白藜芦醇对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用

目的:观察白藜芦醇(resveratrol,RVL)对大鼠离体胸主动脉血管的舒张作用并探讨其机制。方法:采用离体血管环灌流方法,观察RVL在含Ca²⁺或无Ca²⁺ Krebs液孵育条件下对去甲肾上腺素(NA)引起的血管平滑肌收缩的影响;同法观察RVL对30,80mmol·L^-1的KCl引起的血管平滑肌收缩的影响;RVL对NA引起的依赖于细胞内钙和细胞外钙收缩反应的影响,以及加入N-G-硝基-L-精氨酸(L-NNA)和优降糖后RVL舒张大鼠离体主动脉环效应的变化。结果:RVL呈浓度依赖性舒张NA引起的血管收缩;无Ca²⁺ 组RVL抑制NA所致血管平滑肌收缩效应大于含Ca²⁺ 组;RVL能够拮抗NA诱发的依内钙的收缩反应,而对外钙收缩无抑制。RVL对80,30mmol·L^-1 的KCl引起的血管平滑肌收缩均有抑制作用,且前者量效曲线明显上移。L-NNA使RVL舒血管效应降低(26.0±4.6)%;优降糖组的血管舒张受抑程度与对照组无显著差别(P>0.05)。结论:RVL可呈内皮依赖性舒张血管平滑肌,其作用机制可能与该药促进NO合成释放,开放钙激活的钾通道以及抑制血管平滑肌细胞外钙内流和内钙释放有关。     

连翘舒张大鼠离体胸主动脉环作用的研究

目的:观察连翘对大鼠离体胸主动脉环的作用,并探讨其作用机制.方法:取雄性Wistar大鼠,制备胸主动脉环置于浴槽内恒温灌流并记录收缩活动.结果:连翘浓度依赖性舒张去甲肾上腺素(NE)引起的血管收缩,IC50为8.60g/L,其作用是非.内皮依赖性的;连翘浓度依赖性舒张KCI引起的血管收缩,IC50为8.92g/L,其作用是内皮依赖性的.连翘的舒张大鼠离体胸主动脉环作用可被L-NAME部分阻断,但是不被心得安或格列苯脲阻断.连翘显著抑制NE诱发的细胞内钙收缩幅度和细胞外钙收缩幅度.结论:连翘显著舒张大鼠离体胸主动脉,作用机制可能是:阻断细胞膜上的受体调控性钙通道和电压门控钙通道或作用于其相关途径,增加NO浓度;抑制肌浆网释放Ca2+和抑制细胞外的Ca2+通过细胞膜进入细胞内.     

黄芩舒张大鼠离体胸主动脉环作用的研究

目的:观察黄芩对大鼠离体胸主动脉环的作用,并探讨其作用机制。方法:取雄性Wistar大鼠,制备胸主动脉环置于浴槽内恒温灌流并记录收缩活动。结果:黄芩浓度依赖性舒张去甲肾上腺素(NE)引起的血管收缩,IC50为7.45g/L,其作用是非内皮依赖性的;黄芩浓度依赖性舒张KCl引起的血管收缩,IC50为6.57g/L,其作用是内皮依赖性的。黄芩的舒张大鼠离体胸主动脉环作用可被L-NAME部分阻断,但是不被心得安和格列苯脲阻断。黄芩显著抑制NE诱发的细胞内钙收缩幅度和细胞外钙收缩幅度。结论:黄芩显著舒张大鼠离体胸主动脉,作用机制可能是:阻断细胞膜上的受体调控性钙通道和电压门控钙通道或作用于其相关途径,增加NO浓度;抑制肌浆网释放Ca2+和抑制细胞外的Ca2+通过细胞膜进入细胞内。     

蛇床子素对大鼠离体胸主动脉的舒张作用

目的:研究蛇床子素对大鼠胸主动脉的舒张作用并探讨其机制。方法:采用大鼠胸主动脉环张力测定法,观察蛇床子素对苯肾上腺素(PE)和氯化钾(KCl)预收缩的大鼠离体胸主动脉的舒张作用。结果:蛇床子素在不改变血管基础张力的情况下能明显抑制由PE或KCl诱导的大鼠胸主动脉环收缩,其血管舒张作用为非血管内皮依赖性。在无Ca2+溶液中,蛇床子素不能抑制咖啡因或PE诱导的细胞内钙的释放,但添加Ca2+后,蛇床子素能够抑制KCl诱导的细胞外钙内流。结论:蛇床子素的血管舒张作用是非血管内皮依赖性的,其机制可能是通过阻断血管平滑肌细胞上的钙离子通道,抑制细胞外Ca2+内流而起作用的。     

