乙型肝炎病毒特异性转移因子制备方法的改进

[目的 ]进一步探索羊脾乙型肝炎病毒特异性转移因子的制备方法 ,以制备出更高效的乙型肝炎病毒特异性转移因子 .[方法 ]用乙型肝炎疫苗辅以佐剂对羊进行全程免疫 ,然后从羊脾中提取乙型肝炎病毒特异性转移因子 ,通过研究不同的冻融次数及透析液量等因素 ,观察其对乙型肝炎病毒特异性转移因子含量的影响 .[结果 ]乙型肝炎病毒特异性转移因子的制备质量与免疫佐剂加入与否、制备时冻融次数及透析液量有关系 .[结论 ]用改良的制备方法可获得更高质量的乙型肝炎病毒特异性转移因子 .     

乙型肝炎病毒免疫肽的活性测定

[目的 ]研究乙型肝炎病毒免疫肽免疫活性的测定方法 .[方法 ]小鼠脾淋巴细胞经乙型肝炎病毒免疫肽在体外致敏后 ,使它与HBsAg接触而产生白细胞黏附抑制反应 .[结果 ]乙型肝炎病毒免疫肽对白细胞的黏附抑制作用与转移因子相比较显著增强 ,非黏附抑制指数达 82 % [结论 ]白细胞黏附抑制试验可作为一种检测乙型肝炎病毒免疫肽的特异性免疫活性的实用方法 .     

鸡卵黄乙型肝炎特异性转移因子口服液的制备及其免疫活性鉴定

目的制备鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子（EYHBV-STF）口服液,并鉴定其活性,探索一种新型、有效治疗乙肝的免疫调
节剂。方法采用乙肝疫苗免疫母鸡,从卵黄中提取乙型肝炎病毒特异转移因子（HBV-STF）,进行理化特性等检测。采用白细
胞粘附抑制试验检测转移因子的免疫活性,将其制成口服液,经小鼠灌胃后,迟发型皮肤超敏反应试验鉴定其体内特异性细胞
免疫活性,免疫脏器指数鉴定其非特异性免疫活性。同时分别与经注射或口服途径的EYHBV-STF组、传统方法制备的猪脾乙
肝特异性转移因子组、猪脾非特异性转移因子组及未经免疫的鸡卵黄提取液组进行比较。结果EYHBV-STF口服液各项理化
特性及安全实验指标符合TF生物制品标准,体外实验能明显抑制正常小鼠白细胞黏附,体内实验能显著增强小鼠足垫肿胀度
反应,提示该制品可将供体的乙肝抗原特异性皮肤迟发型超敏反应转移给受体,并能够显著提高免疫脏器指数（P<0.01）,与注
射EYHBV-STF、传统方法制备的注射、口服PHBV-STF 对照组比较,各项实验指标结果相近（P>0.05）。结论口服
EYHBV-STF与注射途径同样具有依赖乙肝抗原的特异性细胞免疫活性,可明显增强正常小鼠特异性细胞免疫功能。
     

乙型肝炎特异性转移因子的研制及临床应用

用乙型肝炎疫苗免疫山羊,待其产生免疫后,放血取脾制备乙型肝炎特异性转移因子(GS-TFhbv)。产品经过鉴定,质量符合全国第一届TF会议制定的人TF制检规程要求。对112例慢性乙型病毒性肝炎病人和40例对照组进行临床治疗观察,证实GS-TFhbv治疗组在细胞免疫功能改善、HBsAg、HBeAg的阴转率及抗-HBe阳转率、甲皱微循环的改善及转归上优于对照组。     

卵巢癌特异性转移因子的制备与鉴定

目的：为了卵巢癌手术后免疫治疗的需要,我们用透析法从用癌组织免疫的山羊脾及淋巴结制备了卵巢癌特异性转移因子（ＳＴＦ）。方法：按中国药典及白细胞粘附抑制试验（ＭＴＴ法）对ＳＴＦ的理化性质和免疫学性质进行了检测和鉴定。结果：所制备的卵巢癌ＳＴＦ符合转移因子质量具有对卵巢癌细胞抗原的特异性。在１５例卵巢癌病人的临床应用中,未发现任何毒副反应。结论：用该法制备的卵巢癌ＳＴＰ,可以安全地应用于卵巢的癌的免疫     

