Bcl-2、Bax二种基因在乳腺癌中的关系

Bel-2基因是近年来新发现的原癌基因，Bax基因同属Bel-2家族，肿瘤细胞凋亡受凋亡抑制基因Bcl-2和凋亡促进基因Bax的双向调节，通过大量观察、分析及实验研究发现Bel-2、Bax二种基因在乳腺癌中关系密切，现将有关文献综述如下。     

Bcl-2和Bax基因及多态性与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,乳腺癌的病因,发病机制迄今尚未完全明确。随着分子生物学技术在临床上的应用,基因多态性与各种疾病的关系也越来越受到人们的重视,并在这方面取得一定进展。本文就Bcl-2和Bax基因及多态性与乳腺癌关系的研究进展作一综述。     

术前淋巴化疗对乳腺癌腋窝转移癌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

OBJECTIVE: To observe the expression of Bcl-2 and Bax proteins and cell apoptosis induced by preoperative lymphatic chemotherapy with epirubicin-activated carbon suspension (Epi-CH) in the cells of axillary metastatic lymph node of breast cancer and investigate the mechanism. METHODS: Sixty patients with breast cancer of stages II-III were randomly divided into two groups. Forty patients in Epi-CH group were injected with 10 mg Epi-CH in the tissue around the primary tumor or biopsy excision 72 h before operation. Twenty patients in the control group were injected with 10 mg epirubicin solution in the same region. The stained lymph nodes full of tumor cells in Epi-CH group and the non-stained nodes in the control group were selected for apoptotic detection by TUNEL method. The expression of Bcl-2 and Bax proteins were examined by SP immunohistochemistry. RESULTS: The apoptotic index of the metastatic cancer cells in Epi-CH group was increased remarkably in comparison with that in the control group [(9.5+/-2.7) % vs (3.8+/-1.4) %, P<0.01). Compared with the control group, the expression of Bcl-2 and Bax proteins were up-regulated significantly in Epi-CH group (P<0.05 and P<0.01, respectively), resulting in decreased ratio of Bcl-2/Bax. CONCLUSION: Lymphatic chemotherapy can promote cell apotosis in axillary metastasis of breast cancer, which may result from decreased ratio of Bcl-2/Bax.     

心肌梗死后小鼠心肌Bax和Bcl-2的表达

目的研究心肌梗死后小鼠心脏中Bax和Bcl-2的表达。方法雄性C57BL/6小鼠40只随机分为2组:对照组(10只)和实验组(30只),实验组结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,对照组仅在冠状动脉前降支处穿过缝线,不做结扎。术后4周对2组小鼠进行心肌取材,Western blot方法检测Bax和Bcl-2蛋白在心脏表达的差异。结果实验组小鼠术后4周存活率为53.3%(16/30),对照组为100%(10/10)。Bax和Bcl-2在对照组心肌均有表达,在实验组小鼠心脏远离梗死区(N)、心肌梗死周边区(B)、梗死区(I)的表达逐渐增加(P<0.05),且B区、I区Bax/Bcl-2比值高于N区及对照组(P<0.05)。结论 Bax和Bcl-2在心肌梗死后心脏中呈高表达,且Bax/Bcl-2比值在心肌梗死区及周边区显著增加,提示凋亡可能在心肌梗死后心脏重构中发挥重要作用。     

Bcl-2/Bax与大鼠主动脉钙化的关系

目的探讨Bcl-2/Bax表达与大鼠主动脉钙化的关系。方法 16只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组和钙化组,每组8只。钙化组大鼠给予维生素D3300 000 U·kg-1肌肉注射,每日1次;尼古丁25 mg·kg-1溶于花生油中早、晚各灌胃1次诱导大鼠血管钙化模型。对照组大鼠同时间点给予灌服等量生理盐水。干预6周后股动脉放血处死大鼠,Von Kossa染色观察主动脉形态变化,免疫组织化学法和免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2/Bax蛋白表达。结果钙化组大鼠主动脉血管中膜弹性纤维间可见大量黑色颗粒沉积,而对照组大鼠无黑色颗粒。免疫组织化学法检测结果显示,与对照组比较,钙化组大鼠主动脉平滑肌细胞中Bcl-2表达无明显变化(P>0.05),而Bax阳性表达率显著增高(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组比较,钙化组大鼠主动脉平滑肌细胞中Bcl-2蛋白表达无明显变化,Bax蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论凋亡系统Bcl-2/Bax失衡可能为血管钙化的机制之一。     

