不同方法收集胃液进行结核分支杆菌培养对儿童肺结核？…

目的 探讨胃液的结核分支杆菌培养对儿童肺结核的诊断价值。方法 对４６例儿童肺结核患选取痰、胃腔内直接吸取液、清晨呕吐液及其他时段呕吐液４种标本进行结核分支杆菌培养，并对其培养阳性率进行比较。结果 上述４种标本的结核分支杆菌培养阳性率分别为９％、３３％、２６％和４％。结论 酌情选用不同方法收集肝液进行培养，是诊断儿童肺结核的特异性方法之一。     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分支杆菌DNA的临床价值

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术配对检测９２例肺结核患者外周血单个核细胞内和痰标本中结核分支杆菌ＤＮＡ，同时检测３０例非结核患者外周血。结果显示：外周血和痰标本ＰＣＲ阳性率分别为７１７％和５５４％，前者明显高于后者（Ｐ＜００５）；各型肺结核外周血和痰标本ＰＣＲ阳性率不尽相同；３０例非结核患者外周血ＰＣＲ阳性３例（１０％）。认为ＰＣＲ检测肺结核患者外周血单个核细胞内结核分支杆菌ＤＮＡ是一种快速、敏感的方法，可用于肺结核早期诊断与鉴别诊断     

核酸体外扩增技术诊断骨结核的临床研究

目的探讨核酸体外扩增（ＰＣＲ）技术在骨结核诊断中的价值。方法对６０例骨结核标本与２０例非骨结核标本分别应用ＰＣＲ、抗酸染色镜检及分离培养法进行结核分支杆菌检测。同时，分析了影响ＰＣＲ结果的有关因素与相应处理措施。结果６０例骨结核标本中三种方法的阳性检出率分别为：ＰＣＲ法８３％，镜检法３％，培养法７％。经统计学处理，Ｐ＜０．００５，ＰＣＲ法与镜检及培养法对结核分支杆菌的阳性检出率比较具有显著性差异，ＰＣＲ法明显优于镜检及培养法。２０例非骨结核标本镜检及培养法均阴性，ＰＣＲ法阳性率１０％。盲法结核分支杆菌和对照菌ＰＣＲ检测结果表明，ＰＣＲ的特异性为１００％。ＰＣＲ扩增整个过程自动化控制，可在数小时内完成。结论ＰＣＲ技术是一种快速、敏感、特异与简便的骨结核标本结核分支杆菌检测方法，对骨结核的诊断与鉴别诊断具有重要价值。     

结核病房空气中结核分支杆菌检测方法研究

目的探索空气中结核分支杆菌检测的有效方法。方法选用ＬＷＣ－Ⅰ型空气微生物采样器，对菌阳肺结核病房进行空气采样，３０份采样标本分别用不同方法检测结核分支杆菌。结果聚合酶链反应（ＰＣＲ）阳性１４份，阳性率４７％；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交阳性１８份，阳性率６０％；动物接种实验组３０只豚鼠有２只结核分支杆菌培养阳性，另１只病理组织学检查阳性，而对照组１０只豚鼠脏器培养及病理组织学检查全部阴性；罗氏培养和ＢＡＣＴＥＣ快速培养均呈阴性。结论用空气采样的方法进行空气中结核分支杆菌的监测是可行的。ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交最敏感，动物实验也可提供有意义的参考。     

纤支镜灌洗液的结核分支杆菌快速培养对不典型肺结核的诊断价值

目的：评价纤维支气管镜(以下简称纤支镜)支气管肺泡灌洗液(BALF)的结核分支杆菌快速培养对不典型肺结核的诊断价值。方法：选无痰或痰菌阴性的不典型肺结核患者49例行纤支镜检查，进行活检、刷检、BALF经BBL MGIT分支杆菌快速培养查结核杆菌。结果：49例经纤支镜刷检、BALF快速培养结核分支杆菌检出率分别是67．4％、83．7％，其中15例经纤支镜肺活检，10例病理证实为结核肉芽肿，检出率为66．7％。结论：纤支镜对无痰或痰菌阴性下BALF行结核分支杆菌快培对不典型肺结核具有较高的诊断价值，快速，阳性率较高。根据镜下所见采用不同的取材方法可望提高诊断率。     

