脱蛋白方法对蜘蛛香多糖总抗氧化能力的影响

目的:研究3种脱蛋白方法对蜘蛛香多糖总抗氧化能力的影响。方法:采用Sevag法、三氯乙酸法和盐酸法对蜘蛛香粗多糖脱蛋白,测定蛋白质脱除率、多糖损失率和总抗氧化能力损失率。结果:采用Sevag法脱蛋白,多糖总抗氧化能力损失率最小。Sevag法处理6次,蛋白质脱除率为41.71%,多糖损失率为46.38%,总抗氧化能力损失率为11.62%。结论:蜘蛛香粗多糖适宜用Sevag法脱蛋白。     

金银花多糖脱蛋白方法的研究

目的 优选金银花多糖除蛋白工艺.方法 以多糖损失率和蛋白脱除率为评价指标,选用了3种方法:Sevag法、酶法和酶-Sevag法对金银花多糖提取物进行脱蛋白处理.结果 Sevag法、酶法、酶-Sevag法的蛋白脱除率分别为85.72%、73.28%、84.50%,多糖损失率分别为56.57%、31.22%、29.35%.结论 酶-Sevag法是金银花多糖除蛋白有效,可行方法.     

鲍氏针层孔菌菌丝体多糖脱蛋白方法研究

目的:对多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化,比较不同方法对蛋白质去除的影响。方法:采用Sevag法与三氯乙酸(TCA)法去除鲍氏针层孔菌多糖中的游离蛋白质。结果:TCA去除蛋白质的效果优于Sevag法,TCA最佳脱蛋白条件为:5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30min;在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%。结论:TCA法为最佳的鲍氏针层孔菌脱蛋白方法。     

荔枝核多糖脱蛋白工艺的研究

[摘要] 目的：优化荔枝核多糖的脱蛋白工艺。方法：采用木瓜蛋白酶法、沙维积法(Sevag法)、三氯乙酸法、酶-Sevag联合法、酶-三氯乙酸联合法和三氯乙酸-Sevag联合法等六种方法。对荔枝核多糖脱蛋白进行工艺研究。以多糖保留率和脱蛋白率为指标，比较六种方法的脱蛋白效果。结果：酶法条件为酶用量4%、反应时间1h、pH值为6，反应温度45℃，Sevag试剂处理3次后，蛋白去除率高达91.45%，多糖保留率为71.42%，结论：不同脱蛋白法对荔枝核的脱蛋白效果有明显差异，酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳。     

急性子多糖脱蛋白方法研究

目的:筛选急性子多糖脱蛋白工艺。方法:以蛋白脱除率和多糖损失率为测定指标,考察了三氯乙酸(TCA)法、酶法和酶-TCA法3种方法的脱蛋白效果,并用Box-Behnken响应面法优化最佳工艺。结果:TCA法、酶法、酶-TCA法的蛋白脱除率分别为86.5%、80.4%、84.2%,多糖损失率分别为64.2%、32.4%2、6.2%。结论:酶-TCA法是急性子脱蛋白的最佳方法。     

川芎多糖除蛋白方法研究

目的 对川芎多糖进行除蛋白处理,筛选最佳除蛋白方法.方法 采用Sevag法、三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法3种方法对川芎多糖进行除蛋白处理,通过比较不同方法处理后的蛋白含量及多糖含量来确定最佳的除蛋白方法.结果 Sevag法的蛋白质去除率高(90%以上),但多糖回收率仅为40%;三氯乙酸法的蛋白质去除率为37.28%,多糖回收率为73.19%;三氯乙酸-正丁醇法的蛋白质去除率为83.60%,多糖回收率为85.16%,且操作快速、简便.结论 三氯乙酸-正丁醇法除蛋白效果较好.     

荔枝核多糖脱蛋白工艺考察

目的:优选荔枝核多糖的脱蛋白工艺。方法:以多糖保留率和脱蛋白率为综合评价指标,选取酶用量、酶解时间、酶解pH,酶解温度为影响因素,采用正交试验优选木瓜蛋白酶法对荔枝核多糖的脱蛋白工艺;以多糖保留率和脱蛋白率为指标,比较木瓜蛋白酶法、沙维积法(Sevag法)、三氯乙酸法、酶-Sevag联合法、酶-三氯乙酸联合法和三氯乙酸-Sevag联合法6种方法对荔枝核多糖的脱蛋白效果。结果:木瓜蛋白酶法脱蛋白最佳工艺条件为酶用量4%,酶解时间1 h,pH 6,酶解温度45℃,脱蛋白率70.2%,多糖保留率82.9%;酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳,在酶法处理的基础上,Sevag试剂处理2次,脱蛋白率高达91.45%,多糖保留率71.42%。结论:不同脱蛋白法对荔枝核的脱蛋白效果有明显差异,酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳,可推广于大生产使用。     

