邻苯二甲酸二乙基己基酯对大鼠睾丸细胞DNA损伤和睾丸组织氧化应激影响

目的 探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对大鼠睾丸细胞DNA的损伤和睾丸组织氧化应激的作用.方法 雄性Wistar大鼠25只,随机分为5组,每组5只,通过灌胃的方法摄入DEHP,4个染毒组剂量分别为1 500、3 000、4 500、6000mg·kg-1 ·d-1,1个阴性对照组.用单细胞凝胶电泳技术检测大鼠睾丸细胞DNA的损伤,睾丸组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)的水平以及睾丸组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力.结果 各染毒组和阴性对照组大鼠睾丸细胞DNA损伤率分别为29.0％、71.0％、89.0％、95.0％和15.0％,各染毒组睾丸细胞DNA损伤程度与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),且大鼠睾丸细胞DNA损伤率与染毒剂量之间呈剂量-反应关系(r =0.930,P＜0.01);各染毒组大鼠睾丸组织的ROS、MDA的水平均较阴性对照组显著升高(P＜0.05,P＜0.01),而GSH-Px、SOD的活力又较阴性对照组明显下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 DEHP可造成大鼠睾丸组织明显的氧化应激并引起睾丸细胞DNA的损伤.     

DEHP对大鼠脂质过氧化反应的影响

目的：探讨DEHP对大鼠脂质过氧化反应的影响。方法：通过对不同剂量DEHP染毒大鼠的血液,肝组织匀浆,线粒体匀浆中GSH－Px,GST,SOD,MDA指标的测定,结果：随着DEHP染毒剂量的增加,大鼠血中,组织中的GSH－Px,GST,SOD活性降低,MAD含量增加,尤其是大剂量组,差异均有显著性（P＜0．05,P＜0．01）,结论：DEHP可明显增加大鼠体内的脂质过氧化反应。     

胚胎期暴露DEHP对子代大鼠神经行为的影响

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)胚胎期暴露,评价其对子代大鼠神经行为的影响,初步探讨DEHP所致子鼠神经毒性的机制。方法雌性Wistar大鼠从妊娠日起用10、100、500 mg/(kg.d)DEHP连续灌胃染毒19 d,观察子代大鼠的神经行为学指标。于子鼠出生第7天和第21天测定海马神经细胞凋亡率,不同剂量的DEHP染毒对海马组织bcl-2、bax基因的表达的影响。结果于子鼠出生6周后,进行水迷宫测试。结果显示,随着DEHP剂量增加,中、高剂量组错误次数增加和潜伏期延长十分明显(F=8.058,P<0.05;F=11.221,P<0.05)。电穿梭测试显示,中、高剂量组电击次数增加和主动逃避时间延长较为明显(F=6.984,P<0.05;F=9.841,P<0.05)。出生后7 d子代大鼠海马神经元的细胞凋亡率高于出生21 d,高剂量组尤为显著。RT-PCR检测表明,与对照组相比,bcl-2和bax基因表达增高(F=253.78,P<0.05;F=66.67,P<0.05),且随着DEHP暴露剂量的升高,表达亦增加。结论 DEHP对子代大鼠神经系统具有明显的毒性作用,存在着剂量-反应关系,其可能通过干扰bcl-2和bax基因的表达而影响子代大鼠神经系统发育。     

邻苯二甲酸二乙基己酯和镉对大鼠睾丸

研究邻苯二甲酸二乙基己酯[BF](DEHP)及镉(Cd)对大鼠睾丸巨噬细胞(TM)[BFQB]分泌细胞因子IL-1β的影响? 方法 利用贴壁法提取大鼠睾丸巨噬细胞?以0.1%二甲基亚砜(DMSO)为对照组,用50 μg/ml脂多糖(LPS)作为激活剂,以1 μmol/L?10 μmol/L?100 μmol/L的DEHP或CdCl2单独及各自半量联合处理,作用24 h后用ELISA法检测上清液中细胞因子IL-1β的含量;用CCK8法测定各浓度DEHP或CdCl2单独处理对细胞活性的影响? 结果 LPS可明显促进巨噬细胞分泌细胞因子IL -1β;0.5 μmol/L DEHP+0.5 mol/L Cd和5 μmol/L DEHP+5 μmol/L Cd联合染毒可显著抑制细胞分泌功能,但IL-1β分泌量仍明显高于对照组,并介于两单独作用组之间;50 μmol/L DEHP+50 μmol/L Cd的联合处理可非常显著抑制细胞分泌功能,与对照组相比差异无统计学意义?随着剂量增加,DEHP或Cd单独作用都能抑制细胞分泌功能和细胞活性,但对两者抑制程度存在较大差异? 结论 DEHP和Cd联合处理抑制大鼠TM分泌IL-1β表现出一定交互作用,对细胞活性的抑制可部分解释DEHP和Cd对细胞分泌功能的抑制效应?     

