缺血缺氧性脑损伤对新生鼠脑内神经干细胞的影响

目的观察新生鼠缺血缺氧性损伤后皮层及海马神经干细胞的变化。方法采用新生7d龄SD大鼠制作新生鼠缺血缺氧性脑病模型（HIE），行免疫组化染色，巢蛋白（Nestin）标记神经干细胞。结果正常SD大鼠新生早期的皮层及海马存在一定数量的Nestin阳性细胞，随年龄增加而减少；缺血缺氧后．新生SD大鼠皮层损伤区及其周围、对侧镜区和双侧海马都出现Nestin阳性细胞增多，并以病灶边缘曼加突出，在皮层伤后3d即出现高峰，而海马的高峰期在伤后7d，然后都逐渐减少，至伤后28d均与正常组无差别。结论缺血缺氧能促使新生SD大鼠皮层及海马的神经干细胞增多。     

多疗程无创性延迟肢体缺血预适应保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的持久效应研究

目的:探讨多疗程无创性肢体缺血预适应保护大鼠心肌缺血再灌注损伤持久效应差别,确定最佳的临床应用方案。方法:雄性Wistar大鼠按体重随机进行如下分组:①对照组,包括假手术组、缺血再灌注组、心肌缺血预适应组、股动脉缺血预适应组;②无创性延迟肢体缺血预适应组,包括1d远端肢体缺血预适应间隔1d组、1d远端肢体缺血预适应间隔2d组、3d远端肢体缺血预适应间隔3d组、3d远端肢体缺血预适应间隔5d组。每组分别在间隔末期进行缺血再灌注损伤、监测缺血再灌注期间左心室心功能、心律失常、ST段升高幅度,检测再灌注结束时心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB)及心肌梗死面积。结果:与缺血再灌注组比较,心肌缺血预适应组、1d远端肢体缺血预适应间隔1d组明显改善左心室功能、减少心律失常、降低ST段抬高幅度、降低H-FABP和GPBB活性、减少心肌梗死面积。结论:多疗程1d远端肢体缺血预适应,间隔1d可提供长期的心肌保护,有望成为临床应用的最佳方案。     

缺血再灌注损伤对SD乳鼠器官型脑片神经再生的影响

目的探讨缺血再灌注损伤对SD乳鼠器官型脑片中神经再生的影响。方法制备P3SD乳鼠的全脑器官型脑片,随机分为缺血再灌注组和正常对照组,观察脑片生长情况,培养3天后,两组再分别分为2个亚组,分别给予药物和空白干预,依次列为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组,通过倒置显微镜及免疫荧光染色观察各组脑片在1、3、7天的改变。结果缺血再灌注组室下区、海马齿状回可见巢蛋白阳性新生细胞,而正常对照组未见新生细胞;药物干预后,两组均出现大量新生细胞,但正常对照组单位区域新生细胞数量多于缺血再灌注组(P<0.01);Ⅲ组较Ⅰ、Ⅱ组明显增多(P<0.01),随着培养时间延长,两组新生细胞均向外迁移,上述区域新生细胞密度逐渐减少。结论缺血再灌注损伤可以促进SD乳鼠器官型脑片神经再生,但同时也损伤了神经再生的潜能。     

罗格列酮在缺血预适应中对心肌保护作用的研究

目的:给予罗格列酮(ROS)预处理并且诱导大鼠心肌缺血预适应后,观察心肌梗死面积以及脂联素的分泌,探讨缺血预适应中脂联素的保护机制。方法:用随机数字发生器将SD雄性大鼠随机分为4组:①缺血再灌注组(I/R组);②缺血预适应组(IPC组);③罗格列酮+缺血再灌注组(ROS+I/R组);④罗格列酮+缺血预适应组(ROS+IPC组),各8只。通过RT-PCR测定大鼠心脏脂联素含量。测定大鼠心脏心肌梗死面积,观察脂联素含量。结果:ROS+IPC组脂联素的表达水平分别与ROS+I/R组、IPC组及I/R组相比,差别有显著统计学意义(P0.01)。结论:罗格列酮增加了脂联素的分泌,使其mRNA表达水平增高,减少了心肌梗死面积。这可能是罗格列酮在IPC中产生对心肌保护的主要机制之一。     

