采用四氯化碳诱导家兔肝纤维化模型的建立研究

背景　肝纤维化动物模型的建立有多种方法,而四氯化碳（CCl4）造模法最常使用,而不同的给药途径对造模成功率也造成一定的影响,本研究选择皮下注射纯CCl4,旨在探讨建立家兔肝纤维化模型的最佳给药剂量及时间间隔。目的　探讨CCl4诱导家兔肝纤维化模型的最佳给药方式。方法　2015年4-9月,选用健康新西兰大白兔46只,随机分为4组,其中G0组10只,G1~G3组各12只。G0组皮下注射0.9%氯化钠溶液0.5 ml/kg,G1~G3组分别以0.2、0.3、0.5 ml/kg的分析纯CCl4背部皮下注射,2次/周,共16周。G2组起始剂量为0.3 ml/kg,3周后增加剂量为0.4 ml/kg,5周后增加剂量为0.5 ml/kg,此后维持剂量在0.5 ml/kg。造模后第4、6、8、10、12、14周,分别从G1~G3组随机选取1只家兔,处死并取肝组织标本。第16周处死G1~G3组家兔及2只G0组家兔,造模期间死亡的家兔立即取肝组织标本进行病理学检查。结果　各组家兔的死亡均发生在造模3周内,各组造模3周内家兔死亡率比较,差异有统计学意义（检验统计量值=7.004,P=0.048）;其中,G3组家兔死亡率高于G0、G1、G2组（P<0.001）。第16周时,G1~G3组造模成功率比较,差异无统计学意义（检验统计量值=4.747,P=0.165）。结论　采用CCl4皮下注射,起始剂量为0.3 ml/kg并剂量递增,可成功建立死亡率低的家兔肝纤维化模型。     

声脉冲辐射力弹性成像评估肝纤维化程度的动物实验研究

背景　肝纤维化是肝硬化、肝细胞癌的前期病变,早期治疗可以延缓肝纤维化的进展速度。目前肝纤维化程度的诊断方法主要有肝穿刺活检术、血清学标志物等,但各诊断方法又各有其缺陷。目的　通过建立兔肝纤维化模型,探讨应用声脉冲辐射力弹性成像（ARFI）技术评估兔肝纤维化程度的诊断价值。方法　2015年4-10月选用健康新西兰大白兔44只,随机选取36只为实验组,8只为对照组。实验组给予皮下注射四氯化碳（CCl4）16周建立兔肝纤维化模型,起始剂量为0.3 ml/kg,剂量递增,第4周剂量为0.4 ml/kg,第5周后剂量为0.5 ml/kg;对照组给予相同剂量0.9%氯化钠溶液。分别于造模第4、6、8、10、12、14、16周随机选取实验组3~6只,对照组1~2只,应用ARFI检查活体、离体兔肝横向剪切波速度（SWV、SWV1）。每次检查完成后采用空气栓塞法处死兔并取兔肝组织先行苏木素-伊红（HE）染色,而后行Masson 染色,确定兔肝纤维化病理分期,采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）及ROC曲线下面积（AUC）评价ARFI评估肝纤维化分级的诊断价值。结果　至造模第16周时,成功建立各分期的兔肝纤维化模型。病理检查结果示：对照组兔肝脏病理学检查均正常,无纤维化;实验组36只兔最终死亡4只,造模成功32只（肝纤维化分期为F1期6只、F2期10只、F3期8只、F4期8只）,造模成功率为88.9%（32/36）。实验组F1~F4期的SWV、SWV1大于对照组,实验组F2~F4期的SWV、SWV1大于实验组F1期,实验组F3~F4期的SWV、SWV1大于实验组F2期,实验组F4期SWV1大于实验组F3期（P<0.05）;对照组及实验组F1~F4期SWV1均大于SWV（P<0.05）。通过ROC曲线分析,SWV诊断肝纤维化≥F2期、≥F3期、F4期的AUC分别为0.901、0.939、0.945（P均<0.001）,截断值分别为2.21、2.29、2.36 m/s,灵敏度分别为80.8%、87.5%、87.5%,特异度分别为83.3%、87.5%、79.3%;SWV1诊断肝纤维化≥F2期、≥F3期、F4期的AUC分别为0.901、0.901、0.958（P均<0.001）,截断值分别为2.58、2.92、3.26 m/s,灵敏度分别为80.8%、81.3%、87.5%,特异度分别为83.3%、87.5%、95.8%。结论　采用ARFI检查的SWV、SWV1可用于评估肝纤维化程度,SWV、SWV1诊断兔肝纤维化程度各期的AUC均大于0.9,具有较好的诊断效能。     

