金黄色葡萄球菌对成骨细胞的侵入

目的 明确金黄色葡萄球菌能否侵入体外培养的人成骨细胞,并比较三个不同菌株在侵入能力上的差异。方法 采用三个不同的金黄色葡萄球菌菌株（６５７１、８３２５－４和２５０）,取半对数生长期细菌用于实验。成骨细胞培养自健康成人颌阻生齿手术中之去骨块。侵入实验的细菌与细胞比例为３０：１,侵入发生时间为２小时,细胸外细菌为庆大霉素杀灭。部分被感染的成骨细胞溶解后用于细菌培养,计算菌落数;部分送电镜观察。结果 ６     

金黄色葡萄球菌侵入成骨细胞机制初探

目的：探讨金黄色葡萄球菌在侵入成骨细胞过程中，细菌和细胞各自所起的作用，方法：半对数生长期金黄色葡萄球菌6571为实验用菌株，成骨细胞增产睚健康成人下颌第三磨牙拔除术中去除的骨块。氯霉素，利福平，新生霉素，放线菌酮和Monodansylcadaverine作为细菌或成骨细胞的抑制剂，研究它们在金黄色葡萄球菌侵入成骨细胞过程中的作用。结果：氯霉素，利福平，新生霉素和Monodansylcadaverine处理组的细菌侵入能力明显低于对照组，放线菌酮处理组明显高于对照组。结论：金葡菌在侵入成骨细胞过程中自身需合成蛋白质，RNA和DNA；成骨细胞摄入细菌需借助受体介导的细胞吞饮作用，成骨细胞的蛋白质合成受抑制时能增强对细菌的摄入。     

米诺环素对成年大鼠下颌骨成骨细胞内外金黄色葡萄球菌的作用

目的:探讨米诺环素对金黄色葡萄球菌感染的成年大鼠下颌骨成骨细胞的抗菌作用。方法:采用金黄色葡萄球菌ATCC 25923感染体外培养的成年大鼠下颌骨成骨细胞,被感染的成骨细胞部分经庆大霉素处理后加入米诺环素,另一部分直接加入米诺环素,溶解细胞后计算细胞内外的菌落数。结果:经庆大霉素杀灭细胞外细菌后,细胞内细菌在米诺环素的作用下,随着时间的延长细菌数量减少,24h后基本抑制细胞内菌;随着米诺环素直接作用感染细胞的时间延长细胞内外的细菌均减少,3h细胞外细菌基本抑制,24h后细胞内的细菌也基本完全抑制。结论:米诺环素能够抑制成骨细胞内外的金黄色葡萄球菌,具有时间依赖性,为种植体给药系统的临床应用奠定实验基础。     

成骨细胞在金黄色葡萄球菌感染后的细胞因子表达

目的 探讨成骨细胞在金黄色葡萄球菌感染后细胞因子的产生情况。方法 半对数生长期金葡茵6571为实验用菌株。成骨细胞培养自健康成人下颌第三磨牙拔除术中新鲜去骨块。实验组以MOI为30的比例感染成骨细胞2小时;对照组未加细菌。在0,2,4,8,12,24,48,72小时收集培养液,用ELISA方法测定样本中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8浓度。结果 实验组和对照组均未见TNF-α、IL-β表达。实验组各时间点IL-6、IL-8浓度明显高于对照组。结论 成骨细胞在受金葡茵感染后TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8表达上的变化可能有利于机体对骨组织金葡茵感染的清除。成骨细胞可能是减轻金葡茵骨髓炎的重要细胞成份。     

