MTT法分析培养成骨细胞的存活和增殖能力

用ＭＴＴ法测定离体培养的成骨细胞存活与增殖能力。并观察＾１３７Ｃｓγ线对成骨细胞生长的影响。细胞接受０、３、６、９、１２Ｇｙ照射，培养至第７天，增殖率分别为４１６、３３６、２７５、１４７、１０８％。结果表明：＾１３７Ｃｓγ线剂量高于３Ｇｙ成骨细胞增殖受到显著抑制，９Ｇｙ以上，则基本抑制其增殖。     

MTT法分析PDGF对鼠成骨细胞生长作用的影响

目的：观察ＰＤＧＦ对鼠成骨细胞增殖能力的影响及其与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ联合应用对细胞的生长有否协同作用。方法：酶消化分段收集法分离培养出鼠成骨细胞，利用ＭＴＴ法检测活细胞产生甲月替结晶的含量多少，反映细胞的增殖能力和生长情况。结果：ＰＤＧＦ能促进成骨细胞的增殖生长，其有效浓度为１～１００ｎｇ／ｍｌ，以１００ｎｇ／ｍｌ作用最大；ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ联合应用可明显增强成骨细胞的增殖能力。结论：ＰＤＧＦ可以刺激成骨细胞的增殖，且与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ有协同作用。ＭＴＴ法是测定成骨细胞增殖能力较理想的方法     

辛伐他汀对成骨细胞增殖和矿化功能影响的实验研究

目的：研究辛伐他汀对原代培养大鼠颅骨成骨细胞增殖和矿化功能的影响。方法:酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞,分别用空白培养基、不同浓度辛伐他汀及不同浓度的rhBMP-2作用24h后,MTT法测量药物对细胞增殖活性的影响,细胞接种到培养板连续培养7d,von Kossa染色观察成骨细胞矿化结节,采集图像并转换处理后计算矿化结节面积的百分比。结果:辛伐他汀对成骨细胞增殖活力的增加呈剂量依赖方式,而且可使成骨细胞矿化面积百分比显著增加,与rhBMP-2的作用相当。结论:辛伐他汀可促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞的增殖和矿化,从而发挥促进骨形成的作用。     

氟化物对体外培养的小鼠成骨细胞增殖能力的影响

目的:观察氟化钠对体外培养的成骨细胞的增殖能力的影响。方法:采用四唑盐(MTT)比色法,观察不同剂量氟化钠在不同时间对体外培养的小鼠成骨细胞增殖活力的影响。结果:剂量为2.5、5.0mg/L的氟化钠作用2d时,可使成骨细胞增殖活力较对照组明显增强;≥20mg/L时随着氟化钠剂量的增加和作用时间的延长,成骨细胞的增殖活力明显减弱。结论:氟化钠对成骨细胞的增殖呈现双向调节,且随时间的延长对细胞增殖能力的抑制逐渐增强。     

大鼠成骨细胞的体外培养和鉴定

目的 探讨正常新生大鼠颅骨中分离培养大批成骨细胞并进行功能鉴定。方法 将新生SD大鼠处死，无菌条件下取出颅骨，剔净后剪成1mm×1mm×1mm碎块，0．1％胶原酶Ⅱ消化15min，碎骨块接种于培养瓶中培养，通过观察细胞形态学及钙化结节、碱性磷酸酶染色进行鉴定。结果 用改良组织块法分离的大鼠成骨细胞，在体外培养时可维持其在体内的功能：合成碱性磷酸酶，最终能形成矿化结节。结论 用改良组织块法进行大鼠成骨细胞培养，方便易行，可分离、培养大量高纯度成骨细胞，在体外传代后仍保留其表型特征。     

MTT法分析中药含药血清对体外软骨细胞增殖影响的研究

以ＭＴＴ法观察补肾和柔肝中药含药血清对体外软骨细胞的影响。结果：在两次连续灌胃３ｈ后所取血清浓度为５％和１０％时,对软骨细胞有促进增殖的作用;血清浓度为５％时,两药之间作用无差异,而１０％时,补肾方作用优于柔肝方。为便于以下比较,将血清浓度定在５％;长时间（８ｄ）灌胃和短时间（１ｄ）所取血清对软骨细胞的增殖作用无差异;以０．５、１、５倍等效剂量灌胃所取务清对软骨细胞的增殖作用未呈量效依赖关系,其中     

P物质对体外培养成骨细胞增殖和活性的影响

目的: 观察P物质(substance P,SP)对体外培养的成骨细胞增殖和活性的影响. 方法: 采用新生大鼠颅盖骨消化法培养成骨细胞,再加入不同浓度的SP,观察细胞生长数量,测定碱性磷酸酶活性及观察细胞周期变化. 结果: 浓度范围从1×10-12～1×10-6 mol/L的SP对成骨细胞的增殖和活性都有促进作用,在浓度为1×10-8 mol/L对成骨细胞增殖和活性的促进作用最强. 结论: SP对成骨细胞增殖和活性有促进作用.     

