rhGH对梗阻性黄疸患者术后免疫功能的影响

目的: 探讨重组人生长激素(rhGH)对梗阻性黄疸患者术后免疫功能的影响及临床意义.方法: 采用前瞻、随机、对照方法,对入选36例患者分为对照组(A组,n = 18)、rhGH组(B组,n = 18),B组加用rhGH,检测2组治疗前和治疗后1、8 d细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)、体液免疫指标(IgM、IgA、IgG)和免疫调节因子(IL-2、IL-6、TNF-α)的动态水平,并观察2组患者并发症和病死率的变化.结果: B组治疗后8 d与A组比较,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+指标升高水平明显(42.32%±4.19% vs 31.51%±4.42%;26.36%±4.25%vs 19.29%±4.27%;1.22±0.20 vs 0.95±0.12,均P<0.05);IgA、IgG和IgM浓度明显升高(2.42±0.11 g/L vs 1.41±013 g/L;6.88±0.18g/L vs 4.89±0.15 g/L;1.84±0.18 g/L vs 1.28±0.24 g/L,均P<0.05);IL-6和TNF-α下降明显(0.42±0.11 mg/L vs 0.86±0.10 mg/L;11.04±1.52 pmol/L vs 18.24±1.22 pmol/L,均P<0.05),IL-2浓度显著升高(1.92±0.15 mg/L vs 1.14±0.12 mg/L,P<0.05);B组并发症发生率和病死率明显低于A组(22.22% vs 44.44%,0.00% vs5.56%,均P<0.05).结论: rhGH对梗阻性黄疸患者术后免疫功能具有直接的调理作用,能明显改善患者的免疫状态,有利于患者康复.     

QHF复方联合小剂量顺铂对小鼠H_(22)肝癌血管生成的抑制作用

目的:探讨QHF复方联合小剂量化疗药物顺铂(DDP)对小鼠H22肝癌血管生成的影响,观察其抑瘤效果和不良反应.方法:48只BALB/c小鼠右腋皮下注射小鼠H22肝癌细胞建立荷瘤模型,随机分设为QHF复方组、小剂量DDP、联合用药组(QHF+DDP)及生理盐水组(NS).以抑瘤率为指标,观察各药物对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;以小鼠的一般状况及脾指数为指标,观察各药物对荷瘤小鼠的不良反应;光镜观察肿瘤组织形态;免疫组织化学方法检测各药物对小鼠肝癌组织中的微血管密度(MVD).结果:QHF组、DDP组和联合用药组的瘤质量均较NS对照组明显降低(0.63 g±0.16 g,0.45 g±0.23 g,0.33 g±0.15 g vs 1.22 g±0.22 g,均P<0.01),联合用药组较QHF组显著降低(P<0.01).抑瘤率分别为47.45%、63.11%和72.95%.QHF组、DDP组和联合用药组小鼠移植瘤组织内的MVD数量较NS对照组明显降低(11.00±1.56,10.33±1.49,6.87±0.97 vs19.93±1.02,均P<0.01);联合用药组与各单药组相比明显降低(均P<0.01).QHF与DDP联合应用组的不良反应较单用DDP组轻,生存质量较好.结论:QHF复方与小剂量DDP均具有抗肝癌血管生成的作用;QHF复方与小剂量DDP联合应用具有协同抗肝癌血管生成的作用,同时QHF复方具有提高生存质量和降低化疗药物不良反应的作用.     

VEGF促进肝癌SMMC-7721细胞侵袭性的自分泌机制

目的:探讨促血管内皮生长因子(VEGF)对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭力以及对该细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响,初步研究VEGF对肿瘤侵袭和转移的影响及可能的作用机制.方法:使用VEGF体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,通过细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,再分别使用30μg/L、10μg/LVEGF培养人肝癌SMMC-7721细胞,以正常培养人肝癌SMMC-7721细胞为空白对照组.使用半定量RT-PCR和Western blot法对3组细胞中MMP-9的mRNA和蛋白表达水平进行分析.结果:细胞体外侵袭实验显示,外加VEGF培养后,细胞侵袭力明显增强(P0.01);MMP-9mRNA和蛋白的表达在外加VEGF组中要明显高于空白对照组(0.479±0.025,0.665±0.024vs 0.315±0.022;0.521±0.026,0.662±0.026vs 0.366±0.025,均P<0.01),且高浓度和低浓度组之间也有明显差别.结论:肝癌SMMC-7721细胞系中存在有自分泌机制,VEGF可通过自分泌机制上调肝癌细胞的MMP-9表达,进而促进肿瘤的浸润转移.     

