何首乌中核苷类成分QTRAP UPLC-MS/MS分析

目的:建立同时测定何首乌中10种核苷类成分的QTRAP UPLC-MS/MS分析方法,分析比较生何首乌和制何首乌中核苷类成分的差异。方法:采用QTRAP UPLC-MS/MS技术,Waters Atlantis T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm),流动相甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵(含0.1%冰乙酸),0.4 m L·min-1梯度洗脱,采用正离子多反应监测模式测定何首乌商品药材中10种核苷类成分的含量。结果:10种核苷类成分具有良好的线性关系,相关系数均0.99;何首乌商品药材中核苷类成分尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胞苷含量均较高;生何首乌与制何首乌中核苷类成分含量差异明显。结论:该方法简便、灵敏、准确。该研究为何首乌药材内在质量的评价和控制提供可靠的检测方法。     

基于液质联用技术对不同产地淡豆豉核苷和氨基酸类成分的分析

目的:建立液质联用技术同时测定不同产地淡豆豉中38种核苷和氨基酸类含量的方法。方法:采用超快速液相色谱和三重四极杆-线性离子阱串联质谱以及亲水色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm),流动相0.2%甲酸水-0.2%甲酸乙腈梯度洗脱,流速0.6 m L·min-1,采用电喷雾正离子化及多反应监测模式(MRM),对安徽、江苏、河南3个产区不同采收期共8个批次淡豆豉中的22种氨基酸类和16种核苷类成分进行含量测定;并对结果进行PCA-DA聚类分析及t检验。结果:所建方法使淡豆豉中22种氨基酸类和16种核苷类成分得到较好分离,浓度与峰面积呈良好的线性关系,加样回收率在93.74%~104.32%,RSD在0.6%~3.5%;8个批次样品基本可以测得22种氨基酸类和16种核苷类成分,各批次间核苷与氨基酸的含量都有明显差异,总氨基酸质量分数在7.241~34.21 mg·g-1,总核苷质量分数在14.21~82.53 mg·g-1;不同产地样品的氨基酸含量高低排序为安徽产江苏产河南产,不同产地样品的核苷含量高低排序为江苏产与安徽产河南产,同一产地贮存时间短的样品总氨基酸和总核苷含量也高于贮存时间长的。结论:该方法适用于38种核苷和氨基酸类成分含量的同时测定,比较了不同产地淡豆豉的差异性,在一定程度上反应了不同产区间淡豆豉的质量优劣,为后续药效活性研究提供参考。     

HILIC-HPLC-MS/MS测定酸枣仁内氨基酸类成分的含量

目的:建立酸枣仁药材中游离氨基酸类成分的分析方法。方法:采用多反应离子监测(MRM)方式用Waters XevoTMTQ质谱仪进行检测。以A(含5 mmol·L~(-1)乙酸胺,0.15%甲酸和5 mmol·L~(-1)甲酸胺的水溶液)和B(含0.05%甲酸,1mmol·L~(-1)甲酸胺和1 mmol·L~(-1)乙酸胺的乙腈溶液)作为流动相,采用梯度洗脱,色谱柱为Acquity UPLC BEH Amide(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温35℃,流速0.4 m L·min~(-1)。结果:所测氨基酸成分在12 min内分离良好,在相应的浓度范围内与各峰面积呈良好的线性关系,相关系数均0.990 4;加样回收率(n=6)为95.57%~105.36%,RSD均6.7%。结论:本文所建立的分析方法可用于酸枣仁的质量分析及控制,并为氨基酸类成分的检测提供了方法学参考。     

常见水果中核苷类成分分析

目的：建立HPLC法分别测定桑葚、荔枝、杨梅、苹果中核苷类成分。方法：采用Agilent TC—C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-10mmol·L-1乙酸铵为流动相梯度洗脱,流速0．5mL·min-1,检测波长260nm,柱温30℃,测定了桑葚、荔枝、杨梅、苹果中核苷类成分。结果：4种水果中均含有一定的核苷类成分,桑葚中所含核苷类成分总含量最高。结论：核苷类成分在水果中广泛存在,核苷类成分因水果种类不同其组成和含量存在显著差异。所含核苷类成分所具有的生物活性与其保健功效有一定相关性。     

UPLC法同时测定彝药多星韭中四种核苷类成分的含量

目的:建立UPLC同时测定彝医药食同源植物多星韭不同部位腺嘌呤、鸟嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷的方法,比较不同采收期不同部位4种核苷类成分的含量。方法:采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm×2.1mm,1.8μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温30℃,体积流量0.2 m L/min,进样量2μL,检测波长为260 nm。结果:腺嘌呤、鸟嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷含量分别在6.80~95.20μg/m L、6.70~93.80μg/m L、6.50~91.00μg/m L、7.20~100.80μg/m L线性范围内与峰面积呈良好线性关系,r为0.9995~0.9999,平均回收率为98.25%~101.38%,RSD≤2.32%;4种核苷类成分总含量在花期前花期后,花蕾叶种子根。结论:建立的方法操作简单、稳定性好、准确可靠,可用于同时测定药食同源植物多星韭中4种核苷类成分的含量,为开发利用多星韭提供依据。     

