罗格列酮对apoE基因敲除小鼠血浆高敏C反应蛋白水平的影响

目的探讨罗格列酮对apoE基因敲除小鼠血浆炎症因子水平的影响。方法20只8周龄apoE基因敲除小鼠随机分为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型组和罗格列酮干预组,另取10只8周龄野生型C57/BL小鼠作为正常对照组。3组均饲喂普通饮食,罗格列酮组给予10mg.kg-1.d-1,12周后获取静脉血和主动脉标本。分别用胶乳凝聚法、微量快速测定法及XO法测定高敏C反应蛋白(hs-CRP)、丙二醛(MDA)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性。HE染色后镜下观察主动脉病变。结果AS模型组主动脉形成明显的动脉粥样硬化斑块,罗格列酮干预组病变较AS组轻;AS组血浆MDA、hs-CRP含量均显著高于正常对照组,罗格列酮干预组MDA、hs-CRP含量均显著低于模型组。模型组血浆SOD含量活性明显低于正常对照组,而罗格列酮干预组活性显著高于模型组。结论罗格列酮具有抗AS作用,且其抗AS作用可能与其抗炎症相关。针对炎症有望控制AS的发生发展。     

apoE基因敲除小鼠冠状动脉内粥样硬化病灶与外膜炎症关系初探

目的 研究载脂蛋白E基因敲除apoE小鼠冠状动脉内的动脉粥样硬化病灶的分布、组成、发生和发展机制。方法 对60和120周龄apoE-／-小鼠心脏作连续切片,行Movat特殊染色。从冠状动脉在主动脉开口处连续追踪冠状动脉主干和心肌内冠状动脉小分支,用图像分析仪测量血管口径;根据Movat染色结果观察病灶内组成成分,寻找病灶并分类。结果 在apoE-／-小鼠冠状动脉内发现从主动脉内直接延续来的延伸病灶和在冠状动脉内形成的原位病灶;有延伸病灶的冠状动脉外膜有大量炎性细胞漫润。而独立病灶多发生在左室壁心肌内,更多见于血管分支处和左室乳头肌附近;在有独立病灶的冠状动脉外膜常可发现有增多的炎性细胞。两组小鼠无显著性差异。结论 apoE-／-小鼠冠状动脉主干和心肌小分支内分别存在着延伸和独立的粥样硬化病灶,随着小鼠周龄增加,在形态上更接近成熟病灶。动脉外膜炎症和心肌收缩对血管的挤压可能与病灶的发生和发展有密切关系。     

罗格列酮对人脐静脉内皮细胞NO和PI3K/PKB/eNOS信号通路的影响

目的:观察罗格列酮对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)表达的影响,探讨罗格列酮改善内皮功能的信号转导机制.方法:首先观察罗格列酮对内皮细胞NO影响的时效和量效关系,然后加用eNOS和PKB信号阻断剂进行干预.用Griess重氮化反应法检测NO浓度,RT-PCR方法检测PI3K,PKB及eNOSmRNA的表达,Western免疫印迹方法检测PKB,eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473(PKB-Ser473),eNOS丝氨酸1177(eNOS-Ser1177)的磷酸化表达.结果:罗格列酮呈剂量和时间依赖性地升高内皮细胞NO浓度,不同浓度的罗格列酮培养内皮细胞均能升高PI3K mRNA表达和PKB-Ser473,eNOS-Ser1177磷酸化,但对PKB和eNOS表达均无影响;eNOS阻断剂L-NAME能完全阻断罗格列酮培养的内皮细胞NO浓度的升高,PI3K阻断剂LY294002能阻断罗格列酮诱导的NO产生和PKB,eNOS的磷酸化.结论:罗格列酮能通过激活PI3K/PKB/eNOS信号通路而增强内皮细胞NO的浓度,改善内皮功能.     