HBsAg转移因子对慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖反应的影响

应用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）免疫山羊，取其脾脏及淋巴结经匀浆透析法制备ＨＢｓＡｇ特异性转移因子（ＨＢｓＡｇ－ＳＴＦ）。在体外观察了其对外周血淋巴细胞增殖反应的影响。结果显示：慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖率明显低于正常人。ＨＢｓＡｇ－ＳＴＦ可明显促进患者外周血淋巴细胞的增殖反应，而正常转移因子（ＮＴＦ）对其作用则不明显。提示：慢性乙型肝炎患者的细胞免疫处于抑制状态。特异性转移因子可解除或缓解这种抑制状态。     

重症肌无力特异性免疫吸附剂的制备及对患者血清的动态吸附实验

[目的]制备对重症肌无力致病性抗乙酰胆碱受体抗体具有特异性吸附作用的免疫吸附剂.[方法]采用悬浮再生法合成纤维素,以环氧氯丙烷对其进行活化,将人工合成的人乙酰胆碱受体α亚单位67-76位氨基酸为配基,固定于环氧氯丙烷活化后的球型纤维素上,制备出重症肌无力特异性免疫吸附剂,并与乙酰胆碱受体抗体阳性患者的血清进行动态吸附实验,应用酶联免疫吸附法检测反应前后抗体的吸光度,计算抗体吸附率.[结果]以球型纤维素为载体及多肽为配基制备的免疫吸附剂在血清动态吸附实验中对血清中致病性乙酰胆碱受体抗体的吸附率随吸附时间延长而上升,并在吸附开始后2 h时达到高峰,吸附率为26.59%.[结论]以球型纤维素为载体及多肽为配基制备的免疫吸附剂与致病性乙酰胆碱受体抗体吸附性较好,是治疗重症肌无力较理想的免疫吸附剂.     

STF的贮存条件与其活性的关系

特异性转移因子（SpecificTransferFactor,STF）是抗原致敏的人或动物淋巴细胞的可透析物,具有增强和调节细胞免疫功能的作用。本室曾有MIT、MTT—比色法对胃癌STF进行活性检测,具有增强动物细胞免疫功能的作用,并显示抗原特异活性。[1]。既往人们认为转移因子须采用4℃以下保存,方可保持其免疫活性。本实验用MTT—比色法测其在不同温度贮存下的STF的免疫活性,探讨温度与STF的稳定性关系。1材料和方法1.1特异性转移因子的处理胃癌特异性转移因子为本室自制,批号92（kil,规定紫外线吸收最高峰（251urn）8．0ABS为一个单位…     

血吸虫病特异性免疫核糖核酸的研究——Ⅰ.提取与体外传递免疫的初步观察

近年来血吸虫病的免疫研究有很大进展,国内外均有报道晚期血吸虫病的细胞免疫功能低下,因之设法提高患者的细胞免疫功能将是有益的,对此已有使用转移因子而收益。iRNA能提高机体的免疫功能,而无转移因子的种间限制,已用于肿瘤与乙型肝炎等的治疗。本文报道从血吸虫病巨脾患者的脾脏中,提取血吸虫病特异性免疫RNA(S-iRNA);用白细胞粘附抑制(LAI)试验,测定其活性并观察其对正常人和晚期血吸虫病患者的白细胞传递免疫现象。材料与方法     

Epstein-Barr病毒LMP1 DNA免疫小鼠免疫效果的测定

[目的]探讨EBV-LMP1重组体DNA免疫小鼠后的免疫效果.[方法]将已构建的EBVLMP1基因(EBVLMP1)重组质粒pcDNA3-BLMP1肌肉注射免疫Balb/c小鼠,在免疫后的不同时间分别用ELISA、流式细胞仪及LDH法检测免疫小鼠体内特异性EBVLMP1抗体滴度、CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的数量变化以及EBVLMP1特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的活性.用pcDNA3质粒及PBS作为阴性对照及空白对照.[结果]重组质粒免疫Balb/c小鼠后,可在外周血液血清中检测到特异性的EBVLMP1抗体;其脾细胞中CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群数量明显高于阴性对照及空白对照,且可检测到EBVLMP1特异性的CTL存在.以上结果在免疫16周之内无明显改变.[结论]EBV-LMP1质粒重组体可刺激小鼠产生特异性的体液和细胞免疫,并且可维持一定的时间,具有较好的免疫原性,是一种有效、制备方便的EBV候选疫苗.     

