DNA甲基转移酶在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)和甲基转移酶3b(DNMT3b)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义.方法:应用免疫组化检测47例HCC癌组织、42例HCC癌旁肝组织及12例正常肝组织中DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达情况,分析三者与临床病理特征之间的关系.结果:DNMT1、DNMT3a和DNMT3b在HCC中阳性表达分别为80.9%、68.1%和78.7%,在癌旁组织内的表达分别为50.0%、52.4%和57.1%,均明显高于正常肝组织内的阳性表达(16.7%、16.7%和25.0%),且DNMT1、DNMT3a和DNMT3b与HCC的病理分化类型及乙肝表面抗原阳性显著相关(P<0.05).结论:DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的异常表达与HCC的发生发展有紧密的关系.     

诱骗受体3在肝细胞癌组织中的表达及其与凋亡的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中诱骗受体3(DcR3)表达和意义及与细胞凋亡的关系.方法 应用免疫组织化学Envision二步法和TUNEL技术对62例HCC组织和配对癌旁组织、15例正常肝组织进行DcR3和细胞凋亡检测.结果 44例HCC中DcR3表达、阳性表达率为70.97%,配对癌旁组织为20.96%,正常肝组织无阳性表达,HCC中DcR3表达明显高于其他组(P<0.01),门静脉癌栓形成组中DcR3表达高于阴性组(P<0.01).HCC、癌旁和正常肝组织凋亡指数(AI)分别为3.52±1.65、6.08±1.71和6.87±1.78,HCC与后两者比较差异有统计学意义(P<0.01).DcR3阳性表达组中AI明显低于阴性组(P<0.01).结论 DcR3在HCC呈稳定高表达,与癌细胞凋亡相关,可能参与HCC的发生和影响肿瘤的预后.     

YB-1蛋白在肝癌细胞的表达部位及其意义

目的 探讨YB-1蛋白在肝细胞癌( Hepatocellular carcinoma,HCC)组织、2种肝癌细胞株、正常肝细胞株中的表达及其与肝癌患者临床参数的关系.方法 采用免疫组化检测YB-1蛋白在58例HCC组织及相应例癌旁组织、20例正常肝组织中的表达;用Western blot法检测上述HCC 组织、癌旁组织、正常肝组织及肝癌细胞株QGY-7701、SMMC-7721、正常肝细胞株L02中核移位YB-1蛋白表达.结果 免疫组化显示在HCC组织,YB-1蛋白主要表达于癌细胞胞浆,其阳性率(72.4％,42/58)明显高于癌旁(41.4％,24/58及正常肝组织(35.0％,7/2) (P＜0.05).其中18例(31.0％,18/58)HCC组织伴有明显YB-1核阳性表达,且核表达与HCC病理分级、门静脉癌栓、肿瘤大小相关(P＜0.05).Western blot检测同样证实核移位的YB-1蛋白在肝癌组织(0.474±0.107)显著高于癌旁组织及正常肝组织(P＜0.05).核移位的YB-1蛋白在2种肝癌细胞株中均高于正常肝细胞株(P＜0.05),其差异较织织更为明显.结论 YB-1蛋白在HCC中高表达及核移位可能促进了肝癌的发生发展,有可能成为肝癌治疗的新靶点.     

UNC5b基因表达下调与肝细胞癌血管生成的关系

目的 探讨UNC5b基因在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用.方法 收集中南大学湘雅医院外科2004年10月至2005年8月期间手术切除并经病理确诊为HCC的肿瘤标本和相应距瘤体1 cm外的癌旁肝组织各38例,另取5例正常肝组织作为对照.采用组织原位杂交的方法检测UNC5b mRNA在HCC组织、痛旁组织以及正常肝组织中的表达情况,并分析其与HCC临床病理特征之间的关系.分离培养人脐动脉内皮细胞(HUAEC),用HCC组织匀浆及血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合刺激活化HUAEC,应用RT-PGR方法分析其活化前后UNC5b基因的表达水平.结果 原位杂交结果显示,UNC5b主要表达于正常肝组织以及部分癌旁组织的血管内皮细胞胞质中;在HCC组织的血管内皮细胞中呈弱表达或不表达;HCC组织内皮细胞中UNC5b的表达强弱与肿瘤分化程度、肿瘤结节的数目、肿瘤大小、有无包膜、肝硬化程度无相关性(P>0.05);癌旁组织内皮细胞中UNC5b的表达与有无包膜显著相关(P=0.003).UNC5b基因在未活化的HUAEC中呈强表达(0.973±0.012),在联合刺激活化后的HUAEC中表达明显下调(0.451±0.113,P<0.05).结论 UNC5b基因在HCC组织血管内皮细胞及活化后的HUAEC中的表达均明显下调,提示UNC5b的表达下调可能与HCC的血管生成相关.     

