龙牡桂枝汤及其拆方对注意缺陷多动障碍模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:探讨龙牡桂枝汤及其拆方对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型—自发性高血压大鼠(SHR)下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的调节作用,阐释复方配伍的科学内涵。方法:幼年雄性SHR大鼠随机分为生理盐水组,盐酸哌甲酯组(2 mg·kg~(-1)),龙牡桂枝汤组(30 g·kg~(-1)),桂枝加龙骨牡蛎汤组(21 g·kg~(-1)),甘麦大枣汤组(9.24 g·kg~(-1)),石菖蒲-远志组(4.62 g·kg~(-1)),分别予相应药物灌胃14 d,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质酮(CORT)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测下丘脑盐皮质激素受体(MR),糖皮质激素受体(GR),CRH及海马GR,MR mRNA的表达水平。结果:与生理盐水组比较,盐酸哌甲酯组、龙牡桂枝汤组大鼠血清CORT,ACTH,CRH水平,下丘脑GR,CRH及海马MR,GR mRNA的表达水平明显升高(P0.05,P0.01),其海马GR mRNA表达明显高于盐酸哌甲酯组(P0.01)。拆方研究显示:与生理盐水组比较,桂枝加龙骨牡蛎汤组和甘麦大枣汤组大鼠血清ACTH,CRH水平,下丘脑MR,GR,CRH及海马GR,MR mRNA的表达明显升高(P0.05,P0.01),桂枝加龙骨牡蛎汤组大鼠血清CORT水平明显升高(P0.01),石菖蒲-远志组大鼠血清ACTH水平明显升高(P0.05)。结论:龙牡桂枝汤治疗ADHD的作用机制与提高血清CORT,ACTH,CRH水平,增加下丘脑MR,GR,CRH及海马GR,MR mRNA的表达,从而调控HPA轴功能有关。各拆方药组对HPA轴功能的影响程度依次为桂枝加龙骨牡蛎汤甘麦大枣汤石菖蒲-远志。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠糖皮质激素及其受体基因表达的影响

目的:观察电针对慢性应激模型大鼠糖皮质激素及其受体的影响,进而探讨电针抗抑郁的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、百优解组、束缚组、电针组、糖皮质激素拮抗剂组、电针加糖皮质激素拮抗剂组,每组10只。采用慢性应激结合孤养21d造模。选取"百会"透"印堂"穴电针治疗慢性应激模型大鼠,用糖皮质激素受体拮抗剂RU486阻断下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的负反馈通路。放射免疫法检测肾上腺皮质酮含量,实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应法检测海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达。结果:与空白组比较,束缚组大鼠肾上腺皮质酮的分泌明显增多(P0.05),而电针组与束缚组比较皮质酮的过度分泌明显降低(P0.05)。束缚组大鼠GRmRNA在海马、下丘脑及垂体的表达显著下降(P0.05),电针组与束缚组比较海马、下丘脑、垂体GR的生成增多(P0.05)。以上两指标,模型组和糖皮质激素拮抗剂组的变化与束缚组一致;与模型组比较,百优解组仅可明显升高海马GRmRNA的表达(P0.05);与糖皮质激素拮抗剂组比较,电针加糖皮质激素拮抗剂组可降低肾上腺皮质酮的含量(P0.05),升高海马GRmRNA的表达(P0.05),但其降低肾上腺皮质酮含量和升高下丘脑、垂体GRmRNA表达的作用均不及电针组(P0.05)。结论:电针对糖皮质激素的过度分泌有直接的调控作用,并可通过增强GRmRNA的表达,改善HPA轴负反馈中枢的功能障碍。当HPA轴负反馈通路被阻断后,电针的作用减弱。     

从下丘脑-垂体-甲状腺轴研究肾阳虚证的现状及思考

肾阳虚证下丘脑-垂体-靶腺(肾上腺、甲状腺、性腺及胸腺)轴的功能紊乱.文章从动物实验和临床研究两方面综述了肾阳虚证在下丘脑-垂体-甲状腺轴方面的研究进展,并针对下步研究肾阳虚证提出一些看法.     