慢性HBV感染者特异性细胞毒性T淋巴细胞及HLA-A2的变化研究

目的：探讨慢性HBV感染者特异性细胞毒性T淋巴细胞（specific cytotoxic T lymphocyte,CTL）及人类白细胞抗原一A2（human leucocyte antigen-A2,HLA-A2）的变化。并分析CTL与血清丙氨酸氨基转移酶（alanineaminotransferase,ALT）水平和病毒载量的关系,以了解慢性HBV感染者特异性细胞免疫功能的状态。方法：采用HLA-A2限制的HBVcore18-27抗原表位肽五聚体（MHC Pentamersl法结合流式细胞技术,分析CHB组慢性乙型肝炎46例、LC组乙型肝炎肝硬化29例和NC组23例正常对照健康体检者,外周血HBV特异性CTL及HLA-A2的变化,并分析CTL与ATL水平和病毒载量的关系。结果：CHB组、LC组HLA-A2检出率均明显高于NC组;ALT水平和病毒载量与HBV特异性的CTL有一定的关系。结论：采用HLA-A2限制的HBVcore18-27抗原表位肽五聚体（MHCPentamers）法结合流式细胞技术可以检测到低水平的HBV特异性CTL;HLA-A2是乙型肝炎肝硬化的易感基因之一;ALT水平和病毒载量与HBV特异性CTL有一定的关系。     

南通市乙肝疫苗接种后免疫应答影响因素分析

目的:探讨乙肝疫苗接种人群免疫应答状况和保护性抗体衰减影响因素。方法:采用多阶段分层随机抽样的方法,对全市1~59岁人群共3 630例进行乙肝血清流行病学问卷调查,并用酶联免疫吸附试验检测HBsAg、抗-HBs和抗-HBc。结果:检测3 619例,抗-HBs阴性者1 996例(55.15%)。多因素非条件Logistic回归模型提示,年龄、性别、免疫次数和免疫年限与乙肝疫苗免疫应答的效果存在密切联系。结论:乙肝疫苗接种后免疫应答随着时间的推延呈现削减状态,推行乙肝疫苗的加强免疫策略和成人的补种工作应该是今后乙肝防治工作的重点。     

乙型肝炎特异性转移因子的研究

我们用纯化的人乙肝疫苗免疫健康成猪制备含有特异性转移因子(HBV-TF)的白细胞透析物(DLE)。HBV-TF是与TF-p非常相似的化学制剂,都具有无毒性。HPLC法分析结果发现,HBV特异TF的第6峰偏高,充分证实经免疫后的猪细胞中TF活性有增高趋势,HBV-TF对PHA诱导的人淋巴细胞增殖的影响看出,HBV-TF具有依赖抗原的特异性活性,在7例HBsAg阳性的乙肝患者的周围血淋巴细胞中加入HBV-TF,对淋转表现出抑制作用。制剂的注射结果说明,HBV-TF注射组的小鼠抗乙肝特异性抗体显著增长,HBV-TF可特异地转移免疫信息给纯种鼠,而TTH-TF则无此作用。实验提示,抗体的产生是多细胞的行为,HBV-TF不仅可增强受者的细胞的免疫应答,亦可增强与调节特异抗体的产生。我们对97例乙肝HBsAg慢性携带者、慢迁肝、慢活肝进行实验性治疗观察,用HBV-TF配合中药齐墩果酸片不仅能改善机体临床症状和体征,亦能改善机体免疫状态,降低乙肝传染性指标,使HBeAg阴转率达53.3％～56％。     