基于HILIC-UPLC-MS/MS测定酸枣仁核苷及碱基类成分

目的:建立HILIC模式超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法(HILIC-UPLC-MS/MS)同时测定酸枣仁中11种核苷及碱基类成分的含量。方法:采用Acquity UPLC BEH Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),配有Amide 1.7μm Van Guard保护柱,以10 mmol·L-1乙酸铵-0.8%乙酸水(A)和0.1%乙酸-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,10%A;5~7 min,10%~40%A),流速0.3 m L·min-1,柱温35℃,进样体积1μL,Waters XevoTMTQ质谱仪以多反应离子监测(MRM)方式,进行正离子检测。结果:所测成分在7 min内实现分离,各核苷及碱基类成分在0.002 32~8.66 mg·L~(-1)与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均0.992 2;加样回收率(n=6)为92.1%~108.2%,RSD均7%。各批次各核苷及碱基类成分的含量具有一定的差异。10批样品总核苷及碱基类质量分数在24.5~48.48μg·g-1,其中以10号样品含量最低,2号样品最高。各种核苷类成分中,尿苷含量最高(平均值14.84μg·g-1),胸苷质量分数最低(平均值0.14μg·g-1)。结论:该方法具有简便、快速、重复性好,专属性强等特点,适用于酸枣仁中核苷及碱基类成分的快速定量分析。     

亲水作用色谱串联质谱法分析三七药材中游离氨基酸类成分

目的：建立三七药材中游离氨基酸类成分的分析方法。方法：采用亲水作用色谱串联质谱测定三七药材中22种游离氨基酸,ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱 （2.1 mm×100 mm,1.7μm）,流动相A含5 mmol·L^-1甲酸胺、5 mmol·L^-1乙酸铵和0.15%甲酸水溶液,B含1 mmol·L^-1 甲酸铵、1 mmol·L^-1乙酸铵和0.05%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱（0~6 min,15%~20%A;6~10 min,20%~30%A;10~11 min,30%~46%A）,流速0.4 mL·min^-1,柱温35 ℃;串联质谱正离子多反应模式检测（MRM）。结果：在12 min内22种氨基酸得到较好分离,22种氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数 0.991 7~0.999 9,回收率93.7%~104.7%,日内精密1.13%~4.95%,日间精密度1.84%~5.62%,10批三七药材样品中22种游离氨基酸总含量在4.72~5.96 mg·g^-1。结论：该方法简便、快速、灵敏,适用于三七药材中氨基酸类成分的测定,为三七药材全面质量控制方法的建立提供依据。     

冬虫夏草不同部位核苷类成分比较分析

目的：建立一种同时测定冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素5种核苷类成分含量的高效液相色谱法。方法：ZORBAX SB-Aq（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长260 nm,柱温30℃,流速0.8 mL·min-1。结果：对6批冬虫夏草样本子座、虫体和全草的核苷类成分进行了分析,结果发现冬虫夏草子座核苷类成分含量高于虫体和全草。结论：该方法重复性好,准确性高,可用于冬草夏草中核苷类成分的含量测定。     

9种果实、种子类补益中药的核苷类成分分析

目的:分析了9种常用果实、种子类补益中药大枣、枸杞子、覆盆子、桑椹、龙眼肉、菟丝子、韭菜子、五味子、核桃仁中的核苷类成分。方法:采用HPLC以甲醇-10 mmol.L-1乙酸铵为流动相梯度洗脱,流速0.5 mL.min-1,检测波长260 nm,柱温30℃。结果:在所测药材中普遍含有尿苷,且含量较高;环磷酸腺苷仅在大枣中含有;桑椹中所含核苷类成分总含量相对较高。结论:核苷类成分在所测果实、种子类补益中药中广泛存在;核苷类成分因植物基源不同其组成及其含量存在显著差异,提示该类成分可作为药材质量评价的指标性成分;所含核苷类成分具有的生物活性与其补益功效存在一定的相关性。     

白花蛇舌草及其混淆品中5种抗肿瘤核苷类成分含量测定

目的建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定白花蛇舌草及其混淆品中胞苷、尿苷、腺嘌呤、胸苷和腺苷5种抗肿瘤核苷类成分的方法,并比较其含量差异。方法采用UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.5 m L/min,柱温30℃。结果 5种核苷类成分线性关系、精密度、稳定性、重复性均符合方法学相关要求,加样回收率为98.7%~101.5%。应用所建方法测定了不同产地白花蛇舌草和其常见混淆品中5种核苷类成分的含量。结论本研究所建立的方法简单、快速、准确、可靠,适用于白花蛇舌草及其混淆品中核苷类成分的含量测定。     

