平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺差异蛋白质组学分析

目的：观察平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺蛋白质表达的影响，为进一步探讨平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证作用机理提供依据。方法：左旋甲状腺素（L-T4）腹腔注射和附子汤灌胃造成甲亢肝阳上亢证模型，应用蛋白质组学技术比较正常组、甲亢肝阳上亢证组及平肝潜阳药物治疗组中肾上腺的差异蛋白质。结果：3组蛋白质斑点总体分布相似，主要分布在等电点pI5～8．5，分子量M8．5～135．5kD。与正常组比较，甲亢肝阳上亢证模型组中蛋白质点表达上调的有4个，下调的点有9个；在模型组中上调的4个点在治疗后均较治疗前有下降；而模型组中下调的9个点在治疗后均较治疗前有上调。结合生物信息学进行质谱鉴定，发现其中10个蛋白质分别为神经介素B受体，NG-二甲基精氨酸二甲氨基水解酶，核苷二磷酸激酶，胶原蛋白（Ⅱ）α1链，泛素，硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶，苹果酸脱氢酶，硫氧还蛋白过氧化物酶，热休克蛋白-27，膜联蛋白-A1。结论：平肝潜阳药物治疗后的甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺蛋白质的表达上具有差异，平肝潜阳药物的作用机制可能与所鉴定的这10个蛋白质的抗氧化、调节交感-肾上腺髓质功能及影响能量代谢相关酶等作用有关。     

高血压肝阳上亢证大鼠模型建立和蛋白质表达分析

目的:复制高血压肝阳上亢证大鼠模型,探讨高血压肝阳上亢证候相关蛋白表达情况.方法:采用自发性高血压大鼠(SHR),灌服附子汤6周,观察造模前后症状、血压、饮水量,同时应用双向电泳技术分析大鼠的肝脏蛋白质组变化.结果:自发性高血压大鼠造模6周后,易激惹程度增高、饮水量增加等肝阳上亢证候的表现;SHR组和肝阳上亢组的蛋白斑点总体分布相似,SHR组共检测到蛋白质点数为716±58个;肝阳上亢组875±19个,仅在肝阳上亢组表达的蛋白质有27个;有28个点在表达量上有明显变化(5倍以上),其中15个点下调,13个点上调.结论:用自发性高血压大鼠(SHR)灌服附子汤可建立稳定的高血压肝阳上亢证候大鼠模型,两组差异表达蛋白可能与高血压肝阳上亢证候形成相关.     

曲美他嗪干预气虚血瘀证心衰大鼠心肌线粒体蛋白质组学研究

目的：研究曲美他嗪对气虚血瘀证心衰大鼠心肌线粒体蛋白质组学的影响。方法：SD大鼠随机分为造模组与假手术组,造模组采用结扎左冠前降支致心梗后气虚血瘀证心衰大鼠模型,术后随机分为模型组、曲美他嗪组,各组连续灌胃给药8 周后采集大鼠心肌,采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术,比较各组大鼠心肌线粒体蛋白质组学差异,并运用蛋白免疫印迹技术对差异蛋白进行回复性验证。结果：模型组与假手术组相比有差异而曲美他嗪可使差异趋势逆转的蛋白点为18 个,经质谱分析成功鉴定出10个蛋白,主要涉及能量代谢、氧化损伤、应激反应、细胞骨架、细胞分化增殖等功能。Western blot 结果显示模型组Stress-70、Nucleophosmin 表达上调,ATP-α表达下调,曲美他嗪组Stress-70、Nucleophosmin 表达下调,ATP-α表达上调,与蛋白质组学结果一致。结论：曲美他嗪可一定程度调节模型大鼠心肌线粒体蛋白质组学变化,其干预机制可能与改善能量代谢、抗氧化损伤、减轻应激反应及调节细胞分化增殖等功能相关。采用双向凝胶电泳和质谱技术研究曲美他嗪对气虚血瘀证心衰大鼠心肌线粒体蛋白质组学的影响,结果真实可靠。     