高脂血症apoE基因敲除小鼠心脏中一氧化氮合酶含量及基因表达

目的 探讨高脂饲料对apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠心肌组织中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric-oxide synthase,eNOS）的含量及基因表达的影响。方法 将13只apoE-/-小鼠随机分为两组,即高脂饲料组（n=7）和普通饲料组（n=6）。喂养12周后,测血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）和低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）含量,采用Real-Time RT-PCR法检测心肌组织中eNOS的mRNA表达水平,以免疫组化方法检测eNOS蛋白的表达。结果 高脂饲料组TC、TG和LDL明显高于普通饲料组,HDL则低于普通饲料组（P<0.01）;高脂饲料组心肌组织中eNOS的mRNA和蛋白水平均低于普通饲料组（P<0.01）。结论 高脂饲料导致apoE-/-小鼠发生高脂血症,并引起心肌组织中eNOS的mRNA表达的减少和相应蛋白水平的降低。     

罗格列酮对人脐静脉内皮细胞NO和P13K／PKB／eNOS信号通路的影响

目的：观察罗格列酮对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）一氧化氮（nitric oxide，NO）浓度和内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，P13K）和蛋白激酶B（protein kinaseB，PKB）表达的影响，探讨罗格列酮改善内皮功能的信号转导机制。方法：首先观察罗格列酮对内皮细胞NO影响的时效和量效关系，然后加用eNOS和PKB信号阻断剂进行干预。用Griess重氮化反应法检测NO浓度，RT-PCR方法检测P13K，PKB及eNOSmRNA的表达，Western免疫印迹方法检测PKB，eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473（PKB-Ser473），eNOS丝氨酸1177（eNOS-Ser1177）的磷酸化表达。结果：罗格列酮呈剂量和时间依赖性地升高内皮细胞NO浓度，不同浓度的罗格列酮培养内皮细胞均能升高P13K mRNA表达和PKB-Ser473，eNOS-Ser1177磷酸化，但对PKB和eNOS表达均无影响；eNOS阻断剂L-NAME能完全阻断罗格列酮培养的内皮细胞NO浓度的升高，P13K阻断剂LY294002能阻断罗格列酮诱导的NO产生和PKB，eNOS的磷酸化。结论：罗格列酮能通过激活P13K／PKB／eNOS信号通路而增强内皮细胞NO的浓度，改善内皮功能。     

黄连温胆汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:探讨黄连温胆汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响及机制。方法:10周龄ApoE基因敲除小鼠24只,随机分为3组,分别为空白组、模型组和黄连温胆汤组,每组各8只。除空白组外给予小鼠高脂饲料6周形成动脉粥样硬化模型。造模后黄连温胆汤组给予黄连温胆汤水煎液灌胃8周,模型组给予生理盐水灌胃8周。灌胃结束后取材,测定血清血脂和TNF-α水平;心脏剥离后进行主动脉根部切片HE染色、甲苯胺蓝染色和免疫组化,测主动脉斑块面积、蛋白聚糖沉积面积,统计斑块、蛋白聚糖沉积校正面积和蛋白聚糖/斑块校正面积,以及主动脉壁及斑块TNF-α蛋白表达量。结果:与模型组比较,黄连温胆汤组小鼠血脂水平下调,血清TNF-α水平和主动脉壁及斑块TNF-α蛋白表达水平明显下调,斑块绝对面积和校正面积显著缩小,蛋白聚糖沉积绝对面积减小,蛋白聚糖沉积面积/斑块校正面积有上调趋势,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:黄连温胆汤具有降低血脂水平、减小主动脉斑块面积和抑制动脉粥样硬化病程进展的功效,其机制可能与降低炎性因子TNF-α水平和调节蛋白聚糖代谢相关。     