QTRAP-UFLC-MS/MS同时测定不同产地番荔枝子中氨基酸和核苷类成分的含量及PCA和TOPSIS分析

目的建立超快速液相色谱-串联四级杆/线性离子阱质谱(QTRAP-UFLC-MS/MS)同时测定不同产地番荔枝子中氨基酸和核苷类成分含量的方法,分析比较不同产地样品中25种成分的差异,为番荔枝子资源的综合利用提供科学依据。方法采用Waters XBridge Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm);以0.2%甲酸水(A)-0.2%甲酸乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.6 m L/min;柱温30℃,正离子多反应监测(MRM)模式测定。采用主成分分析(PCA)和TOPSIS分析对不同产地番荔枝子进行综合性评价。结果 15种氨基酸和10种核苷类成分的浓度与峰面积呈良好的线性关系(r~20.994 7);方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3.87%;平均加样回收率在94.90%~98.78%,RSD在0.84%~3.01%。不同产地番荔枝子中氨基酸和核苷类成分存在一定的差异性,其中海南产的综合质量最高。结论该方法简便、准确、可靠,可根据目标成分优选不同产地的番荔枝子,也为其质量评价提供了可靠的依据。     

UPLC法同时测定彝药多星韭中四种核苷类成分的含量北大核心CSCD

目的：建立UPLC同时测定彝医药食同源植物多星韭不同部位腺嘌呤、鸟嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷的方法,比较不同采收期不同部位4种核苷类成分的含量。方法：采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3（100 mm×2.1mm,1.8μm）,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温30℃,体积流量0.2 m L/min,进样量2μL,检测波长为260 nm。结果：腺嘌呤、鸟嘌呤核苷、胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷含量分别在6.80～95.20μg/m L、6.70～93.80μg/m L、6.50～91.00μg/m L、7.20～100.80μg/m L线性范围内与峰面积呈良好线性关系,r为0.9995～0.9999,平均回收率为98.25%～101.38%,RSD≤2.32%;4种核苷类成分总含量在花期前〉花期后,花蕾〉叶〉种子〉根。结论：建立的方法操作简单、稳定性好、准确可靠,可用于同时测定药食同源植物多星韭中4种核苷类成分的含量,为开发利用多星韭提供依据。     

UPLC-MS/MS法同时测定生地黄饮片中7种核苷类成分的含量

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定生地黄饮片中7种核苷类成分(2′-脱氧腺苷、次黄嘌呤、腺嘌呤、腺苷、肌苷、尿嘧啶、尿苷)的含量。方法:采用Waters BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸溶液﹣甲醇为流动相,梯度洗脱;正离子多反应监测(MRM)模式来检测生地黄饮片中7种核苷类成分的含量。结果:7种核苷类成分在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.9913,加样回收率为98.54%～102.07%,RSD值均小于3.19%。结论:该方法可快速、准确地对生地黄饮片中7种核苷类成分进行定性定量分析。     

空心莲子草的高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的利用高效毛细管电泳技术建立空心莲子草药材的指纹图谱。方法采用60cm×75μm毛细管柱,以50mmol/L硼砂溶液-50mmol/L磷酸盐溶液为缓冲液,运行电压为20kV,检测波长220nm,柱温25℃。结果建立的指纹图谱中共有18个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论该法准确简便,可作为控制空心莲子草药材内在质量的有效手段。     

UPLC法同时测定不同产地桔梗中13种核苷类成分

目的:建立UPLC法同时测定不同产地桔梗中13种核苷类成分的含量。方法:采用超声法提取,色谱柱:Waters HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈(A)-0.01%甲酸溶液(B),梯度洗脱(1~8 min,0%~8%A;8~9 min,8%~15%A;9~10.5 min,15%A;10.5~11 min,15%~0%A;11~15 min,0%A);柱温为30℃,流速为0.3 m L/min,检测波长为260 nm;进样量为3μL。结果:不同产地桔梗中13种核苷类化合物的含量差异很大,总含量最高为山东泰安(1451.40μg/g),最低为河南南阳(325.86μg/g)。结论:UPLC方法操作简便,准确可靠,重复性高,可用于桔梗药材中核苷类成分含量的测定,可作为不同产地桔梗质量控制的一种评价指标。     

