血管生成抑制剂TNP-470抑制肺腺癌生长的研究

早在20世纪70年代初期，Folkman研究肿瘤的生长及转移与肿瘤血管生成密切相关，提出抗血管生成治疗可以成为控制实体瘤生长及转移的有效方法。研究表明，TNP-470对多种实体瘤的生长具有抑制作用。本实验通过TNP-470对小鼠肺腺癌进行实验性治疗，探讨TNP-470对肺腺癌生长的抑制作用，并探讨其作用机制。     

肿瘤血管生成抑制剂的临床研究现状和思考

通过抑制肿瘤血管的生成治疗肿瘤是癌症研究领域的一个理论性突破，肿瘤抗血管生成疗法作为癌症治疗的新兴策略受到越来越多的关注．近年来，肿瘤血管生成抑制剂的研究发展迅猛，已由实验室阶段进入临床试验．目前已有40余种血管生成抑制剂进行了不同阶段的临床试验，但结果并不象预期的那样有效，同时还暴露出许多有待解决的问题，如血管生成抑制剂疗效的客观评价问题、临床试验的合理设计及病例选择问题、预防长期应用的毒副作用问题等．只有深入地理解血管生成抑制剂的作用机制和特性，加以改进，合理应用才能使之转化为人类征服肿瘤的利器．下面我们将侧重介绍血管生成抑制剂的临床研究现状、面临的困难和对策．     

肿瘤新生血管生成抑制剂的研究进展

肿瘤血管生成是一个多因子参与的多步骤过程 ,基本步骤包括 :肿瘤组织释放血管生成刺激因子 ;血管周围细胞外基质重塑 ,基膜降解 ;内皮细胞增殖迁移 ;新生血管成形。阻断其中任何一步 ,都将阻止肿瘤血管生成。肿瘤的血管系统已成为一个崭新的有希望的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究破坏或抑制血管生成有效地阻止肿瘤生长和转移的药物 ,这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂 (tumorangiogenesisinhibitor,TAI)。TAI具有许多优势 ,治疗发生时 ,血管形成已被启动 ,故TAI治疗具有良好的特异性 ,血管内皮细胞暴露于血流中 ,药物能直接发…     

细胞色素C对阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡的影响

【目的】探讨细胞色素C（CytC）对小剂量阿糖胞苷（LD-Ara—C）诱导白血病细胞凋亡的影响。【方法】用HL-60白血病细胞株进行传代培养,MTT试验检测Ara—c和Cyt C不同药物浓度对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡。【结果】12μg／ml浓度以下的CytC具有促进HL-60细胞增殖的作用,不同浓度的CytC干预后HL-60细胞凋亡率均低于干预前（P〈0．01）。联合应用CytC和LD-Ara—C,HL-60细胞凋亡率明显高于单用LD-Ara—C组（P〈0．01）。【结论】外源性CytC在12μg／ml浓度以下时仅能促进白血病细胞增殖,联合应用CytC和LD-Ara—C可增强LD-Ara—C诱导白血病细胞凋亡的作用。     

非选择性环氧化酶抑制剂诱导结肠癌细胞凋亡的研究

目的：研究非选择性环氧化酶抑制剂舒林酸对结肠癌细胞株HT-29生长的影响及其参与引起细胞凋亡的可能机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测舒林酸对结肠癌细胞增殖的抑制作用,采用激光共聚焦显微镜（LSM）观察细胞凋亡情况,采用流式细胞仪（FCM）分析其对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果：舒林酸能呈剂量和浓度依赖性押制HT-29的增殖．在4．8mmol·L^-1时其抑制率可迭91．8％。AnnexinV／H染色后LSM观察到凋亡细胞胞膜绿染,胞核红染或呈桔黄色。FCM显示此药能促进细胞的凋亡,使处于G0／G1期的细胞比例显著降低。结论：舒林酸可抑制结肠癌细胞株HT-29生长,其机制可能与其阻止细胞周期的进展,诱导细胞凋亡有关。     

