褐藻糖胶对人白血病细胞株K562凋亡的影响

目的探讨海带提取物褐藻糖胶对体外培养的人髓系白血病细胞株K562生长的影响．从细胞凋亡角度研究其抗肿瘤机制。方法采用肿瘤细胞体外培养、单细胞凝胶电泳、凋亡细胞DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞技术．观察不同剂量褐藻糖胶对体外培养的白血病细胞株K562细胞的影响。结果噻唑蓝（MTT）实验结果显示，褐藻糖胶对K562细胞均具有较强的杀伤作用，尤其以1g／L剂量组为明显。单细胞凝胶电泳实验结果表明，褐藻糖胶对肿瘤细胞DNA有明显损伤作用．尤其以1g／L剂量组的影响最为明显。DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测结果显示．经褐藻糖胶处理后，肿瘤细胞洲亡率上升，其中1g／L剂量组较为明显。提示褐藻糖胶可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。结论褐藻糖胶可通过诱导肿瘤细胞凋亡，从而达到抗肿瘤的目的。     

低浓度力达霉素对人白血病细胞K562增殖的抑制作用

目的探讨低浓度力达霉素(LDM)对人白血病细胞K562增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法以不同浓度LDM处理K562细胞48 h,通过MTT法检测LDM对细胞增殖的抑制作用;利用苔盼蓝染色对细胞活性进行测定;利用瑞氏-姬姆萨染色法观察LDM对细胞形态的影响;Elisa法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在细胞培养上清中的表达;采用Western Blot检测凋亡相关蛋白TNF-α的表达。结果 LDM对K562细胞增殖有一定的抑制作用,用10-12、10-11、10-10、10-9、10-8mol/L浓度的LDM分别作用K562细胞48 h,抑制率分别为(21.2±2.48)%、(37.5±0.88)%、(52.1±1.24)%、(64.5±1.61)%和(71.3±2.00)%。通过瑞氏姬姆萨染色,荧光显微镜下可见胞膜皱缩,有泡状突起及不规则凹陷,胞核染色质浓缩,固缩,浓染,断裂成团块分散在胞膜周边。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清,LDM处理组与对照组相比,TNF-α表达水平升高。Western Blot分析显示,分别用10-8、10-10、10-12 mol/L浓度的LDM处理细胞48 h后,TNF-α蛋白的表达量依次为0.42±0.01、1.67±0.13(P0.01)和2.41±0.08(P0.01),与对照组0.23±0.02相比,吸光度值比升高。结论低浓度LDM可能通过上调TNF-α表达水平诱导K562细胞凋亡抑制其增殖。     

枸杞多糖对人白血病细胞株凋亡的影响

目的 :　探讨枸杞多糖 ( LBP- X)对人白血病 HL- 60细胞凋亡的影响。方法 :　 LBP-X与 HL- 60细胞共培养 ,MTT法检测 LBP- X对 HL- 60细胞增殖的抑制作用 ;以 DPH为荧光探针检测细胞膜流动性的变化 ;用 Hoechst332 5 8染色在荧光显微镜下观察细胞核形态学变化 ;琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞仪检测法定性定量检测细胞凋亡。结果 :　LBP- X2 0～ 1 0 0 0 mg/L呈剂量依赖性抑制 HL- 60细胞增殖 ,且可降低 HL- 60细胞膜的流动性 ;LBP- X作用 48h后 ,荧光显微镜下细胞核固缩、凝聚和断裂 ,出现浓染致密的颗粒块状荧光 ;DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显的“DNA条带”;流式细胞仪分析图上出现凋亡峰。结论 :　 LBP- X对诱导人白血病 HL- 60细胞凋亡有一定作用。     

氯化甲基汞及三氧化二砷对K562细胞凋亡的影响

目的研究氯化甲基汞（MMC）及三氧化二砷（ATO）对K562细胞凋亡的影响。方法K562细胞经1．25、2．5、5、10和20μmol／LMMC或ATO作用24h，采用FITC-“Annexin”V／PI双染法进行细胞凋亡率的检测。结果K562细胞接触不同剂量MMC或ATO 24h，随着剂量增加凋亡率不断增加，5．0μmol／L的细胞凋亡率分别为（31．54±6．35）％和（25．37±7．68）％，与空白对照组（10．36±3．23）％比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MMC及ATO均能促进K562细胞凋亡，且呈剂量依赖性。     