抑郁症与HPA轴关系及中药干预的研究进展

介绍了抑郁症与肾上腺轴的关系以及中药干预相关机制的最新研究资料。查阅CNKI数据库相关文献39篇。研究表明抑郁症患者血浆中促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、糖皮质激素浓度升高,一方面糖皮质激素的持续升高使海马中糖皮质激素受体数量减少、盐皮质激素受体/糖皮质激素受体比例失衡,进而破坏海马神经元;另一方面,海马本身能抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴的活性,海马神经元的破坏使抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴的作用减弱;同时糖皮质激素的升高,使糖皮质激素受体的数量和功能降低,造成糖皮质激素对下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈抑制作用减弱,使其功能更为亢进,形成恶性循环。认为中医药具有多靶点、多层面、多轴点的作用特征,通过对HPA轴来干预抑郁症具有一定的现实意义。     

杏仁核与PTSD中恐惧及记忆障碍关系的研究

创伤后应激障碍（PTSD）是指由于异常威胁性或灾难性心理创伤导致延迟出现和长期持续的精神障碍。杏仁核是大脑中的“恐惧中枢”,是与学习、恐惧记忆密切相关的重要部位．杏仁核发生长时程增强（LTP）是PTSD不可缺的机制．杏仁核神经元盐皮质激素受体（MR）、糖皮质激素受体（GR）及MR／GR发生改变,激活下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴,导致HPA轴调节紊乱是PTSI）发生的重要基础。PTSI）还可以导致杏仁核神经元细胞凋亡,记忆力减退。同时乙酰胆碱酯酶（ACHE）活性降．低,乙酰胆碱增多及多巴胺活动的增强也是PTSD发生的主要神经基础。杏仁核与海马的功能密切相关,海马的部分功能可由杏仁核的调节而实现。     

逍遥散对慢性应激损伤大鼠NR受体亚型表达的影响

目的:本研究用逍遥散和糖皮质激素受体(GR)阻滞剂干预慢性应激损伤大鼠,观察其海马区NR受体亚型表达情况。方法:以逍遥散(5.265g/kg)和GR受体阻滞剂RU-38486(12.5g/kg)为干预药物,应用慢性不可预知应激对大鼠进行为期3周的造模,在造模的同时给予实验药物,3周后停止刺激,于第22天处死大鼠取材。采用荧光免疫组织化学法,测定各组大鼠海马区NR表达。结果:GR受体阻滞剂RU-38486与中药复方逍遥散可显著下调慢性应激损伤大鼠海马区NR阳性表达。结论:逍遥散可以通过促进慢性应激损伤大鼠海马区NR表达下调,从而达到部分恢复慢性应激大鼠下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴负反馈功能的作用,起到缓解诸应激症状的疗效。     

中药减轻糖皮质激素副作用的研究

1963年,邝安堃教授首次用外源性糖皮质激素研制肾上腺皮质功能抑制--肾阳虚动物模型获得成功,并证明这种动物模型的病理生理变化能被温补肾阳中药所纠正.这一研究成果给我们一个重要启示:温补肾阳可以减轻糖皮质激素负反馈引起的下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴抑制副作用.此后有学者[1]研究证实,激素产生副作用,其机理主要是外源性激素通过负反馈抑制垂体-肾上腺皮质功能,以致下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴系统功能的紊乱.对激素产生副作用致HPA轴系统功能的紊乱,中医辨证为"肾阴虚",或"肾阳虚",或"阳阳俱虚".     

