再生障碍性贫血患儿免疫功能的研究

再生障碍性贫血患儿免疫功能的研究余素明，郭桂荣，孙书明为了探讨小儿再生障碍性贫血（简称再障）的发病机理、免疫功能及其相互关系，我们对１４例患儿外周血白细胞介素２（ＩＬ－２）生成量，２０例Ｔ细胞亚群及血清免疫球蛋白以及部分患儿治疗前后动态变化进行了研究...     

小儿再生障碍性贫血细胞免疫功能的观察

本文测定２８例小儿再生障碍性贫血外周血Ｔ淋巴细胞亚群以及血清可溶性白细胞介素α受体（ＳＩＬ－２Ｒ）。结果显示ＣＤ３、ＣＤ４以及ＣＤ４／ＣＤ８显著低于正常对照（Ｐ〈０．０１），ＳＩＬ－２Ｒ显著升高（Ｐ〈０．０１），ＣＤ８与对照组比较无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。提示小儿再生障碍性贫血患儿细胞免疫功能紊乱，为临床应用免疫疗法提供论据。     

T细胞在再生障碍性贫血发病机制中的作用

再生障碍性贫血(再障)是多种病因导致的以骨髓衰竭伴全血细胞减少为特征的疾病,其发病机制与免疫有着密切的关系.细胞免疫介导的造血损伤可能是再障的主要发病机制之一,而T细胞作为细胞免疫中的主要效应细胞,在骨髓及外周血中均有异常,如CD4+和CD8+ T细胞数量与亚群的变化、T细胞受体表达状态异常等均与该病的发生有关.再障患者淋巴细胞凋亡状态和白细胞介素-2、γ干扰素等细胞因子的差异也可能是该病发生和发展的重要原因.近来研究发现T细胞与骨髓问充质干细胞之间的作用也在其免疫发病机制中起着重要的作用.     

外周血T淋巴细胞亚群比例对免疫抑制治疗急性再生障碍性贫血患儿预后预测的意义

目的探讨采用免疫抑制治疗急性再生障碍性贫血(AA)患儿的效果及与治疗前外周血T淋巴细胞亚群分类比例的关系。方法选取本科2000-2007年收治的43例接受免疫抑制治疗的急性AA患儿,依据治疗结果将患儿分为有效组和无效组。对2组患儿治疗前外周血T淋巴细胞亚群分类比例进行统计学分析。进一步将有效组患儿根据CD4+/CD8+比值分为3组:比例正常组,比例倒置组及比例超高组,分别将该3组CD4+/CD8+比值与治疗无效组进行比较,并进行统计学分析。结果免疫抑制治疗有效组与免疫抑制治疗无效组比较,有效组中CD4+/CD8+比例倒置及超高患儿与无效组比较差异有统计学意义;二组治疗前外周血T淋巴细胞亚群分类中CD8+CD28+及CD8+CD28-细胞比例差异有统计学意义,治疗有效组患儿CD8+CD28+/CD8+CD28-比值显著高于治疗无效组。结论急性AA患儿治疗前外周血T淋巴细胞亚群CD8+CD28+/CD8+CD28-细胞比例对预测免疫抑制治疗效果具有一定的临床意义。可有针对性的为急性AA患儿选择治疗方案提供参考依据。     

T淋巴细胞单克隆抗体治疗小儿再生障碍性贫血的疗效与细胞免？…

为了探讨抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体（简称单抗、ＳＭＵ３、ＳＭＵ８）治疗小儿再生障碍性贫血（ＡＡ）的关系，我科１９９３年１１月至１９９６年６月对３８例再障患儿进行了Ｔ细胞亚群测定，并在应用单抗治疗前后与病情转化进行对照。结果表明：患儿Ｔ细胞亚群比值失衡，主要表现为Ｔ４细胞减少，Ｔ８细胞增多，Ｔ４／Ｔ８比值倒置。患者Ｔ细胞处于激活状态。外周ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达明显高于正常。单抗治疗近期有效率为７１．１０     