脑出血患者血清NO和NOS的变化

1　临床资料　 2 0 0 1 0 3 / 2 0 0 2 0 9我院收治脑出血患者 3 8(男2 9 ,女 9)例 ,年龄 12～ 78(平均 4 9 6)岁 ,均经头颅ＣＴ证实为自发性脑出血 .ＧＣＳ :3～ 8分 11例 ,9～ 12分 6例 ,13～ 15分 2 1例 .血肿量为 17 3～ 71 6(平均 3 1 3 )ｍＬ ,合并ＳＡＨ 2 6例 .对照组为健康成人 4 2 (男 3 1,女 11)例 ,年龄 2 6～ 68(平均 4 4 8)岁 .全部受检对象清晨采血分离血浆 (发病后 1～ 3 ,4～ 7,14ｄ采血 ) ,采用美国Ｃａｙｍａｎ试剂盒进行测定 ,结果分别以 μｍｏｌ·Ｌ-1和ｋＵ·Ｌ-1(ｘ±ｓ)表示 .采用ｔ检验判定显著性差异 .脑出血 …     

脂欣康胶囊对ApoE基因敲除小鼠血清炎症细胞因子的影响

目的 探讨复方脂欣康胶囊防治动脉粥样硬化时,对炎症细胞因子的影响.方法 用ELISA法检测脂欣康胶囊治疗载蛋白E基因敲除小鼠血清中TNF-α和IL-1β水平.结果 脂欣康组小鼠血清中TNF-α和IL-1β水平均明显低于模型组(P<0.01);脂欣康组与正常对照组比两项差异都无显著性(P>0.05);模型组小鼠血清中TNF-α和IL-1β水平都显著高于正常对照组(P<0.01).结论 复方脂欣康胶囊通过降脂、消炎等作用,改善小鼠血管内皮细胞状态,对于预防和治疗ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病灶有显著的效果.     

不同类型脑血管狭窄患者血清中的NO含量及NOS活性

目的研究不同脑血管患者血清中血管活性因子NO含量及TNOS／iNOS活性的变化,分析这几种因素在脑血管狭窄中的可能作用机制。方法通过生化分析检测血清中一氧化氮（NO）的含量及组织型一氧化氮合酶（TNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性。结果血清NO及TNOS和iNOS的检测发现,混合组（P=0．000）和MCA组（P=0．001）血清总的NO含量显著增高;颅内组（P=0．004）和MCA组（P=0．002）血清iNOS活性显著增加;颅内组血清TNOS活性显著减弱（P=0．032）,混合组（P=0．011）和MCA组（P=0．018）TNOS活性显著增加。结论多种相关因子的参与是目标人群某些类型脑血管狭窄发生机制的重要组成部分。这为寻找脑血管狭窄的多因素多环节作用机制提供了坚实的理论基础。     

硫酸镁对小鼠全脑缺血再灌注损伤模型NO、NOS的影响

目的:探讨不同剂量硫酸镁(MgSO₄)对小鼠全脑缺血再灌注损伤的治疗作用。方法:将小鼠随机分成对照组、再灌注组、MgSO₄ 90 mg/kg组、MgSO₄ 180 mg/kg组、MgSO₄ 360 mg/kg组;结扎双侧颈总动脉和颈部软组织加压的方法造成全脑缺血,缺血30 min,再灌注60 min。监测脑电图变化,观察病理学形态变化;检测脑组织NO含量和一氧化氮合酶(NOS)、诱导型NOS(iNOS)活性。结果:MgSO₄各治疗组与再灌注组比较,脑组织中NO含量减少(P<0.01),NOS和iNOS活性降低(P<0.01),脑组织病理损害减轻。结论:硫酸镁对脑缺血再灌注损伤有治疗作用,可能与降低NOS、iNOS活性,减少NO含量有关。     

