血站抗-HCV试剂参考品的建立及应用

目的 通过建立抗-HCV试剂参考品以用于评价血站使用的抗-HCV批批鉴定试剂.方法 收集自2009年11月～2010年9月北京市红十字血液中心复检报废的抗-HCV阳性及阴性血浆各150份,所有样品均用确证试剂进行检测.根据确证结果挑选组成参考盘的阳性、阴性及精密度参考品,灵敏度参考品是通过用正常阴性血浆将阳性血浆倍比稀释后,挑选合适样品再用确证试剂检测后获得,以上样品组成该室内部抗-HCV参考品.用A,B,C和D四种国产及进口试剂检测该室制备参考品后与国家标准参考品进行比较.结果 该室内部抗-HCV试剂参考品组成包括20份阳性参考品、20份阴性参考品、4份灵敏度参考品、1份精密度参考品.用A,B,C和D四种国产及进口试剂经ELISA检测后与国家参考品比较符合率100％.结论 本套参考品与国家参考品实验符合度高,灵敏度检测结果更适宜本实验室应用,稳定性良好,适合该血站内部使用.     

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒的诊断性能评价

目的 通过与Ortho3．0丙型肝炎病毒（HCV）抗体诊断试剂盒比较，分析评价EIAgenHCV抗体诊断试剂盒（EIAgen）的诊断性能。方法应用考核试剂EIAgen和参比试剂Ortho3．0HCV抗体诊断试剂盒对2881份样本进行检测，检测结果不一致时，应用重组免疫印迹试验（RIBA）确证试剂RIBAHCV3．0或核酸试验（NAT）确证试剂进行确证，以对结果进行综合分析。结果2881份样本中，考核试剂及参比试剂检测结果均为阳性，且参比试剂的测量值／临界值（S／CO）≥3．8，或检测结果符合确证试验阳性结果的阳性标本为274份，考核试剂及参比试剂检测结果均为阳性且参比试剂的S／CO〈3．8为59份，阴性标本2539份，不确定的9份被剔除。考核试剂检测真阳性274份，无假阴性结果；真阴性2527份，假阳性12份。考核试剂敏感度为100％，高于参比试剂的98，91％；特异度为99．53％，略低于参比试剂的99．88％。考核试剂对部分国内常见HCV基因型（1a型、1b型、2a型、3型和6型）样本27份，均为真阳性，敏感度为100％，对于非HCV感染的病毒性肝炎、自身免疫性疾病及妊娠样本具有良好的特异度，特异度均为100％。溶血、脂血样本对考核试剂检测结果无影响。考核试剂阳性预测值为95．80％，阴性预测值为100％，准确性为99．57％。考核试剂S／CO≥5．9的样本301份，其中用参比试剂检测S／CO≥3，8占88．70％；考核试剂S／CO〈5．9的29份，其中用参比试剂检测S／CO〈3．8占86．21％。结论EIAgen敏感度100％，特异度较好，是一种优秀的检测抗-HCVEIAgen试剂，尤其适用于阳性样本的筛选。采用EIAgen试剂检测样本，当S／CO≥5．9时，样本的阳性预测值较高。     

进口乙型肝炎表面抗原诊断试剂检测结果分析

目的比较进口乙型肝炎表面抗原诊断试剂与国产乙型肝炎表面抗原诊断试剂的敏感性和特异性。方法利用上述两种试剂检测HBsAg血清考核盘（20份阴性、3份阳性、adr、adw、ay3份亚型标本和精密性参考品1份）及5份不确定血样，对检测结果进行统计分析。结果进口HBsAg诊断试剂检测符合率100％，国产HBsAg诊断试剂检测符合率99％。结论进口HBsAg诊断试剂具有灵敏度高、特异性强且能确保对突变逃逸株的检出能力。     

