人食管癌顺铂耐药细胞系DNA聚合酶β的表达

目的:建立人食管癌顺铂(cDDP)耐药细胞系,测定耐药细胞系DNA聚合酶β(polβ)的表达。方法:以临床食管磷癌化疗用药的最低剂量换算终浓度,采用cDDP(10mg/L)反复间歇 24h暴露法作用于食管癌细胞系ECa -109,建立cDDP耐药细胞系ECa 109 /cDDP;MTT法测定药物敏感性,倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞的周期分布,Westernblot测定细胞内DNApolβ表达水平。结果:与ECa- 109细胞比较,ECa -109 /cD DP细胞形态发生了改变,对cDDP的耐药指数为 1. 56;细胞周期发生了变化,S期细胞增多,G0 /G1 期细胞减少,细胞内DNApolβ表达水平增高(P<0. 05或 0. 01)。结论:ECa-109 /cDDP具有耐药表型,其耐药性产生可能与细胞内DNApolβ表达增高有关。     

叉头蛋白3对肺腺癌细胞增殖和化疗药物顺铂敏感性的影响

目的：观察叉头蛋白3（FOXP3）在人肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞增殖和顺铂敏感性的影响,阐明肺腺癌细胞对顺铂耐药的相关机制。方法：收集肺腺癌患者术后石蜡标本50例和正常肺组织10例。免疫组织化学染色方法检测肺腺癌组织和正常肺组织中FOXP3和Ki-67的表达,分析肺腺癌组织和正常肺组织中FOXP3阳性表达率的差异,Pearson相关分析法分析FOXP3和Ki-67表达的相关性。选取对数生长期的人肺腺癌A549细胞进行siRNA转染,将A549细胞分为Mock组（转染脂质体）、Control-siRNA组（转染Control-siRNA）和FOXP3-siRNA组（转染FOXP3-siRNA）。RT-qPCR法检测各组A549细胞中FOXP3 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组A549细胞中FOXP3蛋白表达水平,CCK-8法检测各组A549细胞增殖活性及不同浓度（0、0.63、1.25、2.50和5.00mg·L^-1）顺铂作用后各组A549细胞生长抑制率,RT-qPCR和Western blotting法检测顺铂作用后各组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平。结果：FOXP3在肺腺癌和正常肺组织的阳性表达率分别为62.0%和13.3%,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;FOXP3和Ki-67在肺腺癌组织中表达呈正相关关系（r=0.370,P<0.01）;FOXP3-siRNA组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均明显低于Mock组和Control-siRNA组（P<0.01）;顺铂作用48和72 h后,FOXP3-siRNA组A549细胞增殖活性明显低于Mock组和Control-siRNA组（P<0.05）;1.25、2.50和5.00 mg·L^-1顺铂作用后,FOXP3-siRNA组A549细胞生长抑制率均高于Mock组和Control-siRNA组（P<0.05）;1.25和2.50 mg·L^-1顺铂组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均明显高于0 mg·L^-1顺铂组（P<0.05）。结论：沉默FOXP3可抑制肺腺癌细胞的增殖,增加肺腺癌细胞对顺铂的敏感性。     

沉默MSH3表达增强舌癌细胞对顺铂的敏感性

目的设计靶向DNA错配修复基因MSH3的siRNA干扰片段,观察MSH3有效沉默对舌癌细胞顺铂耐药性的影响。方 法针对MSH3基因CDS区序列,设计3条siRNA片段,体外化学合成小干扰RNA（siRNA）片段,通过脂质体介导转染人舌癌细 胞CAL27。Real-time PCR及Western 检测干扰后MSH3 的表达。MTS,凋亡双染法及细胞免疫荧光检测顺铂处理后细胞存 活、凋亡及DNA双链断裂的情况。结果3 条siRNA 片段转染细胞后,与对照组相比,3 号siRNA 片段转染后能显著降低 MSH3 mRNA及蛋白质表达水平,该片段被选为后续实验。MSH3表达下调后,顺铂的半数抑制浓度（IC50值）分别由21.32降 至13.95 μmol/L（P<0.05）,凋亡指数分别由4.23±1.27升至11.32±1.82（P<0.05）,舌癌细胞中γ-H2AX焦簇（Foci）的数量显著增 加。结论MSH3表达下调可以明显增加舌癌细胞对顺铂的敏感性,减少DNA双链断裂修复是其主要机制之一。     