视网膜母细胞瘤Bcl-2和Bax基因蛋白质表达

目的 :研究凋亡及凋亡调控基因 Bcl- 2 /Bax和视网膜母细胞瘤 ( Retinoblastoma,RB)的发生、发展及退化的关系。方法 :收集 36例 RB标本 ,对其分别进行 Bcl- 2和 Bax基因的蛋白质免疫组织化学染色。对其表达情况和染色强度进行观察。结果 :1 Bcl- 2在分化型 RB中表达比较好 ;2 Bax在未分化型和分化型中表达都比较好。结论 :1分化型和未分化型 RB中都有 Bcl- 2 /Bax基因蛋白表达 ;2随 RB恶性度的增加 ,Bcl- 2的表达逐渐减弱 ;Bax的表达无明显改变。 3分化型 RB受 Bcl- 2和 Bax基因共同控制 ;未分化型 RB受 Bax基因调控 ,Bcl- 2基因发挥很少的作用。     

实验性大鼠脑出血细胞凋亡与Bcl-2和Bax表达关系的研究

目的 研究大鼠脑出血（ICH）后血肿周围细胞凋亡及其与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化规律和关系.方法 90只SD大鼠随机分为正常对照组（n=10）,假手术组（n=40）,ICH组（n=40）.假手术组和ICH组又依术后12h、1d、2d、3d和7d各分为5个亚组.用胶原酶配合肝素诱导大鼠脑尾状核出血,末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记法（TdT-mediated-dUTP nick end labeling,TUNEL）观察不同时间点细胞凋亡的变化, SABC法观察Bcl-2和Bax蛋白在各时点表达的变化,免疫印迹（Western-blot）技术检测Bcl-2和Bax蛋白相对光密度比值,电镜观察细胞超微结构改变.结果 ①ICH组TUNEL阳性细胞12h可检测到,3d达高峰,7d仍有表达（P＜0.01）,阳性细胞主要见于血肿周围,多见神经元,有少量神经胶质细胞和血管内皮细胞;②ICH组Bcl-2和Bax蛋白免疫反应阳性细胞分别于出血2、3d达高峰,7d仍有表达,主要表达于血肿区及血肿周围、同侧及对侧皮层;多见神经元,少数为神经胶质细胞、吞噬细胞和中性粒细胞;③Western-blot 正常对照组和假手术组均可检测到Bcl-2、Bax蛋白,但相对光密度比值较小;ICH组Bcl-2相对光密度比值2d达最大值,Bax则3d达最大值,在7d仍明显高于正常对照组（P＜0.05）.结论 ICH后存在细胞凋亡;Bcl-2和Bax参与了ICH细胞凋亡;ICH组TUNEL阳性细胞7d仍可检测到,提示ICH后7d内进行抗凋亡治疗可以不同程度地阻止细胞凋亡的发生.     

胃癌及癌前病变中Bcl-2、Bax表达及其与Hp感染的关系

目的探讨胃癌及癌前病变胃上皮细胞的凋亡及幽门螺杆菌（Hp）感染致癌的可能机制。方法应用快速尿素酶试验与W—S银染色法将各种病变分为Hp感染阳性组和阴性组，应用免疫组化sP法对各种病变凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达进行检测。结果Bcl-2基因蛋白的表达从浅表性胃炎、肠化生到不典型增生逐渐增加，胃癌时表达率最高，而Bcl-2表达在Hp阳性及Hp阴性组无明显差异。Bax基因蛋白表达随病变进展逐渐降低，且在浅表胃炎、肠化生组Hp阳性者Bax表达明显高于Hp阴性者（P〈0．05）。结论Hp感染可通过促进Bax基因蛋白的过度表达而引起细胞凋亡增加和胃炎发生，且这种诱导凋亡的作用主要发生在胃黏膜病变的早期阶段。Bcl-2基因的异常表达对胃癌及癌前病变的形成发挥一定作用。     

