血管生长抑素基因抑制胰腺癌裸鼠移植瘤血管生成的实验研究

目的:探讨人血管生长抑素基因对胰腺癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法:建立人胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠移植瘤模型,应用人血管生长抑素基因质粒转染胰腺癌裸鼠移植瘤,观察移植瘤生长情况。采用免疫组织化学技术检测肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)表达情况和微血管密度(MVD)差异,透射电子显微镜观察肿瘤细胞情况。结果:治疗组肿瘤体积明显小于空白对照组和空质粒组(P<0.01),VEGF主要表达在肿瘤细胞的胞质内,治疗组、空白对照组和空质粒组平均灰度分别为179.57±5.22、150.87±3.44和163.40±3.54;阳性单位分别为14.94±2.26、31.26±2.72和29.21±2.95;MVD分别为10.60±74.56、19.33±2.52和18.67±5.29,治疗组与空白对照组和空质粒组比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。电子显微镜下治疗组可见大量肿瘤细胞坏死。结论:人血管生长抑素基因能明显抑制胰腺癌裸鼠移植瘤血管生成,促进肿瘤细胞坏死,进而抑制肿瘤生长。     

PTEN和VEGF的表达与膀胱癌血管生成关系的研究

目的研究膀胱癌组织中抑癌基因PTEN和血管内皮生长因子（VEGF）的表达与膀胱癌血管生成的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测62例膀胱癌组织和18例慢性膀胱炎组织（对照组）中PTEN和VEGF的表达，同时分析不同PTEN和VEGF表达状态下，膀胱癌组织微血管密度（MVD）的变化。结果膀胱癌组和对照组PTEN阳性率分别为53．2％（33／62）和100．0％（18／18），2组比较差异有统计学意义（P＜0．01）；膀胱癌组和对照组VEGF阳性率分别为62．9％（39／62）和27．8％（5／18），2组比较差异有统计学意义（P＜0．01）；PTEN和VEGF的表达呈负相关（r=-0．832，P＜0．01）。将膀胱癌分为4组，组A为PTEN阴性VEGF阳性（n=19），组B为PTEN阴性VEGF阴性（n=10），组C为PTEN阳性VEGF阳性（n=20），组D为PTEN阳性VEGF阴性（n=13）。4组平均MVD分别为41．53、31．40、26．55、25．15，组A显著高于其他3组（P＜0．05）。结论膀胱癌PTEN基因失活可能通过增加VEGF的表达来促进血管生成，导致肿瘤恶性进展。     

抑制肿瘤血管生成在防止大鼠膀胱癌进展中的作用

肿瘤血管生成与肿瘤浸润、进展密切相关 ,我们利用膀胱癌动物模型观察血管生成抑制剂TNP 4 70处理后大鼠膀胱肿瘤血管密度 (MVD)的变化 ,探讨抑制肿瘤血管生成在防止大鼠膀胱癌进展中的作用。材料与方法　雄性大白鼠 32只 ,7周龄 ,饲养室每天光照 12h ,多碳水化合物饮食 ,0 .0 5 % 4 羟丁基亚基硝胺(BBN)代饮用水。 2 0周后分为两组 :对照组 16只 ;实验组 16只 ,TNP 4 70 (武田制药工业株式会社提供 ) 30mg(15mg/kg)每周两次腹腔注射。每组分别于 2 1、2 2、2 3、2 4周各处死大白鼠 4只 ,取膀胱癌组织。以CD31作为抗血管内皮细胞抗体…     

人肝癌鸡胚尿囊膜移植瘤及其血管生成模型的建立

肝癌是一种极具侵袭性的、高转移性的恶性肿瘤,预后极差。有研究表明,与其它实体瘤一样,肝癌的转移也与血管生成密切相关,但由于缺乏对肝癌血管生成机理方面系统而深入的研究,目前抗血管生成在肝癌治疗中的应用仍然难以定论。而建立血管生成模型是进行肝癌血管生成研究和筛选血管生成抑制剂的前提条件。本研究拟应用低分化、高转移特性的人肝癌细胞,在鸡胚尿囊膜（Chick chorioallantoic membrane CAM）上建立人肝癌移植瘤及其血管生成模型并确定移植瘤及其血管生成的条件,为肝癌移植瘤及其血管生成的相关研究提供一个简便实用的手段。     

