小鼠肝细胞膜载脂蛋白CⅢ受体特性的进一步研究

目的 研究小鼠肝细胞膜载脂蛋白（apo)CⅢ受体与apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及E的结合特性。方法 用受体的放射性配基结合分析法（RBA）观察血浆脂蛋白（VLDL、LDL及HDL）以及纯化的apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及E与小鼠肝细胞膜apoCⅢ受体结合的活性。结果 apoCⅢ受体与^125I-apoCⅢ的结合能被非标记apoCⅠ、CⅡ、CⅢ、E及VLDL抑制，其中apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及VLDL抑制曲线相似，以apoCⅢ的抑制作用最强，apoCI次之，apoCⅡ最弱，apoEGN apoCⅢ受体亦有一定结合；而含apoB100的LDL以及含apoAI及apoAⅡ的HDL和人血清白蛋白则对结合无影响。结论 小鼠肝细胞膜上存在apoCⅢ受体，除能特异结合apoCⅢ及VLDL外，亦能在一定程度上与apoCⅠ、CⅢ及E结合。     

人脑脊液载脂蛋白AⅠ、B100、CⅡ、CⅢ及E的测定

用载脂蛋白研究室建立的人血清载脂蛋白单向免疫扩散测定法,对人脑脊液载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅡ、CⅢ及E的含量进行了测定。结果表明,人脑脊液不含apoB100、CⅡ,含极微量的apoCⅢ,微量apo AI(1.00±0.54mg/dl,n=7,相当于正常人血清含量121.3±21.5mg/dl的0.8％)及相对较多量的apoE(0.69±0.16mg/dl,n=16,相当于正常人血清含量3.10±0.56mg/dl的22.2％)。并对所得结果进行了讨论。     

人血浆载脂蛋白CⅠ、CⅡ及CⅢ的分离与鉴定

作者利用超速离心法从人血浆分离、纯化极低密度脂蛋白(VLDL)。VLDL脱脂后经葡聚糖凝胶层析及离子交换层析获得apoCⅠ、apoCⅡ及apoCⅢ的纯品。经等电聚焦电泳、免疫电泳、免疫双扩散、酶联免疫及放射免疫鉴定,其纯度符合要求。作者等已用此纯品免疫动物获得特异的单价抗血清,在国内首次建立了人血清载脂蛋白CⅠ、CⅡ及CⅢ的免疫测定法。     

不同种属动物肝细胞膜载脂蛋白CⅢ受体的放射性配体结合分析

目的　探讨不同种属动物肝细胞膜 apo C 受体的存在及结合特性。方法　以 1 2 5I标记的人 apoC 为配体 ,利用放射性配体结合分析法对不同种属动物肝细胞膜与 1 2 5I- apo C 的结合特性进行了初步研究。结果大鼠、狗、羊、猪、兔、鸡、鸽、蛇等动物的肝细胞膜与人 1 2 5I- apo C 有可饱和、高亲合、可逆的结合。竞争性抑制实验表明该结合能被过量非标记 apo C 抑制 ,而人血浆白蛋白对结合无影响。未观察到鲤鱼和牛蛙的肝细胞膜与 1 2 5I-apo C 有可饱和、高亲合的结合。结论　提示肝细胞膜 apo C 受体在进化上具一定保守性。     

不同种属动物肝细胞膜载脂蛋白CⅢ受体的放射性配体结合分析

目的：探讨不同种属动物肝细胞膜apo CⅢ受体的存在及结合特性。方法：以^125I 标记的人apoCⅢ为配体，利用放射性配体结合分析法对不同种属动物肝细胞膜与^125I-apo CⅢ的结合特性进行了初步研究。结果：大鼠、狗、羊、猪、兔、鸡、鸽、蛇等动物的肝细胞膜与人^125I-apo CⅢ有可饱和、高亲合、可逆的结合。竞争性抑制实验表明该结合能被过量非标记apo CⅢ抑制，而人血浆白蛋白对结合无影响。未观察到鲤鱼和牛蛙的肝细胞膜与^125I-apo CⅢ有可饱和、高亲合的结合。结论；提示肝细胞膜apo CⅢ受体在进化上具一定保守性。     