邻苯二甲酸酯和双酚A联合暴露对大鼠睾丸间质细胞活性的影响

目的研究环境内分泌污染物邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)和双酚A(BPA)对原代大鼠睾丸间质细胞活性的影响。方法采用酶消化与贴壁法相结合提取大鼠睾丸间质细胞,分别暴露于终浓度0(对照)、1、10、100、1 000μmol/L的DEHP和(或)BPA溶液24 h。采用CCK8法检测细胞活性。结果与对照组比较,100、1 000μmol/L的DEHP暴露组和10、100、1 000μmol/L BPA暴露组及各浓度DEHP+BPA联合暴露组大鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着DEHP和(或)BPA暴露浓度的升高,大鼠睾丸间质细胞的抑制率均呈上升趋势。与相同浓度DEHP+BPA联合暴露组比较,1、1 000μmol/L的DEHP暴露组大鼠睾丸间质细胞的抑制率较低,1 000μmol/L的BPA暴露组大鼠睾丸间质细胞的抑制率较高,差异均有统计学意义(P0.05)。1μmol/L的DEHP与BPA联合暴露对细胞活性抑制表现为协同作用,1 000μmol/L的DEHP与BPA联合暴露表现为拮抗作用,10和100μmol/L的DEHP与BPA联合暴露对抑制细胞活性未表现出交互作用。结论 DEHP和BPA均能显著影响睾丸间质细胞活性,且以BPA作用更加明显;低剂量(1μmol/L)的DEHP和BPA联合作用为协同效应,高剂量(1 000μmol/L)的DEHP和BPA联合作用为拮抗效应。     

DEHP对大鼠海马神经元树突和突触形态发育影响

目的 探讨邻苯二甲酸（2-乙基己基）酯[di-2-ethylhexyl）phthalate,DEHP]对大鼠海马神经元树突和突触形态发育的影响。方法 体外培养5 d的新生大鼠海马神经元DEHP暴露5 d后,激光共聚焦显微镜下观察免疫荧光染色后的神经元,分析树突丝、树突棘和突触密度,采用Western blot法检测突触蛋白表达水平。结果 0.10、1、10 μmol/L DEHP显著下调体外培养海马神经元的树突丝、树突棘和突触密度;与对照组比较,1 μmol/L DEHP组海马神经元树突丝、树突棘和突触密度[分别为（6.23±0.19）、（4.91±0.09）、（4.04±0.13）个/20 μm]明显下降（P<0.01）,该作用可被雌激素受体阻断剂ICI182,780部分消除（P<0.01）;1 μmol/L DEHP还可拮抗0.01 μmol/L 17β-E2对树突和突触密度的促进作用（P<0.01）;Western blot分析结果显示,与对照组比较,1 μmol/L DEHP神经细胞突触蛋白synapsin I、PSD-95、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体亚基NR2B、磷酸化胞外调节蛋白激酶（p-ERK）1/2表达[分别为（0.53±0.08）、（0.75±0.03）、（0.66±0.06）、（0.67±0.02）]明显降低（P<0.01）。结论 DEHP可能由雌激素受体介导抑制大鼠海马神经元树突和突触形态发育,其机制可能与突触蛋白和NMDA受体表达水平下降及ERK1/2信号通路抑制有关。     

DEHP对妊娠大鼠胚胎着床及胚胎发育影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)在体内对雌性大鼠妊娠早期胚胎着床及妊娠中晚期胚胎发育的影响。方法大鼠妊娠早期(1~6 d)灌胃给予5,25,50 mg/kg DEHP,妊娠14 d处死孕鼠剖腹检测DEHP对胚胎着床情况的影响;大鼠妊娠中晚期(7~20 d)给予5,25,50 mg/kg DEHP,妊娠末期处死后剖腹检查胚胎畸形和胎盘发育情况。结果妊娠早期25、50 mg/kg DEHP干预后,胚胎着床数(10.02±2.75)、(8.77±3.03)只较对照组(14.01±3.01)只降低;妊娠中晚期25、50 mg/kg DEHP干预后,胚胎数(9.68±1.95)、(5.86±2.11)只较对照组(12.98±1.46)只减少,活胎数(8.29±2.02),(5.86±2.21)只较对照组(12.13±2.06)只减少,胚胎重量(4.92±0.97),(4.78±1.12)g较对照组(6.05±1.36)g降低,胎盘重量(0.93±0.09)、(0.85±0.08)g较对照组(1.12±0.12)g降低。结论 DEHP可在妊娠早期影响胚胎着床,并在妊娠中晚期影响胚胎及胎盘发育,造成胚胎丢失...     