UNC5b基因表达下调与肝细胞癌血管生成的关系

目的 探讨UNC5b基因在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用.方法 收集中南大学湘雅医院外科2004年10月至2005年8月期间手术切除并经病理确诊为HCC的肿瘤标本和相应距瘤体1 cm外的癌旁肝组织各38例,另取5例正常肝组织作为对照.采用组织原位杂交的方法检测UNC5b mRNA在HCC组织、痛旁组织以及正常肝组织中的表达情况,并分析其与HCC临床病理特征之间的关系.分离培养人脐动脉内皮细胞(HUAEC),用HCC组织匀浆及血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合刺激活化HUAEC,应用RT-PGR方法分析其活化前后UNC5b基因的表达水平.结果 原位杂交结果显示,UNC5b主要表达于正常肝组织以及部分癌旁组织的血管内皮细胞胞质中;在HCC组织的血管内皮细胞中呈弱表达或不表达;HCC组织内皮细胞中UNC5b的表达强弱与肿瘤分化程度、肿瘤结节的数目、肿瘤大小、有无包膜、肝硬化程度无相关性(P>0.05);癌旁组织内皮细胞中UNC5b的表达与有无包膜显著相关(P=0.003).UNC5b基因在未活化的HUAEC中呈强表达(0.973±0.012),在联合刺激活化后的HUAEC中表达明显下调(0.451±0.113,P<0.05).结论 UNC5b基因在HCC组织血管内皮细胞及活化后的HUAEC中的表达均明显下调,提示UNC5b的表达下调可能与HCC的血管生成相关.     

细胞因子信号转导抑制因子1在人肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达,探讨SOCS-1和HCC的临床、病理特点及术后复发的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测SOCS-1蛋白在41例HCC癌组织、癌旁组织和11例正常肝组织中的表达;分析临床、病理资料,并对上述患者进行随访,根据HCC患者术后复发时间进行生存分析.结果 SOCS-1蛋白在HCC癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为36.58%、65.85%和81.82%(P<0.01).SOCS-1蛋白表达强度与肿瘤病理分级呈负相关(低分化为17.39%,高分化为61.11%;转移组为12.50%,未转移组为52.00%),差异有统计学意义(P<0.01).SOCS-1蛋白表达阳、阴性组患者12月内复发率为分别为14.3%和48.1%(P<0.01).结论 SOCS-1在HCC中表达下调,SOCS-1的低表达在肝癌发生过程中发挥重要作用.SOCS-1可作为一种新的判断HCC患者术后复发和预后的指标.     

基质细胞衍生因子-1在人肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达,探讨SDF-1和HCC的临床、病理特点及术后复发的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测SDF-1在41例HCC癌组织、癌旁组织和11例正常肝组织中的表达;分析临床、病理资料,并对上述患者进行随访,根据HCC患者术后复发时间进行生存分析.结果 SDF-1在HCC癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为68.29%、46.34%、和18.18%(P<0.01).SDF-1表达强度与肿瘤病理分级呈正相关(低分化为66.67%,高分化为43.48%;转移组为52%,未转移组31.25%),差异有统计学意义(P<0.05).SDF-1表达阳性、阴性患者12月内的复发率分别为48.1%和14.3%(P<0.01).结论 SDF-1在HCC中表达上调,SDF-1的高表达在肝癌发生过程中发挥重要作用.SDF-1可作为一种新的判断HCC患者术后复发和预后的指标.     

