钙调神经磷酸酶CaN Aα和CaN Aβ在肺癌中的表达及意义

目的:检测钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)Aα和Aβ亚基蛋白在肺癌细胞中的表达,研究CaN蛋白亚基的表达与肺癌骨转移发生是否相关.方法:应用PCR和Western blot方法检测SBC-5、SBC-3和NCI-H345小细胞肺癌细胞中CaN Aα和Aβ在基因和蛋白水平上的表达;通过免疫组织化学方法检测肺癌骨转移和肺癌无骨转移患者肺癌组织中CaN Aα和Aβ的表达.结果:CaN Aα和Aβ的表达强度在能产生骨转移的肺癌细胞SBC-5中明显高于非骨转移肺癌细胞SBC-3和NCI-H345.在肺癌伴有骨转移患者的肺癌组织中CaN Aα和CaN Aβ的表达强度也都明显较无骨转移肺癌患者组高(CaN Aα P＝0.000;CaN Aβ P＝0.000). 结论:钙调神经磷酸酶不同亚基(CaN Aα和Aβ)的表达可能在肺癌骨转移的发生和发展中具有重要意义.     

血清中CaN和PTHrP测定在肺癌骨转移诊断和疗效判定中的意义

目的：探讨血清中钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）和甲状旁腺激素相关蛋白（parathyroid hormone-related protein,PTHrP）的测定对肺癌骨转移患者的诊断及临床疗效评价的意义。方法：应用ELISA法检测患者血清CaN和PTHrP浓度,并比较其浓度在肺癌骨转移未治疗患者,非骨转移患者及骨转移治疗患者中的差异。结果：骨转移未治疗组患者血清CaN和PTHrP水平均明显高于非骨转移组（P〈0.01）,并高于骨转移治疗组（P〈0.01）。结论：血清CaN和PTHrP的测定对肺癌患者骨转移的诊断及疗效评价可能具有重要意义。     

人钙调神经磷酸酶Aα RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的：构建人CaNAα（钙调神经磷酸酶催化亚基α异构体,calcineurin catalytic subunit alpha isoform）RNAi慢病毒载体PPP3CA-RNAi-LV并鉴定。方法：根据CaNAαmRNA选择靶区、设计合成shRNAs及无关对照序列,酶切连接pGCSIL-PUR载体,经测序鉴定阳性克隆,提取质粒、转染SBC-5细胞,经real-timePCR及Western blot检测CaNAα沉默水平;选择高沉默效率的pGCSIL-PUR-shRNA3进行慢病毒颗粒包装,浓缩纯化并滴定浓度后,-80℃保存备用。结果：与对照组相比,pGCSIL-PUR-shRNA3沉默效率最高,成功包装慢病毒颗粒,滴定浓度为1×109TU/ml。结论：成功构建人CaNAαRNAi慢病毒载体PPP3CA-RNAi-LV,为后续功能研究奠定基础。     

人钙调神经磷酸酶A αRNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的:构建人CaNAα（钙调神经磷酸酶催化亚基α异构体,calcineurin catalytic subunit alpha isoform）RNAi慢病毒载体PPP3CA-RNAi-LV并鉴定。方法:根据CaNAα mRNA选择靶区、设计合成shRNAs及无关对照序列,酶切连接pGCSIL-PUR载体,经测序鉴定阳性克隆,提取质粒、转染SBC-5细胞,经real-time PCR及Western blot检测CaNAα沉默水平;选择高沉默效率的pGCSIL-PUR-shRNA3进行慢病毒颗粒包装,浓缩纯化并滴定浓度后,-80℃保存备用。结果:与对照组相比,pGCSIL-PUR-shRNA3沉默效率最高,成功包装慢病毒颗粒,滴定浓度为1×109TU/ml。结论:成功构建人CaNAα RNAi慢病毒载体PPP3CA-RNAi-LV,为后续功能研究奠定基础。     