膀胱癌肿瘤血管生成的研究进展

膀胱癌的生物学行为突出表现为易复发、多发、浸润和转移。而肿瘤血管生成几贯穿膀胱癌整个发生发展过程。目前,肿瘤血管密度已被用作判断膀胱癌预后的独立指标,高肿瘤血管密度是肿瘤复发的危险因素。膀胱癌浸润生长依赖血管新生,肿瘤血管生成淑及内皮细胞、肿瘤浸润巴细胞及血管外基质之间的相互作用,大致可分为以下几点：（１）肿瘤细胞释放多种血管生成因子;（２）血管内皮细胞因血管生成因子的作用而激活,血管扩张,通透性增高;（３）血管内皮细胞和肿瘤细胞释放蛋白深解酶,降解细胞基底膜和细胞外基质;（４）血管内皮细胞增生;（５）血管内皮细胞从毛细血管后微静脉迁徙出来形成血管新芽;（６）肿瘤微血管分化塑型,形成新生血管网络系统。肿瘤血管形成决定于血管形成调节因子活性,而血管形成促进因子与抑制因子之间的平衡是关键环节。当肿瘤细胞或瘤内白细胞     

肺癌组织中肿瘤血管生成的检测及其意义

目的 检测肺癌组织中的血管生成情况,并探讨其与肺癌淋巴结转移、肿瘤细胞凋亡及增殖的关系。方法 应用免疫组化方法标记肿瘤微血管,ＴＵＮＥＬ方法检测肿瘤细胞凋亡,流式细胞术检测肿瘤细胞增殖。结果 肿瘤微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＤ）在各类型肺癌中差异无显著性意义（Ｐ〉０．０５）。Ⅰ期肺癌中ＭＤ显著低于Ⅱ期和Ⅲ期肺癌（Ｐ〈０．０１）。发生淋巴结转移组ＭＤ显著高于无淋巴结转移组（     

肿瘤血管生成与骨肉瘤研究进展

肿瘤新生血管生成在肿瘤的生长和转移过程中起着重要作用，研究肿瘤血管生成机制可望从根本上改善肿瘤患者的预后。本文综述了骨肉瘤的肿瘤血管生成调节机制、肿瘤微血管密度、影像学检测及骨肉瘤抗血管生成治疗的研究进展。     

酪丝缬肽对人肝癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用及其机制

目的 探讨三肽化合物酪丝缬肽(YSV)对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤的抑制作用及其抗血管生成机制.方法 建立人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学法观察YSV对肿瘤组织中微血管密度(MVD)的影响;应用血管生成相关基因芯片分析YSV对肿瘤组织血管生成相关基因的影响;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证相关基因的表达情况,最后酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中目的因子的含量.结果 YSV能显著抑制人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤的生长,当给药剂量为320μg/kg·d~(-1)时效果最为显著,抑瘤率为60.66%.免疫组织化学法证实YSV能够降低肿瘤组织中微血管密度,YSV作用组MVD平均值36.0±11.6,对照组平均值为114.5±26.5.与生理盐水组比较,在113个候选基因中有18个基因下调2倍以上,其中血管内皮生长因子(VEGF)与白细胞介素(IL)-8基因下调最显著;RT-PCR法证实YSV能够抑制肿瘤组织中VEGF与IL-8在mRNA水平上的表达;ELISA亦证明YSV作用组血浆中因子VEGF及IL-8浓度降低.结论 YSV能显著抑制人肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤生长,通过抑制肿瘤组织中促血管生成因子的表达来发挥抗肿瘤活性.     