半夏白术天麻汤对痰湿壅盛型高血压模型大鼠下丘脑蛋白质组学的影响

目的探讨半夏白术天麻汤治疗痰湿壅盛型高血压病的可能分子机制。方法大鼠高脂饮食24周建立痰湿壅盛型高血压模型,16只造模成功大鼠随机分为模型组和半夏白术天麻汤组,每组各8只,并以普通饲料喂养大鼠8只设为正常组。半夏白术天麻汤组给予半夏白术天麻汤13.8 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均灌胃12周。记录大鼠体重、血压,计算Lee's指数,检测大鼠血清葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇水平;双向电泳分离样品并且进行硝酸银染色,筛选下丘脑差异蛋白质点提交质谱鉴定,采用MALDI-TOF-TOF质谱仪进行质谱分析、肽指纹图谱进行蛋白质鉴定,选取部分蛋白质点验证蛋白质组学结果。结果半夏白术天麻汤组大鼠体重、血压、Lee's指数、血清总胆固醇均较模型组下降(P0.05)。正常组、模型组、半夏白术天麻汤组分别分离出3342、3844、3828个蛋白点,其中半夏白术天麻汤组同模型组比较,100个蛋白质表达降低,72个蛋白质表达增加。在质谱仪进一步鉴定的19种蛋白中,模型组与正常组相比有差异而半夏白术天麻汤可使差异趋势逆转的蛋白点为11个,其中5个表达上调,6个表达下调。结论半夏白术天麻汤治疗痰湿壅盛型高血压病的分子机制可能与改善细胞骨架和形态、内质网应激、能量代谢、神经元结构等有关。     

天麻钩藤饮与高血压病肝阳上亢证方证相关的蛋白质组学初步研究

目的 揭示天麻钩藤饮与高血压病肝阳上亢证“方证相关”的现代生物学基础.方法 制作高血压痛肝阳上亢证细胞模型,用天麻钩藤饮含药血清干预细胞模型,利用双向凝胶电泳(2-DE)技术筛选差异表达的蛋白点.结果 高血压病肝阳上亢证组与健康对照组比较,差异蛋白有25个,其中,有13个蛋白上调,12个蛋白质下调;天麻钩藤饮组与高血压病肝阳上亢证组比较,差异蛋白有12个,其中,有5个蛋白上调,7个蛋白质下调.结论 基于细胞模型的中医“方证相关”蛋白质组学研究是可行的;调节这12个差异蛋白点,可能是天麻钩藤饮治疗高血压病肝阳上亢证疗效的重要分子基础.     

脾气虚证大鼠回肠组织蛋白质差异性表达的实验研究

目的采用蛋白质组学技术研究脾气虚证大鼠回肠组织蛋白的差异性表达。方法 37只大鼠随机分成3组,即正常对照组、脾气虚证模型组和利血平组。分别采用劳倦过度结合饮食不节和利血平注射液(1mg/mL)腹腔注射的方法建立脾气虚证动物模型,通过模糊数学方法鉴定后分离回肠组织,后采用双向电泳法分离差异表达的蛋白,凝胶银染后经选点、酶切和质谱分析,用MASCOT软件在蛋白质数据库中搜索肽质量指纹谱数据并确定蛋白质。结果脾气虚证模型组回肠组织蛋白质图谱中有3个蛋白点表达异常(P<0.05),利血平组回肠组织蛋白质图谱中有9个蛋白点表达异常(P<0.05)。结论脾气虚证的发生与白蛋白表达下调、胰蛋白酶和葡萄糖调节蛋白78表达上调有密切关系。     

高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证比较蛋白质组学初步研究

目的:揭示高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证"同病异证"的现代生物学基础。方法:建立高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证细胞模型,利用双向凝胶电泳(2-DE)技术筛选差异表达的蛋白点。结果:高血压病气虚血瘀证与肝阳上亢证比较,差异蛋白有27个,其中,有11个蛋白上调,16个蛋白质下调。结论:基于双向电泳技术的蛋白质组学方法可以用于中医学证侯研究,27个差异蛋白点可能是高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证同病异证重要分子基础。     