米诺环素对体外培养的成年大鼠牙槽骨成骨细胞生物活性的影响

目的:研究不同浓度的米诺环素对体外培养的成年大鼠牙槽骨成骨细胞(mature rat alveolarosteoblast,MRAOBs)增殖、蛋白合成及碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP)的影响。方法:将不同浓度的米诺环素(1、5、10、20、40、100、200mg/L)加入体外培养的第4代MRAOBs中,孵育2d和4d后,倒置显微镜下观察其对细胞形态的影响,并于2d后检测其对细胞的增殖活性及蛋白合成的影响,4d后检测其对细胞的碱性磷酸酶活性的影响。结果:在1-200mg/L的浓度范围内,米诺环素对细胞形态无影响,可显著促进MRAOB的增殖和蛋白合成(P<0.01),1-100mg/L浓度范围内随着浓度的增加,促进细胞增殖和蛋白合成的作用显著增强,至100mg/L时达最大促进效应。1-200mg/L的米诺环素能显著抑制MRAOBs的ALP活性,随浓度的增加抑制作用逐渐增强。结论:一定浓度的米诺环素有促进成骨细胞的增殖、蛋白合成和抑制成骨细胞分化的作用。     

蛆虫分泌物抑制金黄色葡萄球菌入侵成骨细胞的机制探讨

目的：通过体外实验探讨蛆虫分泌物抑制金黄色葡萄球菌入侵成骨细胞的机制。方法：提取蛆虫分泌物,用糜蛋白酶抑制剂VR23、丝氨酸蛋白酶抑制剂（PMSF）预处理,将未处理的蛆虫分泌物、与抑制剂预处理后的蛆虫分泌物、PBS分别加入小鼠前成骨细胞细胞系MC 3T3-E1进行培养,24、48、72 h后,以蛋白免疫印迹法检测纤连蛋白含量,以CCK-8法检测细胞活性。与金黄色葡萄球菌共培养后,通过细菌涂板计数及免疫荧光法检测胞内菌数量。实验数据采用SPSS 25.0软件包进行统计学分析。结果：蛆虫分泌物可以降解纤连蛋白,不对细胞活性产生影响。细菌涂板计数可见,经蛆虫分泌物处理的小鼠前成骨细胞细胞系中,胞内菌含量较经糜蛋白酶抑制剂或丝氨酸蛋白酶抑制剂预处理的蛆虫分泌物处理的小鼠前成骨细胞细胞系中胞内菌含量低,而经PBS处理的小鼠前成骨细胞细胞系中胞内菌含量最高。免疫荧光法检测亦得到相似结果。结论：蛆虫分泌物可用于减少金黄色葡萄球菌对小鼠前成骨细胞细胞系的内化作用,为慢性难治性骨髓炎的治疗提供了新的思路。     

颌面部金黄色葡萄球菌感染合并败血症治疗体会

目的 分析金葡菌感染合并败血症的诊断和治疗方法。方法 对1例口腔颌面部甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)感染合并败血症患者，根据药敏检测采取组合药物治疗：采用去甲万古霉素、环丙沙星、利福平和万古霉素、磷霉素、SMZco两种组合。结果 万古霉素、磷霉素、SMZco组合获得满意的治疗效果。结论 口腔颌面部感染常规治疗不能有效控制并伴有高热等症状者必须高度警惕MRSA感染，及时行脓液和血液培养与药物敏感性检测是必须的。对确诊MRSA感染，首选万古霉素(或去甲万古霉素)治疗。     

不同流动剪切力对原代大鼠成骨细胞细胞骨架的调节作用

目的:从细胞水平探索细胞骨架在将机械应力刺激信号转导进入细胞中并产生应答反应的作用机制。方法:在建立力学刺激细胞培养系统的基础上，对体外分离培养的原代大鼠颅骨成骨细胞分别施加1．2或1．9N／m^2的流动剪切力，激光共聚焦显微镜下观察流动剪切力作用后成骨细胞细胞骨架的改变。结果:1．2N／m^2的流动剪切力作用1h后，受力细胞及其细胞突起沿流动方向一致被拉长。细胞中央微丝呈束状排列，荧光标记强度明显增强。去除剪切力继续培养24h后，细胞恢复无方向的排列，细胞脑浆微丝重新分布于细胞的周围。1．9N／m^2的流动剪切力作用1h后，受力细胞发生明显的皱缩，细胞脱落明显，脑浆微丝出现解聚消失现象。继续培养24h后，细胞形态及微丝无明显恢复。结论:细胞骨架是成骨细胞受到流动剪切力后的一个机械刺激感受体，成骨细胞受力后形态学的变化是细胞骨架应力纤维变化的结果。     

唇痈并发金黄色葡萄球菌败血症76例临床分析

唇痈并发金黄色葡萄球菌败血症７６例临床分析安徽省立医院口腔颌面外科叶茂昌，刘青，罗永祥，洪礼琳唇痈并发的金黄色葡萄球菌性败血症是一种感染严重的化脓性疾病，其发展迅速，病情危重，有较高的死亡率。我科自１９８０年～１９９２年共收治经血培养证实的患者７６例...     