半夏泻心汤抑制DMH/DSS诱导的结肠炎相关性结肠癌的发生

目的:观察半夏泻心汤对DMH/DSS诱导的结肠炎向结肠癌转变的抑制作用.方法:♂ICR小鼠65只,随机分为正常组、模型组和半夏泻心汤3个剂量(100,200,400 mg/ kg)给药组.采用腹腔注射1,2-二甲肼20 mg/kg及饮用含20 g/L的右旋葡聚糖苷钠复制结肠炎相关的小鼠结肠癌.除模型组20只小鼠,其余30只存活小鼠在出现第二次便血时分别口服给予半夏泻心汤100,200和400 mg/kg进行治疗,1次/d,共11 wk.实验第20周,乙醚麻醉处死小鼠,截取结肠,称重;记录结肠肿瘤数目,取结肠做HE染色:摘取脾脏、胸腺称重.结果:在实验第20周,40%的模型组小鼠出现脱肛,成癌率为85%.半夏泻心汤3个剂量组则未见脱肛小鼠,100 mg/kg组成癌率为20%,200和400 mg/kg成癌率为10%.DMH/DSS诱导的结肠癌小鼠脾脏指数显著升高(6.50±4.08 mg/g vs 4.25±3.39 mg/g,P<0.01),而胸腺指数则明显降低(0.60±0.33 mg/g vs0.71±0.29 mg/g,P<0.05),与对照组相比有显著性差异.半夏泻心汤可明显的对抗结肠癌小鼠胸腺的萎缩(P<0.05),而对脾脏的增大也有明显的治疗作用(P<0.01).病理结果表明,半夏泻心汤成功的将小鼠结肠停留在炎症状态,阻止了结肠炎向结肠癌的转变.结论:半夏泻心汤能够显著地抑制结肠炎向结肠癌的转变,结肠炎的有效治疗是防止结肠癌发生的重要措施.     

马尾松花粉多糖硫酸酯对肝癌HepG2细胞的诱导分化

目的:观察马尾松花粉多糖硫酸酯(SPPM60)对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用, 并对其机制进行初步探讨.方法:MTT法检测HepG2细胞增殖活力; 倒置显微镜、HE染色及透射电镜观察细胞形态;流式细胞技术检测细胞周期; 荧光分光光度计检测细胞内钙离子浓度的变化; 免疫细胞化学方法检测甲胎蛋白的表达, 溴甲酚绿法测定白蛋白含量; 重氮反应比色法测定γ-谷氨酰转肽酶活力, 比色法测定碱性磷酸酶活力, 考马斯亮蓝法测定总蛋白含量.结果:经SPPM60处理后, HepG2细胞的增殖受到抑制; 细胞形态趋于正常; 与对照组相比, SPPM60组G0/G1期细胞数增加(76.97%±0.91% vs 64.62%±0.18%, P<0.05), S期细胞数减少(17.21%±0.71% vs 24.26%±0.15%,P<0.05), G2/M细胞数减少(5.82%±0.20% vs11.13%±0.34%, P<0.01); [Ca2+]i降低; 甲胎蛋白表达降低, 白蛋白分泌量上升(6.77±0.33 mg/106细胞vs 4.87±0.30 mg/106细胞,P<0.05), γ-谷氨酰转肽酶与碱性磷酸酶活力降低(16.3±0.7 U/g vs 22.3±1.2 U/g; 223.3±15.7 U/g vs 311.1±13.4 U/g P<0.05或0.01), 胎盘型碱性磷酸酶的比例降低(46.4%±1.5% vs62.5%±2.3%, P<0.05). PPM60组细胞没有明显变化.结论:硫酸酯化赋予了SPPM60抑制HepG2细胞的活性, 其作用机理可能是降低细胞内钙离子浓度, 阻滞细胞周期于G0/G1期, 诱导HepG2细胞分化逆转其恶性.     