红景天苷对大鼠胸主动脉血管的舒张作用及机制研究

目的:考察红景天苷舒张血管的作用及机制,分析其可能的作用靶点。方法:取同批大鼠胸主动脉制成离体血管环,通过记录血管环的张力变化,观察给予不同处理时,红景天苷对血管环舒缩作用的影响。结果:红景天苷(10-11mol/L~10-5mol/L)可内皮依赖性地舒张血管;0.01mmol/L吲哚美辛(Indomethacin)可使红景天苷的量效曲线下降趋势明显减弱,而0.1mmol/L亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)则无明显影响;0.1mmol/L Ba Cl2也不影响红景天苷的舒张血管作用;10-6mol/L和10-5mol/L红景天苷可减缓无钙高钾环境下Ca2+收缩曲线的上升趋势,并可抑制无钙液中PE引起的缩血管作用。结论:红景天苷对胸主动脉血管的舒张作用具有内皮依赖性,并与内皮产生的前列环素有关,与NO-CGP通路无关。而红景天苷对VDCC和ROCC介导的胞内钙升高的直接调节则可能介导了其内皮非依赖性的血管舒张作用。     

柚皮苷对豚鼠离体气管平滑肌作用的机制研究

目的考察柚皮苷对正常及多种致痉剂诱导的豚鼠气管平滑肌收缩功能的影响及其作用机制。方法采用离体气管恒温灌流的方法,取豚鼠气管,在K-H液中制备豚鼠离体气管环,在其静息张力状态下以及用乙酰胆碱(Ach)、组胺(His)、氯化钙(Ca Cl2)、无钙时Ach诱导细胞内钙释放和高钙时诱发细胞外钙内流条件下,通过BL-420S生物机能实验系统测定其张力的变化,考察柚皮苷对离体豚鼠气管平滑肌张力的影响。结果柚皮苷低剂量浓度(0.0172~0.5504)mmol·L-1时,对静息状态下的豚鼠离体气管平滑肌有一定的收缩作用,高剂量浓度(0.5504~1.3780)mmol·L-1时舒张气管平滑肌,且呈剂量依赖性;使致痉剂Ach、His、Ca Cl2收缩豚鼠离体气管平滑肌的量效曲线非平行性右移,最大效应降低;抑制加入高钙后引发细胞外钙内流导致的收缩。结论柚皮苷舒张气管平滑肌作用机制可能与抑制豚鼠气管平滑肌上M受体、H1受体和阻断Ca2+通道从而抑制细胞Ca2+内流有关。     

丹酚酸B对大鼠离体胸主动脉环张力的影响

目的:研究丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对离体大鼠胸主动脉收缩张力的作用及其机制探讨。方法:SD大鼠,采用大鼠离体胸主动脉灌流模型,通过累积加药法加入Sal B使终浓度递增为1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10~(-5),1×10~(-4)mol·L~(-1),观察血管张力的变化,观察1×10~(-5),1×10~(-4)mol·L~(-1)Sal B对去甲肾上腺素(NE)和氯化钾(KCl)预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。结果:Sal B对内皮完整和内皮损伤的离体大鼠主动脉环基础张力的作用不明显;Sal B对NE预收缩的血管环有明显舒张作用,但对KCl预收缩的血管环无舒张作用;用一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)和环氧酶抑制剂吲哚美辛(Indo)处理血管后,对Sal B舒张血管效应阻断作用不明显,使用电压依赖性的K+通道阻断剂4-AP,Ca2+敏感性的K+通道阻断剂四乙胺(TEA)以及ATP敏感性的K+通道阻断剂格列苯脲处理后,对Sal B舒张血管效应的阻断作用不明显,使用β受体阻断药普萘洛尔处理后,对Sal B舒张血管效应的阻断作用亦不明显;而Sal B对Ca2+引起的收缩有抑制作用,抑制内钙收缩作用比外钙收缩作用更强。结论:Sal B舒张血管作用机制可能与阻断受体依赖性钙通道、电压依赖性钙通道引起的外钙内流和阻断三磷酸肌醇(IP3)受体引起的内钙释放有关,而与NO-鸟苷酸环化酶途径,环氧合酶途径,K+通道和β受体无关。     