邻苯二甲酸二乙基己酯对大鼠睾丸睾酮合成、GATA-4 mRNA表达的影响

目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯对大鼠睾丸睾酮合成、GATA-4 mRNA表达的影响。方法雄性SD大鼠32只,随机分成4组,每组8只,设3个染毒剂量组(10,100,500mg/kg.d DEHP溶媒为玉米油)和1个对照组(玉米油),饲养1个月后处死。酶联免疫吸附法测定血清中睾酮含量;RT-PCR法检测睾丸组织GATA-4 mRNA表达的含量。结果实验组血清中睾酮含量和睾丸组织的GATA-4 mRNA含量均低于对照组。结论邻苯二甲酸二乙基己酯可使大鼠睾丸Leyd ig细胞变性,血清睾酮合成降低,其机制可能与降低GATA-4 mRNA表达有关。     

DEHP介导PPARs对雌性小鼠卵巢功能影响

目的 通过介导过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPARs)探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对雌性生殖系统影响.方法 将40只21 d雌性ICR小鼠随机分成DEHP 0、20、100、500 mg/kg剂量组,连续染毒10 d,停止染毒24 h后处死动物,用实时聚合酶链式反应(real time-PCR)技术测定小鼠PPARs mRNA表达水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中雌二醇、孕酮水平.结果 100、500 mg/kg DEHP组卵巢湿重分别为(0.01±0.003)、(0.01±0.007)g,脏器系数分别为(0.13±0.02)%、(0.12±0.03)%,与对照组比较,明显降低(P<0.05);500 mg/kg DEHP组小鼠血清中雌二醇水平明显低于对照组(P<0.05);各染毒组小鼠血清孕酮水平与对照组之间无明显差异(P>0.05);与对照组比较,各染毒组PPARα、PPARβmRNA表达水平无明显变化(P>0.05),PPARγmRNA表达水平明显升高(P<0.05).结论 DEHP作为一种过氧化物酶体增殖剂可以通过改变PPARs基因表达水平影响雌性小鼠卵巢功能.     

三氯生暴露引起大鼠睾丸组织氧化应激与睾酮合成抑制

目的 研究三氯生(triclosan,TCS)暴露对青春期雄性大鼠睾丸形态学、类固醇激素水平以及激素受体表达的影响,探讨TCS抑制大鼠睾酮合成的潜在机制.方法 选取24只青春期雄性SD大鼠,用不同剂量TCS连续灌胃染毒31 d.通过苏木精—伊红染色(HE)分析睾丸组织形态学变化;通过酶联免疫吸收试剂盒(ELISA)测定...     

子宫肌瘤和卵巢囊肿与血清中PAEs暴露水平关系

目的 了解育龄女性血清酞酸酯类化学物(PAEs)的暴露水平, 分析PAEs与子宫肌瘤、卵巢囊肿的相关性。方法 在上海市第一妇婴保健院收集80例子宫肌瘤、67例卵巢囊肿和17例原发性不孕共164例妇科疾病患者和80例健康对照组血清, 采用气相色谱法(GC)检测其血清中PAEs的含量, 并分析其与妇科疾病的相关性。结果 244例女性中血清的邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基-己基)酯(DEHP)检出率分别为26.2%、95.5%和92.2%, 几何均数分别为0.071、0.270 和0.193 mg/L;病例组血清中DBP水平(0.342 mg/L)明显高于对照组(0.165 mg/L), 差异有统计学意义(t=11.870, P<0.01);子宫肌瘤组血清DBP含量与年龄因素呈负相关(r=-0.267, P=0.028), 对照组血清中DBP含量与BMI值间存在正相关(r=0.270, P=0.017)。结论 子宫肌瘤和卵巢囊肿与血清PAEs水平存在一定的相关性。     

