比的增高,其杀伤活性和克隆抑制率随之增高(P＜0.05).同一效靶比时,NK细胞对KG1a的杀伤活性和克隆抑制率低于K562(P＜0.05).结论 同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞具有细胞毒效应.     

参芪景天颗粒联合化疗对急性髓系白血病患者NK细胞影响

<正>急性白血病是指由于造血干细胞恶变,导致某系列白细胞成熟障碍,其幼稚白细胞在骨髓或其他造血组织中恶性增殖,浸润全身组织器官,使正常造血功能受抑制,以贫血、发热、出血、肝脾及淋巴结肿大为主要临床表现的一组造血系统恶性肿瘤。目前白血病的发病机理尚不明确,现代药理学研究证实,急性白血病的发生、发展与机体免疫水平降低有着密切的关系,尤其是细胞免疫异常。NK细胞执行细胞免疫功能,是机体免疫防护中重要的活性细胞。     

急性髓系白血病化疗早期细胞凋亡率与预后关系的研究

目的 探讨急性髓系白血病患者化疗早期细胞凋亡率与疾病预后的关系.方法 (1)所有对象均来源于2011年7月至2012年10月在潍坊医学院附属医院血液科接受住院化疗的初发AML患者20例;(2)所有患者均采用DA或IDA或HA方案诱导缓解;(3)应用流式细胞术(FCM)及AnnexinV-FITC/PI染色法检测患者化疗前1d及化疗第2d白血病细胞凋亡率.结果 (1)经诱导治疗7d后,完全缓解(complete remission,CR) 14例,未缓解(not remission,NR)6例;(2)化疗第2d白血病细胞凋亡率(9.31±2.42)％明显高于化疗前1 d(4.41±2.13)％,(P＜0.05);(3)化疗后CR组患者细胞凋亡率(10.12±2.23)％明显高于NR组(7.43±2.74)％(P＜0.05).结论 化疗早期细胞凋亡率可作为预测急性髓系白血病疗效的指标之一.     

急性髓系白血病细胞粘附分子表达特点

目的 研究急性髓系白血病(AML)中细胞粘附分子(CAM)的表达特点.方法 应用流式细胞仪间接免疫荧光技术检测85例AML中CAM的表达情况.结果 ①CAM表达阳性率:CD54 60.0%、CD11a 52.9%、CD49e 50.6%、CD49f 49.4%、CD11b 47.1%、CD11c 29.4%和CD15 16.5%;M1、M4和M5阳性率比较高,M0、M2和M3阳性率比较低,M7不表达CAM;②CD34阳性率60.0%.结论 AML中CAM表达与CD34细胞表达相一致.     

CD_7~+急性髓系白血病

CD7+急性髓系白血病（CD7+AML）在分化较差的AML亚型中发生率较高，除髓系抗原外，细胞膜上还有CD34和HLA-DR表达，对白细胞介素3（IL-3）和干细胞因子（SCF）敏感，部分病例有T细胞受体和免疫球蛋白重链的基因重排。临床表现上髓外浸润多见，髓系化疗方案不敏感，完全缓解率低，易复发,这些与CD7+干细胞性白血病相似，提示CD7+AML为早期造血细胞的恶性疾病。     

儿童急性淋巴细胞白血病髓系抗原的表达

急性淋巴细胞白血病 (ALL)是儿童最常见的急性白血病 ,约占白血病患儿总数的 75 %。应用单克隆抗体 (McAb)可精确地鉴定细胞表面或胞浆中免疫标志 ,分析细胞的分化阶段 ,对临床诊断、治疗与预后有重要的指导意义。大多数ALL患者的白血病细胞仅表达淋巴细胞抗原 ,但也有部分同时表达髓系抗原 ,ALL髓系抗原表达与临床及预后的关系目前尚无统一的结论。我们对本院收治的 2 9例儿童ALL免疫表型进行分析 ,旨在探讨儿童ALL髓系抗原表达与临床表现及预后的关系。1　资料与方法1.1.　一般资料　 2 9例均为 2 0 0 0年 1月— 2 0 0 3年 4月本院…     

急性淋巴细胞白血病髓系分化抗原的异常表达

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)髓系分化抗原(MyAg)的表达情况.方法:选择480例ALL患者,其中T细胞-ALL(T-ALL)92例,B细胞-ALL(B-ALL)388例,经血常规和骨髓细胞学检查确诊.抽取肝素抗凝骨髓,加入荧光标记的单克隆抗体,采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:在480例ALL患者中,39.17%伴有MyAg的表达,最常见为CD13(25.42%),其在B-ALL各亚型中表达依次为B-前体ALL(40.00%)、前B-ALL(29.93%)、普通B-ALL(22.22%)、B-ALL(20.98%);CD13在T-ALL的阳性表达率为20.65%.CD33(16.04%)在B-ALL阳性表达率(17.27%)与T-ALL(10.87%)比较,差异无统计学意义.CD117也表达于ALL(4.17%),尤其是T-ALL(14.13%),而B-ALL阳性表达率为1.80%(P<0.01).结论:ALL最常表达的MyAg为CD13和CD33,CD117表达于T-ALL.     