588株分支杆菌菌鉴定

本文对５８８例肺结核病人痰标本进行分离培养，鉴定出８种分支杆菌菌株，其中人型结核分支杆菌占９２．３％；牛型结核分支杆菌占３．４％；非典型占４．３％。１例胞内分支杆菌病。     

单克隆抗体ELISA双抗体夹心法检测支气管肺泡灌洗液结核杆菌抗原

利用抗结核分支杆菌ＭｃＡｂ和抗结核分支杆菌ＨＲＰ－ＭｃＡｂ经双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，对１２８份支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬ）标本进行了检测。结果：痰菌阴性肺结核病人ＢＡＬ标本中结核分支杆菌抗原水平明显高于非结核肺部疾病组。对菌阴肺结核检出的敏感性为８４．１％，特异性为８２．４％，此法降低了利用多克隆抗体检测ＢＡＬ标本易出现的假阳性率。认为此法可作为结核病的辅助诊断方法。     

单克隆抗体ELISA双抗体夹心法检测支气管肺泡灌洗液结核杆菌抗原

利用抗结核分支杆菌ＭｃＡｂ和抗结核分支杆菌ＨＲＰ－ＭｃＡｂ经双抗体夹ＥＬＩＳＡ法，对１２８份支气管肺泡灌洗液标本进行了检测，结果：痰菌阴性肺结核病人ＢＡＬ标本中结核分支杆菌抗原水平明显高于非结核肺部疾病，对菌阴肺结核检出的敏感性为８４．１％，特异性为８２．４％，此法降低了利用多克隆抗体检测ＢＡＬ标本易出现的假阳性率，认为此法可作为结核病的辅助诊断方法。     

肺结核患者外周血白细胞中结核分支杆菌DNA检测及实验评价

目的探讨结核菌检测的新途径及其在肺结核诊断中的价值。方法应用聚合酶链反应技术对７６例肺结核患者（４０例同时留有疾标本），４２例非结核患者外周血标本进行了结核分支杆菌ＤＮＡ检测。结果利用聚合酶链反应检测外用血白细胞中结核菌ＤＮＡ对肺结核诊断的灵敏度为８６％，特异性为 ９０％，准确度达８７％；４０例外周血与疾标本的ＰＣＲ配对检测表明，血标本中的结核菌ＤＮＡ检出率明显高于痰标本。结论外周血白细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测用于肺结核诊断具有较高的敏感性和准确性，明显优于痰标本，可作为肺结核诊断优良可靠的指标。     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分 …

探讨外周血单个核细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测在肺结核诊断中的价值。方法采用改良Ｔｒｉｔｏｎ－ｘ－１００法分离，制备单个核细胞中模板，ＤＮＡ，聚合酶链反应扩增结核分支杆菌２４０ｂｐ基因片段，同时分析了影响ＰＣＲ结果的有关因素。结果８９例肺结核患者的血标本，８４例肺结核患者的痰标本中，结核分支杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７３％和５７％；８４例肺结核患者外周血，痰标本配对检测总阳性率可达８７％。     

TB-SA抗体检测对活动性肺结核临床诊断价值的探讨

目的对TB-SA抗体(Tuberculosis specific Antigen)检测用于活动性肺结核诊断的价值进行评估。方法选取活动性肺结核患者162例(菌阳肺结核78例,菌阴肺结核84例),无结核病患的健康查体者115人,同时检测血清TB-SA抗体、TB-DOT抗体和TB-PCR,入选的活动性肺结核患者连续三天留取3份晨痰标本,进行抗酸杆菌检查和分支杆菌培养。结果活动性肺结核菌阳患者检测血清TB-SA抗体敏感性为85.9%,菌阴者为72.6%,健康人群特异性为86.1%。结论 TB-SA抗体检测是一种快速、简便、有较高敏感性和特异性的辅助诊断活动性肺结核的免疫学方法。     