天麻水煎剂对家兔离体主动脉血管舒张作用的研究

目的:研究天麻水煎剂对家兔主动脉环的舒张作用及机制。方法:采用家兔离体主动脉平滑肌标本,以去甲肾上腺素(NA)预收缩主动脉环后给予不同剂量的天麻观察其张力变化,并探讨去除血管内皮及不同信号通路抑制剂对血管张力变化的影响。结果:天麻对血管环静息张力无明显影响,但不同剂量的天麻可使10-6mol/L NA预收缩血管产生明显舒张(r=0.85,P<0.001)。去除血管内皮、10-4mol/L左旋硝基精氨酸(L-NNA,NO合酶抑制剂)或10-5mol/L甲烯蓝(MB,鸟苷酸环化酶抑制剂)可减弱天麻的舒张作用,但吲哚美辛(环氧酶抑制剂)和普萘洛尔(β肾上腺素能受体阻断剂)无影响。另外,8mg/ml天麻水煎剂对无内皮细胞血管环NA和KCl的量效收缩反应明显压低,且NA和KCl的PD2分别由温育前(6.90±0.93)和(1.53±0.55)降低为(5.61±0.70)和(1.10±0.25)。结论:天麻水煎剂对主动脉的舒张作用是内皮依赖性的,并与内皮释放的NO有关;也与平滑肌细胞膜上的受体依赖性Ca2 通道和电压依赖性Ca2 通道有关。     

替米沙坦对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用

目的观察替米沙坦对大鼠离体胸主动脉环张力的影响,并探讨其作用机制。方法采用离体血管张力实验方法。观察替米沙坦在1×10-9mol/L,1×10^-8mol/L,1×10^-7mol/L,1×10^-6mol/L,1×10^-5mol/L浓度时,对去甲肾上腺素（NE,1×10^-6mol/L）诱发大鼠离体胸主动脉环收缩的影响。观察内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME,10-4mol/L）、环氧合酶抑制剂吲哚美辛（10^-5mol/L）对替米沙坦作用的影响,以及替米沙坦对血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩的影响。结果替米沙坦对NE（1×10^-6mol/L）预收缩的离体胸主动脉环产生浓度依赖性的舒张作用。用Indo预处理的血管环对替米沙坦的舒张反应与未经处理时比较无统计学意义（P〉0.05）。去内皮及L-NAME可显著减弱替米沙坦对血管环的舒张作用（P〈0.05）。替米沙坦对血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩无影响作用。结论替米沙坦对NE预收缩的大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用,其舒张反应可能有内皮依赖性,与内皮产生的NO有关,与前列环素的合成无关,不通过抑制外钙内流和内钙释放发挥舒张作用。     

五种中草药对钙通道阻滞作用的初步研究

目的:初步研究黄芩、牛膝、杜仲、山楂、豨莶草五种中草药对血管平滑肌细胞(VSMCs)钙通道的影响。方法:大鼠离体胸主动脉环观察对去甲肾上腺素(NA)诱导的内钙依赖性与外钙依赖性缩血管作用的影响。结果:上述五种药材均能不同程度的抑制NA诱导的细胞外Ca2 内流产生的血管平滑肌的收缩;其中黄芩还能够显著地抑制NA诱导的细胞内"钙储库"中Ca2 的释放。结论:五种药材对VSMCs钙通道具有阻滞作用,这可能与其扩张血管、降血压作用机制有关;其中牛膝、杜仲、山楂和豨莶草等对VSMCs钙通道的阻滞作用为首次研究发现。     

旋覆代赭汤含药血清对胃窦平滑肌细胞IP_3受体及钙离子浓度影响的实验研究

目的:观察旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)IP3受体(IP3R)及钙离子(Ca2+)浓度的影响。方法:分离大鼠胃窦SMC,加入IP3受体拮抗剂肝素后,镜下观察含药血清对胃窦SMC收缩作用;检测细胞Ca2+总浓度。结果:IP3受体拮抗剂肝素可抑制旋覆代赭汤含药血清对胃窦SMC的收缩作用;各剂量组与无钙缓冲液组的细胞内钙离子总浓度相比较无明显差异。结论:旋覆代赭汤含药血清可使胃窦SMC收缩,其机制可能是通过IP3通路作用于细胞,引起细胞内质网释放Ca2+使胃窦SMCCa2+升高。     