扶正口服液对吗啡依赖大鼠血清NO、NOS的影响

目的：观察扶正口服液（以下简称FZY）对吗啡依赖大鼠戒断症状及血清NO和一氧化氮合成酶（NOS）的影响。方法：剂量递增sc吗啡建立14d大鼠吗啡依赖模型,观察FZY对纳洛酮催促大鼠戒断症状的影响,并用分光光度法测定大鼠血清中NO含量和NOS活性。结果：①FZY两个剂量（5.48、10.96g生药/kg）可显著降低吗啡依赖大鼠催促戒断症状分值（P〈0.01）,且10.96g生药/kg能明显抑制戒断引起的体重下降（P〈0.01）;②FZY两个剂量（5.48、10.96g生药/kg）可显著降低血清NO含量和NOS活性,效应呈剂量相关性。结论：扶正口服液能缓解吗啡依赖大鼠戒断症状,其机制可能与抑制体内NOS活性,进而下调NO水平有关。     

人参二醇组皂苷对感染性休克大鼠血清一氧化氮合酶及一氧化氮的影响

目的观察人参二醇组皂苷（PDS）对感染性休克大鼠血清中一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）含量的影响，探讨其抗感染性休克的作用机制。方法大鼠舌下静脉注射PDS进行预治疗，10rain后注射细菌内毒素（LPS5mg／kg）复制感染性休克模型。实验动物随机分为对照（Control）组；内毒素休克（LPS）组；地塞米松（LPS＋Dex）组；人参二醇组皂苷（LPS＋PDS）组。颈动脉插管记录平均动脉压（MAP）。分别于休克后2h和4h腹主动脉取血，用硝酸还原酶法测定血清中NOS活性和N02^-／NO3^-的含量，间接反映N0的水平。结果注射内毒素后，模型组的MAP迅速下降，在低水平维持，LPS＋Dex组和LPS＋PDS组的MAP未见明显下降，优于模型组（P〈0．01）；注射内毒素2h后模型组的血清NOS和NO明显升高，LPS＋Dex组和LPS＋PDS组NOS活性、NO2^-／NO3^-含量显著低于LPS组（P〈0．05）。结论PDS能够明显改善内毒素休克大鼠的低血压状态，降低NOS活性、NO含量，并对其NO的生成具有抑制作用。     

扶正口服液对吗啡依赖大鼠血清NO、NOS的影响

目的:观察扶正口服液(以下简称FZY)对吗啡依赖大鼠戒断症状及血清NO和一氧化氮合成酶(NOS)的影响。方法:剂量递增sc吗啡建立14d大鼠吗啡依赖模型,观察FZY对纳洛酮催促大鼠戒断症状的影响,并用分光光度法测定大鼠血清中NO含量和NOS活性。结果:①FZY两个剂量(5.48、10.96g生药/kg)可显著降低吗啡依赖大鼠催促戒断症状分值(P<0.01),且10.96g生药/kg能明显抑制戒断引起的体重下降(P<0.01);②FZY两个剂量(5.48、10.96g生药/kg)可显著降低血清NO含量和NOS活性,效应呈剂量相关性。结论:扶正口服液能缓解吗啡依赖大鼠戒断症状,其机制可能与抑制体内NOS活性,进而下调NO水平有关。     

脑缺血再灌注损伤大鼠血清及脑组织NO／NOS变化研究

目的 探讨一氧化氮及一氧化氮合酶在脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 采用大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,分光光度法检测脑缺血再灌注损伤大鼠血清及脑组织NO/NOS的浓度变化.结果 脑缺血再灌注损伤大鼠NO/NOS含量较正常大鼠显著增高(P＜0.05).结论 NO/NOS在脑缺血再灌注损伤中可能起着重要作用.     