玉竹多糖脱蛋白方法的比较研究

目的 研究玉竹多糖脱蛋白最佳方法.方法 以sevag法、三氯乙酸法、sevag新法、酶法对玉竹多糖分别进行脱蛋白处理,并将两种最佳方法结合对玉竹多糖进行脱蛋白处理.结果 以回归方程计算多糖和蛋白含量,得出玉竹多糖脱蛋白最佳工艺为:玉竹多糖溶液稀释20倍,取50 ml,10%盐酸调pH值至6.5,加入3%体积的胰蛋白酶,65℃保温6h,沸水浴5 min,4 000 r/min离心,去变性酶沉淀,再加入其体积1/5的氯仿和1/25的正丁醇,剧烈振摇20 min,离心,取水相重复操作3次,得脱蛋白液.结论 酶法与Sevag法结合,可降低多糖损失,提高蛋白质脱除率,是玉竹多糖脱蛋白的一种良好的方法.     

麻黄多糖中蛋白含量测定及脱蛋白方法的比较

目的：建立麻黄多糖中蛋白的含量测定方法,比较不同脱蛋白方法的蛋白脱除效果。方法：水提醇沉提取麻黄多糖,Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-Sevag法去除蛋白,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。结果：麻黄多糖脱蛋白前的蛋白含量为26.30%,Sevag法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白后的蛋白含量分别为15.00%,6.80%和1.70%;三种方法的蛋白脱除率分别为42.97%,74.14%和93.54%。结论：木瓜蛋白酶-Sevag法的脱蛋白效果较好,考马斯亮蓝G-250染色法操作简便,准确性好,不失为多糖中蛋白含量测定的一种好方法。     

龙葵多糖脱蛋白工艺的比较研究

目的优选龙葵多糖脱蛋白的最佳工艺。方法以多糖保留率、蛋白脱除率为指标,采用正交试验确定Sevag法、三氯乙酸法(TCA法)、酶法的最佳工艺条件,并进行比较。结果三氯乙酸法(TCA法)为最佳脱蛋白方法,最佳工艺条件为用3%的三氯乙酸溶液调节pH至2.5,萃取时间20分钟,萃取次数1次,此时蛋白脱除率87.118%,多糖保留率88.983%。结论 TCA法对龙葵多糖具有较好的脱蛋白效果,且操作简便,工艺稳定,多糖保留率高,可在龙葵多糖的分离纯化中推广使用。     

红毛五加粗多糖脱蛋白工艺比较

目的　研究红毛五加粗多糖脱蛋白工艺。方法　 1用 Sevage法脱蛋白 ;2用三氯乙酸法脱蛋白 ;3用苯酚 -硫酸法测定红毛五加多糖含量。结果　 1用 Sevage法脱蛋白后红毛五加粗品多糖中多糖含量为80 .6 % ;2用三氯乙酸法脱蛋白后红毛五加粗品多糖中多糖含量为 6 8.6 % ;。结论　用 Sevage法脱蛋白效率较高 ,可用于红毛五加多糖分离、精制     

龙葵多糖细胞毒活性物质基础研究

目的研究龙葵多糖细胞毒活性的物质基础。方法从龙葵青果中分离出龙葵粗多糖;Sevage法除去游离蛋白;10%H2O2脱色,95%乙醇沉淀,分离出龙葵多糖。龙葵多糖经DEAE-52纤维素柱色谱分离得多糖-蛋白复合物;采用SDS-PAGE电泳法检测多糖-蛋白复合物是否为糖蛋白,并测定其相对分子质量;MTT法检测多糖-蛋白复合物对乳腺癌细胞MCF-7的IC50;多糖-蛋白复合物再经SephadexG-200凝胶柱色谱精制,采用MTT法进行活性检测。结果 SDS-PAGE电泳法测得龙葵多糖-蛋白复合物是相对分子质量3.0×104和2.5×104的2种糖蛋白的复合物,经MTT法测得其对乳腺癌细胞MCF-7的IC50为804.51μg/mL;多糖-蛋白复合物经SephadexG-200凝胶柱色谱精制得糖蛋白A、B,并测得其对MCF-7的IC50分别为532.96、613.91μg/mL。结论龙葵多糖细胞毒活性的物质基础是相对分子质量为3.0×104和2.5×104的2种糖蛋白。     

桂蚕沙多糖组分的制备与GC-MS分析

目的:制备桂蚕沙的多糖并分析其组分,为专属性鉴定特征的建立奠定基础.方法:桂蚕沙多糖制备流程脱脂后水提醇沉→三氯乙酸除蛋白→大孔吸附树脂纯化→活性炭脱色.桂蚕沙多糖组分的确定采用衍生化后GC-MS分析.结果:桂蚕沙多糖提取率为23.5％.桂蚕沙多糖组分:核糖-木糖-鼠李糖-半乳糖-吡喃葡萄糖-阿拉伯糖(1.97∶3.14∶0.58∶0.92∶5.62).结论:气相色谱-质谱联用技术能够有效的分析桂蚕沙中的多糖组分.     

