线状溶酶体和圆形溶酶体结构关系的电镜细胞化学观察

用酸性磷酸酶(acid phosphatase,AcP ase)的电镜细胞化学方法,在半簿切片(semithin sections)上观察到NIH小鼠肝细胞中含有AcP ase反应阳性的线状溶酶体和圆形或卵圆形溶酶体。前者可分为线状和膨大两部分。线状部分又可分支形成网络并与某些圆形或卵圆形溶酶体相连。结果表明该类细胞的细胞质可能存在着“溶酶体三维结构网络系统”。     

铈在溶酶体膜H~+-ATP酶电镜细胞化学中的应用

应用铈作捕捉剂的电镜细胞化学方法(简称铈法),对大鼠肝细胞溶酶体膜H~-ATP酶的活性进行了定位研究。用铈法的标准孵育液孵育肝组织切片时,酶的活性反应主要见于肝细胞的溶酶体膜和基质中;当加入NaF时,溶酶体基质内的反应被抑制;当加入N-乙基顺丁烯二酰亚胺(NEM)时,溶酶体膜上的反应被抑制;当同时加入NaF和NEM或不加底物时,溶酶体膜和基质内的反应均被抑制。     

超高压电镜脊髓腹角神经元的线状溶酶体的酶细胞化学观察

应用电镜酸性磷酸酶（ＡＣＰ）细胞化学技术显示大鼠脊髓腹角神经元的ＡＣＰ酶活性分布，并进行了超高压电子显微镜观察。酸性磷酸酶不仅存在于胞质内的圆球形溶酶体，还可见该酶阳性的线状溶酶体伸展或呈弯曲走行在胞质中，证明了脊髓腹角神经元存在线状溶酶体。     

标志酶的电镜细胞化学技术探讨

目的 探讨电镜标志酶细胞化学的技术关键及标准化操作.方法 用相同的操作步骤和方法,对新西兰兔肝组织及血液样品进行12种标志酶的超微细胞化学实验,于透射电镜下观察酶的活性定位和变化.结果 建立了一套统一和实用的酶细胞化学操作程序和方法,12种标志酶的活性反应产物准确定位于相应的细胞超微结构.结论 固定和孵育是关键性步骤,其中固定剂的浓度和固定时间以及孵育液的配制质量尤为重要.操作标准化有利于提高多种酶检测的成功率和实验结果的可重复性.     

悬浮细胞电镜酶细胞化学样品制备方法的改进

我们在研究腹水型S_(180)肿瘤细胞等细胞的酶电镜细胞化学过程中,在取材、酶染、包埋等方面取得一定的经验,这些经验可用于多种悬浮细胞酶电镜细胞化学样品制备,现介绍如下。 1.用1640培养液分别洗出S_(180)肿瘤细胞、腹腔中性粒细胞和腹腔巨噬细胞。 2.将上述细胞500r/min离心10min,弃上清,用2.5％戊二醛固定。 3.二甲胂酸钠缓冲液水洗(500r/min)2次,弃上清,分别加入各种孵育液,37℃温育,     

超高压电镜小脑浦氏细胞线状溶酶体的观察

应用电镜ACP酶细胞化学技术,显示小脑浦肯野氏细胞线状溶酶体,进行了超高压电镜的观察。结果表明:小脑浦肯野氏细胞存在线状溶酶体。为进一步探讨中枢神经细胞线状溶酶体的功能提供超微结构的理论依据。     

硕士研究生开设电镜酶细胞化学技术课初探

电镜酶细胞化学技术是研究细胞内各种酶在超微结构水平上的分布情况,以及这些酶在细胞活动过程中变化情况的一种科研手段。本院解剖组胚教研室率先在中医院校为硕士研究生开设电镜酶细胞化学技术课程。对课程的教学动因、保证、方法及目标进行了归纳总结     

人胃粘膜细胞器标志酶电镜细胞化学研究

应用电镜酶细胞化学方法对15例人体正常胃粘膜细胞碱性磷酸酶(AlP)、酸性磷酸酶(AcP)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、焦磷酸硫胺素酶(TPPase)及细胞色素氧化酶(CCO)进行了超微结构水平的研究,并与光镜结果进行了对比观察。发现正常胃粘膜上皮细胞无AlP反应;AcP仅见于主细胞的胞溶酶体及分泌溶酶体内;TPPase定位于胃粘膜表面上皮细胞及主细胞高尔基体反面第1～3层膜囊、GERL及少数内质网中;G6Pase和CCO见于所有胃粘膜上皮细胞内,但G6Pase反应以主细胞显著,CCO反应以壁细胞显著,与其细胞功能相一致。作者认为电镜酶细胞化学研究能更真实地反映出细胞的功能活动和代谢状态。     