miRNA-138 调控卵巢上皮癌细胞对顺铂敏感性的机制研究

目的 探讨miRNA-138 和沉默信息调节因子2 相关酶1（SIRT1）的差异表达对卵巢上皮癌顺铂化疗敏感性的影响。方法 选取2014 年1 月-2017 年1 月在牡丹江医学院红旗医院妇科就诊卵巢上皮癌患者80 例。根据患者对顺铂化疗的敏感性分为顺铂敏感组和顺铂耐药组。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot 检测卵巢上皮癌组织中miRNA-138 和SIRT1 的表达水平;培养SKOV3 细 胞, 分别转染miRNA-138 的类似物（miRNA-138 mimic） 和抑制物（miRNA-138 inhibitor） 后,qRTPCR检测SIRT1 miRNA 的表达变化,并采用MTT 法检测细胞对顺铂的敏感性;SIRT1 miRNA 3''-UTR 野生型（wt）和突变型（mut）萤光素酶报告质粒与miRNA-138 mimic 共转染,双荧光素酶报告系统分析荧光素酶活性。结果 铂敏感组miRNA-138 表达水平高于顺铂耐药组,而SIRT1 表达水平低于顺铂耐药组,差异有统计学意义（P <0.05）;过表达miRNA-138 可降低SIRT1 的表达,提高SKOV3 细胞对顺铂的敏感性,而抑制miRNA-138 可提高SIRT1 的表达,降低SKOV3 细胞对顺铂的敏感性,差异有统计学意义（P <0.05）;miRNA-138 mimic 与SIRT1 miRNA 3''-UTR 野生型质粒共转染,荧光素酶活性降低（P <0.05）,而与SIRT1 miRNA 3''-UTR 突变型质粒共转染,荧光素酶活性无变化（P >0.05）。结论 miRNA-138 可能通过SIRT1 调控卵巢上皮癌细胞对顺铂的敏感性,可作为卵巢上皮癌顺铂化疗耐药治疗的靶点。     

锌指蛋白217表达与卵巢癌组织顺铂化疗敏感性的关系

目的 探讨锌指蛋白217(ZNF217)的表达与卵巢癌组织顺铂化疗敏感性的关系.方法 采集新鲜卵巢癌手术标本60例.将卵巢癌组织制成癌细胞悬液,ATP法检测顺铂化疗敏感性;将卵巢癌组织制成石蜡切片,用于ZNF217蛋白免疫组织化学染色.结果 ATP法检测顺铂化疗敏感性显示,在60例卵巢癌组织中,对顺铂耐药、部分敏感和高度敏感的例数分别为14、29和17例.耐药、部分敏感和高度敏感的卵巢癌组织均有不同程度的ZNF217蛋白的表达,三者的差异有统计学意义(χ2=9.211,P=0.010),而且ZNF217蛋白表达与卵巢癌的顺铂化疗敏感性呈负相关(r=-0.394,P=0.002).结论 卵巢癌组织ZNF217蛋白高表达可能是导致其顺铂化疗耐药的原因之一.     

ERCC1表达与肺癌顺铂化疗敏感性的关系

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织内错配切除交叉互补修复酶1(ERCC1)表达与顺铂化疔敏感性的相关性.方法 选择天津胸科医院就诊临床病理资料完整的NSCLC患者168例,以免疫组化及RT-PCR方法检测肿瘤组织中ERCC1蛋白及mRNA表达.结果 在168例NSCLC患者中,ERCC1表达呈阳性者99例(5 8.93%).ERCC1表达与患者性别、年龄、分期及病理类型无关.在随访的133例NSCLC患者中,显效者91例,其中3例Ⅰa～Ⅰb期患者术后未行化疗.在130例NSCLC患者中,ERCC1呈阳性表达者76例(58.46%).显效者88例,其中ERCC1呈阳性表达者38例(43.18%),阴性者50例(56.82%).而未显效者42例,ERCC1呈阳性表达者为37例(88.10%),阴性表达者仅为5例(11.90%).显效组与未显效组相比,ERCC1表达降低,经x2检验,差异有统计学意义(x2=23.50,P＜0.01).显效组ERCC1 mRNA表达量为(0.624±0.275),未显效组为(2.758±0.771),可见显效组ERCC1 mRNA表达较未显效组减低,差异有统计学意义(t=11.54,P=0.013).结论 ERCC1表达增强可能是NSCLC患者对以顺铂为基础的联合化疗不敏感的重要因素,可为临床制定NSCLC患者的个体化化疗方案提供了有益参考.     

