乙肝病毒前S2抗原研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)前S_2抗原(PS_2)是近年来乙型肝炎(HB)研究的新课题之一。其检测对HB的早期诊断、了解病情和预后判断都有十分重要意义。本文就近年采的一些进展作一综述。     

乙肝病毒前S2抗原与乙肝血清标志物的相关性及其临床意义

目的:探讨前S2抗原(PreS2抗原)与乙型肝炎病毒(HBV)隐、显性感染的关系及其临床意义。方法:采用ELISA法同时检测HBV隐性感染者(为主)及适量显性感染者的PreS2抗原和乙肝血清标志物,然后进行各类、群感染者之间的比较和分析。结果:在HBV隐性感染的人群中,e抗原阳性者和e抗体阳性者PreS2抗原的阳性率分别为93.10%和60.00%;“乙肝大三阳”者和“小三阳”者PreS2抗原的阳性率分别为92.31%和62.50%。在乙肝病毒显性感染者(急、慢性乙肝患者)人群中,PreS2抗原的阳性率分别为90.91%和61.54%。结论:PreS2抗原在判断感染者尤其是隐性感染者血清的传染性、以及隐性感染者的发展转化和显性感染者的临床转归方面,具有较大的参考价值。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其临床意义

为探讨检测乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1Ag)的临床意义,本文对338例各型乙型肝炎患者进行Pre-S1Ag检测,同时检测HBV标志物和HBV-DNA,对其阳性率及相互关系进行分析比较.结果表明:338例患者,Pre-S1Ag阳性检测率为63.02%,HBeAg阳性检测率为48.52%,HBV-DNA阳性检测率为68.05%.Pre-S1Ag阳性与HBV-DNA阳性的符合率为78.56%;Pre-S1Ag与HBeAg阳性的符合率为81.17%;Pre-S1Ag与HBeAg、HBV-DNA具有显著相关性(P＜0.01),提示Pre-S1Ag能够较好地反映病毒复制状况,有可能作为体内病毒复制存在的实验室指标.     

乙肝病毒前—S2区的问题探讨

HBV基因由一个小的、环状的,不完整的双股DNA分子组成,其DNA分子上有一个可变长度的单股区。该基因长股携带病毒的全部蛋白编码拷贝,其核苷酸链上有4个编码表面(S)、核心(C)、X蛋白和DNA多聚酶(P)的开放阅读框架(ORFs)。S区是一个单独的,连续性的ORF,     

双重表达乙肝病毒前S2抗原的重组质粒的疫苗效应

目的：乙肝病毒（HBV）的前S2抗原具有比S抗原更强的免疫原性，可以更有效地诱生特异性免疫应答。文中构建含有前S2抗原编码基因的3种重组质粒，观察接种后诱生特异性体液免疫应答的情况。方法：采用PCR技术扩增HBV的S2-S和S1-S2-S基因；同时串联拼接产生S2-S-S2片段。继而构建重组表达质粒pcDNA3．1／S2S、pcDNA3．1／S1S2S和pcDNA3．1／S2SS2。后者意在表达S抗原的同时，双重表达前S2抗原。然后将上述3种质粒分别以100μg肌肉接种BALB／c小鼠，于2、4周后各加强1次。初次接种后3、5、8和12周，分别采血检测小鼠的前S2抗体和抗-HBs。结果：初次接种后3周，S2SS2组小鼠血清的前S2抗体检出率为12．5％，低于S1S2S组（25％）和S2S组（37．5％）；但5周时则达到87．5％，并持续到12周，优于S1S2S组和S2S组；并且S2SS2组的前S2抗体滴度达到1：2000，高于S2S组（1：500）和S1S2S组（1：50）。不过，S2SS2组同期的抗-HBs检出率和抗-HBs滴度则低于S1S2S组和S2S组。结论：重组质粒pcDNA3．1／S2S-S2以串联拼接方式双重表达前S2抗原，能够诱生较高水平的特异性前S2抗体，但其诱生抗HBs的能力却明显降低，这是在设计改造基因疫苗时需要考虑的一个重要问题。     

前S1抗原与抗-HBc IgM检测结果探讨

检测患者乙型肝炎病毒前S1抗原（Pre-S1Ag）与抗-HBc IgM的水平,探讨两者与HBV急性感染的相关性,为乙型肝炎的早期诊治提供必要的理论依据。对90份临床标本分别采用PCR技术检测HBV-DNA载量阳性标本,采用固相R IA（SPR IA）检测HBeAg、抗-HBc IgM,采用胶体金免疫层析法检测Pre-S1Ag,并对结果进行分析。结果表明90份HBV-DNAPCR阳性标本中Pre-S1Ag阳性71份,HBeAg阳性60份,抗-HBc IgM阳性14份,其检测结果有显著性差异（P〈0.05）。血清Pre-S1Ag、抗-HBc IgM及HBeAg与HBV复制紧密相关。Pre-S1Ag明显优于抗-HBc IgM及HBeAg。因此,Pre-S1Ag的检测对乙型肝炎临床早期诊断、抗病毒治疗方案的选择和预后判断具有重要意义。     

571例HBV免疫标志物阳性血清前S1抗原和HBcAb-IgM临床分析

乙型肝炎病毒（HBV）外膜蛋白包括S、前S1和前S2三种成分。其中前S1蛋白（Pre S1）位于病毒颗粒（Dane颗粒）表面,具有高度的免疫原性,在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面具有十分重要的作用。HBcAb-IgM于HBV感染急性期产生,出现早,滴度高,由此有人认为,HBcAb-IgM是继e抗原和HBV-DNA后提示HBV是否在复制的良好指标。本文检测了571例乙型肝炎病毒免疫标志物至少有一项阳性血清标本,旨在进一步明确前S1抗原和HBcAb-IgM在诊断乙肝病毒感染和活动复制判断中的价值。现将结果报告如下。     

