药用昆虫九香虫HPLC指纹图谱研究

目的研究九香虫高效液相指纹图谱,建立动物药的质量控制方法。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(含0.05%三氟乙酸,TFA)为流动相梯度洗脱,流量1.0 ml·min-1,检测波长为254 nm,柱温30℃,进样量5μl,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"对10批九香虫指纹图谱进行相似度分析评价。结果建立了九香虫HPLC指纹图谱共有模式,10批次不同来源九香虫与对照指纹图谱的相似度为0.905~0.979,其中安徽临泉样品、云南昆明样品相似度均大于0.970,提示这两个地区样品的相似度较高;进一步确定了18个共有峰,由于缺乏合适的对照品,未确定各峰归属。结论九香虫的高效液相指纹图谱分析方法简便、可靠,可定性用于九香虫药材的质量控制。     

大黄总RNA提取方法的研究

目的建立大黄根中总RNA提取的方法,为后续的分子生物学研究打下基础。方法以新鲜的大黄根为材料,分别采用Trizol法、常规CTAB-LiCl法、改良CTAB-LiCl法、通用型试剂盒法提取总RNA,利用琼脂糖凝胶电泳、微量紫外分光光度计和实时荧光定量PCR检测总RNA的纯度、完整性和产量。结果除CTAB-LiCl法外,Trizol法和通用型试剂盒法均不能从大黄根中提取出总RNA。同时,常规CTAB-LiCl法不稳定,所提总RNA有一定程度的降解。采用改良CTAB-LiCl法所提取的总RNA量大,纯度、完整性及质量均较好。结论改良CTAB-LiCl法对大黄等富含多酚、多糖类药材的总RNA提取具有一定的借鉴意义。     

桑寄生不同部位总RNA提取方法比较研究

目的：从桑寄生中提取高质量的RNA。方法：以桑寄生叶片、茎、花和种子为材料,采用TRIzol试剂盒法、改良TRIzol法、CTAB-LiCl法、CTAB-异丙醇法4种方法,比较不同材料及不同方法分离RNA的效果。结果：TRIzol试剂盒法和改良TRIzol法均不能有效的去除桑寄生中的多糖和蛋白质等杂质,不适合用于桑寄生RNA的提取;CTAB-LiCl法提取的RNA质量较高、完整性较好,可满足各种后续分子生物学实验的要求;CTAB-异丙醇法提取桑寄生RNA的效果虽然较好,但还达不到小RNA分析实验要求。结论：为桑寄生后续分子生物学研究提供基础,也为次生代谢物较丰富的药用植物RNA的提取提供参考。     

桑叶片总RNA提取方法的比较研究

目的 研究桑叶片总RNA的提取方法.方法 采用Trizol法、CTAB法及RNA prep prue Plant Kit提取试剂盒提取法,分别提取桑叶片中的总RNA,并通过紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳及RT-PCR对提取效果进行分析比较.结果 3种方法均能从桑叶片中提取分离到总RNA,其中Trizol法能提取纯度较高、完整性较好的RNA,18S及28S带型清晰无弥散,A260/A280值为1.99,RNA产率为594.24μg/g,提取的总RNA适用于RT-PCR实验.结论 用Trizol法提取的桑叶片中总RNA可用于cDNA基因文库的构建及基因表达的差异分析.     

皖贝母总RNA提取方法的比较研究

目的:针对皖贝母鳞茎富含多糖、酚类和其他多种次生代谢产物的特点,筛选一种简单高效的皖贝母总RNA提取方法。方法:用异硫氰酸胍法、皂土法、改进的SDS/酚法、RNAiso plus 4种方法分别提取皖贝母鳞茎总RNA,并对提取的RNA进行电泳及RT-PCR技术检测与分析。结果:皂土法提取的总RNA条带清晰无弥散,完整性好无明显DNA和其他杂质污染,适用于RT-PCR试验。结论:皂土提取法是一种适合于皖贝母总RNA抽提的简单高效的方法。     

四种提取重楼根茎总RNA方法的研究

目的 探索重楼根茎总RNA提取的最佳方法.方法 以重楼根茎为材料,比较研究了4种不同的RNA抽提方法如改良Trizol法、异硫氰酸胍法、改良CTAB法和SDS法提取总RNA的效果.结果 改良Trizol法提取的重楼根茎总RNA的电泳条带清晰,RNA完整性好,A260/A280比值在1.8 ～2.0之间,A260/A230比值在2.0 ～2.3之间,能够满足一般的分子操作要求;但异硫氰酸胍法、改良CTAB法和SDS法所提取的根茎总RNA有明显的DNA或蛋白质污染,并且均有一定程度的降解.结论 改良Trizol法方便、快捷、高效,可有效地从富含多酚和多糖的重楼根茎中分离出高质量RNA,为重楼进行基因克隆、cDNA文库构建等分子生物学研究奠定基础.     