HIV抗体诊断试剂的评价及选用策略

目的对实验室常用的HIV抗体初筛试剂的质量进行评估,并探讨选用试剂的策略。方法分别用5种HIV抗体ELISA检测试剂和1种HIV抗体快速诊断试剂以44份已知结果样品和100份未知结果样品进行检测,未知样本初筛结果阳性或可疑阳性时用蛋白印迹法（WB）确认。用诊断性实验性能指标评估各试剂的质量性能。结果6种试剂的综合质量性能指标（有效率）均大于97．9％,本观察组国产试剂的质量性能指标已经接近国际先进产品的水平;HIV快速诊断试剂与ELISA试剂相比灵敏度略低。结论国产常用HW抗体检测初筛试剂能基本满足临床实验室要求．但应根据不同的环境和临床状态合理选择最适实验室试剂。     

HBsAg、抗-HCV及抗-HIV试剂质控结果分析

全国血液质量管理委员会在血站评审时明确要求 ,试剂使用前必须由质控部门对试剂进行抽样检查 ,合格后方可使用 ,笔者将 2 0 0 1年HBsAg、抗 HCV及抗 HIV试剂质控情况分析报告如下。材料与方法1　检测参比品　HBsAg血清盘 :阴性参考品 2 0份 ,阳性参考品 3份 ,灵敏度参考品 4份 ,(1ng/ml,2ng/ml,5ng/ml,高浓度 ) ,精密性参考品 1份 ;抗 HCV血清盘 :阴性、阳性参考品各 4 0份 ,抗 HIV血清盘 :阴阳参考品各 2 0份 ,精密性参考品为阳性 18号。以上产品均由中国药品生物制品检定所提供。表 1　 2 0 0 1年 1～ 12月HBsAg试剂质控结果厂…     

对HIV p24抗原酶联免疫诊断试剂的初步评价

目的 对人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）p24抗原酶联免疫诊断试剂进行初步评价。方法 用实时荧光PCR、ELISA、Western Blotting等方法检测来源于中国不同地区的124份血浆样品的HIVRNA、HIV p24、抗-HIV抗体,并对部分样品进行HIV基因分型。结果 9例HIV抗体阴性样品中有1例HIV p24抗原阳性,证明为窗口期感染;9例HIV抗体不确定者中有2例为HIV p24抗原阳性;103例HIV抗体确证为阳性者中有8例为p24抗原阳性;3例HIV抗体酶联免疫检测为阳性但确证试剂检测为阴性的样品中,均无p24抗原阳性者。结论 HIV p24抗原检测可以检出HIV感染的窗口期,且可以辅助HIV抗体检测试剂对HIV感染的诊断。     

国产人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂质量评价

目的 对不同原理的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体诊断试剂盒的质量评价。方法 3745份特殊人群血样，各种试剂盒同时测定，对检测结果不一致的样品经HIV抗体免疫印迹法试剂盒确证，比较各试剂盒的检测敏感性；用亲和层折纯化的HIV gp4l抗体，测定各不同试剂盒的最低检出量；用10份系列稀释的阳性血清测定试剂盒的综合检测能力。结果 国产间接法抗HIV诊断试剂检测敏感性较第一代同类试剂提高约2—8倍；双抗原夹心法诊断试剂较间接法其敏感性有显著提高，最低检出量提高了4—32倍。结论 国产抗HIV诊断试剂的质量已有了显著提高，尤其是双抗原夹心法诊断试剂，其质量已达到国际先进试剂的水平。     

5种抗-HIV ELISA试剂的质量比较

现对5家试剂厂提供的抗-HIVELISA试剂(其中3家国产的、2家进口)质量进行比较分析如下。1　材料和方法1.1　材料　1检测产品:抗-HIV阳性血清共20份,其中阴性对照20份;2抗-HIV诊断试剂:5种厂家抗HIVELISA诊断试剂分别用大写字母A、B、C、D、E,其中D、E为进口试剂。3芬兰产酶标仪:WellscanMK-3;4芬兰产酶标洗板机:WellwashMK-2。1.2　方法　均按各试剂使用说明书操作,用OD值检测各试剂的灵敏度,用血清参考品检定各厂家试剂的阴阳符合率。2　结果表1　各厂家试剂20份抗-HIV阳性血清OD平均值比较批号OD值A200401152.856B20040…     