术前淋巴化疗对乳腺癌腋窝转移癌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的 观察术前淋巴化疗对乳腺癌腋窝转移淋巴结癌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,结合凋亡变化,探讨淋巴化疗的作用机制。方法 将60例Ⅱ-Ⅲ期乳腺癌病人随机分为淋巴化疗组(40例)和对照组(20例)。淋巴化疗组改良根治术前72h于瘤床或肿瘤周围注射表阿霉素-活性炭混悬液10mg,对照组注射表阿霉素水溶液10mg。用末端转移酶标记法检测腋窝转移淋巴结癌细胞凋亡指数AI,用免疫组化SP法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 淋巴化疗组转移癌细胞AI平均为(9.5±2.7)%,对照组平均(3.8±1.4)%,前者明显高于后者(P<0.01);淋巴化疗组Bcl-2蛋白表达比对照组升高(P<0.05),而Bax蛋白表达升高更明显(P<0.01),Bcl-2/Bax的比值下降。结论 淋巴化疗能诱导乳腺癌腋窝转移淋巴结内癌细胞凋亡增加,其作用可能是通过降低Bcl-2/Bax蛋白的比值实现的。     

Bcl-2、Bax及M30在寻常疣中的表达

目的　研究细胞凋亡及其相关基因在寻常疣皮损中的表达及意义。方法　采用免疫组化 SP法检测了 2 9例寻常疣皮损中 Bcl- 2、Bax及 M30的表达。结果　 M30均阴性 ,9例 (31% )表皮角质形成细胞 Bax阳性表达 ,仅 6例 (2 1% )基底细胞 Bcl- 2染色弱阳性。结论　寻常疣的增殖性改变可能不是由于表皮角质形成细胞凋亡降低引起的。     

凋亡相关基因Bcl-2和Bax在宫颈病变的变化

目的:探讨Bcl 2和Bax在宫颈癌发生发展中的变化。方法:采用SP免疫组织化学法,分别对36例宫颈上皮内瘤变CINⅠ、40例CINⅡ、48例CINⅢ及56例浸润性宫颈鳞癌(ISCC)组织中的Bcl 2和Bax蛋白进行了检测,并以40例正常宫颈鳞状上皮作对照。结果:Bcl 2蛋白在正常宫颈鳞状上皮,CINⅠ, CINⅡ,CINⅡ,和宫颈癌组织中表达率分别为15. 00 %, 22. 22%, 30. 00%, 58. 33%和53. 57 %。表达在正常与CIN和宫颈癌之间差异有显著性P<0. 05,且和组织分化程度有关。Bax在它们之间表达率分别为17. 5%, 83. 33 %,70. 00%, 52. 08%和53. 57 %, 表达在正常与CIN和宫颈癌之间差异有显著性(P<0. 01)。结论:宫颈鳞状上皮非典型性增生和鳞状上皮癌中均有Bcl 2Bax过表达,表明它们在鳞状上皮癌发生,发展中起作用,和宫颈癌早期发生有关,在ISCC阶段其调控作用可能已经紊乱。     

莪术油对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:观察中药提取物莪术油(zedoray turmeric oil)对人乳腺癌(human breast cancer)细胞系MCF-7的凋亡诱导作用。方法:用不同浓度的莪术油对体外培养的MCF-7细胞进行干预。分别采用MTT、细胞免疫组织化学染色、流式细胞仪检测等方法,观察其对MCF-7细胞增殖的抑制和凋亡诱导作用,并对凋亡相关Bcl-2与Bax蛋白的表达变化进行定性检测。结果:经不同浓度的莪术油处理后的MCF-7细胞,其生长受到明显的抑制,细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加;莪术油作用后,细胞中Bax蛋白表达明显高于对照组。结论:一定浓度的莪术油能抑制MCF-7细胞增殖,促进其凋亡;其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