左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的：观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体（GR）mRNA表达的影响，探讨海马对下丘脑－垂体－肾上腺（HPA）轴的调节作用，以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退的作用机制。方法：以自然衰老大鼠为动物模型，采用原位杂交法，观察药物对大鼠海马各分区（DG、CA1、CA2、CA3）GRmRNA表达变化，结果：老年大鼠海马各分区GRmRNA表达均明显减弱，而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年大鼠海马DG、CA1和CA3分区低下的GRmRNA的表达，结论：左归丸、右归丸通过提高GRmRNA表达，进而改善海马对HPA轴的抑制性调控作用，以延缓机体衰老。     

右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调素mRNA表达的影响

目的：从分子水平探讨肾阳虚证的本质以及补肾中药的作用机理。方法：用醋酸可的松造成肾阳虚模型,以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）半定量法,测定肾阳虚大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴CaMmRNA的表达,以及补肾中药右归饮对其的影响。结果：肾阳虚大鼠下丘脑、肾上腺CaMmRNA水平升高,垂体组织CaMmRNA水平没有显著变化,右归饮能够降低下丘脑组织CaMmRNA水平,但对肾上腺影响不显著。结论：下丘脑中CaMmRNA水平升高与肾阳虚证有关,下丘脑CaMmRNA水平的降低是补肾中药右归饮改善肾阳虚症状的作用机理之一。     

龙牡桂枝汤对慢性应激状态下ADHD大鼠学习记忆及海马-HPA轴的影响

目的：观察龙牡桂枝汤对慢性应激状态下注意缺陷多动障碍（ADHD）模型大鼠学习记忆能力和海马-下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法：32只ADHD模型动物幼年自发性高血压大鼠（SHR）随机分为空白组、慢性应激组、盐酸哌甲酯组和龙牡桂枝汤组,各8只。采用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,ELISA法检测血清促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）、促肾上腺皮质释放激素（CRH）水平,RTPCR法检测下丘脑CRH、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)、促肾上腺皮质释放激素结合蛋白（CRH-BP）及垂体CRHR1、CRH-BP mRNA表达水平,免疫组化法检测海马糖皮质激素受体（GR）、盐皮质激素受体（MR）蛋白表达水平。结果：与空白组比较,慢性应激组寻找平台的潜伏期显著延长（P<0.01）,在目标象限停留时间及穿越平台数显著减少（P<0.05）,血清CORT、CRH、ACTH水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,下丘脑CRH、CRHR1、CRH-BP mRNA及垂体CRHR1、CRH-BP mRNA表达升高（P<0.05...     

针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠海马-HPA轴的影响及其降压机制

目的:通过观察针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠(SHR)海马形态的改变、糖皮质激素受体(GR)表达及下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴各组分表达的影响,探讨其调控血压的中枢-外周机制。方法:48只雄性SHR大鼠随机等分为模型组、捻转补法组与捻转泻法组,16只WKY大鼠作为空白对照组。各针刺组分别采用不同的针刺手法干预双侧太冲穴,模型组与空白组不做针刺处理,各组于针刺前及针刺后定期测量血压。实验第16天采用HE染色法观察海马组织病理性改变,采用Elisa法检测海马GR及HPA轴各组分的表达。结果:与模型组比较,捻转泻法组和捻转补法组均能明显降低SHR大鼠血压(P 0. 01或P 0. 05),各针刺组海马GR含量明显降低(P 0. 05),HPA轴各组分表达量明显降低(P 0. 05);且捻转泻法组较捻转补法组降压效果和良性调控HPA轴作用更明显(P 0. 05)。结论:针刺捻转补泻手法可以通过调节海马中GR含量表达、抑制HPA轴活动,起到降压作用,这可能是针刺捻转补泻手法降压的机制之一。     

柴胡疏肝散对慢性应激抑郁模型大鼠海马调节HPA轴功能的影响

目的:研究柴胡疏肝散对慢性应激模型大鼠海马调节HPA轴功能的影响。方法:采用慢性不可预见性刺激制造慢性应激大鼠模型,分别用Western bolt法和Elisa法检测各组大鼠海马MR和GR及下丘脑CRH蛋白的表达,检测血浆ACTH和血清CORT含量。结果:治疗组大鼠海马GR蛋白表达明显增高,下丘脑CRH蛋白表达及血浆ACTH和血清CORT的含量明显降低。结论:柴胡疏肝散能够抑制慢性应激所致的大鼠HPA轴功能的亢进,其机制可能与调节大鼠海马GR蛋白表达、进而发挥对HPA轴功能的抑制作用有关。     