血管内皮生长因子在骨折修复过程中血管生成的促进作用

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)在骨折修复过程中对骨折端微血管密度(MVD)的影响，探讨VEGF在骨折端血管生成中的作用。方法用168只大白鼠制作股骨骨折模型，随机分为VEGF组、拮抗VEGF组、对照组，用免疫组织化学分别测定伤后不同时间骨折端MVD的变化。结果应用外源性VEGF后。骨折端MVD明显增加；拮抗VEGF组，骨折端MVD明显下降；对照组MVD低于VEGF组，但高于拮抗VEGF组。结论VEGF在骨折修复过程中，对血管生成具有重要作用，并可能作为一种重要细胞因子参与和调节了骨折修复过程。     

膀胱癌组织中血管内皮生长因子的表达及与血管生成的关系

目的 探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）在原发性膀胱移行细胞癌中的表达及其与膀胱癌血管生成之间的关系。方法 免疫组织化学技术检测６８例原发性膀胱移行细胞癌和７例正常膀胱组织中血管内皮生长因子的表达,测定４０例浸润性膀胱癌的微血管密度,并分析ＶＥＧＦ和ＭＶＤ间以及它们与膀胱癌病理分级和临床分期间的关系。结果 ＶＥＧＦ在正常膀胱中不表达或低表达,而在膀胱表达较强;ＶＥＧＦ表达及ＭＶＤ值均与肿瘤的病理分级     

Prognostic significance of angiogenesis in superficial bladder cancer

OBJECTIVE: To assess the prognostic significance of angiogenesis parameters such as microvessel density (MVD) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in superficial bladder cancer. PATIENTS AND METHODS: We studied 127 superficial bladder cancer samples immunohistochemically for the above factors. We compared them with standard clinicopathological features (grade, stage, concurrent in situ, multifocality, primary or recurrent status) as well as with p53 expression, recurrence and progression to muscle infiltrating disease. RESULTS: During a 36 months median follow up of 109 patients with superficial primary tumors (min. 3, max. 69 months), 80 of them recurred (73.4%), while 8 patients (7.3%) progressed to muscle invading disease. A significant correlation was noted between MVD and VEGF in all 127 samples (p = 0.019). No association was noted between MVD or VEGF with the other clinicopathological features, recurrence or progression. Although progression free survival rates of categorized microvessel density (up to and higher than median value) differed significantly only in grade 3 patients, no independent prognostic significance could be attributed to MVD. No correlation was observed between MVD or VEGF with p53 protein. CONCLUSIONS: Based on our data we suggest that VEGF is not useful for predicting recurrence or progression in superficial bladder cancer. Microvessel density determination may help to predict progression of grade 3 patients to muscle invasive disease but not as an independent prognostic factor.     

Expression of Maspin in non-muscle invasive bladder carcinoma: correlation with tumor angiogenesis and prognosis

OBJECTIVES: Maspin is a member of the serpin (serine protease inhibitor) family and has been shown to be a suppressor of tumor growth and an inhibitor of angiogenesis as well as metastasis in several types of tumors. We studied expression patterns of Maspin in pTa/pT1 urothelial carcinoma of the bladder and compared them with microvessel density (MVD) for two vascular markers (CD34 and CD105) and correlated the findings with clinical outcome. MATERIAL AND METHODS: We investigated tumor samples of 110 patients undergoing transurethral resection for pTa/pT1 bladder carcinoma (pTa, n=84; pT1, n=26; grade 1, n= 22; grade 2, n= 81; grade 3, n=7). Immunohistochemical studies were performed using the monoclonal antibodies, anti-human Maspin (NCL Maspin), anti-CD34 Class II and anti-CD105. Maspin expression level was classified according to the staining intensity (- to +++). The blood vessels (CD34) and specifically proliferating blood vessels (CD105) were counted as vessels per field (microvessel density, MVD). RESULTS: Of the 110 tumors, 27 showed a negative immunostaining for Maspin, 46 tumors stained +, 29 stained ++, and 8 stained +++. Maspin expression correlated inversely with CD34 reactivity. In tumors with loss of or only weak Maspin expression, the MVD for CD34 was 21.7 vessels per field, and 4.2 vessels per field for proliferating vessels (CD105), whereas Maspin-positive tumors had an MVD of 17.7 vessels per field (CD34), and of 6.0 vessels per field (CD105). Complete follow-up data are available in 92 patients. After a median follow-up of 25 months, 18 of the 92 patients (19.6%) had tumor recurrences. Tumors with decreased Maspin expression (-/+) had a shorter disease-free interval (23 months) than patients with stronger Maspin (++/+++) expression (29 months), whereas a Kaplan-Meier analysis and the log-rank test showed no significant difference in disease-free survival between the patients. CONCLUSION: The clinical importance of Maspin has been mainly investigated regarding tumor progression or metastasis. We found a decreased Maspin expression in a large portion of pTa/pT1 bladder tumors. Even if patients with decreased Maspin expression have a slightly shorter disease-free survival Maspin does not appear to be a promising prognostic marker.     