再生障碍性贫血患儿外周血淋巴细胞表型分析

目的　探讨再生障碍性贫血 (再障 )患儿外周血淋巴细胞表型的变化 ,了解其在发病中的作用及临床意义。方法　将 1 1 5名确诊为再障的患儿取外周血作淋巴细胞表型分析并与正常组比较。结果　再障组CD4 % ,CD8 % ,CD4/CD8分别为 2 9.53± 8.94,34 .2 5± 1 0 .38,0 .96± 0 .53 ,对照组为 35 .2 5± 5 .1 6 ,2 5 .0 8± 4 .34 ,1 .48± 0 .46 ,两者比较有显著差异 (P <0 .0 0 5) ,而重型再障的细胞表型CD4/CD8、γδT细胞百分率、HLA DR %则更高于慢性再障 ,两者有显著差异。CD3 %两组分别为 69.53± 2 4 .35和 69.98± 5 .79,两者比较无显著差异 (P <0 .0 5)。结论　再障患儿存在严重的免疫异常 ,且与疾病严重程度呈正相关 ,临床可行免疫抑制治疗。     

再生障碍性贫血患儿外周血Tre g／Th 17细胞失衡的研究

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）/Th17细胞失衡在儿童再生障碍性贫血（AA）发病中的意义。方法采用流式细胞仪（FCM）检测AA患儿和健康对照组儿童外周血Treg细胞和Th17细胞的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中IL-17和IL-6的水平。结果 AA患儿外周血Th17细胞比例（1.45±0.28）％显著高于同龄对照组（0.45±0.10）％（P＜0.01）,而Treg细胞比例（4.05±1.07）％及 Treg/Th17细胞比值（2.89±0.88）明显低于同龄对照组儿童（6.96±0.79）％、（15.77±2.77）（P＜0.01）。AA患儿血浆中IL-17、IL-6水平分别为（185.96±40.42）、（20.78±5.49）pg/mL,显著高于同龄对照组（120.47±18.39）、（10.44±2.51）pg/mL （P＜0.01）,且IL-17和IL-6水平均与Th17细胞比例呈正相关（r＝0.67,P＜0.01;r＝0.57,P＜0.01）,而Treg细胞比例与IL-6水平呈负相关（r＝-0.39,P＜0.05）。结论 AA患儿Treg细胞比例的减低和Th17细胞比例的增加所致的Treg/Th17细胞失衡,可能在儿童再障发病中起重要作用,IL-6高表达可能是导致Tre g/Th 17细胞失衡的原因之一。     

小儿再生障碍性贫血细胞免疫功能的观察

本文测定28例小儿再生障碍性贫血外用血T淋巴细胞亚群以及血清可溶性白细胞介素α受体（SIL－2R）。结果显示CD3、CD4以及CD4／CD8显著低于正常对照（P＜O．O1），SIL－2R显著升高（P＜O．01），CD8与对照组比较无显著性差异（P＞O．05）。提示小儿再生障碍性贫血患）儿细胞免疫功能紊乱，为临床应用免疫疗法提供依据。     

细胞因子网络在再生障碍性贫血发病中的作用

目的检测细胞因子网络在再生障碍性贫血(AA)患儿中的表达,以探讨AA的免疫发病机制及探索新的治疗途径。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测35例AA患儿及30例正常儿童外周血白细胞介素-18(IL-18)、IL-12I、L-3及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果与正常对照组比较,AA患儿外周血IL-18I、L-12、TNF-α水平升高,而IL-3水平降低,差异均有显著性(P<0.01)。结论细胞因子网络失衡可能在小儿AA发病中起重要作用。     

支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞17、白细胞介素-17、白细胞介素-21水平变化

目的 检测辅助性T淋巴细胞17(Th17)及细胞因子IL-17、IL-21在支气管哮喘(哮喘)患儿外周血中的表达,探讨其在儿童哮喘发病机制中的作用.方法 以哮喘患儿60例(哮喘组)为研究对象,根据病情分为哮喘发作期(发作期组,n=30)、哮喘缓解期(缓解期组,n=30);以健康儿童30例作为健康对照组.分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测其Th17细胞百分率.采用ELISA法检测各组IL-17、IL-21表达水平.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 哮喘发作期组患儿外周血中Th17及 IL-17 水平明显高于缓解期组和健康对照组(Pa<0.05);哮喘发作期组患儿血清IL-21表达水平明显低于缓解期组和健康对照组(Pa<0.05);哮喘缓解期组与健康对照组外周血Th17、IL-17、IL-21水平比较,差异均无统计学意义(Pa>0.05).结论 Th17、IL-17通过全身系统性炎症反应参与儿童哮喘的发病,IL-21可作为儿童哮喘的控制指标,亦有望为哮喘的治疗提供新的靶点.     