紫杉醇联合顺铂化疗方案治疗晚期食道癌的临床疗效观察

目的:探讨紫杉醇联合顺铂化疗方案治疗晚期食道癌的临床疗效。方法:随机筛选我院2008-2011年收治的Ⅲ、Ⅳ期食管癌患者60例,按照患者化疗方式分化观察组(36例)及对照组(24例),观察组患者行紫杉醇联合顺铂化疗方案,对照组患者采用顺铂联合氟尿嘧啶化疗方案,比较两组患者的有效率及稳定率,化疗药物毒性反应及1、2年生存率。结果:观察组患者近期有效率及稳定率均高于对照组,两组患者比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者1、2年生存率明显高于对照组,两组患者比较差异明显,有统计学意义(P<0.05);两组患者在化疗药物毒性方面比较无明显差异(P>0.05)。结论:紫杉醇联合顺铂化疗方案治疗晚期食道癌,能提高食管癌近期疗效及远期生存率,不增加药物毒性反应。     

抑制热休克蛋白70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性

目的 探讨抑制宫颈癌Hela229细胞内热休克蛋白(HSP)70表达对顺铂(DDP)化疗敏感性的影响.方法 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)及集落克隆法测定各因素对Hela229细胞的抑制作用;溴化丙啶(PI)单染法及DAPI检测细胞的凋亡率;JC-1染色法测定线粒体膜电位(△Ψm)的变化;Western blotting测定相关蛋白的表达;建立裸鼠动物模型测定各因素体内的抑瘤作用.结果 宫颈癌细胞较正常宫颈细胞高表达HSP70;当HSP70抑制剂与顺铂合用,细胞的存活率较单用顺铂显著下降(P<0.01);PI与DAPI染色实验表明HSP70抑制剂能增加顺铂诱导的细胞凋亡率;JC-1染色结果显示,HSP70抑制剂处理后顺铂组细胞线粒体膜电位发生了明显的降低.Western blotting实验结果显示HSP70蛋白表达抑制剂与顺铂合用较单用顺铂显著增加促凋亡蛋Bax/caspase-3表达及caspase-3活化;明显降低抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达.裸鼠移植肿瘤模型结果表明HSP70抑制剂与顺铂合用能增强顺铂对模型小鼠肿瘤的抑制作用(P<0.01).结论 抑制HSP70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性,机制可能是通过抑制HSP70,进而调节凋亡相关蛋白的表达,促进宫颈癌细胞凋亡.HSP70有望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶点.     

miR-141-3p表达与卵巢癌细胞顺铂化疗敏感性的相关性研究

［摘要］ 目的 探讨miR-141-3p在卵巢癌细胞对顺铂耐药中的表达和作用。 方法 采用实时荧光定量PCR法检测A2780/DDP细胞中miR-141-3p的表达水平;下调/过表达miR-141-3p后,采用CCK-8法检测卵巢癌细胞对顺铂的增殖率并计算药物IC50;采用Western blot法检测增殖相关蛋白（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达水平。 结果 miR-141-3p在顺铂耐药的卵巢癌细胞株A2780/DDP中的表达显著高于顺铂敏感的卵巢癌细胞株A2780（P＜0.05）。与对照组比较,A2780细胞中过表达miR-141-3p后可显著增加细胞对顺铂的IC50,增殖相关蛋白PCNA表达亦增加（P＜0.05）。与对照组比较,A2780/DDP细胞中下调miR-141-3p表达后,细胞对顺铂的IC50显著下降,增殖相关蛋白PCNA表达下降（P＜0.05）。 结论 miR-141-3p在顺铂耐药卵巢癌细胞的耐药机制中表达增加,下调miR-141-3p可增加顺铂耐药的卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。     