乳腺癌中Bcl-2的表达与激素受体及预后的关系

目的：研究乳腺癌中Ｂｃｌ－２的表达与激素受体和预后的关系。方法：应用免疫组化法检测７５例乳腺癌中Ｂｃｌ－２、ＥＲ、ＰＲ的表达。结果：５３例（７１％）Ｂｃｌ－２阳性，其中５０例（９４％）ＥＲ阳性，４４例（８３％）ＰＲ阳性，Ｂｃｌ－２的表达与ＥＲ、ＰＲ显著相关（Ｐ均＜０．００５）。Ｂｃｌ－２阳性者五年存活率为８１．１％，阴性者仅为２７．３％，两者有显著性差异（Ｐ＜０．００５）。结论：Ｂｃｌ－２表达与ＥＲ、ＰＲ等诸多临床病理特征相关，可作为激素治疗（内分泌治疗）、化疗或放疗的疗效预测指标。     

Bcl-2、Bcl-xL 和Bax在结直肠癌中的表达

目的:观察结直肠癌与癌旁组织中Bcl-2、Bcl-xL 和Bax的表达,探讨它们在结直肠癌发生发展中的可能作用.方法:RT-PCR、免疫组化MaxVision一步法分别检测40例结直肠癌组织与癌旁组织中Bcl-2、Bcl-xL 和Bax mRNA表达及其相应蛋白表达水平.结果:癌组织和癌旁组织的Bcl-2 mRNA及其蛋白表达水平都很低,两者之间无显著差异;两者Bcl-xL mRNA及蛋白表达水平均较高,且癌组织明显高于癌旁组织(P<0.05);两者Bax mRNA及蛋白表达水平均较Bcl-2、Bcl-xL高,但两者间无显著差异.两者Bcl-2/Bax和Bcl-xL/Bax的比值间无显著差异.Bcl-2蛋白表达与Dukes分期和TNM分期都呈负相关(P<0.05),与其他临床病理相关因素(性别、年龄、肿瘤大小、发生部位、组织学类型、分化程度)无明显相关;而Bcl-xL 、Bax在基因及蛋白水平的表达均与临床病理相关因素无关.结论:结直肠癌中Bcl-xL在基因及蛋白表达水平明显强于Bcl-2,且明显高于癌旁组织;前者可能促进了肿瘤的发生发展.Bcl-2蛋白表达与肿瘤分期呈负相关,可作为评价结直肠癌临床预后的参考指标.     

Bcl-2和Bax蛋白在子宫内膜异位症的表达

目的 :研究凋亡调节蛋白Bcl 2和Bax在子宫内膜异位症发生中的病理生理作用。方法 :应用免疫组织化学ABC法检测 16例子宫腺肌病的正位和异位子宫内膜、12例卵巢内异症的异位内膜及 17例正常子宫内膜中Bcl 2和Bax的免疫定位和染色强度。结果 :①在正常和正位子宫内膜中 ,Bcl 2或Bax表达相同 (P >0 .0 5 ) ,主要见于腺上皮细胞 ,具有明显周期性变化。②子宫腺肌病异位内膜中 ,Bcl 2或Bax均持续表达 ,无周期性变化。③卵巢内异症的异位内膜 ,Bcl 2和Bax极少表达。结论 :①Bcl 2或Bax在正常和正位子宫内膜的周期性表达 ,提示它们可能参与月经周期调节 ;②子宫腺肌病异位内膜腺上皮细胞Bcl 2持续存在 ,使之得以长期增殖而发病 ,为研究腺肌病的发病机制和寻找防治对策提供了新的理论依据。③卵巢内异症极少表达Bcl 2可能是促成凋亡形成 ,引起巧克力囊肿的原因。     