苗药双肾草对肺肾阳虚型COPD大鼠HPA轴的干预

目的:研究苗药双肾草对肺肾阳虚型慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的干预作用,为临床运用提供理论依据。方法:以脂多糖注入气管联合香烟烟熏的方法造大鼠COPD模型,HE染色病理切片镜下观察鉴定模型,以醋酸氢化可的松皮下注射的方法二次造模,制备肺肾阳虚COPD大鼠模型。肺肾阳虚型COPD大鼠随机分为肺肾阳虚型COPD对照组、地米治疗组、双肾草治疗组。ELISA试剂盒定量检测正常组、肺肾阳虚型COPD对照组、地米治疗组、双肾草治疗组大鼠血清中下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)治疗前后的浓度。观察治疗后四组大鼠肺组织HE染色病理切片的肺组织结构。用real-time PCR方法检测四组大鼠肺组织中GR(糖皮质激素受体)mRNA、下丘脑中CORT mRNA、肾上腺中CRH mRNA的表达。结果:通过研究发现,NF-KBp65在模型组表达呈强阳性,在双肾草治疗组表达要弱于地米治疗组。苗药双肾草能提高肺肾阳虚型COPD大鼠血清中ACTH、CORT、CRH的浓度,其浓度高于地米治疗组。双肾草组中CORT mRNA表达量、CRH mRNA、GRmRNA表达量均高于地米治疗组。结论:苗药双肾草可以通过对HPA(下丘脑-垂体-肾上腺轴)干预起到抗炎作用,和糖皮质激素比较,疗效略强于后者。     

宁肠汤对肠易激综合征大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴干预作用的研究

目的：探讨宁肠汤对IBS大鼠神经内分泌功能的调节作用。方法：以夹尾、束缚刺激作为应激原复制IBS大鼠模型,采用放免法检测模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能,观察宁肠汤的调节作用。结果：IBS大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)兴奋亢进,Cor、ACTH含量明显升高(P＜0．01)。而宁肠汤能降低Cor、ACTH的含量,抑制HPA轴的兴奋性。结论：宁肠汤对应激引起的神经内分泌功能紊乱有一定的调节作用。     

补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴CaMPKⅡ的影响

目的：研究CaMPKⅡ在肾阳虚发病中的作用及补肾中药的调整作用,方法：通过液体闪烁仪测定γ-^32P-ATP参入反应底物的摩尔数,用来表示蛋白激酶的活性。结果：肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织中CaMPKⅡ显著升高,补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织升高的CaMPKⅡ活性具有下调作用。结论：下丘脑-垂体-肾上腺轴CaMPKⅡ活性的改变,与肾阳虚的发病密切相关。补肾中药可通过调整下丘脑-垂体-肾上腺轴CaMPKⅡ的活性而发挥作用。     

针刺对下丘脑-垂体-肾上腺轴的调整作用

下丘脑-垂体-肾上腺轴是机体应对外界各种急性或慢性应激的反应中枢,其最高反应中枢是下丘脑室旁核,HPA轴的激活除需应激刺激外,还受到中枢核团的调节作用,随之分泌CRH、ACTH、CORT 3种激素,使机体做出适应性的反应,从而保持内环境的稳定。但机体长期受到应激刺激则使HPA轴处于异常状态,CRH、ACTH、CORT 3种激素分泌异常,机体出现相应的疾病。目前研究发现,针灸能够使CRH、ACTH、CORT 3种激素恢复到正常水平,调整HPA轴功能,但其作用究竟是通过下丘脑室旁核及垂体、肾上腺的作用,还是通过脑内其他中枢核团的调节起效,其内在机制需要今后研究进一步明确。     