过表达miR-218增强食管鳞状细胞癌对顺铂敏感性

目的 研究miR-218 在食管鳞癌细胞中对顺铂药物敏感性的影响.方法 采用递增药物浓度、间歇冲击作用的方法构建耐药细胞株;实时荧光定量PCR检测miR-218 在食管鳞癌细胞株Eca109 与顺铂耐药株Eca109-CisR差异性表达;进一步在顺铂耐药株Eca109-CisR中过表达miR-218:① CCK8实验检测细胞增殖;② 流式细胞仪检测细胞凋亡率;③ Western blot方法检测凋亡抑制蛋白Survivin、Mcl-1及Bcl-2的相对表达量.结果 miR-218在顺铂耐药株Eca109-CisR细胞中呈低表达;过表达 miR-218 增加顺铂耐药株Eca109-CisR对顺铂的药物敏感性;Western blot结果证实凋亡相关蛋白Survivin、Mcl-1 及 Bcl-2相对表达减少.结论 miR-218表达有助于增加食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性,且给对顺铂耐药的食管鳞癌患者提供潜在的基因治疗靶点.     

顺铂联合多西他赛治疗晚期食管癌临床疗效和安全性观察

目的探讨顺铂联合多西他赛治疗晚期食管癌临床疗效和安全性观察。方法选取湖南省常德市肿瘤医院2010年8月～2012年12月经诊断明确的晚期食管癌患者50例为研究对象,应用随机数字表法分为两组．对照组采用氟尿嘧啶加顺铂方案,观察组采用顺铂联合多西他赛治疗方案,观察两组患者临床治疗效果及相关毒副反应。结果观察组完全缓解3例（12％）,部分缓解12例（48％）,总有效率为60％;对照组完全缓解I例（4％）,部分缓解8例（32％）,总有效率为36％。观察组不良反应包括粒细胞减少5例（20％）,血小板减少4例（16％）,恶心、呕吐4例（16％）,发热2例（8％）,化疗相关死亡0例;对照组粒细胞减少8例（32％）;血小板减少6例（24％）,呕心、呕吐8例（32％）,发热6例（24％）,化疗相关死亡2例（8％）。两组患者临床疗效和药物毒副作用相比,差异有统计学意义（X^2=9．441,P〈0．05）。结论顺铂联合多西他赛治疗晚期食管癌疗效较好,安全高效,值得进一步推广应用。     

S100A、P53对宫颈癌行顺铂新辅助化疗患者疗效及敏感性评估

目的探讨S100A6、P53对宫颈癌行顺铂新辅助化疗患者的疗效及化疗敏感性评估价值。方法选取2017年1～12月我院收治的行顺铂新辅助化疗的宫颈癌患者70例,观察不同临床疗效患者的S100A6、P53表达情况。结果 70例患者中完全缓解(CR)8例,部分缓解(PR)51例,疾病稳定(SD)6例,疾病进展(PD)5例,化疗总有效率为84.29%(59/70);化疗前S100A6、P53阳性表达率为85.71%、61.43%,化疗后S100A6、P53阳性表达率为45.71%、84.29%,化疗后S100A6阳性表达率较化疗前明显降低(P0.05),P53阳性表达率较化疗前明显升高(P0.05);高敏感组S100A6、P53阳性表达率分别为27.12%、91.53%,低敏感组S100A6、P53阳性表达率分别为90.91%、45.45%,高敏感组S100A6阳性表达率明显低于低敏感组(P0.05),P53阳性表达率明显高于低敏感组(P0.05)。结论 S100A6、P53可作为宫颈癌患者行顺铂新辅助化疗效果和敏感性预测的标志物。     

香菇多糖联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的观察香菇多糖联合长春瑞滨(NVB)和顺铂(DDP)(NP方案)在治疗中晚期(Ⅱ～Ⅳ期)非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效和毒副反应。方法 86例中晚期NSCLC患者随机分为观察组即香菇多糖联合长春瑞滨和顺铂(NPL)组和对照组即长春瑞滨和顺铂(NP)组。NP组:长春瑞滨25 mg/m2,静脉滴注d1、8,顺铂20 mg/m2静脉滴注d1~4,21 d为1周期,每例治疗2~6周期;NPL组在NP组基础上将香菇多糖1mg加入5%葡萄糖250 ml中静脉滴注d1~8。比较两组患者近期疗效、生活质量变化、毒副反应等。结果两组疗效比较差异无统计学意义(P0.05),但观察组生存质量改善情况明显优于对照组,消化道及血液学Ⅲ+Ⅳ度毒副反应明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论香菇多糖联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌与单纯NP方案治疗相比疗效相近,但可明显改善生活质量和减轻化疗毒副反应。     