漆姑草水提物对K562细胞凋亡及细胞周期影响

目的 探讨漆姑草水提物(HSJ)对人白血病细胞株K562细胞凋亡及细胞周期影响。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HSJ对K562细胞的增殖抑制作用;台盼蓝拒染法观察HSJ对细胞生长曲线影响;流式细胞仪检测HSJ对K562细胞凋亡影响;DNA倍体分析法检测HSJ对K562细胞周期时相影响。结果 HSJ对K562细胞增殖抑制率随剂量增加而增加,作用48 h半数抑制浓度(IC₅₀)为1.35 mg/mL; 1.0、2.0、4.0 mg/mL HSJ处理后,K562细胞凋亡率分别为(8.39±0.81)%、(8.88±1.12)%、(13.42±2.04)%,均高于对照组的(4.60±1.09)%(P<0.05);HSJ能够引起细胞周期进程的改变,与对照组比较,HSJ增加K562细胞中G2期细胞比例(P<0.05),降低S期时相细胞比例(P<0.05),降低增殖指数(PI)(P<0.05),HSJ将K562细胞阻滞于G2期。结论 HSJ对K562细胞具有增殖抑制作用,其机制与诱导细胞凋亡和阻滞K562细胞在G2期有关。     

LXA4对人白血病细胞K562与HL60膜受体ALX表达的影响

目的比较脂氧素A4受体(lipoxin A4 receptor,ALX)在人白血病细胞K562与HL60细胞的表达情况,研究脂氧素A4(Lipoxin A4,LXA4)对K562与HL60膜受体ALX的表达影响,探索LXA4对K562与HL60细胞作用效应强弱不同的可能因素。方法体外培养人白血病细胞K562与HL60,实验分为空白组和LXA4(50、100、200 nmol/L)处理组。采用免疫荧光技术检测K562和HL60细胞是否表达LXA4受体ALX;用不同浓度LXA4作用24 h后,RT-PCR和Western blotting检测并比较各实验组K562与HL60膜受体ALX的表达变化。结果免疫荧光检测显示,K562与HL60胞膜周围及胞浆内有明显绿色荧光,提示二者表达LXA4受体ALX;RT-PCR和Western blotting检测结果表明:随LXA4作用浓度的增高,K562与HL60细胞膜受体ALX的表达呈增高趋势(P<0.05),组间比较,ALX表达差异无统计学意义(P>0.05);K562与HL60空白组比较即从基础水平比较ALX的表达水平无明显差异(P>0.05)。结论 LXA4可上调K562与HL60膜受体ALX的表达,且LXA4对K562与HL60效应强弱的不同并非ALX基础表达水平不同所导致,可能存在其他影响因素。     

厚朴酚对白血病细胞K562体外作用机制探讨

目的探讨中草药提取物厚朴酚对慢性髓性白血病细胞株K562的体外作用机制。方法选用不同浓度(0、5、10、15、20、25μmol/L)厚朴酚处理K562细胞不同时间(24 h、48 h),用MMT方法测定厚朴酚对K562细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测厚朴酚对K562细胞凋亡的影响。结果厚朴酚对K562有明显的增殖抑制作用,呈明显的时间-剂量依赖关系;其作用24 h、48 h的半数有效抑制率(IC50)分别为9.05、5.62μmol/L(P0.05)。流式细胞术检测结果显示,0、5、10、15μmol/L厚朴酚处理24 h后细胞凋亡率分别为1.35%、16.91%、29.61%、46.26%,呈剂量-时间依赖性(P0.05);同时厚朴酚能够抑制BCL-2的表达、上调Bax、细胞色素C及活化的caspase-3、caspase-9的表达。结论厚朴酚对K562细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用可能是通过caspase依赖的线粒体途径诱导细胞凋亡的。     

白藜芦醇对K562细胞增殖凋亡及分化的影响

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人K562细胞增殖、凋亡、分化及血红蛋白合成的影响。方法通过细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测Res对K562细胞增殖的影响,流式细胞分析仪检测Res对K562细胞凋亡率的影响,联苯胺染色及血红蛋白测定检测Res对K562细胞红系分化及血红蛋白合成的作用。结果不同浓度Res作用后可时间和剂量依赖性地抑制K562细胞的增殖,可浓度依赖性地促进K562细胞的凋亡;Res单独作用后未能引起K562细胞联苯胺染色阳性率和血红蛋白含量发生变化。而Res预处理后能增加氯化血红素诱导的细胞联苯胺染色阳性率和血红蛋白含量。结论白藜芦醇能够抑制K562细胞增殖、促进其凋亡,白藜芦醇可增强K562细胞红系分化的能力,但并不能直接引起K562细胞的红系分化。     