南药益智果实的总RNA提取方法比较研究

目的筛选从南药益智不同发育时期的果实中提取出高质量RNA的试剂盒。方法以南药益智果实为研究对象,比较了3种Mag Zol TM Reagent,Takara RNAiso plus和RNAprep Pure Plant Kit试剂盒提取方法,利用琼脂糖凝胶电泳、Nano Drop TM 2000分光光度计和Aligent 2100生物分析仪对3种方法提取的总RNA进行质量检测。结果采用RNAprep Pure Plant Kit试剂盒从南药益智不同发育时期果实中提取的RNA电泳条带清晰、RNA完整性好,其纯度(OD260/280)分别为2.04、2.08和2.06;浓度分别为68.12 ng/μl、140.20 ng/μl和181.51 ng/μl。结论试剂盒RNAprep Pure Plant Kit可有效地从富含多酚益智果实中提取高质量RNA,为南药益智的高通量转录组测序等分子生物学研究奠定基础。     

半夏块茎高质量总RNA提取的一种有效方法

目的：探讨一种有效提取半夏块茎总RNA方法。方法：以半夏试管苗的叶片、叶柄和块茎为试验材料，将常规的异硫氰酸胍提取植物总RNA的方法做了改进，在RNA 提取缓冲液中加入高浓度的β-巯基乙醇以除去酚类物质, 用酸酚/氯仿抽提去除蛋白质污染，以及利用异丙醇和醋酸钠联合沉淀多糖等手段，建立了一种简单实用的从富含多酚类和多糖等物质的植物材料中提取总RNA的方法。结果：该方法所提RNA的A₂₆₀/A_{230均大于2.0，A260/A280的值为1.7～2.0，电泳条带清晰，RNA完整性好。结论：利用本方法提取的半夏试管小块茎总RNA具有很高的质量和纯度，且得率很高，完全满足后续的DDRT-PCR和反向Northern blotting等分子生物学研究，而且简单经济、实验结果稳定，重复性好，适合富含多酚类和多糖等物质的药用植物组织总RNA 的提取。}     

灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取方法的研究

目的:探讨灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取的有效方法。方法:采用SDS法、Trizol法、普通试剂盒法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法提取灰毡毛忍冬花蕾总RNA并比较其效果。结果:SDS法、Trizol法和普通试剂盒法均不适用于本样品总RNA的提取;改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均能有效去除蛋白质、多糖多酚及DNA,OD260/280为1.86-2.00,OD260/230为1.96-2.63,电泳条带清晰,RNA完整性好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。但以多糖多酚试剂盒法提取效果最佳。结论:改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均适合灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取,完全满足后续RT-PCR等分子生物学研究。     

甘草RNA提取方法研究

目的从甘草不同组织中提取高质量的RNA,为进一步合成双链cDNA,构建甘草cDNA文库奠定基础。方法采用几种常用方法(高盐溶液法、LiCl沉淀法、CTAB法和SDS法)提取甘草不同组织的RNA,并以1%琼脂糖凝胶电泳和A260/A280,A260/A230的值作为指标。结果LiCl沉淀法对于甘草不同组织中的RNA具有更好的提取效果,条带清晰,完整性较好,且A260/A280和A260/A230值均接近于2.0,根部组织产量达0.220μg/mg,叶片组织产量达0.275μg/mg。结论采用LiCl沉淀法提取甘草不同组织中的RNA具有更好的效果,适于从富含多糖的植物组织中提取RNA。     

抗癌药用昆虫研究进展

癌症严重威胁人类的生命,科学家们不断地研究探索抑癌抗瘤的.方法 .早在几千年前,我国就有用昆虫治疗肿瘤的案例.近些年来由于研究手段的深入和改进,我国研究人员发现一部分药用昆虫对恶性肿瘤的生长和增殖有明显的抑制作用.文章即对研究较热的几种抗癌药用昆虫的抗癌机理进行简要的介绍,为药用昆虫成功地应用于抗癌治癌领域奠定理论基础.     

半夏叶片总RNA四种提取方法及效果的比较

目的 针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂,富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点,选择优化一种简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法.方法 用4种不同的RNA抽提方法如异硫氰酸胍法、皂土法、CTAB-LiCl法和改进的SDS/酚法提取总RNA,通过电泳、紫外分光光度计检测以及RT-PCR验证等对提取结果进行分析比较.结果 4种方法均能从半夏成熟叶片中提取到总RNA.其中皂土法的提取过程只需3～4h,是其他3种提取方法所用时间的一半.提取1g叶片的成本只有其他3种方法的1/13～1/14.此法提取的总RNA 18S、28S带型清晰无弥散,完整性好,无严重的蛋白质和其他杂质污染,A260/A280为1.8～2.0,A260/A230大于2.0,且总RNA的产率高,为365.744 μg/g鲜重,提取的总RNA适用于RT-PCR试验.结论 皂土法提取的RNA完全适用于DDRT-PCR、Northern blotting、cDNA文库构建等分子生物学研究,是一种快速、经济,适于抽提半夏总RNA的好方法.     