大鼠牙槽骨成骨细胞对硝苯地平跨膜转运的实验研究

目的：研究成年大鼠牙槽骨成骨细胞对硝苯地平的跨膜转运，为人工种植体给药系统以及牙根管给药系统的设计提供实验依据。方法：将大鼠牙槽骨成骨细胞及MC3T3-E1细胞与含有药物（20ug／ml、100ug／ml的硝苯地平）的磷酸盐缓冲液（PBS）共同孵育1、3、5、10、15、20min后，收集各时间点细胞，用高效液相色谱法测定细胞内药物含量，考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。用细胞内药物含量与细胞蛋白的比值作为观察药物转运量的检测指标。结果：硝苯地平可以被成骨细胞及MC3T3-E1细胞转运至细胞内。（1）转运量与细胞种类有关。浓度相同时，成骨细胞在各时间点的转运量明显均大于MC3T3-E1细胞的转运量（P〈0．01）。（2）转运量与药物浓度有关。药物浓度增高，转运量越大（P〈0．05）。（3）转运量与时间有关。结论：大鼠牙槽骨来源成骨细胞及MC3T3-E1细胞可以跨膜转运硝苯地平。转运量与药物浓度、细胞种类、孵育时间有关。从而初步验证了人工种植牙全身给药系统的可行性。     

糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞体外特性的研究

目的：研究体外培养糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞生长分化的特性。方法：20只6周龄雌性SD大鼠随机平均分为2组，实验组腹腔注射四氧嘧啶（200mg／kg），对照组注射生理盐水。模型建立成功10d后，取下颌骨行成骨细胞培养。MTT法、PNPP法、考马斯亮蓝法、放射免疫法及钙结节茜素红染色检测细胞的增殖能力、蛋白校正ALP含量、骨钙素水平及矿化能力。结果：实验组2d、4d、6d MTT相对比值高于对照组（P〈0．05），3d、7d、14d、21d ALP含量低于对照组（P〈0．01），28d总骨钙素水平以及钙结节的数量及面积均低于对照组（P〈0．01）。结论：急性糖尿病早期促进体外培养大鼠下颌骨成骨细胞的增殖，抑制其基质成熟和矿化，可建成具有内在缺陷的成骨细胞模型。     

����̥��ɹ�ϸ��ԭ�����������о�

目的    探索一种纯度高、数量大、操作简便的大鼠原代成骨细胞培养方法,为后续的实验研究奠定基础。方法    2009年3—9月在中国科学院金属研究所生物实验室,选择出生24 h内的大鼠胎鼠4只,摘取颅骨,采用胰蛋白酶和Ⅰ型胶原酶交替消化分离成骨细胞并进行传代培养。相差显微镜下观察原代培养的成骨细胞形态;并采用碱性磷酸酶（ALP）染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色及茜素红染色对培养的细胞进行鉴定。结果    该方法培养出的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,ALP染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色及茜素红染色均表现为阳性。结论        酶交替消化法原代培养胎鼠成骨细胞,获得的成骨细胞纯度高、数量大,可作为一种相对可靠、有效的原代成骨细胞培养方法。     

Oral health promotion interventions on oral reservoirs of staphylococcus aureus: a systematic review