成都地区437例健康男性中老年人血清载脂蛋白CⅡ、CⅢ及E水平分析

为探讨我国健康男性中老年人血清载脂蛋白（ａｐｏ）ＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的正常参考值，采用单向免疫扩散测定法对成都地区４３７例４０～７０岁健康男性空腹血清ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的含量进行了分析。结果显示：成都地区健康男性中老年人空腹血清ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的含量分别为４１．６±１３．１、１１２．８±３１．０和３８．７±８．２ｍｇ／Ｌ，而且不同年龄组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。血清ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的水平与ＴＧ、ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ水平呈正相关（ｒ＝０．１２９５～０．５５５４，Ｐ＜０．０１），血清ａｐｏＣⅡ及ＣⅢ水平与体重指数呈正相关（ｒ＝０．１２４８～０．２０７９，Ｐ＜０．０１），ａｐｏＥ水平与年龄呈正相关（ｒ＝０．１４４８，Ｐ＜０．０１）。     

人血清载脂蛋白CⅢ放射免疫测定法的研究

作者从人血浆分决纯化了apoCⅢ,制备成功特异的单价抗apoCⅢ血清,用国产~(125)碘(氯胺-T法)标记纯化的apoCⅢ,在国内首次建立了人血清 apoCⅢ放射免疫分析法(RIA)。本法灵敏度为3.2 ng;标准曲线测定范围为3.12～100 ng;回收率为104.3±13.9％,批内和批间变异系数分别为6.5％及9.6％。本法测定了成都市21例血脂正常成人血清apoCⅢ,其含量为9.23±2.11 mg/dl。     

大鼠肝非实质细胞载脂蛋白CⅢ结合位点(受体)的研究

作者对“apoCⅢ受体假设”进行了研究,发现~(125)I-标记的人apocⅢ与新分离的大量肝非实质细胞可发生特异结合,而且该结合为一可饱和的特异的受体反应过程,其kd为0.1～0.55μmol/L,B_(max)为18.1～42.0ng/mg细胞蛋白,平均每个肝非实质细胞约有1.0～4.5×10~5个特异的apoCⅢ结合位点。     

胰岛素对培养的人肝癌细胞HepG2分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅢ及E的影响

用冻干浓缩液的圆周免疫扩散法观察了牛胰岛素对 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞分泌载脂蛋白ａｐｏ ＡⅠ、ａｐｏ ＡⅡ、ａｐｏ Ｂ１００、ａｐｏ ＣⅢ及ａｐｏ Ｅ的影响。结果发现,当培养液中的胰岛素浓度为１μｇ／ｍ ｌ时,ａｐｏ ＡⅠ、ａｐｏ Ｅ的分泌无明显改变,ａｐｏ ＡⅡ的分泌有降低的趋势,ａｐｏ ＣⅢ的分泌有增加的趋势,ａｐｏ Ｂ１００ 的分泌降低２１．２％ （ Ｐ＜ ０．０１）; 当培养液中胰岛素的浓度为 １０ μｇ／ｍ ｌ时,ａｐｏ ＡⅠ的分泌减少６．９％ （ Ｐ＜ ０．０５）,ａｐｏ ＡⅡ的分泌减少 ４４．３％ （ Ｐ＜ ００１）,ａｐｏ Ｂ１００ 的分泌减少２９．３％ （ Ｐ＜ ０．０１）,而ａｐｏ ＣⅢ的分泌增加５１．８％ （ Ｐ＜ ０．０１）,ａｐｏ Ｅ的分泌无明显改变。该研究结果支持刘秉文提出的中国人内源性高甘油三酯血症发病机理的设想中的部分环节。     

视黄酸对培养的HepG2细胞分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅢ及E的影响

目的　探讨视黄酸在脂蛋白代谢中的作用。方法　采用冻干浓缩培养液载脂蛋白 RID测定法 ,分别观察 4种不同浓度的视黄酸对培养的人肝癌细胞系 Hep G2细胞载脂蛋白 ( apo) A 、A 、C 、B10 0及 E分泌的影响。结果　视黄酸对 Hep G2细胞 apo A 、A 、B10 0及 C 的分泌均有促进作用 ,对 apo E的分泌则有抑制作用。在本研究条件下 ,当视黄酸的浓度为 2× 10 - 4 m ol/ L时 ,其对 Hep G2细胞 apo分泌的影响作用最大 ,此时apo A 、A 、B10 0和 C 的分泌分别增加 14.3% ( P<0 .0 1)、2 3.8% ( P<0 .0 5 )、16 .1% ( P<0 .0 1)、47.6 % ( P<0 .0 1) ,而 apo E的分泌减少 37.2 % ( P<0 .0 1)。结论　视黄酸对 Hep G2细胞 apo A 、A 、C 、B10 0及 E的分泌有不同的影响     