铝离子对K562细胞红系分化能力抑制作用

目的 研究铝离子对K562细胞红系分化能力的影响.方法 应用台盼蓝染色排除法分析铝离子对K562细胞的活力的影响;应用联苯胺染色法检测铝离子作用下K562细胞的红系分化率;利用荧光标记抗体结合流式细胞技术分析铝离子处理K562细胞的细胞表面转铁蛋白受体CD71的表达.结果 50、100和150μmol/L铝离子作用24～72 h对K562细胞生长有浓度依赖性抑制作用,各浓度组作用72 h时的相对活力分别为(89.23±4.37)%、(52.78±1.58)%和(44.69±1.95)%;铝离子作用48 h对氯化高铁血红素诱导的K562细胞血红蛋白合成表现出较为明显的浓度依赖性抑制,相对于对照组细胞,各浓度组的血红蛋白合成抑制率分别为3.37%、8.61%和10.55%;经100μmol/L铝离子处理48 h后的K562细胞表面CD71的表达水平增加27.7%.结论 一定浓度的铝离子对K562细胞的红系分化能力有抑制作用.     

植物单宁对K562细胞诱导红系分化抑制作用

目的研究可水解单宁诃子酸和特里马素I对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素I对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型糖蛋白A(GPA)在细胞表面的表达。结果诃子酸和特里马素I在0.04~0.09 mmol/L浓度下均可显著抑制K562细胞的生长增殖。2种单宁化合物(0.002~0.01 mmol/L)可显著抑制丁酸钠诱导的K562细胞血红蛋白合成,2种单宁化合物(0.01~0.05 mmol/L)还可显著抑制氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成,特里马素I(0.01 mmol/L)还抑制丁酸钠诱导的GPA在细胞表面表达。结论诃子酸和特里马素I对红系分化有抑制作用。     

复方君子汤对抑制白血病K562细胞生长增殖和诱导凋亡的作用

目的研究分析复方君子汤(FFJZ)对抑制白血病K562细胞生长增殖和诱导凋亡的作用。方法应用台盼蓝拒染法、细胞形态学等对细胞生长状态进行观察,应用四氮甲唑蓝对细胞的增殖情况进行检测,应用流式细胞术对细胞的凋亡率进行检测。结果在浓度为2mg/mL复方君子汤作用下,其细胞抑制率和诱导凋亡效果不明显,与空白对照组对比无统计学意义(P>0.05),在浓度为4mg/mL作用下,细胞抑制率和凋亡发生率上升,与空白对照组对比差异显著,差异有统计学意义(P<0.05),发生凋亡主要为早凋。随着浓度的不断增高,细胞抑制率和凋亡发生率逐渐上升,差异有统计学意义(P<0.05),发生凋亡晚期增多。结论实施复方君子汤可有效抑制白血病K562细胞生长增殖,并对其起到有效的诱导导致白血病K562细胞凋零,大大提高患者生命质量,值得在临床医学中推广使用。     

三氧化二砷联用华蟾素对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究三氧化二砷联用华蟾素对K562细胞增殖和凋亡的影响,为三氧化二砷和华蟾素联合应用于临床提供理论依据.方法 细胞增殖采用细胞生长及活力测定;细胞凋亡采用细胞形态、Annexin-V/PI双染实验、DNA的PI染色及DNA电泳等方法 测定.结果 在三氧化二砷和华蟾素作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降,1.0 μmol/L As2O3、0.125μg/rnl华蟾素、0.25 μg/ml华蟾素、1.0 μmol/L As2O3＋0.125μg/ml华蟾素、1.0 μmol/L As2O3＋0.25μg/ml华蟾素作用K562细胞24 h和48 h后,增殖抑制率分别为（24±1.3）%、（21±1.5）%、（38±3.1）%、（57±2.7）%、（66±3.3）%及（49±2.9）%、（48±2.7）%、（61±2.1）%、（77±3.8）%、（82±4.2）%,细胞凋亡率分别为（4.8±0.5）%、（5.6±0.7）%、（9.8±0.6）%、（11.9±1.2）%、（15.2±1.5）%及（11.0±0.9）%、（12.9±1.1）%、（18.4±1.5）%、（21.0±2.0）%、（28.0±1.9）%,凋亡细胞百分率呈时间剂量依赖关系;基因组DNA电泳出现＂梯＂状条带.结论 三氧化二砷和华蟾素均有抑制K562细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用,两药联用效果更佳.     

