加强神经干细胞移植治疗研究

脑内移植是指选择供体神经组织或细胞植入宿主的脑内，以代替受损或变性的神经元，重建神经环路或分泌神经递质，达到调控神经功能和改善症状的目的。动物实验已证实，未成熟的神经细胞移植到宿主脑内不仅可存活，而且可以保持其原有神经功能的特性。90年代初期神经干细胞(neural stem cell，     

胚胎组织脑内移植治疗帕金森氏病临床CT和MRI随访观察报告

动物实验已证实,胚胎未成熟神经元脑内移植后,可以在宿主脑内存活、生长和建立新的神经突触联系,并可替代受损和变性的神经组织,有助于恢复中枢神经系统的功能和神经内分泌功能。但脑内移植物是否存活生长?尚缺乏影像学和组织学证据。本文报告1例接受人体胚胎组织脑内移植的患者,     

成年大鼠脑内5-HT能神经纤维向胎鼠脑皮层移植物内投射的研究

目的:探讨大鼠胎脑皮层组织同种移植后的存活情况,以及宿主脑组织与移植物之间是否能建立神经纤维联系.方法:移植受体(宿主)为正常雄性成年Wistar大鼠,移植供体取自胎龄15～17d的Wistar孕鼠.在移植手术后不同时间取脑切片,用ABC法进行免疫组织化学染色,显示5-HT能神经纤维及其在宿主脑内和移植物中的分布情况.结果:同种胎鼠脑皮层组织移植后存活率为30%,ABC法显示有5-HT能神经纤维从宿主脑组织长入移植物中.结论:同种胎脑皮层组织移植后移植物与宿主脑组织可以建立神经纤维联系.     

成年大鼠脑内5-HT能神经纤维向胎鼠脑皮层移植物内投射的研究

目的：探讨大鼠胎脑皮层组织同种移植后的存活情况，以及宿主脑组织与移植物之间是否能建立神经纤维联系。方法：移植受体(宿主)为正常雄性成年Wistar大鼠。移植供体取自胎龄15～17d的Wistar孕鼠。在移植手术后不同时间取脑切片。用ABC法进行免疫组织化学染色。显示5-HT能神经纤维及其在宿主脑内和移植物中的分布情况。结果：同种胎鼠脑皮层组织移植后存活率为30%，ABC法显示有5-PIT能神经纤维从宿主脑组织长入移植物中。结论：同种胎脑皮层组织移植后移植物与宿主脑组织可以建立神经纤维联系。     

改良高香草酸测定法在脑移植中的应用

瑞典 Blacklund 教授于1982年首次开展自体肾上腺髓质脑内移植治疗震颤麻痹以来,人们十分关注肾上腺髓质移植物在宿主脑内的存活,力图采取灵敏、可行的测定方法检测脑脊液(CSF)中儿茶酚胺及其代谢产物含量的变化,以便间接判断移植物是否存活。     

鼠胎蓝斑脑内移植抑制电点燃癫痫的基础研究

本实验用６－羟基多巴胺损毁鼠前脑去甲肾上腺素（Ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ；ＮＥ）能神经后，将富含ＮＥ的鼠胎蓝斑区细胞悬液植入单或双侧杏仁核－梨状区皮质，予慢性电刺激海马制成癫痫模型。经行为和电生理研究发现移植物对点燃癫痫的发生和发展及海马细胞的痫样放电具有明显的阻抑作用，且双侧靶点内移植的抑制作用明显高于单侧移植。用络氨酸羟化酶的特异抗血清对前脑切片进行免疫细胞化学染色光镜分析，发现移植的ＮＥ能神经元存活、生长良好，并发出纤维支配海马。用高效液相色谱－电化学检测法测定移植靶点周围脑组织的单胺类神经递质含量，发现接受蓝斑移植的动物端脑内ＮＥ含量明显增高，其中以接受双侧靶点内移植的动物增高更为显著。经统计分析发现前脑ＮＥ含量的高低与癫痫的点燃速度呈负相关，而蓝斑移植物对点燃癫痫的阻抑作用是通过移植的ＮＥ能神经元在宿主动物脑内存活并生产和提高脑内ＮＥ含量来实现的。     

同种胚胎中脑腹侧部植入猴帕金森氏病模型的实验研究

采用猴13只,其中妊娠8周猴2只。应用1 甲基1,2,5,6 4氢吡啶(MPTP)诱发猴帕会森氏病模型,将同种胚胎中脑腹侧部植入猴 PD 模型的尾状核内。术后观察6个月,病理症状、肌电图、旋转行为等与移植前无明显改善。MRI 检查可见移植区有点块状低信号影(T_(?)像)。组织病理学检查,移植1(1/2)月后,移植物内只有少数神经元存活,3个月后移植物内神经元消失,6个月后移植部位仅存在胶质疤痕,大量吞噬细胞及淋巴球浸润。显示慢性排异现象尚未完全终止。实验表明,脑组织移植后,对病理症状的改善不明显,移植的神经元未能在宿主脑内长期存活。     