TGF-β1在ConA激活的CD4+T细胞抑制NK细胞杀伤毒性中的影响

目的 初步探讨ConA激活的CD4 T细胞对NK细胞杀伤毒性的影响及TGF-β1分子在其中的作用.方法 磁珠分选纯化BALB/c小鼠脾脏CD4 T细胞与NK细胞,体外用ConA激活CD4 T细胞,将激活的CD4 T细胞与NK细胞共培养,并加入TGF-β1抗体,共培养24、48、72 h和96 h后,用51Cr标记的YAC-1检测NK细胞的杀伤毒性.结果 ConA激活的CD4 T细胞能够在所测的4个时相点显著抑制NK细胞的杀伤毒性,抑制率分别为25.00%、31.60%、34.70%和46.50%;在此共培养体系中加入TGF-β1抗体后,抑制率分别增加到63.80%、59.43%、60.70%和90.90%.结论 ConA激活的CD4 T细胞能够显著抑制NK细胞的杀伤毒性,并且这种抑制作用随着TGF-β1抗体的加入而增强,表明TGF-β1分子影响了ConA激活的CD4 T细胞对NK细胞杀伤毒性的抑制.     

急性髓系白血病患者白血病细胞CD34和CD38抗原的表达及其临床意义

目的:探讨初诊急性髓系白血病(AML)患者白血病细胞CD34和CD38抗原表达与预后的关系,阐明CD34和CD38抗原表达在预测AML患者预后中的作用。方法:收集初诊AML患者94例,采用流式细胞术检测AML患者白血病细胞CD34和CD38抗原的表达,依据CD38抗原表达将患者分为CD34⁺ CD38^-组(n=36)和CD34⁺CD38⁺组(n=58)。2组患者诱导方案均为IA方案。比较2组患者完全缓解率(CRR)、复发率、中位总生存时间(OS)、中位无病生存时间(DFS)和生存率。结果:CD34⁺ CD38^-组患者CRR为77.8%,CD34⁺CD38⁺组为86.2%,2组患者诱导治疗后CRR比较差异无统计学意义(P>0.05);CD34⁺ CD38^-组患者总复发率和1年内复发率(53.8%和36.0%)均高于CD34⁺CD38⁺组(27.9%和14.3%)(P<0.05);CD34⁺ CD38^-组患者中位OS(13.60个月)小于CD34⁺CD38⁺组(20.33个月)(P<0.05);CD34⁺ CD38^-组患者中位DFS(12.87个月)小于CD34⁺CD38⁺组(33.93个月)(P<0.05)。CD34⁺ CD38^-组患者1年和2年生存率(52.8%和38.9%)低于CD34⁺CD38⁺组(75.9%和48.3%)(P<0.05)。结论:白血病细胞CD34⁺ CD38^-抗原的表达为初诊AML患者提供一个新的预后指标,表达CD34⁺ CD38^-抗原患者预后不良。     

N K 细胞、 L A K 细胞抗弓形虫作用机理的研究

目的：观察 Ｉ Ｌ ２在小鼠抗弓形虫机理中的作用。方法：应用３ Ｈ 尿嘧啶（３ Ｈ Ｕ）特异性标记弓形虫在小鼠腹腔巨噬细胞（ Ｍ ｏｕｓｅ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍ ａｃｒｏｐｈａｇｅ, Ｍ Ｐ Ｍ ）内的增殖实验及１２５ Ⅰ 尿嘧啶核苷（１２５Ⅰ Ｕｄ Ｒ）标记的细胞毒实验,观察 Ｉ Ｌ ２的抗弓形虫作用。结果： Ｉ Ｌ ２对 Ｍ Ｐ Ｍ 的抗弓形虫作用及对 Ｉ Ｆ Ｎ γ诱导的 Ｍ Ｐ Ｍ 抗弓形虫作用无明显影响;正常小鼠 Ｎ Ｋ 细胞杀伤弓形虫感染靶细胞的能力,显著低于杀伤肿瘤细胞的能力（ Ｐ＜ ０００１）;而经 Ｉ Ｌ ２诱导的 Ｌ Ａ Ｋ 细胞杀伤自身感染弓形虫靶细 胞的能力, 明显高于 Ｎ Ｋ 细胞（ Ｐ＜ ０００１）, 并与 Ｌ Ａ Ｋ 杀伤肿瘤细胞的能力无明显差别（ Ｐ＞ ００５）。结论：提示 Ｉ Ｌ ２体内应用提高弓形虫小鼠的生存能力的机理可能与提高体内 Ｌ Ａ Ｋ 细胞杀伤自身感染弓形虫细胞的能力有关。     

急性白血病患者骨髓细胞畸胎瘤衍生生长因子-1及CIX34的表达

目的:检测畸胎瘤衍生生长因子-1(Cripto-1)及CD34抗原在白血病(AL)患者骨髓细胞的表达情况.方法:应用流式细胞术检测63例初治AL患者[其中急性髓系白血病(AML)49例,急性淋巴细胞白血病(ALL)14例]及16例对照人群骨髓细胞中Cripto-1及CD34抗原的表达.结果:Cripto-1在AL患者及正常对照组的阳性表达率分别为26.98%和0(P=0.007),CD34的阳性表达率分别为60.32%和0(P<0.001).ALL患者中未检测到Crip-to-1的表达,AML患者中Cripto-1及CD34的表达具有关联性(X2=9.095,rp=0.396,P=0.003).结论:AL患者Cripto-1及CD34表达升高.Cripto-1/CD34共同高表达是AL的一个不良预后因素.     