钙调神经磷酸酶A与B在乳腺癌组织中的表达

目的：检测钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）信号转导通路蛋白在乳腺癌组织中的表达,分析CaN成员与乳腺癌临床病理特征的关系。方法：应用Western印迹法检测55例乳腺癌组织及其邻近正常组织的CaNAα、CaN Aβ与CaNB蛋白表达,免疫组织化学法检测CaN在细胞水平的分布。结果：CaN Aα、CaN Aβ与CaNB在乳腺癌组织中表达明显升高,分别为正常乳腺组织的6.45、4.67与2.31倍（P〈0.05）;CaN Aα与CaN Aβ表达水平与TNM分期较晚（Ⅲ/Ⅳ）有关（P=0.05）。结论：CaN信号转导通路蛋白的持续活化可能在乳腺癌的发生中起重要作用。     

钙调神经磷酸酶Aα对不同骨转移潜能小细胞肺癌细胞株黏附作用的影响

目的:探讨CnAα在小细胞肺癌骨转移中对骨基质黏附作用的影响。方法:构建CnAα稳定高表达和低表达的小细胞肺癌细胞SBC-3和SBC-5细胞株;利用骨条技术对构建好的稳定表达细胞株的骨黏附能力强弱进行对比。结果:高骨转移潜能SBC-5细胞对骨组织的黏附能力强于非骨转移SBC-3细胞;上调CnAα的SBC-3细胞的黏附能力强于其亲本细胞SBC-3,而下调CnAα的SBC-5细胞的黏附能力低于其亲本SBC-5细胞。结论:CnAα可能是通过提高小细胞肺癌细胞对骨组织的黏附能力来促进肺癌骨转移。     

钙调蛋白磷酸酶B亚基靶向肝癌的研究

目的:基于小动物活体成像检测技术,探讨重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基(rhCNB)的肝癌靶向性。方法:采用肿瘤组织块法建立BALB/c裸小鼠荷人肝癌细胞SMMC-7721原位肝癌模型。原位肝癌模型建立第14天时,按荷瘤动物体重大小随机分为FITC标记的rhCNB(rhCNB-FITC)给药组和FITC对照组,每组12只,各取6只分别用于给药后2 h、24 h剖解取出心脏、肺、肝、胃、双侧肾脏和脾脏用小动物活体成像系统进行荧光检测。另取未接种肿瘤的正常BALB/c裸小鼠随机分为rhCNB-FITC给药组和空白对照组,rhCNB-FITC给药组12只,各取6只分别用于给药后2 h、24 h剖解取相同的脏器进行荧光检测。空白对照组6只,剖解取出相同的脏器进行荧光检测。结果:rhCNB-FITC给予未接种肿瘤的正常动物2 h时,主要分布于动物的肾脏、肝、胃、心和肺,脾脏未见明显分布;24 h时,主要分布于动物的肾脏,肝、胃、心、肺和脾脏未见明显分布。在原位肝癌模型试验中,rhCNB-FITC给药2 h时,主要分布于肝肿瘤、肾脏、肺、胃和心脏等组织器官,脾脏内未检测到明显荧光;FITC给药组只有在肝...     

EphA2、E-钙黏蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中EphA2、E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法,检测60例NSCLC及10例正常肺组织（对照组）中EphA2、E-cadherin的表达。结果:EphA2在NSCLC中的阳性表达率为80.00%,明显高于癌旁正常肺组织20.00％（P=0.001）。E-cadherin在NSCLC中的阳性表达率为58.33%,明显低于癌旁正常肺组织100.00％（P=0.000）。EphA2、E-cadherin蛋白在NSCLC中的表达差异与患者性别、年龄、病变部位无关(均P>0.05),但与NSCLC的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移相关（P<0.05）。结论:EphA2可促进肿瘤细胞的转化、增殖、迁移,E-cadherin可促进肿瘤细胞的迁移,两者在NSCLC中的共同作用导致了NSCLC的恶性进展,可作为临床评估肺癌恶性程度的指标。     