成都地区362名汉族成人载脂蛋白E表型分布及其与血脂和载脂蛋白之间的关系

为探讨成都地区汉族人群载脂蛋白（ａｐｏ）Ｅ多态性情况及其与血脂、ａｐｏ 之间的关系,作者随机抽取了成都地区健康体检的３６２名汉族成人,采用等电聚焦免疫印迹分析法对其血清ａｐｏＥ表型进行了测定,同时对受检者空腹血ＴＧ、ＴＣ及ａｐｏＡⅠ,Ｂ１００,ＣⅡ,ＣⅢ,Ｅ进行了全面分析。结果显示：成都地区汉族人群ａｐｏＥ表型分布频率为：Ｅ３／３ ７２．９３％ ,Ｅ２／３ １２．９８％ ,Ｅ３／４ １１．３３％ ,Ｅ２／４ １．３８％ ,Ｅ４／４ １．３８％ ,Ｅ２／２未检测到。ＡｐｏＥ等位基因频率为：ε３ ０．８５０８,ε２ ０．０７１８,ε４ ０．０７７４。３６２名汉族成人不同ａｐｏＥ表型的血脂和载脂蛋白水平显示：与ａｐｏＥ３ （Ｅ３／３）或ａｐｏＥ４（Ｅ３／４ ＋ Ｅ４／４ ）组比较,ａｐｏＥ２ （Ｅ２／３ ＋ Ｅ２／２ ）组血清ＴＣ及ａｐｏＢ１００ 明显降低（Ｐ＜ ０．０５）,ａｐｏＥ水平明显升高（Ｐ＜０．００１）,ＴＧ、ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣⅡ、ａｐｏＣⅢ水平无统计学差异;与ａｐｏＥ３ 组比较,ａｐｏＥ４ 组ＴＧ、ＴＣ、ａｐｏＡⅠ、Ｂ１００、ＣⅡ、ＣⅢ和Ｅ均无统计学差异。     

载脂蛋白AⅠ、CⅡ和CⅢmRNA在大鼠组织中的分布

用人载脂蛋白(apo)AI、CⅡ和CⅢ cDNA作探针,经RNA斑点杂交分析说明大鼠肝脏、小肠、脑和肾脏组织均有apo AⅠ、CⅡ和CⅢ mRNA分布。     

142例冠心病患者血脂及载脂蛋白AⅠ、B100、CⅠ、CⅡ及CⅢ的研究

对成都地区142例冠心病患者及64例年龄相当的正常人的血脂及载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅠ、CⅡ及CⅢ进行了分析。结果表明,患者血清甘油三酯显著升高(P<0.001),高密度脂蛋白胆固醇显著下降(P<0.001),胆固醇除陈旧性心肌梗塞组略有增加外,余未见改变,apoAⅠ及apoC Ⅱ显著下降(P<0.01或P<0.001),apoB100升高(P<0.01或P<0.001),apoCⅢ轻度升高。作者结合成都地区膳食及Ⅳ型高脂血症发生率高的特点对所得结果进行了讨论。     

载脂蛋白AⅠ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、E对肝细胞膜高密度脂蛋白受体结合功能的影响

以~(125)碘标记人不含apoE HDL_3为配体,研究纯化人apoAI、CⅠ、CⅡ、CⅢ、Cs及E对大鼠肝细胞膜HDL受体结合功能的影响。结果:非标记apoAI及apoCs均可有效竞争性抑制~(125)I-HDL_3与肝细胞膜HDL受体的结合;apoC亚类中,apoCⅢ抑制活性最强,抑制曲线与apoAI相似,非标记apoE则无明显抑制活性。表明apoC(尤其是apoCⅢ)对肝细胞膜HDL受体活性有重要调节作用,提示HDL受体可能是一种能识别和结合apoA及apoC的“apoA/C受体”。     

肝细胞膜载脂蛋白CⅢ受体研究

肝细胞膜载脂蛋白ＣⅢ受体研究成果完成单位华西医科大学基础医学院主要研究人员刘秉文张林华方定志鉴定组织部门四川省教育委员会鉴定时间１９９７年３月２８日获奖情况获１９９７年度四川省科技进步三等奖华西医大载脂蛋白研究室对“ａｐｏＣⅢ受体”进行了研究，发现人...     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL脂质与载脂蛋白组成的研究