儿童肺结核的诊断进展

2017年11月9日,中华人民共和国卫生行业新标准《WS 288—2017肺结核诊断》出台,作者就新标准中关于儿童肺结核的若干问题进行解读,并结合文献论述儿童肺结核的诊断进展。临床和影像学表现、结核病患者密切接触史及结核菌素皮肤试验是儿童肺结核临床诊断的主要依据。γ-干扰素释放试验较结核菌素皮肤试验有更好的特异性。怀疑儿童肺结核时应尽可能留取2份以上胃液、痰液或鼻咽吸取物等标本进行涂片镜检、固体和液体培养,以及进行分子生物学检测,以增加病原学检测的阳性率。怀疑气道受累时应进行支气管镜检查。利福平耐药实时荧光定量抗酸扩增(Xpert MTB/RIF)检测阳性可作为儿童肺结核确诊的病原学依据。     

The usefulness of colonoscopic biopsy in the diagnosis of intestinal tuberculosis and pattern of concomitant extra-intestinal tuberculosis]

BACKGROUND/AIMS: Intestinal tuberculosis can be difficult to diagnose because it may mimic many other intestinal diseases. The aim of this study was to evaluate the diagnostic yield of colonoscopic biopsy and frequency of concomittent extra-intestinal tuberculosis in intestinal tuberculosis. METHODS: The medical records of 225 consecutive patients with intestinal tuberculosis (81 men, 144 women; mean age 40.6 yrs) were analyzed retrospectively. RESULTS: Histological examination of colonoscopic biopsy specimens revealed granulomas in 163 (72.4%) of the 225 patients. However, caseous necrosis was found in only 25 (11.1%) patients, and acid-fast bacilli (AFB) were noted in 39 (17.3%) of the 225 patients. Mycobacterium tuberculosis was isolated from the culture of biopsy specimens in 52 (29.3%) of 177 patients. Eighty-four patients (37.3%) had concomitant extra-intestinal tuberculosis and 67 (29.8%) showed active pulmonary tuberculosis. Histological examination of the biopsy specimens enabled the diagnosis of intestinal tuberculosis by the presence of either caseating granulomas or AFB in 52 (23.1%) patients. Combination of histological examination and Mycobacterium culture established the diagnosis in 87 (38.7%) patients. Before getting the result of Mycobacterium culture, the diagnosis could be made, by either histological examination or the presence of extra-intestinal tuberculosis in 107 (47.6%) patients. Combination of caseating granulomas, AFB staining, Mycobacterium culture, and the presence of extra-intestinal tuberculosis resulted in the diagnosis in 126 (56.0%) patients. CONCLUSIONS: To increase the diagnostic yield, AFB staining and Mycobacterium culture should be routinely performed on biopsy specimens in addition to routine histological examination for caseating granulomas.     

四种结核分枝杆菌检测方法的临床应用评价

目的评估涂片、培养、PCR和增菌PCR检测结核分枝杆菌临床应用价值。方法对124例临床确诊的肺结核、可疑结核患者和非结核病人痰标本的涂片、培养、PCR和增菌PCR四种方法的检测结果进行比较。结果涂片、培养、PCR和4及7d的增菌PCR检测31例临床确诊的肺结核病人痰标本阳性率分别为22.5%、32.2%、54.8%、64.5%和87.1%;检测59例临床可疑肺结核病人痰标本阳性率分别为13.6%、18.6%、28.8%、37.3%和52.5%。比较四种方法的阳性检测率有显著性差异(P<0.05)。检测34例非结核病人痰标本,涂片、培养均为阴性,而PCR和增菌PCR均有1例假阳性,假阳性率2.9%。比较PCR与增菌PCR对菌阳和菌阴病人的痰标本阳性检测率,有显著性差异(P<0.05),而两种方法的假阳性率相同。结论增菌PCR检测结核分枝杆菌具有很高的敏感性和特异性,可作为结核病的有效辅助诊断方法之一。     