蛇床子素对成骨样细胞UMR106增殖和分化的影响

目的:以在某种程度上可反映成骨细胞增殖的成骨样细胞UMR106为靶细胞,考察蛇床子素对其细胞形态、增殖率和分化程度的影响。方法:实验于2003-03/2004-03,在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以大鼠成骨肉瘤细胞系UMR106为靶细胞,以雌二醇1×10-8mol/L为阳性对照,同时设空白对照组,蛇床子素干预组分为1×10-8mol/L,1×10-7mol/L,1×10-6mol/L3个浓度组。①调整细胞浓度为4×107L-1,接种于12孔培养板上。48h后,倒置显微镜下观察细胞形态变化。②调整细胞浓度为2×107L-1,接种于96孔培养板,采用四唑盐法测定各孔的吸光度,计算平均增殖率。③调整细胞浓度为2×107L-1,接种于24孔培养板,磷酸对硝基苯基质动力学法测定细胞内外碱性磷酸酶活性。上述实验每组均设8个复孔。结果:①培养基中加入蛇床子素培养48h后,与对照组相比UMR106细胞数量明显增多,核分裂期多见,1×10-6mol/L,1×10-7mol/L组可见细胞重叠生长,分泌基质堆积明显。②UMR106细胞经蛇床子素处理48h后,相对于对照组,1×10-6mol/L组增殖率为52%,1×10-7mol/L组为37%,1×10-8mol/L组为16%。3个给药组与对照组相比差异均有显著性(t=37.36,14.94,6.81,P<0.01)。③UMR106细胞经蛇床子素1×10-6mol/L和经雌二醇1×10-8mol/L处理24h和48h后,细胞内碱性磷酸酶活性均显著高于对照组犤(825.17±12.34),(775.16±8.67),(715.14±14.17)μkat/g;(2415.48±15.84),(2355.47±5.67),(2285.49±7.67)μkat/g;t=16.56,10.22;20.89,34.90,P<0.01犦。④UMR106细胞在浓度为1×10-6,1×10-7mol/L的蛇床子素及雌二醇10-8mol/L培养24h后,细胞外碱性磷酸酶活性显著高于对照组犤(781.66±11.50),(733.15±15.34),(728.81±9.84),(652.80±11.34)μkat/g;t=22.56,11.91,14.32,P<0.01犦。结论:蛇床子素可剂量依赖地促进UMR106细胞的增殖,刺激UMR106细胞的碱性磷酸酶活性,提示其可能具有直接促进成骨细胞增殖、分化的作用。     

氨茶碱对白血病K562细胞凋亡的影响

目的：探讨氨茶碱对慢性粒细胞白血病细胞系（K562细胞株）凋亡的影响。方法：取对数生长期的K562细胞加入250．0mg／L的氨茶碱共同培养，对照组不加氨茶碱，72h后收集细胞进行检测：采用吖啶橙染色，荧光显微镜观察细胞凋亡，流式细胞术（FCM）检测细胞周期。结果：吖啶橙染色出现明显凋亡形态学改变，细胞周期分析显示氨茶碱处理组S期细胞比率明显增高，提示S期阻滞。结论：氨茶碱可将K562细胞阻滞于S期，并诱导凋亡。     