三氧化二砷联用华蟾素对K562细胞增殖和凋亡的影响

Objective To investigate the effect of As2 O3 in combination with cinobufacini on proliferation and apoptosis of the K562 cells and provide theoretical basis for clinical application.Methods Cell proliferation was assayed by analyzing the growth and viability of the cells.Apoptosis was assayed by performing cell morphology,Annexin-V/PI staining,DNA-PI staining,and DNA gel electrophoresis.Results After exposure to As2O3 and cinobufacini,the growth of K562 cells was inhibited and the viability of K562 cells was decreased. After treated with 1.0μmol/L As2O3,0.125μg/ml cinobufacini,0.25μg/ml cinobufacini,1.0μmol/L As2O3 + 0.125 μg/ml cinobufacini,1.0μmol/L As2O3 + 0.25μg/ml cinobufacini for 24 and 48 hours,the proliferation inhibition rate were(24 ± 1.3)%,(21 ± 1.5)%,(38 ± 3.1)%,(57 ±2.7)%,(66 ±3.3)% and(49 ±2.9)%,(48 ±2.7)%,(61 ±2.1)%,(77 ±3.8)%,(82 ±4.2)%,the apoptosis rate of K562 cells were(4.8 ± 0.5)%,(5.6 ± 0.7)%,(9.8 ± 0.6)%,(11.9 ± 1.2)%,(15.2±1.5)% and(11.0 ±0.9)%,(12.9 ±1.1)%,(18.4 ±1.5)%,(21.0 ±2.0)%,(28.0 ±1.9)%.The percentage of apoptotic cells was a time- and dose-dependent manner.Typical DNA ladder was shown by DNA gel electrophoresis.Conclusions As2O3 combined with cinobufacini inhibited the proliferation of K562 cells and induced apoptosis of the K562 cells,the combination of the two drugs had better effect.     

枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长及细胞凋亡影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长及其细胞凋亡的影响。方法不同剂量的枸杞多糖作用于体外培养的宫颈癌Hela细胞，用苔盼蓝染色、四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测人宫颈癌Hela细胞存活率、抑制率及细胞凋亡等指标。结果枸杞多糖可明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长，抑制率司达96．85％，并呈剂量效应关系，细胞凋亡率可达36．8％。结论枸杞多糖对人宫颈癌Hela细胞生长具有抑制作用，其抑制机制可能是通过影响人宫颈癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。     

Survivin反义寡核苷酸增加白血病细胞K562对化疗敏感性的观察

目的探讨Sttrvivin反义寡核苷酸（ASODN）对白血病细胞K．562对阿霉素（ADM）敏感性的影响。方法采用Sur-vivinASODN及其对照序列，脂质体转染K562细胞，MTT法观察细胞增殖；RT—PCR、Western blot观察Survivin mRNA和蛋白表达；荧光分光光度计检测Caspase-3的活性。结果ASODN＋ADM联合作用的细胞抑制率与单独应用ADM或ASODN的细胞抑制率相比呈明显增高；经转染ASODN的K562细胞分别出现Survivin mRNA和蛋白表达降低；Caspase-3的活性增加。结论Survivin ASODN能通过抑制Survivin表达，增加Caspase-3的活性而增强白血病细胞K562对ADM的敏感性。     

酒精对体外培养人红白血病细胞活性影响的研究

目的 了解长期饮酒对人体组织细胞损伤的可能原因。方法 采用不同浓度酒精加入体外培养的人红白血病(K562)细胞中,用荧光显微镜和倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳的方法检测细胞DNA裂解。结果 1％酒精能有效诱导K562细胞凋亡,且随剂量增大凋亡时间缩短。5％酒精作用30h则可引起细胞坏死。结论 长期饮酒者血液中有核细胞数量减少,可能与其促凋亡作用有关。     

细胞浓度对穿孔 K562细胞活力和膜电压的影响

目的研究细胞浓度变化对穿孔K562细胞活力和膜电压的影响.方法在相同的强脉冲电场作用下,用长春新碱处理不同浓度的人红白血病K562细胞,用电穿孔仪对其进行电穿孔处理,然后检测作用后的细胞活力.结果不同浓度的K562细胞活力不同,且活力比和细胞浓度呈非线性关系.实验结果也间接表明在不同细胞浓度下,穿孔细胞膜膜电压变化是不相同的.结论细胞浓度是影响K562细胞活力和膜电压变化的一个重要因素.     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562细胞株药物耐受性的影响