脑内移植与免疫

近十年来积累了许多脑移植的实验依据,表明在适宜的条件下,移植物能在宿主脑内成活并和宿主脑整合形成突触。多数实验在近种系的啮齿类动物中进行,以避免复杂的免疫排斥。在用脑内移植治疗帕金森病(PD)的实验研究的基础上,1985年Backlund首次报告选用自体肾上腺髓质植入脑内。迄今至少已有150例以上病人接受了这样的手术。采用自体肾上腺髓质移植目的就在于避免免疫排斥反应。但用肾上腺髓质作移植物不可能与植入含丰富的多巴胺(DA)神经元的胚中脑悬液获得同样好的功效。对治疗帕金森症来说最适合的供体是来自     

神经干细胞移植促进脑出血大鼠功能恢复

目的:观察胎鼠神经干细胞体外的生长、分化及移植到脑出血大鼠后的存活、迁徙、分化情况。研究神经干细胞对脑出血后神经功能损害的可能修复作用。方法:通过尾状核内注射自体动脉血制作大鼠脑出血模型。分离、培养大鼠胎鼠神经干细胞并移植于成年大鼠尾状核,对大鼠脑出血后的神经恢复情况进行功能评价。结果:神经干细胞可以在宿主脑内存活、迁徙和分化,神经干细胞移植组大鼠运动功能较对照组明显改善。结论:神经干细胞移植能促进改善大鼠脑出血的神经功能恢复。     

免疫组化法观察兔脑缺血灶内移植神经元的变化

以兔大脑中动脉阻断型(MCAo)局灶脑缺血模型为对象,把含胎免脑干中缝核血清素(5—HT)能性神经元的细胞悬液用脑立体定向术移植到缺血灶内。对术后存活一、二、三个月的兔进行脑5—HT的免疫组化研究。结果表明植入的5—HT阳性细胞能够在脑缺血灶内存活、生长并成熟,同时发出细胞突起与宿主细胞形成联系;移植神经元最初集聚成簇,逐渐向周围脑实质内迁移并与宿主脑整合起来。     

胎脑黑质脑内移植对PD鼠纹状体内D2RmRNA表达的影响

为了研究胎脑黑质脑内移植后对ＰＤ鼠纹状体神经元Ｄ２Ｒ基因表达的影响，采用核酸斑点杂交技术对太体内Ｄ２ＲｍＲＮＡ进行了连续定量观察，发现胎脑黑质移植物能够使ＰＤ鼠纹状体内过度表达的Ｄ２ＲｍＲＮＡ水平恢复正常。本研究结果提示，Ｄ２ＲｍＲＮＡ过度表达及ＰＤ鼠旋转行为被矫正的程度可能反映出胎脑黑持移植物对宿主形成神经再支配的程度。     

胎脑黑质脑内移植对PD鼠纹状体内D_2RmRNA表达的影响

为了研究胎脑黑质脑内移植后对ＰＤ鼠纹状体神经元Ｄ２Ｒ基因表达的影响，采用核酸斑点杂交技术对纹状体内Ｄ２ＲｍＲＮＡ进行了连续定量观察，发现胎脑黑质移植物能够使ＰＤ鼠纹状体内过度表达的Ｄ２ＲｍＲＮＡ水平恢复正常。本研究结果提示：Ｄ２ＲｍＲＮＡ过度表达及ＰＤ鼠旋转行为被矫正的程度可能反映出胎脑黑质移植物对宿主形成神经再支配的程度。     

中枢神经系统疾病的细胞替代治疗

中枢神经系统的自我修复能力非常有限,主要是因为成熟的神经细胞缺乏再生的能力,尽管成年脑内有神经干细胞存在,但不足以弥补损伤神经元的缺失。由于这些原因,人们希望通过移植新的细胞以代替那些因为损伤或疾病而丢失的细胞,从而修复神经系统功能。在大多数情况下,移植的神经元或神经干细胞发挥治疗作用多依赖于它们在组织和功能上与宿主脑组织的融合。只有当神经元处于发育阶段（成熟前期）时植入脑内,它们才会存活和良好生长。它们和宿主脑组织建立起交互联系（reciprocal connectivity）的能力也依赖于宿主的年龄,宿主处于胚胎阶段时这种能力最大,随宿主年龄的增大,这种能力逐渐减弱。尽管如此,在成年脑组织中,移植的神经元也能建立起相应的功能联系,并且当宿主神经通路受损时这种能力明显增加,提示神经元分化和建立交互联系的机制在发     

成年大鼠宿主脑内5—HT能神经纤维向胎脑皮层移植物内投射的研究

应用免疫组织化学方法和电镜技术研究大鼠胎脑皮层组织同种移植后的存活情况以及移植物与宿主脑组织之间的神经纤维联系。证实:同种胎脑皮层组织移植后存活率为30％,ABC法研究表明有5-羟色胺能神经纤维从宿主脑组织内长入移植物中,两者之间已建立了神经纤维联系。     