转染VEGF-C cDNA对NB4细胞增殖、分化与凋亡的影响

目的探讨转染血管内皮生长因子(VEGF)-C cDNA 对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞增殖、全反式维甲酸(ATRA)诱导分化及化疗药物介导的细胞凋亡作用的影响。方法采用脂质体法将重组表达载体(pcDNA3.1-VEGF-C)和 pcDNA3.1转染 NB4细胞建立稳定细胞株;采用MTT 法及集落形成实验分析转染 VEGF-C cDNA 对 NB4细胞增殖的影响;NB4/VEGF-C 细胞经 ATRA诱导后涂片经瑞特-姬姆萨染色作形态学分析,实时荧光定量 PCR 检测调控粘细胞分化基因 C/EBPα相对表达水平,同时以流式细胞术检测细胞表面的 CD11b 表达量;Annexin V/PI 双染流式细胞术检测NB4/VEGF-C 细胞经鬼闩乙叉甙(Vp16)诱导的细胞凋亡;并以实时荧光定量 PCR 检测 bcl-2基因相对表达水平,均以 NB4/pcDNA3.1细胞为对照。结果成功转染获得稳定表达 VEGF-C 的细胞株 NB4/VEGF-C,其增殖能力显著高于 NB4/pcDNA3.1细胞;NB4/VEGF-C细胞对抗 ATRA 介导的早幼粒细胞分化成熟,CD11b 表达量低于对照组,C/EBPα基因含量仅为对照组的1/32;NB4/VEGF-C 细胞经Vp16介导后 bcl-2基因表达约为 NB4/pcDNA3.1细胞的2.28倍,而凋亡的 NB4/VEGF-C 细胞百分率(7.20±2.52)%明显低于凋亡的 NB4/pcDNA3.1细胞的(16.07±3.58)%(P=0.005)。结论 VEGF-C 通过 VEGF 受体3(VEGFR-3)信号途径促进白血病细胞增殖,抑制分化诱导剂介导的 NB4 细胞分化及化疗药物介导的细胞凋亡,推测 VEGF-C/VEGFR-3信号途径在白血病疾病进展中发挥重要作用并可望作为白血病治疗的靶点。     

免疫检查点抑制剂联合抗血管生成药物治疗非小细胞肺癌的疗效和安全性

目的 分析免疫检查点抑制剂联合抗血管生成药物治疗非小细胞肺癌的疗效和安全性。方法 选择自2020年6月至2021年6月南通市肿瘤医院收治的68例非小细胞肺癌患者作为研究对象,依据随机数字表法分为观察组和对照组,各34例。对照组予以常规化疗(培美曲塞联合卡铂),观察组予以免疫检查点抑制剂联合抗血管生成药物治疗(卡瑞利珠单抗联合贝伐珠单抗注射液),1个治疗周期为21 d,至少治疗2个周期。随访18个月,比较两组治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)水平、T淋巴细胞亚群水平(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)、生活质量总体改善率、治疗效果及预后、不良反应发生情况。结果 治疗后,观察组血清VEGF水平为(114.02±13.44) ng/L,低于对照组[(153.97±17.85) ng/L],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺     

Embelin对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的 研究Embelin对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨.方法 用不同浓度的Embelin处理HL-60细胞,采用MTT法绘制生长曲线,通过Annexin V/PI 复染及JC-1染色,观察Embelin对HL-60细胞凋亡的影响;通过流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD33、CD34、CD11b和CD14表达的变化.在对HL-60细胞研究的基础上,选择9例急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者的骨髓进行相应的研究.结果 Embelin对HL-60细胞具有增殖抑制作用,且作用呈时间和剂量依赖性.24 h的,IC50值为429.98 μmoL/L.33.97 μmol/L的Embelin作用HL-60细胞3 d,流式细胞术检测结果 显示CD11b、CD14阳性细胞率均升高(P值均<0.01);339.67 μmol/L Embelin作用于HL-60细胞后12、24及48 h的特异性凋亡率分别为(9.23 ±0.05)%、(25.86 ±0.30)%和(39.03±0.07)%,10.19、33.97、101.90、339.67及1019.02 μmol/L Embelin作用于HL-60细胞24 h后特异性凋亡率分别为(0.07±0.03)%、(7.43±0.30)%、(14.01±0.01)%、(25.52±0.03)%和(39.15±0.01)%,其诱导凋亡的作用呈时间及剂量依赖性.33.97 μmol/L的Embelin作用于ANLL 患者骨髓细胞3 d,3例M3患者骨髓细胞表面分化抗原出现显著性改变;339.67 μmol/L的Embelin作用患者骨髓细胞24 h,9例均发生凋亡.结论 亚细胞毒浓度的Embelin可诱导HL-60细胞向单核细胞分化;高浓度的Embelin对HL-60细胞具有增殖抑制及促进凋亡的作用.其促进凋亡的机制与线粒体凋亡途径有关.亚细胞毒浓度的Embelin对体外培养的M3患者骨髓细胞具有促进分化的作用;339.67 μmol/L的Embelin对ANLL骨髓细胞具有促进凋亡的作用.     