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目的 探讨大肠癌从大肠腺瘤伴轻度不典型增生到重度不典型增生到腺癌发展过程中肿瘤血管生成、细胞增殖、细胞凋亡的变化及其内在联系。方法 应用免疫组化方法测定增殖细胞核抗原(PCNA)和微血管密度(MVD)，用TUNEL法测定细胞凋亡。结果 (1)从腺瘤到腺癌的发展过程中，细胞增殖水平逐渐增高，细胞凋亡逐渐减少，MVD逐渐增多。而且腺瘤伴轻度不典型增生的肿瘤微血管与腺瘤伴重度不典型增生相比不仅形态上有差异，在数量差异也有显著性。(2)轻度不典型增生腺瘤PCNA与AI呈正相关性。(3)将所有大肠肿瘤作为一组分析，发现MVD与AI具有负相关性。结论 (1)血管生成抑制肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤细胞增殖。(2)血管生成开关可能是在腺瘤伴轻度不典型增生向重度不典型增生和腺癌的转化过程中启动的。     

化疗栓塞对膀胱肿瘤新生血管生成及血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的 探讨膀胱动脉化疗栓塞对膀胱肿瘤新生血管生成及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响. 方法 膀胱癌患者30例.临床分期Tis1例、Ta2例、16例、T2 11例、T39例、T41例.病理分级G19例、G213例、G38例.采用丝裂霉素20 mg或羟喜树碱10 mg联合顺铂60 mg经膀胱动脉灌注及明胶海绵栓塞.化疗栓塞前后膀胱镜下取肿瘤组织,免疫组织化学SP法测定VEGF表达及微血管密度(MVD),并进行病理观察及随访. 结果 化疗栓塞前后肿瘤VEGF阳性表达率分别为73.33%(22例)及43.33%(13例); MVD分别为69.81±3.38及56.35±3.26,差异均有统计学意义(P<0.05).病理观察栓塞前后瘤体直径分别为(2.17±0.88)及(1.58±0.87)cm,差异有统计学意义(P<0.05).化疗栓塞后肿瘤组织明显坏死、退变.30例随访12～36个月,平均24.6个月,5例复发(G1T1、G2T1、G2T3、G3T3、G3T4各1例,单纯移行细胞癌4例、混合癌1例),复发时间为栓塞后6个月1例.6～12个月2例,24～36个月2例.复发组栓塞前后VEGF阳性分别为5例(均为强阳性)及4例(阳性3例、强阳性1例),差异无统计学意义(P>0.05),但强阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),MVD值分别为87.35±2.96、72.37±4.11,差异有统计学意义(P<0.05).未复发组栓塞后MVD值为53.15±3.50,与复发组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 化疗栓塞能降低膀胱癌组织VEGF表达,减少MVD计数,提示化疗栓塞可影响膀胱癌的分化程度,使肿瘤降级降期,减少术后转移,降低复发率,提高生存率.     

alphastatin抑制胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成的实验研究

目的探讨alphastatin对裸鼠体内新生血管形成和人胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用及机制。方法裸鼠皮下注射基质胶溶液形成基质胶体。测定alphastatin对基质胶体内新生血管的抑制作用。人胃癌BGC823细胞接种于裸鼠皮下形成移植瘤。分别于裸鼠腹腔注射磷酸盐缓冲液（PBS）和不同剂量的alphastatin（100nmol／L,0．25mg·kg^-1·d^-1;1000nmol／L,2．5mg·kg^-1·d^-1）,测定各组瘤体大小、体质量并进行病理学分析,测定微血管密度（MVD）计数。分离瘤体内血管内皮细胞．经alphastatin处理后,提取细胞内蛋白,进行细胞鞘氨醇激酶（SPK）活性测定。结果裸鼠移植瘤实验中．与PBS对照组相比,两个不同剂量alphastatin实验组裸鼠移植瘤的体积和体质量均得到了不同程度的抑制[体积：（1145．96±29．89）μm^3、（612．65±23．45）μm^3比（1771±31．05）μm^3,P〈0．05;瘤体质量：（0．31±0．03）g、（0．12±0．02）g比（0．67±0．02）g,P〈0．05]。体外实验病理学证实．alphastatin减少了瘤体内MVD的数目．降低了移植瘤体内血管内皮细胞SPK活性．上述作用均呈现一定的量-效关系。结论alphastatin具有明显抑制人胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成的作用．这种效应与降低血管内皮细胞SPK活性、减少1-磷酸鞘氨醇（SIP）的生成有密切关系。     