肺结核患儿胃液样本结核分枝杆菌培养阳性率提高方法的探讨

目的:建立提高肺结核患儿胃液样本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)培养阳性率的方法,同时,探讨培养液的pH值对MTB抗原-胶体金检测试剂正确判读结果的影响和磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution, PBS)对结核样本前处理液pH值的调节作用。方法:将70份疑似肺结核患儿胃液样本同时用两步培养法、传统培养法和Xpert Ultra进行检测。两步培养法为先将胃液样本直接接种到罗氏培养基上,约20～30 d后收集可疑MTB菌落再行常规的碱处理-中和离心法处理进行分离培养(传统培养法)。比较传统培养法和两步法阳性检出率的差异;以样本的Xpert Ultra检测结果作为菌载量标准,分析两步法在不同菌载量样本中的阳性检出率差异。同时,配制系列pH值梯度的溶液,确定MTB抗原-胶体金检测试剂获得最佳显示结果的最适pH值范围;用系列体积的PBS缓冲液(pH=6.8)中和3%或4%NaOH与等体积样本的混合液,确定pH值至7～9时所需的体积稀释倍数。结果:传统培养法阳性检出率为26.5%(18/68),两步法阳性检出率为23.1%(15...     

二代测序技术检测临床痰标本中结核分枝杆菌的初步评价CSCD

目的:评价二代测序(NGS)技术对临床痰标本中结核分枝杆菌的检测效能。方法:采用前瞻性研究方法,选取北京市疾病预防控制中心(北京结核病控制研究与防治所)2021年8—10月接诊的49例疑似肺结核患者痰标本,同时进行抗酸杆菌涂片镜检(简称“涂片”)、分枝杆菌培养(包含罗氏培养和MGIT 960液体培养;简称“培养”)、GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)和NGS技术检测结核分枝杆菌,比较4种方法检测不同分类患者阳性率差异,并以最终临床诊断为参照标准,评价4种检测方法的检测效能。结果:49例疑似肺结核患者中,最终肺结核诊断者40例(包括病原学确诊患者25例、病原学阴性临床诊断患者15例),非肺结核患者9例(包括肺炎6例,非结核分枝杆菌感染、慢性阻塞性肺疾病和哮喘各1例)。NGS技术检测49例疑似肺结核患者的阳性率[69.4%(34/49)]明显高于涂片[44.9%(22/49)]、培养[51.0%(25/49)]和Xpert[49.0%(24/49)],差异均有统计学意义(χ^(2)=17.614、17.018、20.753,P值均=0.000);检测病原学阴性肺结核患者的阳性检出率为46.7%(7/15)。以临床诊断结果为参照标准,涂片、培养、Xpert、NGS技术对49例疑似患者痰标本的检测敏感度分别为55.0%(22/40)、60.0%(24/40)、60.0%(24/40)、80.0%(32/40),特异度分别为9/9、8/9、9/9、7/9,一致率分别为63.3%(31/49)、65.3%(32/49)、67.3%(33/49)、79.6%(39/49),Kappa值分别为0.310、0.297、0.355、0.459。结论:以临床诊断为参考标准,NGS技术检测的敏感度最高,与临床诊断的一致性也最高,能够快速、高效检测痰标本中的结核分枝杆菌,可早期辅助诊断疑似肺结核患者。     

实时荧光PCR检测儿童肺结核粪便中Mtb-DNA的效果评价

目的 应用实时荧光PCR快速检测肺结核患儿粪便中Mtb-DNA,并初步评估其临床效果。 方法 收集肺结核住院儿童粪便标本76份,应用实时荧光PCR检测Mtb-DNA,检测结果与20例其他呼吸系统疾病患儿的粪便实时荧光PCR检测Mtb-DNA、76例粪便抗酸杆菌涂片检查以及41例患儿痰标本的涂片和(或)培养、实时荧光PCR检测结果进行比较。 结果 粪便实时荧光PCR检测敏感度达到23.68%(18/76),特异度为100.00％(20/20),肺结核患儿粪便PCR阳性率［23.68%(18/76)］明显高于涂片阳性率［6.58%(5/76)］,41例患儿中痰涂片和(或)培养阳性例数(15例)和痰PCR检测阳性例数(18例)高于粪便PCR检测阳性例数(11例)。 结论 实时荧光PCR检测儿童粪便Mtb-DNA,是一种特异度高、比较敏感、非侵入性且相对安全的儿童肺结核快速诊断方法。     