酪氨酸激酶抑制剂HerbimycinA联合化疗药物对K562细胞凋亡…

探讨慢性髓细胞白血病细胞抗凋亡机制和诱导细胞凋亡的有效方法。方法：采用Ｋ５６２细胞培养，观察酪氨酸激酶抑制剂ＨｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ联合化疗药物对细胞凋主恨的影响，探讨ＨＭＡ对ＣＭＬ细胞的作用。结论ＨＭＡ通过抑制ＣＭＬ细胞内酪氨酸激酶活性促进细胞凋亡而增加对化疗药物的敏感性，表明酪氨酸激酶抑制剂作为治疗ＣＭＬ药物具有潜在应用价值。     

三氧化二砷对白血病HL-60细胞株的凋亡作用

目的：探讨三氧化二砷对HL-60的诱导凋亡作用。方法：琼脂糖电泳检测DNA条带;Hoecst 33258染色后荧光显微镜观察细胞核的变化。用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：10μmol/L三氧化二砷处理HL-60细胞24~48 h可见到DNA出现梯形条带;处理24~48 h HL-60细胞核呈现细胞核浓缩和核碎裂现象。流式细胞仪测定12、24、和48 h的细胞凋亡率分别为（8.5±2.1）%、（12.8±3.4）%及（21.4±5.8）%,而培养48 h的HL-60细胞自然凋亡率仅为（1.5±0.5）%（P〈0.05）。结论：三氧化二砷可诱导HL-60细胞凋亡。     

肌醇六磷酸对结肠癌HT-29细胞分化的影响

目的 研究肌醇六磷酸（IP6）对结肠癌细胞株HT-29细胞周期的影响,探讨IP6诱导HT-29细胞分化的作用及其机制。方法 将HT-29细胞与不同浓度（0、1.8、3.3 mmol/L）IP6共同孵育24、48、72 h后,收集细胞,使用流式细胞仪检测细胞周期,并用透射电镜观察细胞结构的变化。结果 除1.8 mmol/L IP6作用24 h对HT-29细胞周期分布没有明显的影响外,其他各组G0/G1期细胞明显增多,S期、G2/M期细胞则相应减少。同时,IP6作用后细胞结构发生改变,出现核固缩、细胞器丰富、微绒毛增多等分化趋势。结论 IP6能够调节HT-29细胞周期,阻止细胞从G0/G1期进入S期,从而诱导细胞分化。     

一氧化氮与血液细胞的凋亡和分化

一氧化氮是一种有广泛作用的生物活性介质,在细胞凋亡和分化中有着重要作用。本文就近年关于一氧化氮诱导、抑制血液细胞凋亡机制及其影响因素,一氧化氮与血液细胞的分化等作一综述。     

抑制血管生成—肿瘤治疗的新战略

肿瘤预后与血管生长因子的调节有关。当加速血管生长的因子上调合并抑制血管生长的因子下调时,可引起肿瘤血管生成、迅速生长和转移。因此,分析肿瘤血管生长因子和血管生长状态,有利于鉴别诊断和判断预后。目前,用血管生成抑制剂治疗肿瘤动物已取得成功,并初步应用于临床。据此,可以预测,抗血管生成应成为治疗肿瘤的新方向。     