Lymphocyte Subpopulations and Lymphokine Production in Children with Constitutional Aplastic Anemia

The expression of lymphocyte surface markers as well as the production of interleukin-2 (IL-2) and interferon-gamma (IFN) by mitogen-stimulated peripheral blood mononuclear cells (MNC) have been studied in five children with constitutional aplastic anemia. A significantly reduced T4/T8 ratio was found and two of five patients also had a reduced percentage of B cells. One patient had a high percentage of HLA-DR positive T8⁺ cells, very suggestive of a high degree of circulating activated T suppressor/ cytotoxic cells. IL-2 production was reduced in two patients, whereas IFN production was only reduced in one of these. The abnormalities found correlate with the duration of the bone marrow failure. The patients with the longest duration of bone marrow failure also exhibited the lowest T4/T8 ratio. No spontaneous IFN production was detected in any of the patients. There was no clinical benefit or reversal of the immune abnormalities during and following treatment with cimetidine and cyclosporin A in two patients.     

儿童再生障碍性贫血的诊断与治疗

我国属于再生障碍性贫血(再障)高发地区,儿童期为再障好发年龄段.在目前我国儿童白血病诊治研究取得显著进展的今天,必须高度重视儿童再障的诊治研究.现归纳小儿再障的发病机制、诊断分型标准、治疗方法 和疗效标准的国内外研究进展,尤其是针对诊断分型、鉴别诊断等方面提出了需要临床重视的问题,并详细介绍了治疗方法 、药物选择原则与常见药物不良反应及其具体防治措施.     

过敏性紫癜患儿血树突状细胞共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2平衡相关性

目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿外周血树突状细胞(DC)共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2平衡的相关性。方法HSP患儿40例。健康对照儿童18例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血浆IFNγ-、IL-4水平。对其中HSP 28例及18例健康对照儿童外周血单个核细胞(PBMC)体外经细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、rhIL-4和rhTNF-α以诱生DC并培养8 d,流式细胞仪检测DC表面CD86(B7-2)、CD80(B7-1)、CD83表达率。结果1.HSP组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组(t=4.26 P<0.01),IL-4水平显著高于健康对照组(t′=5.09 P<0.01),IFN-γ/IL-4比值显著低于健康对照组(t′=7.98 P<0.01)。2.HSP组外周血DC表面CD83表达率与健康对照组无显著性差异(P>0.05);HSP组外周血DC表面CD86表达率显著高于健康对照组(t=3.94 P<0.01),CD80低于健康对照组(t′=2.60 P<0.05)。3.二组外周血DC表面CD86表达率与血浆IL-4水平均呈显著正相关(r=0.53,0.63 Pa<0.01),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关(r=-0.55,-0.80 Pa<0.01),而与血浆IFN-γ水平均无相关性(Pa>0.05);二组外周血DC表面CD80表达率与血浆IFN-γ水平均呈正相关(r=0.43,0.49 Pa<0.05),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著正相关(r=0.49,0.63 Pa<0.05),而与血浆IL-4水平均无相关性(Pa>0.05)。结论HSP患儿存在Th1/Th2失衡,HSP患儿DC表面共刺激分子差异表达直接或间接导致Th1/Th2失衡。     

Cyclosporine a in Five Children with Severe Aplastic Anemia

Five children with aplastic anemia (AA) were treated with Cyclosporine A (CyA) after failure or poor response to other immunosuppressive agents. A complete remission was achieved in 3 patients, a good partial response in 1, and a poor partial response in another. In 1 patient in whom a complete remission was obtained, a relapse occurred 4 months after CyA was stopped. The treatment was resumed and a complete remission was again observed. Four patients were still on treatment, and side effects were mild. CyA appeared to be an effective treatment in AA.     

辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2平衡与慢性乙型肝炎的关系

目的探讨辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2细胞平衡与慢性乙型肝炎(CHB)的关系。方法CHB患儿42例分别于肝炎活动期及缓解期采空腹血5 mL,双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定其Th1、Th2细胞分泌细胞因子干扰素-γ(IFNγ-)、肿瘤坏死因子-α(TNFα-)和白细胞介素-10(IL-10)水平。荧光定量PCR法测定其HBV DNA。15例健康对照检测相同指标。结果肝炎活动期患儿IFNγ-、TNFα-较缓解期明显增高(Pa<0.01),缓解期则低于健康对照组(P<0.01,0.05)。在肝炎患儿活动期及缓解期IL-10无差异(P>0.05),但均高于健康对照组(P<0.01,0.05)。黄疸型与无黄疸型肝炎在活动期与缓解期患儿IFNγ-、TNFα-与IL-10均无差异(Pa>0.05)。HBV DNA与IFNγ-、TNFα-及IL-10均无相关性(P>0.05)。上述细胞因子与HBV DNA是否存在前C区1 896位变异无关(P>0.05)。结论CHB患儿存在Th1/Th2细胞失平衡。CHB患儿Th1细胞因子分泌增加可致肝脏炎性反应。在疾病过程中,Th2细胞因子占主导地位,削弱机体对病毒细胞免疫功能,造成病毒持续感染,疾病慢性化。检测Th1/Th2细胞因子变化作为监测CHB患儿疾病病情以及判断预后指标。     

阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞功能的影响

目的 探讨阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2功能的影响.方法 选取24例支气管哮喘发作期患儿为支气管哮喘组,20例健康儿童为健康对照组.二组均在无菌条件下获取外周血单个核细胞(PBMC)悬液,哮喘组予不同质量浓度(0.2、0.1、0.05、0mg/L)阿奇霉素治疗,健康对照组未予阿奇霉素干预,均体外培养48h.酶联免疫吸附(ELISA)法检测培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4及IL-10水平变化.采用SPSS ll.5软件进行统计学分析.结果 l.支气管哮喘组患儿PBMC产生IL-4水平明显高于健康对照组(P<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显低于健康对照组(P<0.05),IFN-γ和IL-10水平与健康对照组比较无显著性差异(Pa>0.05);2.支气管哮喘组患儿PBMC在阿奇霉素0.1mg/L水平条件下,IL-4分泌水平明显高于0.2mg/L和0.05mg/L组(Pa<0.05)及空白对照组(P<0.01),各组间PBMC分泌IFN-γ水平和IFN-γIL-4比值均无显著性差异(Pa>0.05);3.阿奇霉素0.2mg/L和0.1 mg/L组PBMC产生IL-10水平均明显高于空白对照组(P<0.01,0.05),0.2mg/L组明显高于0.05 mg/L组(P<0.05),其他各组间均无显著性差异(Pa>0.05).结论 常规质量浓度阿奇霉素(0.1mg/L)对支气管哮喘患儿外周血Th1/Th2平衡无明显影响,但可通过上调PBMC产生IL-10水平,而间接发挥其免疫调节作用.     

Epidemiological Features of Aplastic Anemia in Indian Children

Objectives

To study the socio-demographic profile and clinico-hematological features of aplastic anemia in children presenting at a single institution over 5 y.

Methods

Patients below the age of 15 y presenting with features of aplastic anemia were included in the study. Epidemiology, clinico-hematological features and treatment received were recorded in all the cases. Serology for hepatitis A, B, C, E, EBV, parvovirus and HIV was carried out. Cytogenetic studies were available in approximately half of the patients.

Results

One hundred eighty five patients were diagnosed with aplastic anemia. Ten patients with inherited bone marrow failure syndrome (IBMFS) were excluded. Median age was 8 y (range 4–14 y) with a male to female ratio of 2.4:1. Pallor (100 %) followed by bleeding manifestations (83.8 %) and fever (73.5 %) were most common presenting symptoms. One hundred twenty patients (70 %) were classified as severe, 36 (21 %) very severe and 17 (9 %) non-severe aplastic anemia. Viral markers for parvovirus, Epstein barr virus and hepatitis were positive in 25.8 %, 20 % and 6.7 % patients respectively. Six patients had history of varicella infection in recent past (within 6 mo). Very few patients (30) could afford immunosuppressive therapy (IST) and had suboptimal response (29.7 %).

Conclusions

Majority of patients had idiopathic aplastic anemia. Very severe aplastic anemia and severe aplastic anemia were frequent. Few patients received IST and had suboptimal response. There is need to establish a national registry for aplastic anemia.