环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响

目的:探讨环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响.方法:在纯化的蛋白体系中进行平滑肌肌球蛋白Ca2+依赖性磷酸化反应,采用甘油聚丙烯酰胺凝胶电泳测定肌球蛋白轻链磷酸化程度,孔雀绿法测定肌球蛋白Mg2+-ATPase活性.以平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性、肌球蛋白磷酸化以及在克氏液中孵育的肠平滑肌收缩振幅为指标,考察环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性和肌球蛋白磷酸化程度的调节作用,以及环氧橙皮油素对大鼠离体小肠平滑肌收缩性的影响.结果:在肌球蛋白轻链的Ca2+依赖性磷酸化反应中,在40～320 μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素能抑制磷酸化肌球蛋白Mg2+-ATPase活性及其轻链磷酸化程度(P＜0.01),这种抑制作用与1-(5-氯-1-萘-磺酰)-六氢-1,4-二氮杂卓(ML-9)具有协同作用;40 - 320μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素可剂量依赖性抑制大鼠离体小肠平滑肌收缩,且可拮抗新斯的明、乙酰胆碱引起的促进收缩作用,相加阿托品引起的抑制收缩作用(P＜0.01).结论:环氧橙皮油素可通过抑制平滑肌肌球蛋白的功能,抑制胃肠平滑肌的收缩性.     

野马追对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响

目的 :研究野马追对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响。方法 :离体豚鼠气管螺旋条上建立不同浓度野马追孵育时各致痉剂的量效曲线 ,观察野马追对各致痉剂引起收缩的影响。结果 :野马追对豚鼠离体气管平滑肌的静息张力和乙酰胆碱、组胺、氯化钙、氯化钾、氯化钡所致的收缩都有抑制作用 ,使以上各致痉剂的量效曲线非平行右移 ,最大效应降低 ,其强度依次为BaCl2>KCl>CaCl2 >His >Ach ,并明显抑制乙酰胆碱所致的外钙内流引起的收缩 ,以上作用均具剂量依赖性。结论 :野马追为以上各激动剂的非竞争性拮抗剂 ,其作用机制可能与钙通道的阻滞作用有关。     

萹蓄总黄酮对离体大鼠血管舒张作用机制的探讨

目的 研究萹蓄总黄酮(FP)对正常离体大鼠胸主动脉的舒张作用并对其机制进行初步探讨.方法 65%乙醇提取、聚酰胺富集、75%乙醇洗脱制得萹蓄总黄酮(FP),以芦丁为标准品测定FP中黄酮含量;以正常离体大鼠胸主动脉为标本,利用BL-420E生物机能实验系统记录FP对去氧肾上腺素(PE)预先收缩血管的舒张作用及FP舒张血...     

L-荷包牡丹碱对大鼠胃底肌条收缩效应的影响

目的 :研究L-荷包牡丹碱 (L-D)对 5-HT ,Histamine,K⁺ ,Ca²⁺ 引起的大鼠胃底肌条收缩效应的影响。方法 :采用大鼠胃底肌条的离体实验法 ,观察L-D对其收缩效应的影响。结果 :L-D及罂粟碱 (pap)对 5 HT ,His tamine ,K⁺ 及Ca2⁺诱发的大鼠胃底肌条的收缩均有显著的对抗作用。呈现非竞争性拮抗。在无Ca²⁺ 液中两药均能抑制 5 HT诱发的收缩 ,提示两药对胃底肌条依赖细胞内Ca²⁺所致收缩均有显著的抑制 ,当恢复细胞外Ca2⁺ 浓度后 ,L-D对胃底肌条依赖细胞外Ca²⁺ 的收缩有抑制作用 ,而 pap无影响。 结论 :L-D具有松弛胃底肌条的作用。     

Effects of Total Alkaloids in Buxus microphylla Leaves on Aorta Smooth Muscle of Rats and Their Mechanisms