慢性胃炎脾胃湿热证大鼠胃黏膜蛋白质组与三仁汤治疗的实验研究

目的研究慢性胃炎脾胃湿热证大鼠胃黏膜的蛋白质表达,探讨慢性胃炎脾胃湿热证的相关发病机制,观察三仁汤治疗后慢性胃炎脾胃湿热证大鼠胃黏膜蛋白质的表达差异,探讨三仁汤治疗慢性胃炎脾胃湿热证作用机制。方法将36只SD雄性大鼠适应性喂养3天后,随机分为3组:正常对照组(对照组)、慢性胃炎脾胃湿热证模型组(模型组)、三仁汤治疗组(治疗组),每组12只。采用复合因素复制慢性胃炎脾胃湿热证大鼠模型,运用双向凝胶电泳分离大鼠胃黏膜蛋白,考马斯亮蓝染色,使用PDQuest8.0软件分析差异蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)鉴定仪进行蛋白鉴定。结果在对照组、模型组、治疗组凝胶图谱中检测到蛋白质斑点数分别为(1025±39)、(994±51)、(1087±33)个。经PDquest8.0软件分析,与对照组比较,模型组有差异表达蛋白质点74个,其中上调30个,下调44个;与模型组比较,治疗组有差异表达蛋白质点75个,其中上调49个,下调26个。成功鉴定了5个差异蛋白质点,分别为热休克蛋白72(heat shock protein 72,HSP72)、热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)、蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide-isomerase,PDI)、苹果酸脱氧酶(malate dehydrogenase,MDH)、未命名蛋白(unnamed protein)。结论慢性胃炎脾胃湿热证的发病机制可能与应激反应及能量代谢障碍有关,三仁汤治疗慢性胃炎脾胃湿热证的作用机制可能是调节胃黏膜蛋白质的差异表达。     

“醒脑开窍”针刺法对局灶性脑缺血大鼠海马蛋白质组学影响的研究

[目的]寻找与脑缺血相关及针刺起效的靶蛋白,从蛋白质组学层面探讨脑缺血的病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。[方法]将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术6h组,模型6h组和针刺6h组,采用改进的线栓法制备动物模型。在规定时间快速断头取脑,剥离缺血侧海马,提取脑组织总蛋白进行双向电泳,以Image Master 2DV3.01 Elite软件进行图像分析。选取差异蛋白质点进行胶内酶解,以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF-MS)测肽质量指纹图,检索Swiss-Port数据库,对蛋白质进行鉴定。[结果]共鉴定出30个差异蛋白质。正常组与假手术组比较无差异蛋白表达;模型组与正常组比较鉴定出差异蛋白质点29个,其中在模型6h组新出现1个,在模型6h表达上调的11个,表达下调的17个;针刺组与模型组比较鉴定出差异蛋白质点21个,其中在针刺组上调有16个,下调的有5个。[结论]以双向电泳联合质谱技术,初步发现与脑缺血相关以及针刺治疗脑缺血的部分靶蛋白质,有助于深入研究脑缺血性损伤病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。     

琼玉膏对D-半乳糖所致衰老大鼠差异蛋白质表达的影响

目的 采用蛋白质组学方法,在下丘脑中探索琼玉膏对衰老大鼠产生调节作用的相关蛋白质,从而在分子水平上解释抗衰老方剂琼玉膏的作用机理。方法 将2～3月龄42只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、琼玉膏组,每组14只。给药结束后,抽提下丘脑全蛋白。利用荧光双向差异凝胶电泳、图像分析、胶内酶切、质谱鉴定等蛋白质组学技术,分离、分析、鉴定大鼠下丘脑差异蛋白质;通过数据库检索和生物信息学方法,分析差异蛋白的功能及属性。结果 1. 成功复制亚急性衰老大鼠动物模型;2. 获得了正常对照组、模型组和琼玉膏组下丘脑组织的全蛋白表达荧光双向差异凝胶电泳图谱;3. 运用蛋白质组学技术,比较正常对照组、模型组及琼玉膏组的下丘脑组织,确认了15种表达量发生了变化的蛋白质。结论 鉴定出差异蛋白主要涉及有突触形成相关蛋白、线粒体相关蛋白、能量代谢相关蛋白、抗氧化、细胞骨架蛋白、细胞分化、增殖和凋亡蛋白等,为进一步筛选特异相关蛋白和药物靶位治疗奠定基础。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