神经干细胞移植在颞叶损伤后癫痫治疗中的应用

颞叶脑损伤后海马神经元的破坏和异常修复的结果形成了后期癫痫发作的基础。哺乳动物中枢神经系统损伤后自身修复能力有限,临床现行治疗多着重于改善脑代谢以加强细胞保护和防止存活神经元继发性损伤。随着干细胞研究的深入,其在特定环境和因子的诱导下能定向分化成不同的神经细胞类型,体内移植并使它们存活、分化、整合到宿主正常神经环路成为新的治疗方向。本文结合神经组织移植治疗颞叶皮层和海马损伤后癫痫的实验结果,探讨神经干细胞移植治疗的可行性及其与移植脑环境的关系。     

大鼠胚胎大脑皮层脑片培养及移植的实验研究

目的：研究经体外培养的胚胎大脑皮片能否提高在脑移植术后的生存率及生存质量,及大脑皮层损伤后立即行脑移植与伤后第７～９天行脑移植对移植物的生存情况有否影响。方法：取ＳＤ胚胎大鼠大脑皮层制成脑片,对Ａ组大鼠在大脑皮层造腔后立即进行移植,对Ｂ组大鼠在大脑皮层造腔后第９天用未经培养的胚胎脑片进行移植。Ｃ组为对胚胎脑片进行原代培养７天后对已行损伤脑皮质造腔后第９天的ＳＤ大鼠进行脑移植。Ｄ组为空白对照组。结果：Ｃ组移植神经之存活率明显高于Ａ、Ｂ组,宿主对移植物的排异反应Ａ、Ｂ组比Ｃ组明显,Ｃ组移植物与宿主脑产生了良好的整合,有较为丰富的纤维联系。结论：对胚胎大脑脑片进行原代培养,在受体鼠大脑造腔处术后第９天进行脑移植能明显提高移植神经元的成活率及与宿主脑形成更好的整合关系。     

脑组织移植与临床应用

近十年来,胚脑组织移植的实验研究取得长足进展,现已证明移植物能在宿主脑内成活并和宿主脑整合形成突触。为脑内移植技术应用于临床奠定了理论基础。从1988年4月以来作者用这种方法治疗小脑萎缩症、帕金森氏病(PD)等共25例,取得较好效果,现将临床应用情况报告如下。     

大鼠胚胎大脑皮层脑片培养及移植的实验研究

目的：研究经体外培养的胚胎大脑皮片能否提高在脑移植术后的生存率及生存质量，及大脑皮层损伤后立即行脑移植与伤后第7－9天行脑移植对移植物的生存情况有否影响。方法：取SD胚胎大鼠皮层制成脑片，对A组大鼠在大脑皮层造腔后立即进行移植，对B组大鼠在大脑皮层造腔后第9天用末经培养的胚胎脑片进行移植。C组为胚胎脑片进行原代培养7天后对已行损伤脑皮质造腔后第9天的SD大鼠进行脑移植。D组为空白对照组。结果：C组移植神经之存活率明显高于A、B组。宿主对移植物的排异反应A、B组比C组明显，C组移植物与宿主脑产生了良好的整合，有较为丰富的纤维联系。结论：对胚胎大脑脑片进行原代培养,在受体鼠大脑造腔处术后第9天进行脑移植能明显提高移植神经元的成活率及宿主脑形成更好的整合关系。     

胚胎神经干细胞在出血性脑卒中大鼠脑内移植的实验研究

目的 研究胚胎神经干细胞出血性脑卒中大鼠脑内移植对神经功能缺损改善作用.方法 30只SD大鼠随机分配到单纯脑出血组(A,10只)、培养液移植组(B,10只)及NSCs移植组(C,10只).制作脑出血模型后3d,C组将神经于细胞经Hoechst标记后移植到病灶区,B组注射等量培养液.通过移植前后神经功能评分检测神经功能缺损修复情况,以及冰冻切片后组织免疫荧光检测移植神经干细胞的分化情况.结果 实验中分离、培养的神经干细胞经标记移植人大鼠脑内后,经免疫荧光检测证实能够在血肿腔周边分化成神经元和星形胶质细胞.移植术后2周内3组间大鼠神经功能改善无明显差异.但从移植术后第21天到第28天,神经干细胞移植组大鼠的神经功能改善显著好于培养液移植组和单纯脑出血组P＜0.001,有统计学意义.结论 神经干细胞移植入脑出血大鼠脑内后能够存活并分化为神经元及星形胶质细胞,促进改善大鼠的神经功能,是一种很有发展前途的治疗方法,值得进一步深入研究.     

神经干细胞与帕金森病

神经干细胞具有几乎无限的稳定扩增能力以及体外分化为多巴胺能神经元的能力,使之成为神经变性疾病移植治疗的重要细胞来源。神经干细胞可以在宿主脑内增殖、分化、迁移并与宿主神经组织整合。移植后的神经干细胞系在体内特定环境下可以自发地表达多巴胺能神经元的特性。可以通过刺激成年哺乳动物脑内终生存在的神经干细胞,使之在脑内增殖、迁移,并分化为多巴胺能神经元,与周围建立突触联系以治疗帕金森病。神经干细胞治疗帕金森病的前景是巨大的,但距临床应用尚有一定距离,仍需要包括动物实验在内的大量基础研究。