神经型钙黏蛋白分子在多发性骨髓瘤患者中的表达

目的 探讨神经型钙黏蛋白（N-cadherin）分子在多发性骨髓瘤（MM）患者中的表达及其临床意义.方法 收集54例初治MM患者及20名健康人骨髓单个核细胞,应用实时荧光定量PCR法检测N-cadherin mRNA表达,Western blot法测定其蛋白表达.结果 MM患者N-cadherin mRNA表达水平为6.056±3.033,健康对照组为1.788±0.778,二组相比差异有统计学意义（P＜0.0001）.按照ISS分期,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期MM患者N-cadherin mRNA表达水平分别为3.681±3.185、5.757±3.292、7.460±3.647,其中Ⅱ期、Ⅲ期与健康对照组相比差异均具有统计学意义（均P＜0.05）;Ⅰ期与健康对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.有髓外浸润及无髓外浸润患者N-cadherin mRNA表达量分别为9.159±3.178、5.083±3.288,差异有统计学意义（P＜ 0.001）.有骨质破坏和无骨质破坏患者N-cadherin mRNA表达量分别为6.544±3.729、4.240±2.896,差异有统计学意义（P=0.047）.初治MM患者N-cadherin mRNA表达水平为6.056±3.033,治疗后有效患者N-cadherin mRNA表达水平下降（3.768±2.216）（P=0.015）,治疗无效患者N-cadherin mRNA水平与治疗前相比差异无统计学意义（P＞0.05）.初治MM患者N-cadherin蛋白表达量明显高于缓解期患者及健康对照组,而在治疗后复发的患者中,N-cadherin蛋白表达量明显高于初治患者.结论 N-cadherin分子在MM患者中高表达,其可能参与MM的发生及发展.     

间隙连接蛋白43和E-钙黏素在肺癌组织中的表达及临床意义

  目的 探讨间隙连接蛋白（Cx43）和上皮细胞钙黏素（E-钙黏素）在非小细胞肺癌中的表达特征及其临床意义。方法 应用免疫组化ABC法检测50例原发性肺癌组织中Cx43和E-钙黏素的表达情况，分析其表达与肺癌临床病理的关系。结果 Cx43和E-钙黏素在非小细胞肺癌中的阳性表达率分别为54 %和46 %，20例癌旁组织中均可见E-钙黏素和Cx43阳性表达。随着肿瘤进展，Cx43和E-cadherin表达逐渐降低，在Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌中阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期；中、高分化的肺癌阳性表达率明显高于低分化的肺癌；肺癌伴淋巴结转移者的E-钙黏素表达水平低于无淋巴结转移者；Cx43表达与肺癌有无淋巴结转移无明显相关性。Cx43在肺腺癌组织中的阳性表达率明显高于鳞癌和大细胞未分化癌（P＜0.05）。E-钙黏素的表达与非小细胞肺癌的组织类型无明显相关性。     

钙调蛋白、钙网蛋白及周期蛋白依赖性激酶1基因在胃癌组织中的表达

目的 研究钙调蛋白(CaM)、钙网蛋白(CRT)及周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)基因在胃癌组织中的表达,及其与胃癌发生发展的相关性.方法 实时定量PCR法定量检测CaM、CRT及CDK1基因在人胃癌组织中的表达,并分析其表达与临床病理参数、幽门螺杆菌感染的关系.结果 胃癌组织和淋巴结组织中CaM、CRT及CDK1基因的表达比癌旁组织高2.08～3.70倍,幽门螺杆菌感染组中此三个基因的表达比非感染组分别上调2.78～7.36倍.其中CaM基因的表达与生存时间相关,CDK1基因的表达与pTNM分期及淋巴结转移相关,而CRT基因的表达与肿瘤大小、生存时间及淋巴结转移相关.结论 Hp通过上调CaM、CRT及CDK1基因的表达参与胃癌的发生发展,联合检测三个基因对判断预后有一定作用.     