羌蓝汤解热作用机理的探讨

家兔ｉｖ内毒素后，在体温升高的同时血浆ｃＡＭＰ含量与血清ＩＬ１、ＩＬ６水平显著升高。家兔ｉｇ２０ｇ／ｋｇ羌蓝汤可以抑制内毒素的致热作用，在解热的同时也抑制血浆ｃＡＭＰ含量以及血清ＩＬ１、ＩＬ６活性水平的升高。     

黄连与黄芩配伍时主要有效成分溶出率变化规律研究

目的:考察黄芩与黄连按不同比例配伍时,主要有效成分黄芩苷、盐酸小檗碱溶出率的变化规律,以探讨传统药对黄芩配伍黄连对有效成分煎出的影响。方法:根据临床常用方剂黄芩与黄连的配伍比例,选择按1:0、1:1、1:2、1:3、2:1、2:3、3:1、3:2、0:1等9个比例分别配伍,水煎煮回流法提取,经分离精制,制得各供试品,在优化的RP-HPLC条件下进行分析,比较色谱指纹图谱,考察主要成分黄芩苷、小檗碱的相对峰面积变化与配伍比例的关系。结果:黄芩与黄连按不同比例配伍后主要成分黄芩苷、盐酸小檗碱的含量各有不同的影响,黄芩苷溶出率与黄芩比例成非线性关系,盐酸小檗碱溶出率与黄连比例亦成非线性关系,黄芩的最佳配伍比例是3:1,黄连的最佳配伍比例是1:3。结论:按不同比例配伍黄芩、黄连合煎过程中,黄芩苷、盐酸小檗碱溶出率有明显不同。     

运用数字化色谱指纹谱技术设计中药复方专利技术特征

中药复方是中医学的精髓，但目前专利法的设置以及专利申请文件的撰写格式不利于中药复方的技术保护。数字化色谱指纹谱将色谱峰的定位和峰面积以数字化形式进行表达，不仅能够比较准确地表达一个组合物的内在总体情况，亦能较完整地反映出复杂中药复方产品的化学组成特征。作者认为，数字化色谱指纹图谱技术不仅能准确反映中药复方的整体质量状况，也可用于中药复方专利中技术特征的描述。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

中医按摩对心理性亚健康状态的改善

目的:观察中医按摩对亚健康状态改善的临床效果,探索非药物治疗亚健康状态的方法。方法:将120例心理性亚健康患者随机分为观察组和对照组各60例。对照组采用常规的中药治疗和心理行为指导,观察组在对照组的基础上结合中医按摩调治。结果:观察组总有效率为98.33%,对照组为76.67%,两组治疗效果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后对疲劳乏力、睡眠障碍、记忆力减退和注意力不集中、肌肉酸痛、焦虑5项观察指标的改善程度均优于对照组。结论:中医按摩可以有效改善亚健康状态的主要症状。     

不同剂型去甲斑蝥素肝脏注射急性毒性比较

目的：比较去甲斑蝥素缓释注射课题与普通注射液肝脏注射的急性毒性、为缓释剂型的临床肝脏注射应用提供实验依据。方法：６０只小鼠及１８只大鼠各随机分为３组,分别肝脏注射等量去甲斑蝥素缓释溶液,普通水剂及药物缓释辅料泊洛沙姆４０７溶液,观察小鼠行为状态、生存情况及大鼠肝脏病理形态学变化。结果;注射去甲斑螯素缓释溶液组小鼠死亡率低于普通水溶液组;泊洛沙姆４０７小鼠肝脏注射的ＬＤ５０〉６２５ｍｇ／ｋｇ,缓释制