黄芩甙对肝癌细胞BEL-7402抗黏附作用中细胞凋亡和细胞周期的改变

目的:研究黄芩甙对人肝癌BEL-7402细胞系黏附、细胞凋亡及细胞周期的影响,探讨三者之间的关系.方法:应用细胞培养技术培养BEL-7402细胞,不同浓度黄芩甙处理肝癌细胞,通过Boyden小室模型测定其黏附力,同时观察细胞形态,流式细胞术测定肝癌细胞integrinβ_1、E-cd表达的改变及细胞凋亡率.结果:5,10,20mg/L黄芩甙处理组细胞黏附力与对照组相比均有显著降低(52.38±3.83,35.63±2.32,26.58±1.13 vs 84.32±6.74.p<0.05).对照组表现出纤维母细胞样形态,伸出形态各异的伪足.而黄芩甙组细胞形态较圆,伪足数目相对较少,电镜下显示细胞微绒毛明显减少,甚至消失.5,10,20mg/L黄芩甙组细胞integrinβ_1表达较对照组降低(354.07±18.17,319.44±15.21,291.49±12.88 vs 407.54±20.58:P<0.05),E-cd的表达则增加(335.5±20.18,376.4±22.36,393.8±25.68 vs 251.72±12.34,P<0.05).黄芩甙作用后,随黄芩甙浓度增加肝癌细胞G_0/G_1,期比例逐步增高,S期细胞减少,同时细胞凋亡率增加.结论:黄芩甙对肝癌BEL-7402细胞发挥抗黏附作用,其机制可能与抑制黏附分子E-cd的表达,促进integrinβ_1表达有关.在抗黏附的同时细胞周期发生改变,细胞凋亡增多.     

大鼠梗阻性胆管炎细胞免疫功能降低及中药锦红片的影响

目的:探讨梗阻性胆管炎大鼠细胞免疫功能降低的发生机制及清热通下中药锦红片的影响.方法:♂SD大鼠24只建立急性梗阻性胆管炎模型,随机分为模型组(n=8)、锦红片治疗组(n=8)和单纯胆管梗阻组(n=8),检测血浆IL-2,CD_3~ ,CD_4~ ,CD_8~ ,内毒素,胸腺指数,胸腺细胞凋亡指数及电镜下观察胸腺的超微结构及凋亡.结果:模型组IL-2,CD_3~ ,CD_4~ 和胸腺指数显著低于治疗组和单纯胆管梗阻组(IL-2:28.5±3.0 ng/L vs 33.9±3.6 ng/L,39.6±2.2 ng/L,P<0.05,P<0.01;CD_3~ :54.5%±5.5% vs 70.7%±4.8%,66.3%±7.1%,均P<0.01;CD_4~ :34.5%±8.3% vs 44.2%±3.3%,44.5%±4.2%,均P<0.01:胸腺指数:0.89±0.18 vs 1.10±0.13.1.12±0.24,均P<0.05),CD_8~ 3组间没有统计学差异,血浆内毒素和凋亡指数明显高于治疗组和梗阻组(内毒素:0.85±0.14 Eu/mL vs 0.53±0.10 EU/mL,0.49±0.11 EU/mL,均P<0.01;凋亡指数:25.7±5.1 vs 15.8±5.5.9.0±3.1.P<0.05,P<0.01),模型组胸腺可见较多典型的凋亡细胞,结果显示经中药干预治疗后,免疫功能、内毒素血症和胸腺细胞凋亡有所改善,接近单纯胆管梗阻组水平.结论:梗阻性胆管炎大鼠存在免疫功能降低,胸腺细胞异常凋亡.锦红片对维持免疫机能的稳定有积极的意义.     