MUC4､MUC16在卵巢上皮癌细胞系SKOV-3､OVCAR-3､CAOV-3和组织中的表达及临床意义

目的 :研究MUC4、MUC16在卵巢上皮癌细胞系SKOV-3、OVAR-3、CAOV-3和卵巢上皮癌组织的表达及与临床病理特征关系。方法:1培养卵巢癌SKOV-3、OVAR-3、CAOV-3细胞系,行免疫细胞化学SABC法和Western blot观察MUC4、MUC16蛋白表达;2对临床卵巢癌组织采用免疫组织化学SP两步法检测正常卵巢组织和肿瘤组织中MUC4、MUC16表达与临床病理特征关系。结果:1经免疫细胞化学和Western blot研究发现MUC4在人卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3细胞中不表达,而在CAOV-3细胞中有表达;MUC16在人卵巢癌OVCAR-3细胞中表达量最高,其次是CAOV-3细胞,在SKOV-3细胞表达量最低;2在正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤中,MUC4和MUC16表达量均较低。但在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中,MUC4和MUC16表达非常明显;3 MUC4在卵巢浆液性和黏液性上皮癌中表达无差异(86.36%vs 75.00%),而MUC16在浆液性卵巢癌中阳性表达率(81.81%)明显高于黏液性卵巢癌(25.00%)(P<0.05)。MUC4在早期卵巢癌表达偏高,达91.67%,而MUC16在晚期卵巢癌表达(85.70%)明显高于早期(50.00%)。结论:不同卵巢癌细胞MUC4和MUC16表达不同;联合MUC4和MUC16的检测有助于卵巢癌的病理分型、临床诊断及预后的判断。     

卵巢癌患者血浆miRNA水平与顺铂化疗敏感性的相关性研究

目的探讨卵巢癌患者血浆miRNA分子标志物水平与铂类化疗敏感性的相关性。方法应用实时定量PCR方法检测48例卵巢癌患者化疗前后血浆中miRNA的表达,13例体检正常者为内参对照,观察卵巢癌患者铂类化疗药物的疗效及预后的关系。结果初检的11种miRNA中,仅有5种miRNA（miR-124,miR-145,miR-22,miR-106a,miR-142）能够在外周血中检测出。其中3种miRNA（miR-22,miR-106a,miR-142）在正常人和卵巢癌患者的外周血中表达水平比较差异有统计学意义（P＜0．01）。患者化疗后外周血中仅miR-22水平显著升高（约3．2倍）,且miR-22水平高者对化疗反应多数敏感,反之不敏感。患者外周血miR-22的表达水平与其预后呈正相关（P＜0．05）。结论血浆中miR-22,miR-106a,miR-142水平升高可能参与了卵巢癌的发生发展,化疗患者敏感者仅miR-22呈高表达,不敏感者miR-22呈低表达,提示其可作为预测化疗敏感性及预后的指标之一。     

lncRNA-miR210HG、SH3BGRL3表达在非小细胞肺癌患者中的临床意义

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)-miR210HG、SH3BGRL3表达在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的临床意义。 方法选取76例NSCLC患者,比较癌组织和癌旁组织中lncRNA-miR210HG和SH3BGRL3 mRNA阳性表达率,并将患者分为阳性组和阴性组。比较lncRNA-miR210HG、SH3BGRL3阳性和阴性表达与临床病理特征的关系。比较各组生存情况。结果癌组织中lncRNA-miR210HG、SH3BGRL3表达水平高于癌旁组织(P＜0.05)。lncRNA-miR210HG阳性表达者Ⅲ期占比、淋巴结转移占比高于阴性表达者；SH3BGRL3阳性表达者Ⅲ期占比、淋巴结转移占比、低中分化占比高于阴性表达者(P＜0.05)。lncRNA-miR210HG、SH3BGRL3阳性组总生存率均低于阴性组(P＜0.05)。 结论lncRNA-miR210HG、SH3BGRL3在NSCLC癌组织中高表达,不同表达水平者TNM分期、淋巴结转移、分化程度不同。     