评估第4代HIV酶联免疫法诊断试剂对静脉吸毒者感染窗口期的检测能力

目的应用BBI公司血清抗体阳转盘评价第4代人类免疫缺陷病毒（HIV）酶联免疫法诊断试剂（以下简称第4代试剂）对窗口期感染的检测能力,并应用其从静脉吸毒人群样本中筛查窗口期感染者,从而分析第四代试剂检测临床样本的特异性和敏感性。方法首先应用第3代HIV酶联免疫法诊断试剂筛查BBI血清阳转盘和收集的吸毒人群样本,阳性样本进一步用免疫印迹法确认。再用第4代试剂分别检测阴性和阳性样本,阴性样本中出现阳性反应者,进行p24抗原和HIV RNA病毒载量检测,证实是否为窗口期样本。对证实为窗口期的感染者随访至抗体阳转。结果用第3代试剂检测BBI阳转血清盘,未发现阳性样本;检测静脉吸毒人群样本2629份,发现HIV抗体阳性样本77份,经免疫印迹法（WB）确认均为阳性,阴性样本2552份。第4代试剂可检出BBI阳转血清盘第14天的窗口期样本;在2552份静脉吸毒人群抗体阴性样本中检出2份窗口期样本,一例随访至血清阳转,一例失访。临床检测特异性为99.2％,假阳性率0.8％（95％可信区间0．4％～1．1％）。结论第4代试剂比第3代试剂能够更早地发现HIV感染者,降低窗口期漏检,减少HIV传播。     

HIV和梅毒抗体初筛快速检测试剂在预备出国人员体检中的应用

目的通过对预备出国人员HIV和梅毒抗体两项结果的检测，了解目前此类人群的HIV和梅毒抗体的阳性检出率。方法使用HIV1／2快速测试条和甲苯胺红不加热血清实验(TRUST)。结果在2003年5月至9月期间预备出国人员体检的1152份标本中，HIV初筛检测阳性标本6份，经确认实验确证阳性标本0份；梅毒抗体初筛检测阳性标本4份，经确认实验确证阳性标本4份。结论1152份预备出国人员HIV抗体检测阳性率0％；梅毒抗体阳性率0．35％。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价。[方法]制备抗HCV-核心区（Core）抗原四株单克隆抗体，研制出双抗体夹心检测HCV～core抗原酶联免疫检测（ELISA）试剂。三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份，HBsAg阳性100份，抗HIV阳性40份，从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份。[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV—cAg阳性，3份经HCVPCR检测有1份阳性，100份HBsAg阳性，40份抗HIV阳性样本检测均为阴性，在10万份抗HCV抗体筛查样品中，选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV—cAg检测，有4份阳性，4份HCV—cAg阳性样品中有3份HCV—RNA检测阳性。[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度。     

金标层析法与酶联免疫吸附试验初筛 HIV1＋2型抗体对比分析

目的：对金标层析法（GICA）试剂和酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂初筛 HIV1＋2进行对比分析,评估GICA试剂的品质,并将筛查出阳性血清进行免疫印迹试验（WB）确认,探讨筛查结果与WB试验结果的关系。方法选用市面上口碑较好的5个厂家的艾滋病病毒（HIV ）抗体GICA快速筛查试剂与ELISA HIV抗体初筛试剂平行检测16780例血清标本,初筛阳性血清送疾控中心用WB试验做确认,对WB试验结果不确定者进行4、8周随访检测,8周随访标本补充HIV-1病毒载量检测。结果7种试剂敏感性为99．23％～100．00％,其中3种GI-CA试剂在敏感性上已经达到ELISA试剂的水平（100％）,假阳性率为0．08％～0．12％,功效率均在99．80％以上,282例初筛阳性血清经WB法确认有260例为阳性,5例不确定血清经随访检测确定均为阴性,初筛试剂阳性率可达92．20％。结论 GICA检测试剂筛检HIV抗体检测敏感性、特异性和功效率均较高,某些厂家生产的试剂在敏感性、特异性方面已经达到了ELISA试剂的水平,且快速、简便、价廉,是理想的HIV抗体筛查试剂。     