塑料拆解地区水环境中DEHP检测

目的 监测某塑料拆解地区水环境中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的污染水平及探讨其可能的来源,为保护当地环境、促进居民健康提供基础数据。方法 用固相萃取和气相色谱联用技术检测河水、井水、塘水、无组织排放水和饮用水中DEHP水平。结果 各类水样中均检出DEHP,检出率为100%。河流污染断面DEHP平均浓度2.05μg/L,为清洁断面平均浓度(0.32μg/L)的6.4倍。暴露区井水(14.20μg/L)和塘水(135.68μg/L)DEHP的平均浓度分别为对照组井水(0.79μg/L)和塘水(0.37μg/L)的18和367倍。暴露区无组织排放水样中DE-HP的检出范围在0.36~161.86μg/L。结论 塑料拆解地区井水、塘水和无组织排放水样中均检出DEHP,且DEHP的平均浓度均超过中国《生活饮用水卫生标准》(GB5479-2006)和《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)的要求,应引起重视。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯亚慢性染毒对wistar大鼠血液学及血生化指标的影响

目的 观察邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)染毒90 d对大鼠血液学及血生化指标的影响.方法 将健康SPF级Wistar大鼠80只,雌雄各半,按体重随机分为对照组和3个DEHP染毒组(500、100、20 mg/kg)各20只,经口90 d染毒后,采集大鼠下腔静脉血,进行血常规、血生化常规检测.结果 血液学检测...     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯宫内暴露对子代大鼠睾丸发育及铜锌微量元素的影响

取雌性Wistar大鼠从妊娠日起用10、100、500mg/(kg.d)邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)连续灌胃染毒至孕19d。测定睾丸脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活力,睾丸组织中铜、锌微量元素含量。随着DEHP剂量的增加,500mg/(kg.d)DEHP染毒组子代大鼠睾丸中的MDA含量增加,SOD活力降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。500mg/(kg.d)DEHP染毒组的锌元素含量与对照组相比,显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);而铜含量在各组间差别不明显。提示DEHP胚胎期暴露对子代雄性大鼠的生殖系统发育具有明显的毒性作用,可增加大鼠睾丸组织的脂质过氧化水平,同时会干扰生殖系统锌元素的代谢。这是DEHP致子代雄性大鼠生殖发育毒性的可能机制之一。 更多还原     

DEHP对小鼠淋巴细胞分泌IL-2影响

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)影响小鼠淋巴瘤细胞(EL4)分泌白细胞介素-2(IL-2)蛋白影响机制研究,探讨DEHP对辅助性T细胞1(Th1)型细胞因子影响。方法不同浓度DEHP染毒以25 ng/mL佛波酯(PMA)+1μg/mL离子霉素(Ion)激活的EL4细胞,并用钙调神经磷酸酶抑制剂FK506进行干预;实验6 h用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测活化T细胞核因子(NFAT)的mRNA表达;实验48 h用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中IL-2蛋白表达。结果与激活剂组的(72.59±9.05)pg/mL比较,10,50μmol/L DEHP染毒组的IL-2蛋白分泌量为(36.00±5.10),(32.00±1.86)pg/mL,明显降低EL4细胞分泌IL-2蛋白(P<0.01);50μmol/L DEHP明显升高了EL4细胞中NFAT2 mRNA相对含量,且降低了NFAT1 mRNA相对含量(P<0.05);0.05,0.5μmol/L FK506未明显影响IL-2蛋白表达;Spearman相关分析表明,DEHP影响IL-2蛋白与NFAT mRNA表达无相关。结论DEHP可能是通过NFAT非依赖途径影响EL4细胞分泌IL-2蛋白。     

邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯联合染毒对雄性大鼠生殖毒性的影响

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)联合染毒对雄性大鼠睾丸的脂质过氧化作用以及对生化酶和血清激素水平的影响。方法选择健康成年清洁级雄性SD大鼠32只,按2×2析因设计随机分为4组,分别为阴性对照组(玉米油)、DBP单独染毒组(1/20LD50,1.0g/kg)、DEHP单独染毒组(1/20LD50,1.7g/kg)和DBP+DEHP染毒组(1.0g/kgDBP+1.7g/kgDEHP),每组8只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒剂量为5ml/kg,每天1次,连续染毒8周。测定睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)水平,测定血清中雄性激素睾酮(T),黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)水平。结果 DBP和DEHP联合染毒对睾丸组织中SOD活力和血清中T水平呈现协同作用,对γ-GT、ACP活力和FSH水平呈现拮抗作用。结论 DBP和DEHP联合染毒对雄性大鼠具有明显的生殖毒性作用,可能是通过破坏氧化-抗氧化系统的平衡和影响睾丸组织中酶的活力以及血清激素水平干扰下丘脑—垂体—睾丸轴的生理平衡,抑制T的分泌,导致雄性生殖功能的降低。     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯青春前期暴露对雌性大鼠性激素水平及卵巢抗氧化系统的影响