远程缺血后适应降低心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究

目的:探讨远程缺血后适应对心肌缺血再灌注的氧化还原、能量代谢及炎症反应的影响。方法:阻断成年SD大鼠冠状动脉左前降支30 min再灌注120 min的方式建立缺血再灌注模型;分别以3个周期30 s缺血、30 s灌注的方式建立缺血预适应、缺血后适应、远程缺血后适应的缺血适应模型;开胸后不阻断冠状动脉建立对照组模型。实验结束收集大鼠缺血心肌组织,通过黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,化学比色法检测髓过氧化物酶(MPO)活性,生物发光法检测三磷酸腺苷(ATP)含量;实时定量聚合酶链反应法分别检测基质细胞衍化因子-1(SDF-1)和血管内皮生长因子(VEGF),以及线粒体功能相关基因Ndufa2、Ndufa4、Cox4il、Cox7a2表达(n=8)。结果:缺血预适应、缺血后适应、远程缺血后适应均显著增加缺血心肌组织的SOD活性、ATP含量;降低MDA含量、MPO活性;并可以诱导SDF-1、VEGF及线粒体功能相关基因Ndufa2、Ndufa4、Cox4il、Cox7a2的表达。结论:远程缺血后适应应用在缺血再灌注损伤时有增加缺血心肌组织的抗氧化还原、保护能量代谢、降低炎症反应等作用;远程缺血后适应与缺血预适应及缺血后适应降低缺血再灌注损伤的作用效果类似。     

炎症反应与心肌梗死后交感神经重构

心肌梗死后恶性心律失常事件是心肌梗死恢复期猝死的主要原因,心肌梗死后交感神经重构促进了恶性心律失常事件的发生,研究发现炎症反应参与交感神经重构,抑制炎症反应可改善心脏交感重构。     

缺血预适应对糖尿病大鼠再灌注心肌的保护作用

目的　通过建立大鼠缺血预适应 (IP)模型 ,探讨IP对缺血 再灌注 (I/P)糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法　在SD大鼠腹腔内注射链佐星 (6 0mg/kg)制造糖尿病大鼠模型。 2d后 ,随机时刻测定血糖 ,将血糖≥ 11.1mmol/L定为糖尿病大鼠 2 2只 ,另外 2 2只血糖正常鼠为非糖尿病鼠。 2周后 ,麻醉大鼠 ,结扎和放松冠状动脉左前降支(LAD)复制IP和I/P模型。将 44只大鼠分为IP糖尿病大鼠组 (DIP组 )、IP非糖尿病大鼠组 (NDIP组 )、非IP糖尿病大鼠组 (DNIP组 )和非IP非糖尿病大鼠组 (NDNIP组 )各 11只。记录II导联心电图。取心脏切片染色 ,计算心肌缺血范围和心肌坏死范围。结果　各组间心肌缺血范围无显著差异 (P >0 .0 5 )。DIP组心肌坏死范围较DNIP组明显减小 (P <0 .0 1)。DNIP组室性心律失常增多 ,尤其心室颤动较其他各组显著增多 (P <0 .0 1)。结论　缺血预适应可以减轻糖尿病大鼠随后较长时间缺血 再灌注对心肌的严重损害 ,能减少心肌坏死范围和降低心室颤动的发生率。     

头孢曲松预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织TLR4和TNF-α蛋白表达的影响

目的 探讨头孢曲松钠预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织中Toll样受体4(TLR4)和肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达的影响.方法 24只健康SD大鼠随机分为缺血组、假手术组和头孢曲松预处理组.预处理组于术前5d每日进行腹腔注射头孢曲松钠(200 mg/kg),其余两组给予等量生理盐水腹腔注射.线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血后24 h进行神经行为学评分,免疫组化法检测大鼠脑组织TLR4和TNF-α蛋白的表达.结果 ①神经行为学评分:缺血组神经功能缺损评分较假手术组显著升高(P＜0.01);头孢曲松钠预处理组则显著低于缺血组(P＜0.05).②与假手术组比较,缺血组大鼠脑组织的TLR4和TNF-α免疫组化阳性细胞数显著增多(P＜0.01);与缺血组比较,头孢曲松预处理组大鼠脑组织的TLR4和TNF-α免疫组化阳性细胞数明显减少(P＜0.05).结论 头孢曲松对局灶性脑缺血大鼠脑组织中TLR4和TNF-α的表达有明显的抑制作用,可能是通过抑制脑组织中炎性反应而达到阻断神经损伤的作用.     

心肌梗死后猝死机制的新概念：梗死灶周神经再生与室性心律失常

心肌梗死后病灶周围存在神经再生，且以交感神经为主，具有独特的表型。这种再生重构的神经对慢性心肌梗死患者的猝死具有重要的病理生理意义。抑制心肌梗死后神经的异常再生重构，可为预防心肌梗死后的猝死提供一条新途径     

心肌梗死后猝死机制的新概念：梗死灶周神经再生与室性心律失常

心肌梗死后病灶周围存在神经再生，且以交感神经为主，具有独特的表型。这种再生重构的神经对慢性心肌梗死患者的猝死具有重要的病理生理意义。抑制心肌梗死后神经的异常再生重构，可为预防心肌梗死后的猝死提供一条新途径。     