LC-MS/MS同时测定消喘膏中3种化学成分

目的：建立同时测定消喘膏中芥子碱硫氰酸盐、延胡索乙素和细辛脂素含量的方法。方法：采用液相色谱-串联质谱联用技术。色谱柱为Waters Symmetry C18（150 mm×2.10 mm,5μm）,流动相为甲醇（0.2%甲酸和2 mmol/L甲酸铵）和水（0.2%甲酸和2 mmol/L甲酸铵）,梯度洗脱;质谱条件：采用电喷雾离子源正离子模式,通过多反应监测（MRM）模式同时监测复方中3种成分。结果：3种成分线性回归方程的r值均≥0.9990。平均加样回收率为71.4%～88.7%,RSD范围为7.3%～11.1%（n均为6）。结论：本法简便、快速、灵敏度高、专属性好,可用于消喘膏中芥子碱硫氰酸盐、延胡索乙素和细辛脂素的含量测定。     

HPLC-MS/MS法测定体外培育牛黄与天然牛黄中26种胆汁酸成分

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定体外培育牛黄Calculus Bovis Sativus(CBS)和天然牛黄Calculus Bovis(CB)中26种胆汁酸成分。方法 Symmetry C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为水(0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵)-甲醇(0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵),体积流量0.15 m L/min,梯度洗脱,进样量为10μL。质谱采用电喷雾离子源,负离子模式监测,喷射电压-4 500 V,离子源温度350℃,采用多反应监测模式(MRM)。结果牛黄中26种胆汁酸在线性范围内峰面积与摩尔浓度均呈良好的线性关系(r≥0.991 4),加样回收率为98.2%~102.3%,精密度RSD值小于0.95%,CBS和CB的胆汁酸类成分在种类和含量上存在一定差异。结论该法灵敏度高、专属性好、结果可靠,适用于牛黄中胆汁酸成分的测定。     

空心莲子草的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立空心莲子草药材的指纹图谱分析方法,探讨不同国家和地区空心莲子草药材的品质差异.方法 采用反相高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.12%磷酸水溶液系统,线性梯度洗脱,检测波长345mm,进样量为10μl.结果 建立了空心莲子草药材的HPLC指纹图谱,确立了空心莲子草药材指纹图谱中的17个共有峰,计算了12批空心莲子草药材指纹图谱与对照图谱的相似度.结论 所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性,能够用于空心莲子草药材的质量控制.     

HPLC-PDA同时测定不同品种及产地蜈蚣中8种核苷类成分

目的:建立同时检测不同品种、不同产地蜈蚣样品中8种核苷类成分(胞嘧啶,胞苷,次黄嘌呤,黄嘌呤,尿苷,胸腺嘧啶,2'-脱氧肌苷和胸苷)含量的高效液相色谱法。方法:不同品种及产地蜈蚣提取物的分析选用Hedera ODS-2 C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃,检测波长254 nm,进样量5μL。结果:8种核苷类成分分离良好;在一定质量浓度内线性关系良好(r0.999 9);加样回收率在95.73%~102.6%;11个批次蜈蚣样品中均含有8种核苷类成分,但含量存在差异。不同品种、不同产地的蜈蚣中核苷成分总量墨江蜈蚣含量最高,多棘蜈蚣其次,少棘巨蜈蚣和黑头蜈蚣中核苷类总成分比较接近。蜈蚣中次黄嘌呤和黄嘌呤明显高于其他核苷成分,少棘巨蜈蚣中次黄嘌呤的含量要高于其他品种。结论:该文所建立的方法快速简便,重复性、准确度良好,为蜈蚣的质量控制提供依据。     

麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分区域差异性分析

为了揭示麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分的区域特征,采用UPLC-QTRAP~?/MS2方法对4个地区39批次麋鹿角中37种核苷类和氨基酸类成分进行含量测定,并利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及聚类分析法(CA)进行综合质量评价。结果显示,不同地区麋鹿角中均含有丰富的核苷类和氨基酸类成分,总质量分数分别可达45.09、634.80μg·g~(-1),所含成分种类及总量差异较小,但各地区之间各成分含量存在显著差异,主要差异成分为Ura、Hpro、Thr、Glu、G5P、2'-dG、Adeno、Met、Ade、Gln、Orni、Phe、2'-dA、Hit、Lys和Ile。其中,Ura、Met、Glu和Ile分别在江苏大丰、江苏溱湖、北京和湖北石首这些区域的麋鹿角药材中含量最高。OPLS-DA及CA分析结果均显示基于核苷类、游离氨基酸类成分的数据信息可将所有麋鹿角样品分为3类,反映出麋鹿角样品的区域特征性。研究结果提示麋鹿角中核苷类、游离氨基酸类成分的积累与其生境密切相关,为麋鹿角药材的品质形成研究、内在质量评价及控制以及麋鹿角的综合利用提供了有益参考。鉴于研究发现,建议可将Ura、Met、Glu和Ile的含量因素作为不同地区药材特征纳入麋鹿角质量标准体系。