糖尿病小鼠一氧化氮与一氧化氮合酶活性测定结果分析

目的　观察Ⅰ型糖尿病 (DM)小鼠模型血清一氧化氮 (NO)与组织一氧化氮合酶 (NOS)的变化 ,探讨NO在胰岛细胞中损伤机制。方法　用柯萨奇B4病毒 (CB4V)感染Swiss小鼠建立DM模型 ,应用放射免疫法 ,检测其血清NO与组织NOS活性 ,并分析两者之间的关系。结果　DM模型小鼠血清NO含量随血糖升高和胰岛素水平下降而升高 ,组织NOS活性随血清NO含量升高而增强 ,且两者呈正相关 (r =0 .8175 ,P <0 .0 1)。结论　NO可能是造成胰岛 β细胞损伤的主要因素。     

实验性骨质疏松病理学观察及血清NO和NOS测定及其意义

目的观察去势雌性大鼠骨质疏松骨形态及骨计量学改变,测定血清NO和NOS水平,探讨NO和NOS在骨质疏松发病机制中的作用和意义。方法将45只3月龄雌性大鼠随机分成假手术组(Sham组);去势组(OVX组);尼尔雌醇/左炔诺孕酮治疗组(OVX+N/L组)。OVX+N/L组为去势后3天开始尼尔雌醇/左炔诺孕酮治疗。三组动物术后14周全部处死,通过图像分析仪对骨组织进行形态计量分析及血清NO和NOS的测定,并进行比较分析。结果OVX组较Sham组及OVX/NL组:相对骨小梁体积及骨小梁平均厚度显著减少(P<0.01);骨小梁吸收面积及成骨细胞覆盖骨小梁表面百分比明显增加(P<0.01);血清NO和NOS的水平显著降低(P<0.01)。OVX+N/L组较Sham组上述指标均无显著性差异(P>0.05)。结论去势雌性大鼠骨丢失是骨转换加快(高转换型)和重建负平衡骨吸收超过骨形成所致,血清中NO和NOS的变化可能发挥着重要作用;雌激素防止这种骨转换的负平衡可能通过NO和NOS途径来实现的。     

酸枣仁汤对大鼠脑组织、血中NO、NOS与ET-1的影响

目的:初步探讨酸枣仁汤对血脑屏障的影响,为中枢神经系统疾病用中药复方汤剂效用机制研究提供思路和方法。方法:观察酸枣仁汤对大鼠脑组织、血中NO、NOS以及ET-1含量的影响。结果:与空白组及地西泮组比较,酸枣仁汤组大鼠的血清、脑组织NO、NOS含量显著升高,NO/ET-1比值显著增大。结论:酸枣仁汤能增加血液及脑组织NOS含量,促进NO的生成,提示其对中枢神经系统的治疗作用可能与舒张毛细血管、增强血脑屏障通透性有关。     

冷库工人血浆中NO及NOS水平的研究

目的　研究低温作业人群血浆中NO、NOS水平 ,探讨低温作业对人可能的危害与机制。方法　选冷库作业工人为研究对象 ,其中保鲜冷库 (0℃组 ) 5 3人 ,水产冷库 (-2 0℃组 ) 5 3人 ,另选不从事有毒有害职业的村民5 7人作为对照 ,用试剂盒检测血浆中NO、NOS水平。结果　 0℃组与 -2 0℃组分别与对照组相比 ,其血浆中NO含量和NOS活性均增高 (P <0 .0 5 )。0℃组与 -2 0℃组相比 ,各指标差异无显著性。结论　在冷作业工人中存在着NO含量和NOS活性增高 ,可能与机体处于冷应激状态有关。     

萸冰制剂对实验性偏头痛大鼠血清NO/NOS含量的影响

萸冰制剂是由华佗再造丸中主药吴茱萸与冰片组成。根据硝酸甘油、NO/NOS、偏头痛的内在联系,文章利用硝酸甘油型实验性偏头痛动物模型,并用硝酸还原酶法测定其血液中的NO/NOS含量。结果表明：硝酸甘油实验性偏头痛大鼠血清中NO/NOS的含量明显增强,萸冰制剂能明显降低偏头痛大鼠血清中NO/NOS的含量,且降低NO/NOS含量的作用明显优于西药阳性组（麦角胺咖啡因）和中药阳性组（正天丸）,与模型组比较有显著或极显著差异。提示：萸冰制剂具有治疗实验性偏头痛动物模型的作用。