补肾方药对老年大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质所属组织结构形态变化的影响

目的:观察左归丸、右归丸对老年大鼠HPA轴所属组织形态结构变化的影响。方法:以自然衰老大鼠为肾虚证动物模型,HE染色,光镜观察HPA轴所属组织结构的增龄性变化,以及补肾方药(左、右归丸)的改善作用。结果:老年大鼠垂体、下丘脑、肾上腺皮质组织形态结构呈现明显的老年性退化,左归丸、右归丸能不同程度改善这些组织结构。结论:左归丸、右归丸能从组织结构形态方面延缓下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的老年性变化。     

右归丸对肾阳虚大鼠垂体-肾上腺轴动态影响的实验研究

目的:研究右归丸对肾阳虚大鼠垂体-肾上腺轴的动态影响。方法:(1)SD雄性大鼠90只,随机分为正常组、模型组和右归丸组。(2)氢化可的松注射液后肢肌肉注射,连续29 d,造成肾阳虚证模型。正常组、模型组和右归丸组于第8 d分别用生理盐水和右归丸煎液灌胃,连续22 d。(3)在15 d、23 d、30 d分别取大鼠血清,用放射免疫法测定垂体-肾上腺轴激素ACTH(adrenocorticotropic hormone,促肾上腺皮质激素)、cort(cortisol,皮质醇)的含量。(4)取垂体和肾上腺称取重量。结果:(1)肾阳虚模型组15 d、23 d、30 d垂体-肾上腺轴激素水平不断下降,且垂体和靶腺下降程度一致。(2)右归丸能提高肾阳虚大鼠垂体-肾上腺轴的激素水平、肾上腺重量。(3)右归丸组各期的ACTH是递减的,可能是由于机体的负反馈调节。结论:右归丸对肾阳虚大鼠垂体-肾上腺轴的动态变化有明显的调节作用。     

基于“肾应冬”探讨下丘脑-垂体-肾上腺轴褪黑素水平的四季变化

目的:通过观察对比正常组与模型组(摘除松果体)金黄地鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(Hypothalamus-Pituitary-Adrenal Axis,HPA轴)中褪黑素(Melatonin,MT)含量的季节性变化,进一步探讨"肾应冬,主封藏"的生物学机制,中医肾藏象的本质内涵及松果体在季节变化过程中的作用。方法:分别于春分、夏至、秋分、冬至日取出正常组与模型组金黄地鼠下丘脑、垂体、肾上腺组织,用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)法检测各组织中MT含量。结果:金黄地鼠正常组下丘脑与垂体组织中MT含量均有季节性变化;金黄地鼠正常组的肾上腺组织的MT水平存在着明显的四季差异,而松果腺摘除时则导致肾上腺组织原有的MT季节节律消失。其中正常组下丘脑MT含量变化表达趋势为冬夏秋春,模型组下丘脑MT含量变化表达趋势夏秋冬春。正常组垂体中MT含量变化表现趋势为夏春冬秋,模型组垂体中MT含量变化表现为夏秋春冬。正常组肾上腺中MT含量变化表现趋势为冬夏秋春,模型组肾上腺中MT含量变化表现为夏春秋冬。结论:下丘脑-垂体-肾上腺轴各水平的褪黑素水平存在四季节律变化;松果体对于下丘脑-垂体-肾上腺轴中肾上腺水平的褪黑素季节变化规律有直接的影响;冬季肾上腺的褪黑素水平高于其他三季,表明冬季褪黑素对肾上腺的功能影响最强。     

基于下丘脑-垂体-肾上腺-骨相关细胞轴分析肾主骨的本质

肾主骨理论在预防和治疗骨内平衡失调方面有重要的理论和临床作用,而下丘脑-垂体-肾上腺（HPA） 轴作为人体最重要的神经内分泌系统,与骨骼新陈代谢密切相关。研究发现不同类型的肾虚患者以HPA 功能障碍为共同特征,提示肾精在一定程度上与HPA 功能有关。通过对下丘脑-垂体-肾上腺-骨相关细胞轴的进一步研究,探索肾主骨理论的本质,以期为中医理论与现代对抗疗法的协调发展提供线索与基础。