全身骨扫描在肺癌骨转移临床诊断中的意义

目的 探讨全身骨扫描在肺癌骨转移临床诊断中的价值.方法 对256例确诊的肺癌患者进行99mTc-MDP骨显像检查,对骨转移的部位、数量、病理类型进行分析.结果 全组肺癌骨转移的发生率为39.45％,其中腺癌发生率50.66％,鳞癌发生率26.19％,小细胞癌发生率12.50％.101例肺癌骨转移中,多发病灶89例(88...     

E-cadherin和α-catenin及β-catenin在乳腺癌组织中的表达及意义

目的：探讨上皮性钙黏素（E-cd）及α-连接素（cat）、β-cat在浸润性乳腺癌中的表达及意义。方法：免疫组化SP法。结果：60例乳腺癌组织中E-cd、α-cat、β-cat异常表达率分别为51．7％、61．7％和70％，E-cd的表达与乳腺癌分化程度、临床TNM分期、淋巴结转移显著相关，P〈0．005～0．0005，α-cat、β-cat的表达与分化程度、淋巴结转移无关。如果将E-cd、α-cat和β-cat作为一类蛋白分析，这类蛋白分子的异常表达与淋巴结转移显著相关，P〈0．05。结论：E-cd表达下调在乳腺癌浸润、转移中有重要作用，E-cd单独表达下调足以破坏E-cd／cat复合物的功能，导致癌细胞浸润转移。     

E-cadherin和α-catenin及β-catenin在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨上皮性钙黏 素(E cd)及α 连接素(cat)、β cat在 浸润性乳腺癌中的表达及意义。 方法:免疫组化SP法。结果:60 例乳腺癌组织中E cd、α cat、β cat 异常表达率分别为51.7%、61.7% 和70%,E cd的表达与乳腺癌分 化程度、临床TNM分期、淋巴结 转移显著相关,P<0.005～ 0.0005,α cat、β cat的表达与分化 程度、淋巴结转移无关。如果将 E cd、α cat和β cat作为一类蛋白 分析,这类蛋白分子的异常表达与 淋巴结转移显著相关,P<0.05。 结论:E cd表达下调在乳腺癌浸 润、转移中有重要作用,E cd单独 表达下调足以破坏E cd/cat复合 物的功能,导致癌细胞浸润转移。     

miRNA-451和钙结合蛋白39在非小细胞肺癌患者中的表达及临床意义

目的 探讨微小RNA(miRNA)-451和钙结合蛋白39(CAB39)在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中的表达及临床意义。方法 收集180例NSCLC患者的NSCLC组织和对应的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miRNA-451相对表达量,采用免疫组织化学染色法检测CAB39表达情况。采用多因素Logistic回归模型分析NSCLC患者NSCLC组织中miRNA-451和CAB39表达情况的影响因素。比较不同miRNA-451、CAB39表达情况NSCLC患者的预后。结果 NSCLC组织中miRNA-451相对表达量和CAB39阳性表达率均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义（P<0.01）。肿瘤直径>3 cm、有淋巴结转移、临床分期为Ⅲ～Ⅳ的NSCLC患者NSCLC组织中miRNA-451高表达率和CAB39阳性表达率均低于肿瘤直径≤3 cm、无淋巴结转移、临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示,淋巴结转移情况、临床分期均是NSCLC患者NSCLC组织中miRNA-451和CAB39表达情况的...     