Bcl-2、Bax及caspase-9在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的探讨Bcl-2,Bax及Caspase-9在子宫内膜异位症（Endometrosis,EMS）患者异位内膜中和在位内膜中的表达及其意义。方法采用Western Blot法检测Bcl-2,Bax及Caspase-9蛋白在EMS患者异位及在位内膜组织中的半定量表达情况。结果Bcl-2、Bax及Caspase-9蛋白在EMS患者在位内膜的相对半定量表达值分别为0．5189±0．5176、0．4676±0．2346和0．2873±0．1018,而在异位内膜中分别为0．7348±0．4372、0．2327±0．2417和0．1447±0．1209。异位内膜中的Bcl-2蛋白的表达高于在位内膜,而Bax及Caspase-9蛋白低于在位内膜,差异均具有统计学意义（P〈0．05o结论与在位内膜相比,EMS患者的异位内膜中的Bcl-2蛋白的表达升高,而Bax及Caspase-9蛋白表达降低,细胞凋亡能力减弱,可能是致使异位的子宫内膜组织在异位种植生长,导致EMS发生发展的机制之一。     

Bcl-2和Bax在非小细胞肺癌中的表达与MVD的相关性研究

目的：以微血管密度（micro vessel density,MVD）为标记,探讨Bcl-2和Bax在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织和正常肺组织中的不同表达,及在肺癌发生、转移及预后中的不同表达。方法：采用免疫组织化学的方法（SP法）,检测63例NSCLC标本中Bcl-2和Bax蛋白与21例正常肺部组织的细胞表达之间的差异,并测定MVD。结果：Bcl-2和Bax之间具有较强的负相关性。Bcl-2、Bax表达的阳性率与NSCLC组织分化程度、TNM分期存在显著性差异（P〈0.05）,但与性别及生存期限无关。MVD和分化程度、TNM临床分期及淋巴结是否转移、生存期限有显著性关系,但和吸烟及性别无关,和组织学类型无显著性关系。结论：MVD在癌症早期随Bcl-2和Bax一起呈高表达,但随着肿瘤细胞的扩散,Bcl-2就失去了调控的作用,即出现基因表达的＂钝化＂现象。这提供了一条针对早期肺癌MVD升高的Bcl-2/Bax分子靶向治疗方法。     

输精管复通对生精细胞中Bcl-2及Bax基因蛋白表达的影响

为了解Bcl-2及Bax基因在输精管复通后大鼠生精细胞中的表达情况，作者建立了大鼠输精管结扎和复通模型，应用免疫组化法观察Bcl-2及Bax基因在大鼠输精管复通后生精细胞中的表达变化。结果显示：输精管复通组Bcl-2基因表达逐渐增强，复通后8周显著地强于输精管结扎组，到12周同假手术组；而输精管复通组的Bax基因表达无改变，与输精管结扎组无差异，都显著地强于假手术组。Bcl-2基因蛋白表达的变化说明在输精管结扎后，以及输精管复通后均发挥了抗凋亡的作用，而Bax基因蛋白表达在输精管复通前后的一致性，说明其对生精细胞凋亡作用有待进一步研究。     

莱菔硫烷对人肝癌HepG-2细胞Bcl-2与Bax基因转录及蛋白表达的影响

目的：研究莱菔硫烷（Sulforaphane,SFN）在体外对HepG-2细胞Bcl-2、Bax基因转录和蛋白表达的影响,探讨SFN诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法：不同浓度SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48 h,采用SRB法测定SFN对HepG-2细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测SFN作用后的细胞凋亡率;Western blot法和RT-PCR法检测SFN在蛋白和mRNA水平上对Bcl-2和Bax表达的影响。结果：SFN对HepG-2细胞的GI50为9.40μmol/L,TGI为26.68μmol/L;10、20、40μmol/L的SFN作用于HepG-2细胞48 h后,激光共聚焦显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态,细胞凋亡率分别为（27.42±0.43）%、（46.53±0.35）%和（58.92±0.48）%（P〈0.01）;细胞内Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著降低（P〈0.01）,而20、40μmol/L的SFN作用后细胞内Bax蛋白和mRNA的表达水平均显著升高（P〈0.01）,Bcl-2/Bax和Bcl-2 mRNA/Bax mRNA均随SFN剂量的增加显著降低（P〈0.01）,且变化趋势均呈一定的剂量依赖关系。结论：SFN能抑制HepG-2细胞的增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,可在翻译和转录水平下调Bcl-2、上调Bax的表达,这可能是SFN诱导HepG-2细胞凋亡的主要机制之一。