百草枯一次灌胃构建家兔肺间质纤维化模型

目的： 构建百草枯致肺间质纤维化动物模型。方法： 25只家兔随机分为实验组（20只）和对照组（5只）。实验组家兔以40 mg/kg体质量百草枯一次性灌胃,并于染毒后第3、7、14、28天处死,对照组生理盐水灌胃并于第28天处死。观察两组家兔的一般情况、肺组织大体结构和肺组织病理学改变。结果： 实验组家兔在染毒后1 h即出现中毒性改变,肺组织在第28天出现明显的纤维化改变。结论：百草枯灌胃法能可靠地构建出肺纤维化动物模型。     

不同剂量刀豆蛋白A诱导Balb/c小鼠肝纤维化的量效关系

目的观察不同剂量刀豆蛋白A（Con A）诱导小鼠肝纤维化的效果,探讨建立小鼠肝纤维化动物模型所需最佳剂量及成模时间。方法实验组Balb/c小鼠18只,再分为A组、B组、C组,每组6只,经尾静脉分别注射10 mg/kg、12.5 mg/kg、15 mg/kg的Con A,每周1次。对照组6只,经尾静脉注射等量PBS,每周1次。各组均于每次注射后24 h采血,测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）;于实验第5、7、9周,每组各处死2只小鼠,取血清检测血清透明质酸,留肝脏作病理检查。结果A组第9周、B组第7周出现肝纤维化,C组第5周出现肝纤维化,但死亡2只。实验组ALT、AST、明显高于对照组（P〈0.05）。结论12.5 mg/kg Con A经尾静脉注射小鼠是合适的剂量,每周1次,注射6次可建立肝纤维化动物模型。     

家兔脂肪肝模型的建立及病理学研究

目的模拟目前人类不良饮食方式建立脂肪肝动物模型 ,探讨脂肪肝的病变特点和病理学量化诊断指标。方法选用 4 0只新西兰家兔 ,分为实验 1、2、3组及对照组 ,实验组采用高脂高糖及含酒精饮料分别喂养 3、6、12周 ,建立不同程度脂肪肝模型 ,对照组采用普通饲料及饮用水喂养。观察不同程度脂肪肝解剖学、病理组织学特点 ,计算肝脏指数 ,并采用真彩色图像分析系统对苏丹Ⅳ染色组织切片进行肝脂肪变面积量化分析。结果实验组家兔形成小泡性为主的肝细胞脂肪变。分别形成轻度脂肪肝 7例 ,中度脂肪肝 10例 ,重度脂肪肝 11例。其中75 %伴发不同程度脂肪性肝炎 ,5 7%有不同程度纤维化 ,11%形成小结节性肝硬化。实验组动物肝指数随造模时间延长而递增 ,与对照组比较差异具有非常显著性意义 ,P <0 .0 0 0 1。图像分析结果显示正常肝脏及轻、中、重度脂肪肝单位测试面积上被测物的面积值依次为 :<10 %、10 %～ 2 5 %、2 6 %～ 35 %和 >35 % ,各组间差异具有显著性意义 ,P <0 .0 0 0 1。结论高脂高糖加酒精喂养可成功的建立不同程度脂肪性肝病模型 ,联合采用病理学和图像分析可更准确的反映脂肪肝的病变类型和程度     