四种酶联免疫吸附试验试剂检测梅毒抗体的比较

目的评价国内常用的4种梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂的有效性,为临床选择梅毒诊断试剂提供依据。方法对180例临床血清分别进行快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）和4种试剂的ELISA（试剂分别为A、B、C、D）。以TPPA结果为参考对照,分别统计各ELISA试剂的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 180例血清标本中,RPR阳性58例,TPPA阳性84例,两者均阴性95例。TPPA检测阳性率为46.67%（84/180）,A试剂为44.44%（80/180）,B试剂为45.00%（81/180）,C试剂为45.00%（81/180）,D试剂为28.33%（51/180）。D试剂与TPPA及其他3种试剂的检测阳性率差异有统计学意义（P均〈0.01）。D试剂的敏感性最差（57.14%）,而其他几种ELISA试剂的敏感性较好（94.05%~95.24%）。4种ELISA试剂的特异性均较理想（96.88%~100.00%）。结论个别国产ELISA试剂的敏感性差,提示在选择这类试剂时,应以质控血清进行预试验,使用符合要求的试剂。     

国产抗-HIV ELISA诊断试剂质量提高的血清学证实

目的　了解国产抗 HIVELISA诊断试剂质量提高情况 ,保证检测结果的准确性。方法　使用卫生部艾滋病预防与控制中心艾滋病参比实验室的试剂质量考核血清盘 ,对 3种国产抗 HIVELISA试剂质量考核 ,并对结果比较分析。结果　 2 0 0 1年生产的抗 HIVELISA诊断试剂敏感性比 1998、1999年的试剂明显提高 ,阳性漏检率明显减少。结论　国产抗 HIVELISA诊断试剂质量在不断提高 ,双抗原夹心法试剂敏感性优于间接法试剂     

国产梅毒螺旋体酶联免疫诊断试剂盒质量评价

目的 比较国产梅毒螺旋体酶联免疫诊断试剂盒的质量差异,优选适宜于献血者梅毒螺旋体检测的试剂盒.方法 应用中国药品生物制品检定所提供的梅毒螺旋体国家参考品和卫生部临床检验中心提供的梅毒螺旋体临界值质控血清,对所购进的试剂盒进行质量评价.结果 5个厂家试剂的阴性符合率、阳性符合率、总符合率、灵敏度和精密度存有一定差别,个别厂家试剂有假阳性出现和临界值质控血清未检出.结论 不同厂家的试剂质量存在明显差异,因此试剂使用前必须进行质量抽检,综合评价其质量.选择灵敏度高、特异性强的试剂,以提高献血者梅毒螺旋体的检测质量.     

丙型肝炎病毒抗体检测试剂在高危人群中的应用评价

目的 对研制的丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂（双抗原夹心法）在高危人群中的应用进行评价,并与间接法进行比较。方法 收集河北省固安县丙型肝炎高发地区A村38份、B村47份,共85份样品,采用研制的抗-HCV检测试剂（双抗原夹心法）及间接法同时测定样品抗-HCV,对检测结果不符的样品用HCV-RIBA补充试剂进行确认。结果 85份样品中,间接法检测阳性76份（89．41％）,阴性9份;双抗原夹心法检出阳性73份（85．88％）,阴性12份。有3份间接法检测弱阳性,而双抗原夹心法检测为阴性,经HCV-RIBA补充试剂确认2份为阴性,1份仅1条带阳性,再经病毒核酸定量检测为（1．2～4．8）×10^2copies／ml,HCVRNA测定为阴性。结论 研制的双抗原夹心法抗-HCV检测试剂的灵敏度与间接法相同,特异性优于间接法。     