缺氧诱导因子1α与脯氨酸羟化酶3在肝癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和脯氨酸羟化酶3(prolyl hydroxylase 3,PHD3)的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测103例HCC组织、14例癌旁肝组织和13例正常肝组织中HIF-1α和PHD3的表达,并分析其与临床病理特点间的关系。结果:HIF-1α在HCC组织中的表达阳性率显著高于癌旁肝组织,其阳性表达与肿瘤最大径、脉管瘤栓、术后2年生存率、肿瘤分级和TNM分期显著相关(P<0.05)。正常肝组织不表达HIF-1α。PHD3在HCC组织中阳性表达明显高于癌旁肝组织和正常肝组织,其在HCC中阳性表达与脉管瘤栓、肿瘤分级和术后2年生存率显著相关(P<0.05)。生存分析显示,HIF-1α和PHD3阳性表达组病人术后生存期较阴性表达组明显缩短。COX多因素分析显示,HIF-1α和PHD3阳性表达是HCC的独立预后因素。结论:HIF-1α和PHD3可能在HCC的发生、发展、浸润和转移中起重要作用。对HCC中HIF-1α、PHD3表达的检测有助于判断HCC的恶性程度及预后分析。     

AP-1和MMP-9蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨转录因子激活蛋白-1(activating protein-1,AP-1)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达特点、相互关系及临床意义.方法 采用免疫组化SABC方法检测比较56例HCC组织和癌旁正常肝组织中AP-1和MMP-9的表达,分析两者与临床病理因素的相关性.结果 HCC组织中AP-1 (c-Jun/c-Fos)和MMP-9阳性表达率均明显高于癌旁正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.05).c-Jun和c-Fos蛋白的表达与患者肝内转移、病理分级、TNM分期明显相关(P<0.05或者P<0.01).MMP-9蛋白表达与患者有无肿瘤包膜、肝内转移、TNM分期明显相关(P<0.05或者P<0.01).HCC组织中AP-1(c-Jun/c-Fos)和MMP-9表达呈正相关(r=0.535,P<0.01).结论 AP-1、MMP-9在HCC的发生发展过程中起着重要的作用;AP-1可能通过上调MMP-9的表达和活性而促进HCC的浸润和转移.     

DNA甲基转移酶在肝门部胆管癌中的表达及临床意义

目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMTs)在肝门部胆管癌中的表达及其临床意义.方法 收集1997年4月至2007年3月中山大学附属第一医院收治的111例肝门部胆管癌患者(胆管癌组)和39例胆总管囊肿患者(对照组)胆管组织标本,构建组织芯片,采用免疫组织化学方法检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平;比较胆管癌组与对照组的胆管组织中DNMTs蛋白表达的差异;分析肝门部胆管癌组织中DNMTs蛋白表达与临床病理因素的关系,计数资料的比较采用x2检验或Fisher确切概率法,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存情况分析采用Log-rank检验.结果 胆管癌组的DNMT1和DNMT3b高表达率分别为54.1％ (60/111)和47.7％ (53/111),显著高于对照组的28.2％ (11/39)和23.1％ (9/39),两组比较,差异有统计学意义(x2=7.740,7.240,P＜0.05).DNMT1的高表达与Bismuth-Corlette分型、T分期存在明显相关性(x2=12.200,17.800,P＜0.05);而DNMT3a在胆管癌组和对照组的高表达率比较,差异无统计学意义(x2=3.370,P＞0.05);DNMT3b的高表达则只与Bismuth-Corlette分型存在明显相关性(x2=8.300,P＜0.05).111例患者中66例行肝门部胆管癌切除术,其中42例获得随访.DNMT1低表达者的术后中位生存时间为23.9个月,明显长于DNMT1高表达者的11.8个月(x2=3.980,P＜0.05).结论 DNMT1和DNMT3b高表达在肝门部胆管癌发生、发展中起重要作用;DNMT1的表达水平与肝门部胆管癌根治性切除术后生存时间明显相关,可望成为有价值的预测因子.