RNA干扰阻断cyclin D1表达抑制结肠癌细胞增殖

目的:使用RNA干扰技术阻断人结肠癌细胞cyclin D1的表达,检测其对细胞生长增殖的影响和机制.方法:将人结肠癌细胞株HT-29分成3组,antisense组(转染反义链组)、sense组(转染正义链组)和对照组.免疫沉淀和蛋白质印迹法观察cyclin D1 siRNA对细胞cyclin D1蛋白质表达的影响,并对蛋白质电泳图像进行分析,MTT比色法绘制细胞生长曲线,~3H-TdR技术和流式细胞技术观测细胞周期变化结果:反义siRNA有效抑制了cyclin D1蛋白质表达,MTT实验显示,转染反义siRNA的细胞,生长代谢减慢,与对照组细胞差异显著(P<0.01).而antisense组细胞24 h的~3H-TdR渗入量,G_0/G_1期和S期细胞较对照组和sense组明显减少(~3H-TdR:1181.8±117.97 vs 1798.4±55.36,1851.4±83.46:P<0.01;G_0/G_1期:79.31% vs 60.87%.59.14%:S期:13.67% vs 26.42%,27.93%:P<0.01).结论:RNA干扰技术能有效减弱cyclin D1蛋白质表达,使细胞周期受阻,并抑制结肠癌细胞的生长增殖.     

干细胞因子对糖尿病小鼠小肠平滑肌细胞慢波的影响

目的:探讨外源性干细胞因子(stem cell factor,SCF)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠小肠动力障碍时小肠平滑肌细胞慢波的影响.方法:♂Balb/c小鼠一次性腹腔注射(ip)链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)造模,将小鼠分为正常组、DM组、DM+外源性SCF组(DM+SCF组);DM+SCF组ip SCF 0.20 μg/(kg·d),正常组和DM组每天ip等量的磷酸盐缓冲液(pH7.40).所有小鼠干预6 wk结束后,给予印度墨水灌胃测定小肠传输速率,用微电极细胞内记录仪记录各组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波的变化.结果:DM组小肠推进率比正常组的明显降低(44.05%±5.48% vs 82.75%±6.56%,P<0.01);DM+SCF组比DM组的小肠推进率显著增加(75.89%±3.61% vs 44.05%±5.48%,P<0.01).但比正常组的降低(75.89%±3.619% vs 82.75%±6.56%,P<0.05);DM组与正常小鼠相比,十二指肠平滑肌细胞内慢波频率明显减慢(13.33±4.27 vs 30.67±3.33,P<0.01),波幅明显减小(15.17±3.71 vs 35.17±3.71,P<0.01).且波形杂乱不规则.DM+SCF组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波频率和波幅比DM组增加(26.50±1.87 vs 13.33±4.27;27.50±2.26 vs 15.17±3.71,均P<0.01),但比正常组减慢和降低(26.50±1.87 vs 30.67±3.33,P<0.05;27.50±2.26 vs 35.17±3.71,P<0.01).结论:外源性SCF对DM小鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用.     

瑞巴派特对药物所致胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用及其机制

目的:本文旨在在体外水平上研究瑞巴派特与血红素氧合酶1(hemeoxygenase 1,HO-1)相互作用,从而抑制药物所致的胃黏膜上皮细胞损伤的作用.方法:将处于对数生长期的细胞分为4组,分别为空白组、损伤组、低浓度组以及高浓度组.分别给予单纯损伤处理或添加预保护处理,使用细胞增殖检测法、免疫印迹蛋白检测法等对细胞增殖功能、HO-1的蛋白表达以及细胞内丙二醛(malondialdehyde,M D A)和超氧化物歧化酶(s u p e r o x i d e dismutase,SOD)的含量进行测定.结果:细胞增殖实验中,空白组、损伤组以及药物处理组(低浓度和高浓度)存活率分别为97.22%±2.01%,60.33%±1.88%、72.34%±1.03%,组间差异均具有统计学意义(P0.05);损伤组的MDA含量升高,而经药物预处理后,MDA含量下降为1.88 nmol/m g±0.13 n m o l/m g和1.55 n m o l/m g±0.16n m o l/m g,与损伤组比较差异有统计学意义(t=9.567、7.332,P=0.009、0.032).药物进行处理后,低浓度组和高浓度组SOD分别提高为(10.23 U/mg±1.77 U/mg)和(12.09U/mg±2.01 U/mg),与损伤组相比差异均有统计学意义(P0.05);HO-1经过免疫印迹蛋白检测技术检测损伤组的蛋白稍高于对照组,经药物处理后HO-1的表达量明显升高(0.88±0.10 vs 0.34±0.03,1.34±0.28 vs 0.88±0.10).统计学处理后显示两组间差异均有统计学意义,且具有剂量依赖性(t=5.869、9.122,P=0.017、0.008).结论:瑞巴派特可激活HO-1抑制氧化应激反应,从而减轻药物引起的对GES-1细胞的损伤作用.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.