乙型肝炎不同感染阶段HBV-DNA载量与病程的关系

目的　探讨乙型肝炎患者不同感染阶段HBV DNA的载量及与病程的关系。方法　用时间分辨荧光免疫分析系统和适时荧光定量PCR(FQ PCR)方法同时检测 2 99例不同感染阶段的乙型肝炎患者血清中HBeAg及HBV DNA的含量。 结果　不同病程阶段HBV DNA载量和HBeAg的含量是不同的 ,二者呈显著正相关 ,急性乙型肝炎的HBV DNA的载量与慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化比较有统计学意义 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。在乙型肝炎血清免疫标志物的不同模式中 ,HBeAg阳性 /ALT异常组中HBV DNA的载量最高 ,HBeAg消失的乙型肝炎患者血清中HBV DNA的载量显著降低 ,但未发现HBeAg消失时HBV DNA载量的阈值 ;HBeAg阳性组、HBeAg阳性 /HBeAb阳性组、HBeAb阳性组的HBV DNA载量均有明显差异 ,且与HBeAg的含量呈显著正相关。结论　HBV DNA的载量和HBeAg的含量不仅是乙型肝炎病毒复制的直观依据 ,也是激发机体免疫反应而引起肝脏损伤的重要原因之一 ,而且对乙型肝炎的早期诊断、传染性的判断及抗病毒治疗方案的制定、药物的筛选及药物的疗效考核等均具有重要的价值。     

乙肝核酸疫苗pCI/S2S接种小鼠后的免疫应答研究

目的 构建乙肝核酸疫苗pCI/S2S,研究其接种小鼠后,接种局部肌肉特异性抗原蛋白的表达以及所诱生的免疫应答反应.方法 从慢性乙肝患者的混合血清中制备HBV DNA模板,扩增出基因片段S2S,与pCI载体进行连接,得到重组质粒pCI/S2S.将其肌肉注射接种BALB/c小鼠,在不同的时间点检测血清中抗-HBs及抗-preS2;并于第12周时用细胞毒性检测试剂盒(LDH)检测体外细胞毒性T细胞(CTL)活性,同时以免疫组织化学法检测小鼠接种部位HBsAg的表达.结果 小鼠肌肉接种pCI/S2S完成后1周血清抗-HBs、抗-preS2开始阳转,阳转率于6周或8周达高峰,且能诱生特异性CTL应答.此外,免疫组织化学法能在小鼠的接种局部肌细胞中检测出目的抗原蛋白的表达.结论 乙肝核酸疫苗pCI/S2S接种小鼠后,能在小鼠体内诱生特异性的体液免疫和细胞免疫应答.     

Hepatitis B: update on perinatal management. Infectious Diseases and Immunization Committee, Canadian Paediatric Society.

Infants of women infected with hepatitis B virus (HBV) are at risk of acquiring hepatitis B, usually at the time of delivery but occasionally in utero or after delivery. Perinatally acquired HBV infections are noteworthy for their tendency to persist throughout life, predisposing victims to cirrhosis and hepatocellular carcinoma. In most instances perinatal infection can be prevented by combined passive-active immunization of infants at risk. It is recommended that attempts be made to identify pregnant women infected with HBV and that their infants be given hepatitis B immune globulin soon after birth, then be actively immunized with HBV vaccine. This approach is effective and safe and is subsidized in many provinces.     

主动免疫联合清肝片治疗慢性乙肝病毒携带者

目的观察抗HBV特异性主动免疫疗法联合清肝片治疗慢性乙型肝炎病毒（HBV）携带者的疗效。方法将慢性HBV携带者80例,分成治疗组和对照组各40例,对照组常规只用清肝片口服治疗;治疗组在此基础上加用抗HBV特异性主动免疫疗法治疗,疗程为12个月,治疗结束后随访6个月。结果治疗组HBsAg、HBeAg、HBVDNA阴转率及HBVDNA下降率明显优于对照组,两组比较均示有显著性差异。结论抗HBV特异性主动免疫联合清肝片治疗慢性HBV携带者具有简单、易行、廉价及无副作用、疗效较满意等特点,是解决慢性HBV携带者可以选择的良好途径。