ELISA法HBsAg检测试剂盒质量评价

目的比较国产ELISA法HBsAg检测试剂盒的质量差异,优选适宜于献血者HBsAg检测的试剂盒。方法应用HBsAg国家参考品对所购进的试剂盒进行质量评价。结果5个厂家试剂的阴性符合率、阳性符合率、总符合率、灵敏度和精密度存有一定差别,2个厂家试剂有假阳性出现,2个厂家的试剂有最低检出限量参考品未检出。结论不同厂家的试剂质量存在明显差异,因此试剂使用前必须进行质量抽检,综合评价其质量。选择灵敏度高、特异性强的试剂,以提高献血者HBsAg的检测质量。     

丙型肝炎国产诊断试剂与第三代进口试剂的临床比较研究

目的考察丙型肝炎（丙肝）国产改进酶标诊断试剂与国外第三代主流试剂的灵敏度与特异性。方法用改进后的国产新伟凯公司丙肝试剂（ＸＷＫ）和两种国外第三代主流试剂（Ａ３，Ｏ３）检测了２８８２份供血员血样和５５６份各种肝炎病人血样。结果３种试剂（ＸＷＫ，Ａ３，Ｏ３）分别检出３８０，３７８和３７１份阳性样品，经免疫印迹条法（ＲＩＢＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法确证，３种试剂的假阳性数分别为７，６和１份，假阴性数分别为１，２和４份。结果说明，改进后的国产丙肝试剂，其检出灵敏度与目前国际上最新一代试剂接近，但其特异性略逊于国外两种第三代主流试剂。结论分析ＲＩＢＡ和ＰＣＲ所测得的３种试剂漏检样品的结果可以看出，目前国际上的第三代丙肝酶标试剂对丙肝核心抗体的检出灵敏度较低，这一点与我们以前的研究结果相同。而改进后的国产丙肝试剂既赶上了国外第三代试剂对丙肝ＮＳ３抗体的检出力度，同时又避免了国外试剂所暴露出的对丙肝核心抗体检出力弱的缺点。     

丝虫特异IgG4酶联免疫吸附测定试验检测试剂盒应用价值的研究

目的探讨丝虫特异IgG4酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测试剂盒检测丝虫病患者血清和滤纸血中特异IgG4亚类抗体的敏感度和特异度并评价其应用价值。 方法应用丝虫特异IgG4 ELISA检测试剂盒,检测微丝蚴阳性患者血清或滤纸血、其他蠕虫患者血清、晚期丝虫病患者滤纸血、原微丝蚴血症转阴者滤纸血和基本消除丝虫病后出生儿童滤纸血以及消除丝虫病后不同时间居民血清或滤纸血样本。采用两相关样本的非参数检验,分析血清与滤纸血检测相同稀释度下的IgG4的A值差异。 结果检测86例微丝蚴阳性患者血清,显示丝虫特异IgG4阳性81例,阳性符合率94.19%。检测97份其他蠕虫患者血清、58份阴性冻存血清和100份正常健康人对照血清,显示丝虫特异IgG4全部阴性,阴性符合率100%。4例现症微丝蚴血症患者,血清和滤纸血丝虫特异IgG4全部阳性,血清阳性吸光度(A)值均高于同一患者滤纸血样本A值,但差异无统计学意义(Z＝－1.826,P>0.05)。检测48例晚期丝虫病患者滤纸血、76例原微丝蚴血症转阴者滤纸血、312例基本消除丝虫病地区1983年后出生儿童滤纸血,显示丝虫特异IgG4全部阴性。检测原丝虫病高中度流行地区消除丝虫病后的枣庄、泰安和济宁地市居民滤纸血和血清样本分别为2744份、2243份和800份,显示丝虫特异IgG4全部阴性。 结论丝虫特异IgG4酶联免疫吸附测定试验的检测试剂盒敏感度高、特异度强、操作简便快捷,特别适用于丝虫病诊断和消除丝虫病地区的疾病监测。