硕士研究生开设电镜酶细胞化学技术课初探

电镜酶细胞化学技术是研究细胞内各种酶在超微结构水平上的分布情况，以及这些酶在细胞活动过程中变化情况的一种科研手段。本院解部组胚教研室率先在中医院校为硕士研究生开设电镜酶细胞化学技术课程。对课程的教学动因、保证、方法及目标连行了归纳总结。     

胃粘液腺癌分泌细胞器电镜酶细胞化学研究

利用酶细胞化学方法对胃粘液腺癌细胞葡萄糖-6-磷酸酶(G6-Pase)焦磷酸硫胺素酶(TPPase)和酸性磷酸酶(AcP)进行了光、电镜 水平的定位观察。作者发现胃粘液腺癌G6Pase、TPPase反应较弱,AcP反应多明显增强;电镜下呈弱G6Pase反应的内质网常被挤至细胞周边部或夹于粘液颗粒之间,呈“点彩”状;TPPase反应除见于高尔基体扁平膜囊外,还见于一些未成熟分泌颗粒内,提示分泌颗粒的加工和分泌加速;癌细胞溶酶体数量增加,泌噬作用活跃,AcP反应明显.作者认为胃粘液腺癌分泌功能异常活跃与其畸形分化过程有关;溶酶体的大量增加为其易于转移提供了必要的形态学基础。     

显示电镜酶细胞化学技术的几点体会

电镜酶细胞化学是正在发展中的技术,至今只有近30年的历史。由于酶细胞化学的技术比较复杂,影响因素较多,方法也不够稳定,所以迄今在全国电镜室均未普遍开展。近几年来随着科学技术的发展,特别在生物医学中人们正注意把传统的形态描述与功能相结合起来的要求越来越引起人们的关注,并且有一些方法已开始在临床诊断和研究中使用。作者自1984年则开始探索超微结构细胞化学实验工作,并付之应用。如我们对AKP(碱性磷酸酶)、5′-Nase(5′-核苷酸酶)、MPO(髓过氧化物酶)、ATPase     

H~+-ATP酶定位的电镜细胞化学观察

目的用电子显微镜细胞化学方法观察H+-ATP酶在细胞器中的位置。H+-ATP酶不仅定位在溶酶体膜,而且定位在Wistar大鼠近曲小管上皮细胞的细胞膜、核膜上。上述结果表明用电镜细胞化学方法以形态学表现形式证实H+-ATP酶定位在细胞内膜相结构的学说。     

小鼠肾上腺皮质细胞溶酶体细胞化学的电镜观察

本文用细胞化学方法对小鼠肾上腺皮质细胞溶酶体酸性磷酸酶(AcPase)反应进行了超微结构观察,讨论了初级溶酶体与次级溶酶体,次级溶酶体与脂滴及脂褐素的关系.     

人心房肌细胞特殊颗粒的电镜酶细胞化学和免疫电镜研究

本研究应用电镜CMP酶细胞化学和心钠素免疫电镜胶体金,分别标记人心房肌细胞中初级溶酶体和心钠素,进行鉴别定位观察和定量分析。心钠素颗粒数量居多,占78.7～79.3％,大小均一,直径0.20±0.05μm(x±s),分布于整个细胞质内,多成簇,尤以肌膜下,核极区多见。而溶酶体大小不一,直径0.30±0.19μm(x±s),显著大于心钠素颗粒(P<0.001),一般在核极区成簇分布,也见肌原纤维之间和肌膜下单个散在分布。     

鼠肝细胞溶酶体膜中性pH p-对硝基苯磷酸酶的电镜细胞化学研究

用电镜细胞化学方法研究了大白鼠肝细胞溶酶体膜的中性pHp—对硝基苯磷酸酶(p-nltrophenyl phosphatase)(p-NPPase)的活性。切片用野田等人报告的原法反应时,溶酶体膜和基质均有酶的活性。加入酸性磷酸酶(AcPase)的抑制剂氟化钠(NaF)后,基质的酶活性被抑制,膜上的则不受影响。相反,当孵育液中含有4,4′-diisothiocyanostilbene-2.2′-disulfonic acid,disodium salt(DIDS)或N—乙基顺丁稀二酰亚胺(N-ethylmaleimide)(NEM)时,溶酶体膜上的酶反应被抑制而基质反应不受影响。如将氟化钠或DIDS或氟化钠和N—乙基顺丁烯二酰亚胺同时加到孵育液中,则膜和基质的反应都消失。这些结果表明溶酶体膜上中性范围的p—NPPase活性可能代表了H~+—ATPase活性。     

微波照射对SDH酶细胞化学影响的电镜观察

微波照射对ＳＤＨ酶细胞化学影响的电镜观察在电镜标本制作中，微波固定具有独到的优点，但微波固定对ＳＤＨ酶的活性是否有影响还未见报道。本文探讨了微波固定对ＳＤＨ酶活性和细胞超微结构的影响。成年小鼠断头处死，取肝组织切成１ｍｍ￣３，小块，浸入冷ＰＢＳ中。对...