三种分子诊断技术对儿童肺结核的诊断价值

目的 探讨三种分子诊断技术对儿童肺结核的诊断效能,为儿童肺结核的诊断寻求简单、快速、准确的新方法。方法 搜集哈尔滨市胸科医院儿童结核科、哈尔滨市儿童医院呼吸科、哈尔滨医科大学附属第一医院儿科2016年9月至2018年6月收治的2个月至14周岁的疑似肺结核患儿共186例,最后临床诊断肺结核者119例,其中低龄儿54例(45.4%),年长儿65例(54.6%);非结核病者67例,其中低龄儿31例(42.3%),年长儿36例(53.7%)。应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescen quantitative PCR,FQ-PCR)、实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)和耐药基因芯片技术分别检测患儿胃液和痰液(年长儿)中的结核分枝杆菌,评价各方法的诊断效能。结果 以临床诊断为标准,FQ-PCR、SAT、耐药基因芯片检测胃液中MTB的敏感度分别为81.51%(97/119)、 78.15%(93/119)、73.11%(87/119),特异度分别为86.57%(58/67)、98.51%(66/67)、92.54%(62/67),Kappa值分别为 0.653、0.709、0.603。3种方法检测年长儿胃液中MTB的敏感度分别为 80.00%(52/65)、73.85%(48/65)、67.69%(44/65),特异度分别为75.00%(27/36)、97.22%(35/36)、88.89%(32/36);检测年长儿痰液中MTB的敏感度分别为 47.69%(31/65)、41.54%(27/65)、36.92%(24/65),特异度分别为88.89%(32/36)、 97.22%(35/36)、91.67%(33/36),各方法检测的敏感度胃液均高于痰液,差异均有统计学意义(χ ²值分别为14.696、13.898、12.334,P值均为0.000),各方法检测的特异度胃液和痰液之间差异均无统计学意义(χ ²值分别为2.347、0.000、0.158,P值分别为0.126、1.000、0.691);胃液总的阳性检出率为87.69%(57/65),痰液总的阳性检出率为58.46%(38/65),两者差异有统计学意义(χ ²=14.114,P=0.000)。 结论 FQ-PCR、SAT、耐药基因芯片检测儿童疑似肺结核患者的胃液和痰液中结核分枝杆菌的敏感度高、特异度强,对儿童肺结核的诊断具有重要价值。     

Evaluation of a commercial ligase chain reaction assay for the diagnosis of pulmonary and extra-pulmonary tuberculosis.

SETTING: Egas Moniz Hospital, Lisbon, Portugal. OBJECTIVE: To evaluate the Ligase Chain Reaction (LCx) Mycobacterium tuberculosis Assay for the direct detection of M. tuberculosis complex in respiratory specimens after smear observation, and its suitability for non-respiratory clinical specimens. DESIGN: Analysis of 156 specimens collected from 123 patients with pulmonary tuberculosis and/or extrapulmonary involvement. RESULTS: Among 93 pulmonary secretions and 63 extra-pulmonary samples and after resolution of discrepancies based on clinical and laboratory findings, two pulmonary samples from a patient with a diagnosis of sarcoidosis, four samples of cerebrospinal and one of seminal fluid were considered as false positives. Two tissue biopsy samples, one pericardial effusion and one pulmonary secretion from patients strongly suspected of having tuberculosis were considered as false negatives for the assay, without inhibition of amplification. All specimens yielding M. avium on culture were LCx negative. CONCLUSION: The LCx Mycobacterium tuberculosis Assay was found to be useful for the rapid identification of M. tuberculosis complex in all types of specimens. It revealed a high specificity both in pulmonary and extrapulmonary products, and a sensitivity of 97% for the pulmonary secretions and of 75% for the extra-pulmonary specimens, independently of the bacilloscopy results.