镰刀菌诱导白木香结香部位总RNA提取方法的研究

目的白木香树在自然条件下不产生树脂,以自然、微生物或人工方式可使之形成沉香树脂。"小孔滴注法"接种镰刀菌人工诱导白木香结香,8个月后野外采集白木香结香部位(分泌黑色树脂的树干组织),提取其总RNA,为阐明沉香特征产物的代谢途径、揭示人工诱导白木香结香的分子机制奠定基础。方法 "小孔滴注法"人工造香,手工割取白木香结香部位。分别采用CTAB-Li Cl法、Trizol试剂法、RN09试剂盒法、改良异硫氰酸胍-CTAB法和Qiagen试剂盒法提取总RNA并检测完整性。结果与其它四种提取方法相比,Qiagen试剂盒法提取的RNA条带清晰,OD260/OD280比值在1.8~2.0的范围内。结论 Qiagen试剂盒法适用于镰刀菌人工诱导白木香结香部位总RNA提取,对其它次生代谢物质含量较高的植物中提取总RNA具有一定的借鉴意义。     

提取金荞麦愈伤组织总RNA的一种有效方法

目的:建立金荞麦愈伤组织总RNA提取方法.方法:采用CTAB法结合LiCl沉淀的改良方法提取RNA,紫外分光光度检测、0.8%非变性琼脂糖凝胶电泳检测,RNA的反转录等评价RNA质量.结果:提取的总RNA 28S和18S条带清晰,且A260/A280在1.9～2.0,以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广(500bp～5 kb).结论:该方法提取出的总RNA质量能满足RT-PCR等分子生物学操作的要求,且简单、有效、经济,可用于金荞麦愈伤组织总RNA的提取.     

药用昆虫和蜈蚣的不同提取部分的细胞毒作用

将褐蚁、步行虫、蜈蚣的已烷、乙酸乙酯、甲醇及水提取部分和斑蝥中的斑蝥素对癌细胞株L_(121(?))、P_(33(?))和SNU-1的细胞毒作用进行了体外实验研究。 实验方法及材料:将药用昆虫室温下自然干燥、粉碎。各样品药粉舒别取50g·500ml甲醇浸泡24小时,室温下提取3次得到总提物。按常规步骤将总提物分成己烷、乙酸乙酯、甲醇和水等提取部分。另外.甲醇提取后的药物残渣用蒸馏水煮沸提取2次。每次8     

药食昆虫九香虫的生物学及开发利用研究进展

九香虫Aspongopus chinensis Dallas属半翅目兜蝽科昆虫,有悠久的药用历史,也是产区民间常用的滋补保健品。文章从基础生物学、民族动物学、营养及活性成分、药理作用、人工养殖技术以及市场需求前景等方面阐述了九香虫研究概况和进展,并从可持续利用角度对其下一步的研究方向提出了建议。     

金线莲RNA提取方法的改进

目的：有效提取金线莲RNA，为研究内生真菌促进其生长机制奠定基础。方法：CTAB法制备RNA，1％琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像仪照相。结果：提取的RNAA260／A230为2．054，A260／A280为1．818，产量达154．35μg/g。电泳条带清晰，RNA完整性好。结论：用该方法能高质高量地制定富含多糖和酚类化合物的药用植物RNA。     

一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法

目的:筛选从不同发育期山楂果实中提取RNA的最佳方法。方法:对不同发育期山楂果实总RNA提取方法进行了探索,考察了Trizol法、改良Trizol法、经典十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法提取RNA的效果,采用琼脂糖凝胶电泳和核酸蛋白定量仪检测RNA质量。结果:Trizol法、改良Trizol法对成熟期山楂果实RNA提取效果不佳,琼脂糖凝胶电泳检测几乎看不到条带;经典CTAB法对各发育期样本RNA提取质量均不理想;改良CTAB法对不同发育期山楂果实总RNA有良好的提取效果,A_(260 nm)/A_(280 nm)均在2.0左右,28 S和18 S条带完整,满足反转录和聚合酶链式反应(PCR)扩增反应的需求。结论:建立的改良CTAB法是一种有效的山楂果实总RNA提取方法,适用于不同发育期山楂果实RNA的提取,为开展山楂有效成分的生物合成研究奠定了基础。     

药用坚果蛋白的提取分离方法

坚果又称壳果,多为植物种子的子叶或胚乳,营养价值很高。美国（时代〉杂志曾评选它为现代人的10大营养食品之一。坚果一般分两类：一是树坚果,包括杏仁、腰果、榛子、核桃、松子、板栗、白果（银杏）、开心果、夏威夷果等;二是种子,包括花生、葵花子、南瓜子,西瓜子等。