降钙素基因相关肽预适应对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

为探讨降钙素基因相关肽预适应对在体大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型是否具有保护作用，用36只SD大鼠随机分为三组：对照组、缺血预适应组和降钙素基因相关肽组。后组持续缺血前20min静脉注射降钙素基因相关肽（10μg／kg）。所有动物均接受30min缺血／2h再灌注。预适应方案由3次5min缺血／再灌注组成。梗塞大小由硝基四唑氮兰染色判定，并以坏死区占危险区的百分数表示。结果发现，缺血预适应和降钙素基因相关肽预适应均能显著地降低缺血和再灌注所致的室性心动过速或心室纤维性颤动的发生。缺血预适应（15．7％，P＜0．01）和降钙素基因相关肽预适应（28．8％，P＜0．01）也均能较对照组（54．0％）显著降低缺血／再灌注后的心肌梗塞面积。本研究结果证实降钙素基因相关肽预适应在在体大鼠模型中也具有心肌保护作用。     

葛根素对局灶性脑缺血大鼠转化生长因子-β1的影响

目的 研究大鼠缺血性脑损伤后缺血区脑组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨葛根素对缺血性脑损伤的神经保护机制.方法 108 只雄性 SD 大鼠,用线拴法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为手术加葛根素组、手术组、假手术组.每组又分5个不同时段观察点(6 h、12 h、24 h、48 h、72 h),手术加葛根素组大鼠应用葛根素干预治疗, 假手术组和手术组大鼠给予同等容量生理盐水对照,用SABC法免疫组织化学染色观察各时间点TGF-β1的表达,测算72 h后大鼠脑梗死体积百分比.结果 与假手术组相比,手术组和手术加葛根素组各时间点缺血区脑组织TGF-β1蛋白表达均显著增加(P＜0.01).手术加葛根素组各时间点TGF-β1的表达均较手术组显著增加(P＜0.05或P＜0.01).结论 葛根素注射液可能通过上调TGF-β1的表达,抑制过度的炎症反应来发挥神经保护作用.     

大剂量当归预适应抗心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的机制

目的观察大剂量当归水煎液预适应对缺血再灌注(IR)大鼠心肌细胞凋亡及心肌组织Bcl-2及Bax蛋白表达的影响。方法应用离体灌流大鼠心脏,复制大鼠心肌IR与缺血预适应(IPC)模型,并以不同大剂量当归水煎液灌胃6 w后,取大鼠心脏进行离体灌注,复制当归IPC模型,以TTC法测定心肌梗死面积,以Tunel法检测细胞凋亡,Western印迹法检测Bcl-2及Bax蛋白表达。结果大剂量当归水煎液预适应能有效降低IR大鼠心肌梗死面积,降低心肌细胞的凋亡率,并增加心肌组织Bcl-2的表达而抑制Bax的表达,且呈现明显剂量-效应关系(P0.05,P0.01)。结论大剂量当归水煎液预适应可增加心肌组织Bcl-2的表达而抑制Bax的表达,从而减少IR大鼠心肌细胞的凋亡,对IR大鼠心肌具有明显保护作用。     

乙酰水杨酸对大鼠心肌缺血预适应的双向调节作用及机制

目的 研究乙酰水杨酸(ASA)对大鼠缺血预适应的心脏保护作用的影响并初步探讨其可能机制.方法 采用左冠状动脉前降支结扎法,分别复制缺血再灌注及缺血预适应模型;Evan‘s蓝和红四氮唑结合染色法确定心脏缺血和梗死区;利用试剂盒检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;应用电泳凝胶迁移法检测缺血区域NF-κB与DNA结合活性.结果 与低、中浓度ASA作用不同,高浓度的ASA能显著增加缺血预适应后心脏梗死面积、血清LDH、CK含量;同时,明显抑制了NF-κB-DNA的结合活性;SOD与MDA分别随ASA浓度的增加而增高或降低.结论 ASA对大鼠心脏缺血预适应的双向调节作用可能由其对NF-κB-DNA的结合活性的不同影响所致.     