The oral cavity serves as a reservoir of Staphylococcus aureus for infection of the lower respiratory tract and cross-infection to other patients. This systematic review was designed to examine the effectiveness of oral health promotion interventions on this pathogen. The PubMed, ISI Web of Science, and Cochrane Library databases were searched for clinical trials assessing the effect of oral health promotion interventions on oral and oropharyngeal carriage of S. aureus. Oral health promotion interventions on oral reservoirs of S. aureus in both systemically healthy and medically compromised groups consisted of oral hygiene interventions only. There was a lack of evidence pertaining to the effectiveness of mechanical oral hygiene interventions against this pathogen. Chlorhexidine delivered in oral hygiene products such as mouthrinses, gels, and sprays appeared to have some utility against S. aureus, although some studies found equivocal effects. There was a dearth of studies investigating the efficacy of other chemical agents. Although many chemical agents contained in oral hygiene products have proven in vitro activity against S. aureus, their clinical effectiveness and potential role as adjuncts or alternative therapies to conventional treatment remain to be confirmed by further high-quality randomized controlled trials.     

低浓度雌二醇对骨质疏松大鼠颌骨成骨细胞增殖分化能力的影响

目的:研究低浓度雌二醇对骨质疏松大鼠颌骨成骨细胞增殖分化能力的影响.方法:选用3月龄健康未孕雌性SD (Sprague-Dawley)大鼠20只,随机分为卵巢切除术组(ovx组),假手术组(sham组).术后12w取ovx组双侧下颌骨,培养成骨细胞.采用低浓度雌二醇(10-10mol/L)干预成骨细胞3d后,检测碱性磷酸酶、骨钙素的表达、PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen)蛋白表达和增殖能力.结果:低浓度雌二醇明显促进了成骨细胞的增殖能力(MTT检测,雌二醇组:0.372±0.023;对照组:0.175±0.011)和PCNA蛋白表达(雌二醇组:0.495±0.023;对照组:0.176±0.012),增加了成骨细胞的碱性磷酸酶(雌二醇组:0.495±0.023;对照组:0.176±0.012)和骨钙素(雌二醇组:14.26±1.71;对照组:9.17±1.01).结论:低浓度雌二醇增加了骨质疏松大鼠颌骨成骨细胞的增殖分化能力,可用来颌骨骨质疏松症防治的探索研究.     

肿瘤坏死因子-α对大鼠成骨细胞生长影响的实验研究

目的通过观察肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对大鼠成骨细胞生长的影响,探讨TNF-α对成骨细胞的分子生物学调控作用。方法采用不同质量浓度TNF-α诱导大鼠成骨细胞,利用MTT法检测成骨细胞增殖的变化,利用4-硝基苯基磷酸二钠盐（PNPP）偶氮法检测成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）活性情况。结果大鼠成骨细胞增殖活性及ALP活性随TNF-α质量浓度的升高而降低,其中当TNF-α质量浓度大于50 ng/mL时,与对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论TNF-α对成骨细胞的增殖和分化均有抑制作用,当TNF-α质量浓度大于50 ng/mL时,这种抑制作用更明显。     

建模时间及糖浓度对糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞培养的影响

目的：探讨建模时间长短及不同糖浓度培养基对糖尿病大鼠下颌骨来源成骨细胞培养的影响为胰岛素经人工种植牙给药建立细胞模型。方法：链脲霉素诱导I型糖尿病大鼠模型，建模后10d及40d取其下颌骨，分别于葡萄糖含量为5．5mmol／L（低糖组）和25mmol／L（高糖组）的培养基中进行成骨细胞培养，观察细胞的形态及生长情况。细胞计数法检测生长增殖能力，碱性磷酸酶染色法、茜素红钙结节染色法分别检测分化及矿化能力。结果：细胞增殖能力由大到小依次为建模10d低糖组〉建模10d高糖组〉建模40d低糖组〉建模40d高糖组（p〈0．05），分化能力建模10d低糖组〉建模40d低糖组、建模10d高糖组及建模40d高糖组（p〈0．01）。建模10d低糖组可形成钙结节，其他组未能形成钙结节。结论：建模时间延长、高糖培养对糖尿病大鼠下颌骨来源成骨细胞的各项生物学活性指标均产生负面影响，其中建模时间主要抑制了细胞增殖，而高糖培养主要抑制了细胞的分化和矿化。