目的 研究急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞（MSCs）对K562细胞药物耐受性的影响,并初步探讨其机制.方法 从白血病患儿骨髓中分离、培养并鉴定MSCs;建立K562细胞株与MSCs共培养的体系,观察MSCs对K562细胞生长的影响;AnnexinV-FITC检测一定浓度的阿霉素（ADM）对K562细胞凋亡的影响;流式细胞仪测定不同培养条件下的K562细胞周期;RT-PCR检测K562细胞的Bcl-2和Bax基因.结果 和单独培养的K562细胞相比,与MSCs黏附共培养的K562细胞生长较为缓慢,未见明显的对数生长期.单独培养组细胞早期凋亡率为（9.19±0.53）%,而黏附培养组为（4.00±0.37）%,差异具有统计学意义（P＜0.05）.黏附共培养组K562细胞,G0-G1期细胞比例为（80.95±3.83）%,显著高于单独培养组（50.2±2.26）%（P＜0.05）;而S期细胞比例为（17.40±1.50）%,显著低于单独培养组（37.03±3.50）%（P＜0.05）.相对于单独悬浮培养的K562细胞,黏附共培养的K562细胞Bcl-2基因相对表达明显增强,Bcl-2/Bax显著增高.结论 白血病患儿MSCs能抑制白血病细胞株K562生长,改变细胞周期而逃避药物的促凋亡作用,K562对阿霉素产生耐药性可能与黏附共培养后Bcl-2基因表达增强有关.     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562细胞株药物耐受性的影响

Objective To study the effect of acute lymphoblastic leukemia (ALL) children bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) on the resistance of K562cell atd mechanism in vitro.Method MSCs were obtained from AL children bone marrow after derivation, cultivation and identification.The coculture of MSCs and K562 and K562 suspension were established.Effects of MSCs on the growth of K562 cells were investigated in vivo.The two kinds of cells treated with different concentration of adriamycin (ADM) and the rate of apoptosis was evaluated by flow cytometry.Cell cycle was determined by flow cytometry.RT-PCR was used to detect Bcl-2 and Bax in K562 cells.Result Compared with the cell growth curve of K562 alone, the K562 cell co-cultured with MSCs grew slower and the exponential phase of growth was not obvious.The apoptosis index of the K562 cells co- clutured with MSCs was (9.19 ±0.53)% examined by flow cytometry, and that of the K562 cells alone was 4.00 ± 0.37% respectively( P ＜ 0.05 ).The percentage of cells at G0/G1 phase was (50.2 ± 2.26) % and that at S phase was (37.03 ± 3.50) % in the group of K562 alone, but those of the K562 cells co - cultured with MSCs were (80.95 ± 3.83) % and ( 17.40 ± 1.50)% respectively( P ＜0.05).The result of RT-PCR suggested expression of Bcl-2/Bax of the K562 cell co-cultured with MSCs was higher than K562 alone.Conclusion ALL children MSCs suppressed the growth of K562 cell in vitro.Adhesion made K562 depress sensitive to ADM.The mechanism was perhaps caused by adhesion with MSCs, K562 cell cycle was changed and related to Bcl-2 gene high level expression.     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562细胞株药物耐受性的影响

Objective To study the effect of acute lymphoblastic leukemia (ALL) children bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) on the resistance of K562cell atd mechanism in vitro.Method MSCs were obtained from AL children bone marrow after derivation, cultivation and identification.The coculture of MSCs and K562 and K562 suspension were established.Effects of MSCs on the growth of K562 cells were investigated in vivo.The two kinds of cells treated with different concentration of adriamycin (ADM) and the rate of apoptosis was evaluated by flow cytometry.Cell cycle was determined by flow cytometry.RT-PCR was used to detect Bcl-2 and Bax in K562 cells.Result Compared with the cell growth curve of K562 alone, the K562 cell co-cultured with MSCs grew slower and the exponential phase of growth was not obvious.The apoptosis index of the K562 cells co- clutured with MSCs was (9.19 ±0.53)% examined by flow cytometry, and that of the K562 cells alone was 4.00 ± 0.37% respectively( P ＜ 0.05 ).The percentage of cells at G0/G1 phase was (50.2 ± 2.26) % and that at S phase was (37.03 ± 3.50) % in the group of K562 alone, but those of the K562 cells co - cultured with MSCs were (80.95 ± 3.83) % and ( 17.40 ± 1.50)% respectively( P ＜0.05).The result of RT-PCR suggested expression of Bcl-2/Bax of the K562 cell co-cultured with MSCs was higher than K562 alone.Conclusion ALL children MSCs suppressed the growth of K562 cell in vitro.Adhesion made K562 depress sensitive to ADM.The mechanism was perhaps caused by adhesion with MSCs, K562 cell cycle was changed and related to Bcl-2 gene high level expression.