Objective To investigate the effects of total alkaloids in Buxus microphylla leaves(ABML)on isolated rats thoracic aorta rings,and then to explore the possible mechanisms underlying the effects.Methods Thoracic aortas of Wistar rats were isolated,removed,and mounted onto an organ bath.The effects of ABML at different concentration on the contraction of isolated thoracic aorta rings(with and without endothelium)precontracted with KCl or PE were observed with organ bath technique.Dose-effect curves of CaCl2 were recorded by organ bath technique.The concentration of intracellular Ca 2+ ([Ca 2+ ]i)increased by PE,KCI,and caffeine in the presence of ABML was determined using Ca 2+ sensitive fluorescence indicator Fura-2/AM loaded thoracic aorta vascular smooth muscle (VSM)cells of rats.Results In aorta rings precontracted with PE and KCl,ABML produced concentration- dependent relaxation in both intact and denuded endothelium ring groups.There was no difference in the inhibition of contraction between the intact and denuded endothelium ring groups at the same concentration.Exposure of isolated thoracic aorta rings to ABML led to a significant reduction in the contracting response induced by CaCl2,and shifted the cumulative concentration-response curves to right.ABML could significantly inhibit the extracellular Ca 2+ influx induced by PE and KCl under[Ca 2+ ]0 of 1.5 mmol/L,with inhibitory ratios of 40.2%and 49.9%,respectively.In the case of Ca 2+ -free,ABML could significantly inhibit the intracellular Ca 2+ release induced by PE,with inhibitory ratio of 72.4%.Conclusion ABML relaxes thoracic aorta VSM cells by suppressing influx of extracellular Ca 2+ via voltage-dependent Ca 2+ channel and receptor-operated Ca 2+ channel.     

Kv和BK_(Ca)通道阻断剂对家兔离体Oddi括约肌肌环张力的作用及芍药甙的调控作用

目的探讨电压依赖性钾通道(Kv)、大电导钙激活钾通道(BKCa)阻断剂对家兔离体Oddi括约肌(SO)肌环张力的作用及中药芍药的有效成分芍药甙对其调控作用。方法制备离体兔Oddi括约肌肌环标本,放置于平滑肌恒温灌流浴槽中,观察Kv通道阻断剂4-aminopyridine(4-AP)、BKCa通道阻断剂tetraethylammonium chloride(TEA)对家兔离体SO肌环的收缩作用;观察芍药甙对4-AP和TEA引起的收缩作用的影响。结果 4-AP、TEA均可以引起SO肌环收缩,且随4-AP、TEA浓度增加,收缩程度也在增强。4-AP和TEA对SO肌环的收缩作用可以被芍药甙抑制。结论在离体条件下,Kv通道和BKCa通道对维持SO细胞的静息膜电位起主要作用。芍药甙可能通过对Kv通道和BKCa通道的调控,实现了对SO细胞的舒张反应。     

中药胃肠舒对Ca~(2+)信号传导途径的调控

目的:研究中药胃肠舒对Ca2+信号传导途径的调控。方法:肠推进实验和离体肠道平滑肌的收缩检测胃肠舒对肠道平滑肌的作用;免疫组化法检测肠组织NOS和ChAT的表达;CellTiter-GloTM法、流式细胞术和激光共聚焦显微镜分别检测ATP含量、线粒体跨膜电位和Ca2+浓度的变化。结果:胃肠舒组能提高大鼠卡红肠道推进率,使离体肠道平滑肌自发活动收缩幅度加大,降低了NOS的含量,增高了ChAT的表达,ATP、Ca2+及线粒体跨膜电位升高。结论:胃肠舒能兴奋肠道平滑肌加快肠蠕动,可能是通过Ca2+调控实现的。     

东北鹤虱中香豆素类对兔离体回肠的作用

目的：观察东北鹤虱中香豆素类对兔离体回肠的作用及对钙离子的影响。方法：采用兔离体回肠标本，结予不同剂量香豆素（CM）及维拉帕米（Ver)，观察对平滑肌收缩的影响。结果：CM和Ver可剂量依赖性地抑制乙酰胆碱（Ach）引起的回肠的收缩，非竞争性拮抗Cacl2所致回肠收缩，并对Ach引起的第1，2相收缩有影响。结论：东北鹤虱中提取的香豆素类具有与Ver相似的钙拮抗作用。