建立膀胱癌细胞系BIU-87原位移植瘤模型的实验研究

目的 探讨建立人体膀胱癌细胞系BIU-87膀胱原位移植瘤模型的有效方法,为膀胱癌实验动物的相关研究提供理论基础.方法 BALB-C系裸鼠20只,分成A、B两组(各10只),A组采用手术方法于膀胱壁内注射人体膀胱癌细胞系BIU-87,B组经膀胱灌注人体膀胱癌细胞系BIU-87,分别观察不同阶段两组裸鼠膀胱肿瘤的发生发展情况.实验终点(4周)处死裸鼠,进行瘤体大小及组织学检测.结果 A组裸鼠中,一只于术后第2d死亡,其余存活9只中,8只成瘤,成瘤率为89％;B组10只均未成瘤.结论 经膀胱灌注不能建立理想的膀胱原位移植瘤模型,手术方法建立膀胱原位移植瘤模型的效果确切,能较好地模拟人膀胱肿瘤的疾病发展过程,对国人膀胱肿瘤的研究具有一定应用价值.     

肿瘤组织VEGF表达和MVD与膀胱癌预后的关系

目的:探讨肿瘤组织中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达和微血管密度(Microvessel density,MVD)与膀胱癌预后的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测62例膀胱癌手术标本中VEGF和MVD。结果:VEGF阳性表达率为63%,VEGF阳性表达的肿瘤组织中的MVD明显高于阴性者(P<0.01);VEGF表达和MVD与肿瘤的浸润生长、血行转移、淋巴结转移具有明显相关关系(P<0.05,P<0.01);VEGF阳性表达者的预后较阴性者差;多因素分析表明,VEGF和MVD可能成为判断膀胱癌预后的新因素。结论:VEGF表达和MVD与膀胱癌的恶性进程和不良预后有关,测定VEGF和MVD可能是判断膀胱癌预后有价值的指标。     

The effects of modified RNA-binding proteins HuR on the biological behavior of the bladder cancer T24 cell line

BackgroundIn tumors, the role of human antigen R (HuR) includes regulating tumor cell proliferation, differentiation, apoptosis, angiogenesis, and lymphangiogenesis. Previous studies have revealed that the expression of HuR can be detected in bladder cancer, and is related to the biological behavior of malignancy.MethodsT24 cells were transfected by HuR overexpression and HuR knockdown vectors, and divided into the control group, the overexpression-HuR group, and the cas9-HuR group. Cell viability was detected after 48 h by methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay, apoptosis was detected by Annexin V-allophycocyanin (APC)/7-aminoactinomycin D (7-AAD) double staining, cell migration was detected by Transwell assays, and the expression levels of HuR, cyclin D1, and apoptosis-related factors [i.e., B-cell lymphoma 2 (Bcl-2)] were detected by fluorescence quantitative polymerase chain reaction (PCR) and Western blot.ResultsCompared to the control group, cell viability after 48 h increased significantly in the overexpression-HuR group, and decreased significantly in the cas9-HuR group (P<0.05). The number of migrating cells increased significantly in the overexpression-HuR group, and decreased significantly in the cas9-HuR group (P<0.05). The apoptosis rate was significantly decreased in the overexpression-HuR group, and significantly increased in the cas9-HuR group (P<0.05). The messenger ribonucleic acid and protein expression levels of HuR, cyclin D1, and Bcl-2 were significantly increased in the overexpression-HuR group, and significantly decreased in the cas9-HuR group (P<0.05).ConclusionsHuR promotes the proliferation and migration of T24 cells, and inhibits cell apoptosis. The mechanism may be related to the expression of cyclin D and the apoptosis-related protein, Bcl-2.