红毛五加多糖分离精制实验研究

目的　研究红毛五加多糖的分离精制工艺。方法　用 Sevage法脱蛋白 ;用透析法除去小分子物质 ;用苯酚 -硫酸法测定红毛五加多糖含量。结果　红毛五加粗品多糖经分离精制后其多糖含量为 80 .6 %。结论　本法效率较高 ,可用于红毛五加多糖分离精制。     

六味地黄生物制剂中多糖脱蛋白方法对比

目的:对六味地黄生物制剂粗多糖中蛋白质的去除方法进行比较研究,探讨不同方法对多糖的提取率及纯度的影响.方法:利用Sevage法、TCA-正丁醇沉淀法、鞣酸沉淀法对六味地黄生物制剂脱蛋白,通过蛋白清除率和多糖保存率比较3种方法的优劣.结果:TCA-正丁醇法脱蛋白时效果最好,最佳条件为TCA-正丁醇试剂的体积比1∶2,TCA-正丁醇试剂的配比1∶5,振摇时间30 min,静置时间1.0h,多糖脱蛋白效率最高,多糖保存率最大.结论:TCA-正丁醇法是目前六味地黄生物制剂脱蛋白效果最好的工艺.     

金樱根多糖的制备及其体内抗肿瘤作用初探

目的:从金樱根中分离提取金樱根多糖,并探索其抗肿瘤活性。方法:水提醇沉法提取,Sevag法除蛋白,大孔树脂脱色后获得金樱根多糖粗品。建立小鼠S180肉瘤腹水瘤模型,并将小鼠随机分为4组:生理盐水组(阴性对照组)、金樱根多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1)。建立移植实体瘤模型,将小鼠随机分为8组:生理盐水组(阴性对照组)、阳性对照5-Fu(5-氟脲嘧啶)组(20 mg·kg-1)、金樱根多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1)、金樱根多糖各剂量组+5-Fu组。腹腔注射给药结束后处死小鼠,计算各用药组抑瘤率、生命延长率和白细胞数、胸腺指数、脾指数,并用EILSA法测定荷瘤小鼠血清中IL-2(白细胞介素-2)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)水平。结果:制备得到金樱根多糖粗品含糖量为85.43%。金樱根多糖50,100,200 mg·kg-1剂量组荷瘤小鼠生命延长率分别为3.07%±2.35%,10.11%±4.32%,34.3%±8.31%,与对照组相比,仅高剂量组有统计学意义(P<0.05)。但金樱根多糖低、中、高剂量组与5-Fu组(20 mg·kg-1)合用抑瘤率分别为62.74%±4.35%,67.92%±3.24%,78.79%±6.23%,明显优于单用5-Fu(P<0.05),且与单用5-Fu组相比合用能升高白细胞数、胸腺指数、脾指数及IL-2水平(P<0.05),但对TNF-α水平无影响。结论:金樱根多糖单用不能有效抑制小鼠S180肉瘤生长,但与5-Fu合用有明显的增效减毒作用。     

半叶马尾藻多糖的分离纯化与光谱分析

本文对半叶马尾藻多糖采用水提醇沉法粗提，蛋白酶联合Sevag法去蛋白纯化，凝胶过滤柱层析分离得半叶马尾藻纯多糖的不同组分，溴化钾压片红外光谱测定和紫外光谱扫描鉴定分析。结果表明，SHP的苯酚-硫酸呈色反应呈阳性，茚三酮反应呈弱阳性，碘-碘化钾反应呈阴性，说明提取物为非淀粉性多糖。SHP的提取率为8．56％，总糖含量为90．96％。凝胶过滤柱层析结果表明，半叶马尾藻多糖中含有吡喃多糖、木聚糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖和果糖等。紫外扫描结果显示多糖几乎不含核酸和蛋白质；红外光谱显示SHP主要为吡喃多糖，并显示多糖分子结构中存在β2糖苷键，还存在α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰。     

党参多糖铁的合成及鉴别

目的：合成并鉴别一种有机补铁剂。方法：采用水提醇沉的方法提取党参多糖,用苯酚-硫酸法测多糖含量。党参多糖和三氯化铁在碱性条件下合成党参多糖铁,并对其合成温度进行考查,采用邻菲罗啉比色法配合透析法测定党参多糖铁的铁含量及存在形式,并用红外光谱法分析了铁的结合方式。结果：合成所得党参多糖铁的多糖得率为15.6%,党参多糖含铁量为19.9%。结论：红外光谱法解析多糖铁的结构说明党参多糖铁是以络合形式存在。