Id_1与Id_3在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探索分化抑制因子(Inhibitors of differentiation,Id)Id_1 和 Id_3 在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化S-P法检测60例NSCLC、8例炎性假瘤、lO例肺结核、12例正常肺组织中Id1和Id3的表达情况.结果:在人NSCLC组织中,Id_1 和 Id_3 均过度表达,与正常肺组织及良性病变组织(结核和炎性假瘤)比较差异具有显著性(P0.05);在肿瘤有淋巴结转移组中表达的明显高于无淋巴结转移组,统计分析差异具有显著性(P<0.05).结论:Id_1、Id_3蛋白与NSCLC的发生发展及淋巴结转移有关,可能作为NSCLC诊断及判断预后的重要标志物.     

GP和EP化疗方案联合手术治疗对非小细胞肺癌患者临床疗效及免疫功能的影响

目的探讨GP和EP化疗方案联合手术治疗非小细胞肺癌患者的临床价值。方法选取2010年1月～2013年12月我院收治的非小细胞肺癌患者98例,采用随机数字表法分为研究组与对照组,各49例,研究组用GP化疗方案+手术,对照组用EP化疗方案+手术,分析治疗结果、免疫功能与生存率。结果研究组病灶完全缓解率、总缓解率、KPS评分、生存率、免疫功能优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 GP化疗方案(吉西他滨+顺铂)联合手术效果优于EP化疗方案(依托泊苷+顺铂),值得推广。     

拓扑替康与顺铂对bcl-2及fas在卵巢癌细胞系3AO及其耐药系3AO/cDDP表达的影响

目的:研究bcl鄄2及fas在体外培养的卵巢癌细胞系3AO及其耐药系3AO/cDDP的表达及化疗药物拓扑替康(topotecan熏TPT)与顺铂穴cisplatinum熏cDDP雪对两种基因表达的影响。方法:用人卵巢上皮癌细胞系3AO及其cDDP耐药细胞系3AO/cDDP进行体外培养实验,用流式细胞仪(flowcytometry熏FCM)检测两种细胞系在化疗药物顺铂(cDDP)与拓扑替康治疗前后的fas和bcl鄄2表达。结果:与3AO相比,fas与bcl鄄2在3AO/cDDP中的表达明显降低(P<0.01);cDDP和TPT可使fas在3AO中的表达明显升高(P<0.01),bcl鄄2明显降低(P<0.01);cDDP和TPT对fas表达影响较为显著(P<0.01)熏对bcl鄄2无显著影响(P>0.05)。结论:fas可能在卵巢癌的化疗耐药中起作用,但bcl鄄2的作用尚不明确;cDDP及TPT可能通过fas介导的细胞凋亡机制促进细胞死亡。     

肝癌细胞中EP3受体亚型表达及其调控肝癌细胞生长的研究

目的:研究肝癌细胞中EP3受体剪接体亚型的表达类型及其调控肝癌细胞生长的功能。方法:EP3受体激动剂Sulprostone处理肝癌细胞株观察其生长情况;二维电泳和质谱分析研究EP3受体激动与下游信号蛋白之间的关系;Real-TimePCR实验鉴定肝癌细胞株中EP3受体剪接体亚型的表达类型。结果:10μmol/L Sulprostone处理CCLP1细胞24 h后,细胞生长率上调了31.46%(P<0.01);给予CCLP1细胞10μmol/L Sulprostone处理24 h后,二维电泳和质谱实验的结果显示促进细胞增殖侵袭、与细胞代谢正相关的蛋白水平升高,降低细胞代谢速度、减慢细胞生长、抑制细胞侵袭转移的相关蛋白水平下降;Real-Time PCR实验检测肝癌细胞,结果表明肝细胞癌HUH-7、Hep3B、HepG2细胞及胆管细胞癌HuCCT1、CCLP1细胞表达EP3-4、EP3-5、EP3-6和EP3-7 4种剪接体亚型。结论:EP3受体通过上调促细胞生长代谢蛋白,下调抑制细胞生长代谢蛋白而发挥促进肝癌细胞增殖的作用。肝细胞癌HUH-7、Hep3B、HepG2细胞及胆管细胞癌HuCCT1、CCLP1细胞表达EP3-4、EP3-5、EP3-6和EP3-7 4种EP3受体剪接体亚型。