MTT法实验条件的研究

本实验用２种体外传代培养的白血病细胞株（Ｋ５６２，ＨＬ６０）对ＭＴＴ实验条件进行研究。结果表明：ＭＴＴ代谢产物甲分细胞数量呈线性关系。最佳实验条件为：实验用九为２×１０＾５／孔或４×１０＾５／孔；ＭＴＴ加入量为１００μｇ（５ｍｇ／ｍｌ，２０μｌ）；其它实验条件为选用５７０ｎｍ为主波长，６３０ｎｍ为参考滤长；９６孔板不离心；ＭＴＴ作用４小时。ＭＴＴ法经济、准确、快速和简便，从而为临床急性白血病的药物     

接骨中药对培养成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响

目的:为比较常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞的作用.方法:应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色方法观察常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞的增殖、ALP表达及矿化结节形成的影响. 结果:这8个单味中药对早期增殖期的成骨细胞除当归外均无明显的促增殖和分化的作用;而当归组和自然铜能增加成骨细胞矿化期矿化结节的形成.结论:单味接骨中药当归具有刺激体外培养成骨细胞增殖及分化的功能.     

MTT法检测异种肝细胞生长因子对大鼠肝细胞体外增殖的影响

目的 :研究肝细胞生长因子对大鼠肝细胞原代培养的影响。方法 :利用胶原酶原位二步灌注法分离大鼠肝细胞 ,接种并预培养 1 .5 h后 ,用含不同浓度 HGF的培养基继续培养至 48h,MTT比色法检测肝细胞生长因子对原代培养大鼠肝细胞增殖的影响。结果 :在所设加样量范围内 ,培养基所含 HGF为 1 0 μg/m L时 ,原代培养大鼠肝细胞的增殖出现最高峰。结论 :HGF对原代培养的大鼠肝细胞的增殖有明显的影响 ,但其作用效果无剂量依从关系     

MTT法测定异博定逆转胃癌与结肠癌细胞多药物抗性的研究

用MTT法测定了钙通道阻滞剂异博定逆转胃癌和结肠癌的多药物抗性。结果表明异博定能有效地提高5－Fu、MMC、CDDP和ADM的细胞毒性作用，增强这些化疗药物杀伤肿瘤细胞的作用。     

三种甲替溶解剂在MTT比色法中的应用

研究ＭＴＴ比色法中三种甲　溶解剂，异丙醇（ＩＳＯＰ）、１０％曲拉通—５０％异丙醇（ＴＲＩ－ＴＯＮ－ＩＳＯＰ）和２０％ＳＤＳ（均加入１０ｍｍｏｌ／ＬＨＣｌ酸化）的应用效果。结果发现，在测定不同浓度的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）时，ＴＲＩＴＯＮ—ＩＳＯＰ与ＳＤＳ效果相当，而在测定不同浓度的Ｈｅｌａ细胞时，前者优于后者，而ＴＲＩＴＯＮ—ＩＳＯＰ和ＳＤＳ均优于ＩＳＯＰ。     

小儿恶性肿瘤四氮唑盐法药敏试验的建立

①目的筛选对个体恶性肿瘤病儿敏感的化疗药物,并探讨其最适条件。②方法用四氮唑盐(MTT)法药敏试验对5例恶性肿瘤病儿进行药物筛选。③结果每孔细胞数在5X10~4~5X10~5,培养48~72h,MTT浓度为2.0~2.5g/l时比较适宜。从不同化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用可以看出,不同药物对同一肿瘤细胞的杀伤作用有很大不同,同一药物对同一类型的不同个体肿瘤的杀伤作用也不相同。④结论MTT法药敏试验操作简单、快速,易于推广,可广泛应用于临床,以提高疗效,避免不必要的化疗副作用。     