对２０例正常人及２０例内源性高甘油三酯血症（ＨＴＧ）患者的血浆及血浆ＶＬＤＬ，ＬＤＬ、ＨＤＬ的ＴＧ、ＦＣ、ＣＥ、ＰＬ以及ａｐｏＡⅠ、ＡⅡ、Ｂ１００、ＣⅡ、ＣⅢ、Ｅ的组成及含量进行了全面分析。结果表明：内源性ＨＴＧ患者空腹血浆ＴＧ、ａｐｏＣⅡ、ＣⅡ及Ｅ显著增加，ＨＤＬ－Ｃ及ａｐｏＡⅠ显著降低，而且其血浆ＶＬＤＬ、ＬＤＬ、ＨＤＬ的组成明显异常，即ＶＬＤＬＴＣ、ＣＥ、ＦＣ、ＰＬ以及ＶＬＤＬａｐｏＢ１００、ＣⅡ、ＣⅡ、Ｅ均显著增加，ＨＤＬＴＧ增加，ＣＥ及ａｐｏＡⅠ、ＣⅡ、ＣⅢ和Ｅ显著降低ＬＤＬＴＧ及ａｐｏＢ１００增加，文内还对载脂蛋白的功能及其与脂质代谢的关系进行了讨论．探讨了内源性ＨＴＧ患者脂质及载脂蛋白异常的一些原因，为揭示ＨＴＧ的发生机理提供了有价值的资料。     

2型糖尿病患者血清载脂蛋白AⅠ、AⅡ、 B100、CⅡ、CⅢ、E含量分析

目的　探讨2型糖尿病患者血清中载脂蛋白(apo)AⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ、E含量的改变特点。方法　对143例2型糖尿病患者(其中合并冠心病20例,合并高甘油三酯血症66例,合并高胆固醇血症55例)和127例非糖尿病对照进行了空腹12小时后血糖、胰岛素、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇及apoAⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ、E含量的测定。结果　与非糖尿病对照组相比,男性2型糖尿病患者腰臀比(WHR)、空腹血糖(FBG)及apoCⅡ明显升高(P<0.05),apoAⅠ、AⅡ明显降低(P<0.05)。女性糖尿病患者较女性非糖尿病者体重指数(BMI)、WHR、FBG、TG水平明显升高(P<0.05),HDL-C、apoAⅠ、AⅡ水平则明显降低(P<0.01)。在伴有脂质异常血症和冠心病的2型糖尿病患者中,apo(s)与血脂的变化更为明显。2型糖尿病伴高甘油三酯血症的患者较TG正常的糖尿病患者BMI、WHR、空腹胰岛素(INS)、TG、TC、apoB100、CⅡ、CⅢ和E水平明显升高,同时伴HDL-C、apoAⅠ水平降低(P均<0.05);2型糖尿病伴高胆固醇血症的患者与TC正常的的患者相比,WHR、TG、TC和apoB100、CⅡ、CⅢ、E水平也明显升高(P<0.01)。载脂蛋白的变化与血脂的变化呈明显相关。在2型糖尿病合并冠心病的患者中,BMI、FBG、INS、apoB100、CⅡ、CⅢ和E水平显著升高,HDL-C、apoAⅡ水平则显著降低(P均<0.05)。结论　载脂蛋白异常是2型糖尿病患者的代谢紊乱特征,同时可能是2型糖尿病发生脂代谢紊乱和冠心病的重要原因。     

成都地区269例健康成人血清载脂蛋白CⅢ含量的研究

作者采用竞争性酶免疫试验(CEIA)测定了成都地区正常人血清载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)含量。269例正常人apoCⅢ含量为11.8±3.6mg/dl(M±SD),与国外有关报道基本一致,并初步表明apoCⅢ的含量似无种族、营养、性别及年龄差异。血清apoCⅢ含量与甘油三酯呈正相关(r=0.24),提示血中apoCⅢ含量与VLDL的增长有关。     

脑卒中患者血脂及载脂蛋白AⅠ、B100、CⅠ及CⅡ的研究

对72例脑卒中患者及64例年龄相当正常人的血脂及载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅠ及CⅡ进行了全面分析。结果发现脑卒中患者血清甘油三酯含量显著增加,HDL-胆固醇显著降低,总胆固醇含量略有下降。患者血清apoAⅠ略有降低,apoB100略有升高,而apoCⅠ及CⅡ显著降低。作者对结果进行了讨论。     

高糖膳食对大鼠肝实质及非实质细胞VLDL HDL及载脂蛋白CⅢ受体的影响

对高糖膳食诱发的内源性高甘油三酯血症大鼠肝脏VLDL、HDL及载脂蛋白(apo)CⅢ的受体功能进行了研究。发现肝非实质细胞VLDL受体存在下降调节机理;VLDL及HDL的受体除了受血浆脂蛋白浓度的下降或上升调节外,还可能与apoCⅢ受体活性的增加有关。