CT灌注成像技术对犬肝纤维化模型的实验研究

目的:采用CT灌注成像技术,探讨beagle犬肝纤维化造模过程中各灌注参数的变化规律。材料和方法:实验采用雄性犬14只,实验组10只,对照组4只。利用四氯化碳溶液腹腔注射加饮食控制法制备肝纤维化模型。在双周末分别进行肝脏CT灌注扫描和肝穿刺病理活检,计算各项灌注参数。结果:实验犬于10周末有5只造模成功,死亡两只,其余三只未造模成功的实验数据不纳入统计范围。门脉灌注量HPP在肝纤维化过程中呈降低趋势,S1期与S4期比较,差异有显著性(p<0.05);肝脏灌注指数HPI在肝纤维化过程中呈升高趋势,S1期与S4期比较,差异有显著性(p<0.05)。结论:随着肝纤维化程度的加重,肝脏灌注指数HPI呈增高趋势,门脉灌注量HPP呈下降趋势。     

复合因素法致大鼠肝纤维化模型的建立

目的探讨一种新的制备肝纤维化动物模型的方法,为下一步研究肝纤维化发生机制、治疗方案提供稳定、可靠的动物模型。方法将80只雄性Wistar大鼠随机分成两组,对照组腹腔内注射橄榄油2 mL/kg,2次/周,并给予普通饮水及饲料。模型组采用腹腔注射猪血清+四氯化碳(CCl4)+高脂低蛋白饲料(10%猪油、2%胆固醇)+普通饲料+乙醇进行诱导。共8周,实验结束进行肝功能生化指标测定及病理学观察并加以评估。结果模型组70只,造模结束时死亡10只,死亡率14.3%。血清ALT、AST、ALP、GGT和Hyp与正常对照组有显著性差异(P<0.01),病理切片均可看到明显的肝纤维化形成,造模成功60只,成模率85.7%。对照组10只全存活。结论该方法可成功建立肝纤维化模型,为实验研究应用。     

不同浓度四氯化碳复合法诱导家兔肝纤维化模型的建立

目的 寻找到适宜做影像学和血清学研究的动物家兔肝纤维化模型建市方法.方法 分别用体积比为5%四氯化碳(CCl4)油溶液和纯CCl4,按0.1 ml/kg剂量每周1次腹腔注射,并辅以5%浓度的乙醇作为饮水,诱导家兔肝纤维化形成,并于注射后6、8、10、12周分组处夕匕家兔取其肝脏进行病理学检查.结果 家兔的死亡多发生在4周之内,6周之后趋于稳定.5%CCl4浓度组家兔死亡率为60%,纯CCl4组死亡率为25%.结论 长期给予CCl4可导致家兔的肝纤维化形成,采用腹腔注射纯CCI4,同时辅以5%浓度的乙醇作为饮水的复合法造模,家兔死亡率低,成模率高.     

清肝饮对大鼠肝纤维化单胺氧化酶活性的影响

目的:观察清肝饮对实验性大鼠肝纤维化单胺氧化酶活性的影响.方法:将40只大鼠均分正常对照组、早期造模对照组、晚期造模对照组、早期造模治疗组及晚期造模治疗组5组,分别用药.结果:治疗后肝纤维化大鼠肝细胞器中溶酶体和线粒体LMAO显著下降.结论:清肝饮能降低肝纤维化的活跃程度和进展程度.     

酒精复合性肝纤维化大鼠模型的建立及动态观察

目的 建立大鼠酒精复合性肝纤维化动物模型,观察肝纤维化的动态病变情况.方法 雄性SD大鼠随机分成对照组、酒精性肝纤维化模型组.模型组大鼠灌胃酒精、橄榄油、吡唑的混悬液,并间断饲喂高脂饲料,结合微量CCl4腹腔注射的复合方式造模.分别于2、4、6、8周时检测造模大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平,并根据肝脏病理切片分析肝脏纤维化病变程度.结果 在造模2周末,肝细胞轻、中度脂肪变:4周末,重度脂肪肝,轻度的纤维组织增生;6周末,肝细胞严重脂变,纤维隔形成,中度界面肝炎;8周末,多个假小体形成,达早期肝硬化程度.模型组大鼠的体重、血清ALT、AST、TG、TC水平与对照组比较,差异均有统计学意义.结论 运用酒精灌胃为主的复合方式造模,8周内可建立形成不同程度(酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化)的酒精性肝纤维化的动物模型.该模型可靠且复制时间短,肝纤维化进展稳定.