MTT法在榄香烯乳对人膀胱癌T_(24)细胞体外实验中的应用

用改进的MTT法测定榄香烯乳对体外培养的人膀胱癌T24细胞的抑制作用。结果：榄香烯乳能抑制T24细胞增殖，且存在剂量一时间依赖性；IC50值24h为3560mg／L，48h为29．38mg／L，分别为相同条件下MMC的34．7倍和58．3倍。结论：榄香烯乳能明显抑制膀胱癌T24细胞的增殖，提高剂量、缩短用药间隔时间、适当延长作用时间可达到与MMC相同的效果。经改进的MTT法简便、迅速一干扰因素少。值得推广应用。     

MTT法用于实体肿瘤细胞化疗药敏测定的初步研究

用溴化二甲噻唑二苯四氮唑（ＭＴＴ）方法对２６例实体肿瘤细胞行化疗药敏测定。结果表明，不同肿瘤细胞对同一化疗药物，同一肿瘤细胞对不同化疗药物的敏感性各不相同。准确取材、避免污染、合理送检方式以及尽早实验是化疗药敏测定成功的关键。当药敏结果用于肿瘤的个体化治疗时，可选择临床上常用的药物进行试验，并根据结果选对肿瘤抑制率高的前３种药物为相对敏感药物。     

CUMULATIVE RESULTS OF CHEMOSENSITIVITY TEST USING MTT ASSAY IN DOUBLE-LAYER AGAROSE

Objective To investigate cumulative results of chemosensitivity test using 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyl （MTT） assay in double-layer agarose. Methods A total of 2 491 patients with different kinds of cancers were enrolled in the study, in which 18 kinds of different anticancer drugs were used. A computer soft was used to get charts. ResultsThe total evaluability rate was 82.7% （2 060/2 491）. Among all agents, the efficiency rates of 5-Fu, MMC, DDP, BLM and CBP were higher than the efficiency rates of others. The response rate range of different cancer in vitro sensitivity by using MTT assay in double layer agarose were from 9.2% （biliary duct） to 37.5% （malignant lymphoma）. For colon and rectum cancer, 5-Fu, DDP, MMC and BLM were more sensitive than other anti-tumor agents. For breast carcinomas, ACTD and DDP were more sensitive. For gastric cancer, 5-Fu, DDP and BLM were more sensitive. For leukemia, VM-26 and HHRT were more sensitive. ACM was more sensitive to kidney and MXT and BLM were more sensitive to pancreas cancer. For Lung cancer, DDP and EPI were more sensitive. Mean true positive rate, mean true negative rate, mean sensitivity, mean specificity and mean accuracy were 44% , 92% , 72% , 77% , and 76% , respectively. Conclusion Chemosensitivity tesing using the MTT assay in a double layer agarose was a very useful reference to chem- therapy.     

MTT法对膀胱肿瘤化疗药物敏感性的预测

①目的研究人膀胱肿瘤对化疗药物反应性，筛选对个体敏感的化疗药物。②方法采用四氮唑蓝（ＭＴＴ）法对手术切除的２７例膀胱肿瘤新鲜标本进行顺铂（ＤＤＰ）、保尔佳（ｐｏｌｙｅｒｇａ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）、噻替哌（ＴＨＴ）、阿霉素（ＡＤＭ）和足叶乙甙（ＶＰ－１６）的抗癌药物敏感试验。③结果２７例中对３种药物敏感者１０例，占３７．０％；敏感药物顺序依次为：ＤＤＰ，ｐｏｌｙｅｒｇａ，ＭＭＣ，ＴＨＴ，ＡＤＭ和ＶＰ－１６，与临床治疗结果大致相符。④结论ＭＴＴ法可以作为化疗药物敏感试验的检测方法，为临床科学合理地选择用药提供依据。     

白血病化疗药物MTT法体外敏感试验的临床意义（附14例分析）

应用ＭＴＴ法对１４例白血病患者进行了ＤＮＲ、Ｈａｒ、Ａｒａ－ｃ、ＶＣＲ、ＡＤＭ和ＶＰ＿（１６）等６种常用化疗药物的体外敏感试验及临床观察。按体外药敏结果选择药物组成方案进行化疗，杀伤指数＞５５％者占６６．７％，未按药敏结果组成方案进行化疗，杀伤指数＞５５％者仅占２５％，二者差异有显著性，表明体外药敏与临床用药间有一定关系。