目的研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)青春前期暴露对雌性大鼠性激素水平及卵巢氧化应激指标的影响。方法将40只健康3周龄SPF级雌性SD大鼠按体重随机分为5组,分别为对照(玉米油)组和0.5、5、50、500 mg/kg DEHP暴露组,每组8只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为1 ml/kg,每天1次,连续染毒4周。测定雌性大鼠血清、睾丸氧化应激[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)]指标以及血清、海马性激素[雌二醇、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)]水平。结果与对照组相比,500 mg/kg DEHP暴露组雌性大鼠卵巢MDA、ACP水平增加,差异均有统计学意义(P0.05);而各剂量DEHP暴露组雌性大鼠卵巢SOD、CAT和AKP的水平均未见明显变化。各剂量DEHP暴露组雌性大鼠血清MDA、SOD、CAT、ACP和AKP的水平与对照组相比,差异均无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,仅0.5 mg/kg DEHP暴露组雌性大鼠海马雌二醇水平及5 mg/kg DEHP暴露组雌性大鼠血清雌二醇水平降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,仅500 mg/kg DEHP暴露组雌性大鼠血清LH水平升高,差异有统计学意义(P0.05);而各剂量DEHP暴露组雌性大鼠血清FSH水平均未见明显变化。结论 DEHP青春前期暴露会导致雌性大鼠卵巢氧化应激损伤,并易引起青春期性激素分泌紊乱。     

PVC医疗器械中增塑剂DEHP的安全性评价

目的探讨我国PVC医疗器械中DEHP安全性评价的必要性、研究思路、评价方法。方法对美国、日本、欧盟对PVC医疗器械中增塑剂DEHP安全性评价的思路进行回顾、梳理,结合我国目前PVC医疗器械生产现状及监管要求,对我国PVC医疗器械中DEHP的安全性评价思路及方法进行探讨。结果 PVC医疗器械产品中的DEHP在临床使用时的释放量可能会超过人体可耐受量值,从而对人体的健康带来潜在危害,生产企业有必要对PVC医疗器械产品中DEHP的安全性进行评估。评估可以主要从对原材料的控制及产品中DEHP的释放量进行测定两方面进行。结论生产企业可首先对DEHP增塑的PVC医疗器械原材料按照国家标准进行评估,其次对产品中的DEHP释放量模拟临床使用条件进行测定,通过将DEHP释放量值与国际权威机构已评估得出的人体可耐受限量值(TI值)进行比较,评估产品中DEHP可能对人体带来的风险。     

邻苯二甲酸二乙基己基酯对大鼠肝细胞和睾丸细胞DNA单链断裂水平的影响

目的 探讨邻苯二甲酸二乙基已基酯(DEHP)对大鼠肝细胞和睾丸细胞DNA的损伤.方法 选用雄性Wis-ter大鼠25只,随机分为5组,每组5只,通过灌胃的方法摄入DEHP,4个染毒组剂量浓度分别为1 500、3 000、4 500、6 000 mg·kg-1·d-1,1个阴性溶剂对照组,用单细胞凝胶电泳技术(彗星试验)检测大鼠肝细胞和睾丸细胞DNA的损伤.结果 各染毒组和对照组大鼠肝细胞DNA损伤率分别为28.0%、69.0%、86.0%、94.0%和18.0%,各染毒组肝细胞DNA损伤程度与对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01),且大鼠肝细胞损伤率与染毒剂量之间呈剂量-反应关系(r=0.942,P<0.01);各染毒组和对照组大鼠睾丸细胞DNA损伤率分别为29.0%、71.0%、89.0%、95.0%和15.0%,各染毒组睾丸细胞DNA损伤程度与对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01),且大鼠睾丸细胞损伤率与染毒剂量之间呈剂量-反应关系(r=0.930,P<0.01).结论 DEHP可造成大鼠的肝细胞和睾丸细胞DNA的损伤,并随染毒剂量的增加有加重的趋势.