急性白血病患者P—糖蛋白和CD34的表达及其临床意义

用免疫细胞化学ＡＢＣ法检测３０例急性白血病患者骨髓单个细胞Ｐ－糖蛋白（Ｐ－１７０）和ＣＤ３４的表达。结果示：Ｐ－１７０或ＣＤ３４表达在急性非淋巴细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组之间的差异不明显（Ｐ〉０．０５）;Ｐ－１７０或ＣＤ３４阳性表达组临床疗效差。与阴性表达组相比差异明显（Ｐ〈０．０５）。提示,同时检测两 中提高对急性白血病的疗效判断。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD34+CD59+细胞与正常人CD34+细胞生存、增殖、扩增性能的比较

目的探索阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓CD34CD59细胞体外扩增的方法,并对其与正常人CD34 细胞的生存、增殖及扩增性能进行比较,为PNH患者实现自体骨髓移植(ABMT)或自体外周血干细胞移植(APBSCT)提供重要的实验基础。方法应用免疫磁珠富集纯化CD34 细胞,然后用流式细胞仪分选出PNH患者的CD34 CD59 细胞及正常人CD34 细胞。对两种细胞在不同造血生长因子组合下,进行体外扩增液体培养2周。并对扩增前及扩增不同阶段的细胞进行体外半固体培养。结果(1)PNH患者CD34 CD59 细胞在体外能得到有效的扩增,在细胞因子合理组合作用下,第7天时CD34 CD59 细胞绝对数扩增约23.49倍。2PNH患者CD34 CD59 细胞与正常人CD34 细胞存在部分相同或相似的特性。在体外扩增过程中,对细胞因子的反应有相同的趋势,均为扩增第7天达到扩增高峰,均在SCF IL-3 IL-6 FL Tpo Epo组合条件下达到最大扩增能力。并且扩增后的细胞仍有形成CFU的能力,均能很好地保持CD59抗原,无GPI锚连蛋白的丢失。(3)正常人CD34 细胞在生存、增殖、形成CFU的能力及扩增能力上均明显强于PNH患者的CD34 CD59 细胞。结论(1)PNH患者CD34 CD59 细胞在体外能得到有效的扩增,临床上应用具有一定的可行性,能满足大多数PNH患者ABMT或APBSCT的需要。(2)PNH患者     

体外扩增小鼠CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的研究

目的研究体外扩增小鼠CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的表面分子标志、分化途径及细胞属性。方法获取超抗原SEB活化后体外扩增的小鼠效应细胞,用抗CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRVβ8-FITC和CD69-FITC荧光抗体染色后,用流式细胞仪（FCMCalibueBD,USA）鉴定CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的表面分子标志和分化途径。用逆转录聚合酶链反应测定细胞内各种细胞因子和Foxp3基因转录水平。结果体外扩增的细胞中91.92%是CD8^＋T细胞,其中22.75%的细胞是CD8^＋NN1.1＋NKT细胞,高于正常值（0.21±0.19,n=12）108倍以上。19.61%NKT细胞是TcRVβ8＋NN1.1＋NKT细胞。CD69分子的表达由原始0.11%增加到85.95%。CD4＋T、CD3＋T细胞亚群和CD4＋NKT、CD3＋NKT及CD4-CD8-NKT细胞亚群没有增加。扩增细胞TGF-β的mRNA表达呈阳性,不表达Foxp3和细胞因子IL-2、4、5、6、10及IFN-γ。CD8^＋NKT细胞直接由CD8^＋T细胞分化而来。结论 CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的分子特征为CD69＋Foxp3-TcRVβ8＋TGF-β＋CD8^＋NK1.1^＋;它们既不是CD8^＋T调节细胞（Treg.）,也不是CD4^＋NKT细胞,直接由CD8^＋T细胞分化而来,带有TCRVβ8受体,应属于T细胞亚群。     

急性白血病患者P-糖蛋白和CD34的表达及其临床意义

用免疫细胞化学ABC法检测 30例急性白血病患者骨髓单个核细胞P 糖蛋白 (P 1 70 )和CD34的表达。结果示 :P 1 70或CD34表达在急性非淋巴细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组之间的差异不明显 ( P >0 .0 5) ;P 1 70或CD34阳性表达组临床疗效差 ,与阴性表达组相比差异明显 (P <0 .0 5)。提示 ,同时检测两者可提高对急性白血病的疗效判断