双歧杆菌诱导结肠癌细胞凋亡的研究现状

双歧杆菌是人类及某些哺乳类动物肠道中固有的和占优势的细菌。人们普遍认为双歧杆菌的总数量反映了机体的健康状况 ,它对维持肠道内的微生态平衡起重要作用 ,并且有免疫赋活及抑制多种肿瘤发生、发展的功能。细胞凋亡是受基因调控的细胞主动的程序化死亡。研究发现 ,化疗、放疗、内分泌法以及免疫过继疗法等治疗恶性肿瘤均可通过诱导肿瘤细胞的凋亡来实现 [1 ]。仅就双歧杆菌诱导结肠癌细胞的凋亡及可能的机制综述如下。1　双歧杆菌诱导结肠癌细胞凋亡的形态学观察以结肠癌裸鼠移植瘤为动物模型 ,用透射电镜观察青春型双歧杆菌对移植瘤超微…     

虫草素对结肠癌细胞体外增殖、迁移能力的影响及其诱导细胞凋亡的作用

目的研究虫草素在体外对结肠癌细胞增殖、迁移能力的影响,及其诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法按血清药理学实验原则,将20只BALB/c裸鼠随机分为两组,分别喂饲虫草素或生理盐水,3 d后处死取血清,将血清按下列不同处理方法在体外与人结肠癌细胞株SW1116共培养:(1)虫草素组;(2)化疗组;(3)虫草素+化疗组(下称:联合用药组);(4)空白对照组(下称:对照组)。以CCK-8法检测细胞增殖抑制作用,Transwell小室观察检测细胞迁移能力,荧光染色和流式细胞检测法观察细胞凋亡情况。结果 (1)SW1116细胞经虫草素+顺铂联合作用96 h、120 h后,细胞增殖的抑制率显著高于其余三组(P=0.02);(2)虫草素联合顺铂能显著减少肿瘤细胞迁移数(P<0.05);(3)经Hoechst 33258荧光染色,在联合用药组中见大量被染成亮蓝色的凋亡细胞,流式细胞仪定量分析显示该组细胞凋亡率明显高于其余三组(P<0.05)。结论虫草素及铂类化疗药(顺铂)对人结肠癌细胞株SW1116有显著抑增殖、抗迁移和促凋亡作用,虫草素与顺铂合用可显著提高这一疗效,提示虫草素有一定的化疗辅助作用。     

siRNA沉默细胞周期相关激酶基因对鼠结肠癌生长及其细胞凋亡的影响

目的探讨siRNA沉默细胞周期相关激酶(CCRK)基因对鼠结肠癌生长及其凋亡的影响。 方法将50只BALB/C(nu/nu)裸鼠皮下接种人类结肠癌SW480细胞,将其中建立移植瘤裸鼠模型成功的30只裸小鼠按照单纯随机抽样方法随机分为3组,分别接种siRNACCRK转染的人类结肠癌SW480细胞株(实验组)、正常培养的SW480细胞(空白对照组)和以转染携带无关序列片段sh RNA慢病毒的SW480细胞(阴性对照组)。第42天处死裸鼠后取下肿瘤组织,比较各组肿瘤重量、CCRKmRNA表达量、CCRK蛋白表达和细胞凋亡的变化。 结果转染siRNA组肿瘤重量、CCRK mRNA和CCRK蛋白表达[(0.54±0.15)g,1.14±0.24和0.18±0.05]表达显著低于空白对照组[(1.05 ± 0.14)g,2.41±0.42和0.49±0.07]和空siRNA载体组[(1.07 ±0 .12)g,2.39±0.47,0.47±0.09;F＝21.18,23.47,90.03;P<0.01];空白对照组与空siRNA载体组比较差异无统计学意义(q＝0.98,1.07,1.13;P>0.05)。实验组沉默CCRK基因后组织中细胞凋亡率为(21.23±1.12)%,明显高于空白对照组(6.78±0.37)%和阴性对照组(7.25±0.32)%,差异有统计学意义(F＝56.936,P<0.01);但空白对照组和空siRNA载体组之间差异无统计学意义(q＝1.78,P>0.05)。 结论CCRK靶向siRNA表达载体接种结肠癌裸鼠后能显著降低结肠癌瘤体的增长,抑制CCRK基因和蛋白表达;siRNA沉默CCRK基因能促进其凋亡,CCRK基因有望成为结直肠癌治疗的新靶点。