肺癌骨转移患者CaN、PTHRP的水平变化及诊断价值探讨

目的 探讨血清钙调磷酸酶(CaN)和甲状旁腺激素相关蛋白(PTHRP)对早期诊断肺癌骨转移的临床价值.方法 选取79例肺癌骨转移患者(转移组)和90例肺癌未发生骨转移患者(无转移组),检测两组患者的血清CaN、PTHRP、癌胚抗原(CEA)、CA125、骨碱性磷酸酶(BALP)的水平并进行比较分析.结果 转移组患者的血清CaN、PTHRP、CEA、CA125、BALP水平明显高于无转移组,差异有统计学意义(P﹤0.01).转移组患者的血清CaN、PTHRP与CEA、CA125、BALP水平均呈明显正相关(P﹤0.01).绘制ROC曲线,当选取CaN=590.4 U/ml为诊断临界点时,鉴别诊断肺癌骨转移的灵敏度为78.2%,特异度为84.0%,漏诊率为21.8%,误诊率为16.0%, ROC曲线下面积为0.872(95%CI:0.821~0.946);当选取PTHRP=6.81 ng/ml为诊断临界点时,鉴别诊断肺癌骨转移的灵敏度为70.4%,特异度为78.5%,漏诊率为29.6%,误诊率为21.5%,ROC曲线下面积为0.811(95%CI:0.785~0.863).结论 肺癌骨转移患者的血清CaN和PTHRP水平升高明显,对肺癌骨转移有一定的鉴别诊断价值.     

非小细胞肺癌中上皮钙粘附素的表达及其意义

目的研究上皮钙粘附素(epithelialcadherin,E-cad)在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)中的表达,探讨E-cad与NSCLC的组织类型、病理分级、TNM分期及淋巴结转移的关系。方法应用免疫组织化学SABC法检测65例原发性NSCLC,20例癌旁组织中E-cad蛋白的表达水平。结果20例正常肺组织均阳性表达,且均匀分布于膜表面。NSCLC中E-cad表达不均匀,阳性率为32.3%,与正常组比较差异有显著性(P<0.05)。但与组织类型无关(P>0.05),与病理分级、TNM分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论E-cad与NSCLC的发生发展呈显著负相关,低表达者预示预后不良。     

血清ProGRP、NSE和MMP-9在肺癌中的表达及意义

摘 要：［目的］ 探讨血清肿瘤标志物胃泌素释放肽前体(ProGRP)、神经特异性烯醇化酶(NSE)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肺癌诊断中的价值及意义。［方法］ 采用电化学发光法和ELISA法检测50例小细胞肺癌(SCLC)患者、70例非小细胞肺癌(NSCLC)患者和40例肺良性病变者血清中ProGRP、NSE及MMP-9水平。［结果］ SCLC组和NSCLC组血清ProGRP、NSE及MMP-9水平显著性高于肺良性病变组(P＜0.05)。在SCLC组中,ProGRP、NSE和MMP-9在广泛期和有淋巴结转移者高于局限期和无淋巴结转移者(P＜0.05);NSCLC组患者中,ProGRP、NSE和MMP-9在肿瘤TNM分期Ⅲ~Ⅳ期和淋巴结转移者显著性高于肿瘤TNM分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移者(P＜0.05)。ProGRP、NSE、 MMP-9诊断肺癌曲线下面积(AUC)分别为0.973（95%CI：0.953-0.994),0.890（95%CI：0.840~0.940),0.830（95%CI：0.769~0.891）。［结论］ 检测ProGRP、NSE、MMP-9能够提高肺癌的诊断水平,血清ProGRP、NSE和MMP-9可作为肺癌诊断标志物。     

HCG在肺癌中的表达及其意义

采用ＡＢＣ免疫组织化学法对１６５例肺癌进行ＨＣＧ检测。实验显示，ＨＣＧ的表达与肺癌的组织学类型和分化程度具有相关性，并发现浸润性强和有转移的肺癌，其中ＨＣＧ的阳性率显著高于浸润性弱和无转移者。研究提示，肺癌细胞的ＨＣＧ测定，对判断癌的组织学类型、分化程度和生物学行为均有一定的参考价值。