缺血后适应对糖尿病大鼠再灌注心肌的保护作用及其与P-Akt的关系

目的:探讨缺血后适应对糖尿病大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及其信号机制。方法:2W龄健康SD大鼠60只,雌雄不拘,体质量250～300g,随机分为6组:1.空白对照组(N组);2.缺血再灌注组(IR组);3.缺血后适应组(Post组);4.糖尿病大鼠后适应组(Dpost组);5.糖尿病大鼠缺血再灌注组(DIR组);6.糖尿病大鼠空白组(DN组)。观测心脏冠状动脉灌流量、心肌梗死范围、免疫印迹(western blot)对P-Akt的测定、电镜下观察心肌和线粒体的改变。结果:缺血后适应组(Post组DPost组)较缺血再灌注组(IR组DIR组)冠状动脉流量明显增加,心肌梗死范围明显减少,P-Akt的表达明显增强,心肌纤维和线粒体的完整程度明显较好。结论:缺血后处理在糖尿病大鼠离体心脏具有显著的保护作用,这一作用可能与Akt激活有关。     

细胞学机制在调控心肌梗死后炎症反应中的研究进展

炎症在心肌梗死后心脏修复中发挥重要作用,适度的炎症反应可以缩小梗死范围,促进缺血心肌的恢复,而持久激活的炎症反应则会加重缺血损伤,引起心脏不良重构。最近研究表明,心肌梗死后炎症和修复细胞的功能超出了传统学说所提出的作用范围。现就梗死后炎症反应的细胞学机制的研究进展做一综述,为进一步研究如何通过调控心肌梗死后的炎症反应从而抑制病理性重构为临床治疗提供新的方向。     

血管生成素相关蛋白2对大鼠缺血心肌促血管生长作用的初步观察

目的观察和评价血管生成素相关蛋白2(angiopoietin-related protein 2,ARP2)基因移植于大鼠急性缺血心肌后的促血管新生作用,探讨其促血管新生机制。方法建立急性心肌缺血大鼠模型,将42只大鼠随机分为3组:缺血区域心肌内注射ARP2重组腺病毒组(Ⅰ组,n=14);注射ARP2空腺病毒组(Ⅱ组,n=14)和注射磷酸缓冲溶液组(Ⅲ组,n=14),注射后28天行心脏彩色超声检查、心肌声学造影,并取注射点心肌切片作常规病理HE染色、VB染色、Ⅷ因子相关抗原免疫学检测。结果Ⅰ组大鼠心脏功能及心肌灌注较Ⅱ、Ⅲ组明显改善,免疫组织化学检测显示Ⅰ组心肌高度表达ARP2蛋白,心肌纤维间毛细血管数目明显增多。结论ARP2能通过促进大鼠缺血心肌血管新生,从而改善心脏功能。     

用cDNA芯片检测大鼠心肌缺血预适应后基因表达谱的改变

为了检测缺血预适应后大鼠心肌基因表达谱的改变，采用cDNA芯片方法对缺血预适应后大鼠心肌基因谱的改变进行检测。结果发现，缺血预适应大鼠心肌中差异表达基因共75项，其中表达上调基因48项，表达下调基因27项。采用逆转录—聚合酶链反应进一步验证了cDNA芯片结果的可靠性，并初步分析了基因表达谱改变在缺血预适应诱导的心肌内源性保护作用中有一定意义。以上研究有助于从基因水平阐明缺血预适应诱导的心肌保护的分子机制，为临床防治缺血／再灌注损伤及缺血性心脏疾病提供新的思路。     

他克莫司对异种周围神经移植再生影响的实验研究

目的 探讨他克莫司(FK506)对大鼠异种神经移植排斥反应的抑制作用和影响.方法 将BABL/c小鼠的坐骨神经移植到SD大鼠的腓深神经,移植后每天喂饲FK506 5 mg/kg,共12 w.于移植术后4、8、12 w分别取异种神经移植后的神经进行组织学光镜、电镜观察和胫前肌湿重测定.结果 实验组术后12 w时光镜观察神经周围纤维组织增生,神经纤维排列较致密,成束状,少许淋巴细胞、浆细胞浸润.电镜观察神经纤维膜结构完好,新生神经纤维及轴突结构正常,线粒体仍有轻度变性,神经纤维间可见浆细胞的出现.大鼠胫前肌湿重测量与对照组相比较,应用FK506使神经移植大鼠胫前肌湿重明显增加(P＜0.05).结论 FK506能显著抑制大鼠异种神经移植的免疫排斥反应和促进神经再生作用.     

睡眠剥夺对大鼠心肌损伤效应的研究

目的:评估睡眠剥夺(SD)后大鼠心肌组织损伤程度并探讨其机制。方法: 将60只实验大鼠随机分为6组,每组10只。采用改良的多平台SD法(MMPM)建立SD模型,观察SD对心肌组织中缺血修饰白蛋白（IMA）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物酶(SOD)含量的影响。结果: 与笼养组（CC组）和大平台组（TC组）相比,SD后大鼠心肌组织中IMA、hs-CRP、GSH及MDA的含量明显升高(P<0.05),且随着SD时间的延长有明显上升的趋势;而SOD的活性随着SD时间的延长有降低的趋势。结论: SD可引起大鼠心肌发生明显的氧化应激和炎症反应,且随着氧化应激和炎症反应的加重,心肌发生进行性缺血缺氧损害。