乙型肝炎病毒前S1蛋白抗原检测的临床意义

目的通过分析HBV前S1（PreS1）蛋白抗原和血清标志物之间的关系,探讨PreS1蛋白抗原检测在临床上的应用价值。 方法收集382例HBV患者血清样本,采用ELISA法检测HBVPreS1蛋白抗原和血清标志物,采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA,并比较所有检测结果。 结果382例HBV患者血清样本PreS1蛋白抗原和HBV-DNA的检出率分别为33．8％和40．8％;其中HBeAg阳性的144例中,PreS1抗原阳性为112例,HBV-DNA阳性为134例,阳性率分别为77．8％和93．1％;HBeAg阴性的102例中,PreS1抗原阳性为17例,HBV-DNA阳性为22例,阳性率分别为7．1％和9．2％。HBV-DNA检出率稍高于PreS1抗原的检出率,但两者间检出率差异均无统计学意义（P〉0．05）。 结论HBVPreS1蛋白可反映HBV复制的情况,与HBV-DNA结果有较好的一致性,可作为临床上HBV感染诊断或监测的指标。     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床意义

探讨乙型肝炎病毒前s1抗原（Pre-S1）检测在乙型肝炎病毒诊断中的临床意义。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量聚合酶链反应技术（fluorescenee quantitative PCR,FQ-PCR）对650份HBV-M不同阳性模式及40份HBV—M全阴性模式血清标本进行乙型肝炎病毒Pre-S1、乙肝五项和HBV—DNA检测,并对三种检测结果进行统计学分析。在650份HBV—M不同阳性模式标本中,在119份大三阳标本中Pre—S1阳性检出率92．4％,HBV-DNA阳性检出率100％,在186份小三阳标本中Pre—SI阳性检出率42．5％,HBV—DNA阳性检出率63．4％,在21例HBsAg（＋）和HBcAb（＋）阳性组中Pres1阳性检出率47．6％,HBV．DNA阳性检出率66．7％;在297例HBsAb（＋）标本中Pre—S1阳性检出率0．4％,HBV-DNA阳性检出率0％,在268例HBV—DNA阳性的标本中Pre-S1阳性检出率79．3％。在40份HBV—M全阴模式中Pre-S1阳性检出率0％,HBV-DNA阳性检出率0％。Pre—S1在大三阳、小三阳及HBV-DNA阳性组阳性检出率明显高于阴性组（P〈0．01）,Pre—S1检测可补充和完善乙肝“两对半”检测的不足,尤其对HBeAg阴性或变异的HBV感染者能更好的反映病毒的复制状态和传染性。     

化学发光免疫法检测前列腺特异性抗原的临床应用

目的 利用化学发光免疫法定量检测前列腺特异性抗原(PSA),分析其在临床诊断前列腺癌中的应用情况.方法 将60例前列腺癌患者设为A组,60例良性前列腺增生患者设为B组,60例健康体检者设为C组,对三组受试者血清中总前列腺特异性抗原(tPSA),游离前列腺特异性抗原(fPSA)进行化学发光免疫法检测,并分析其水平差异.结果 经检测,A组和B组的tPSA含量显著高于C组,而且A组tPSA含量显著高于B组,差异显著,存在统计学意义(P＜0.05);另外A组fPSA/tPSA比值低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对PSA进行化学发光免疫法检测,具有较高的临床诊断价值,可为前列腺癌临床诊断提供可靠的参考依据.     

发光酶免疫分析法测定环孢霉素血药浓度

建立发光酶免疫分析(LEIA)方法进行环孢霉素(Cyclosporine)治疗药物监测(TOM).用定标、质控、回收率、精密度、抗干扰等对LEIA进行评价,并对用药达稳态浓度后肾移植患者的肝素抗凝全血中的环孢霉素血药浓度进行测定.结果表明:定标、质控均符合实验要求,平均回收率为99.6%,CV为2.1%,高胆红素、血红蛋白、甘油三酯以及高、低总蛋白等对LEIA的干扰误差均<10%.肾移植患者无药物中毒反应和排斥反应,环孢霉素血药浓度平均值为190.3μg/L.LEIA法测定环孢霉素血药浓度具有较高的特异性和稳定性.     

乙型肝炎病毒前S1蛋白检测的临床意义

目的探讨乙肝前S1抗原和“乙肝六项”、HBV-DNA的关系并结合ALT的变化确定前S1抗原的临床意义和诊断价值。方法采用ELISA方法检测前S1和乙肝六项,荧光定量PCR法检测HBV-DNA,采用紫外连续监测法检测谷丙转氨酶(ALT)。结果“大三阳”标本中前S1阳性率为85.2%,HBV-DNA阳性率为90.3%;“小三阳”中前S1阳性率为46.4%,HBV-DNA阳性率为31.6%;HBSAg+、HBCAg+、e系统为阴性的前S1阳性率为26.9%,HBV-DNA的阳性率为23.0%。急性乙肝跟踪观察前S1、HBV-DNA、ALT时发现前S1能够较早反应乙肝恢复情况。ALT恢复越快前S1抗原转阴越早,且先于DNA阴转。结论前S1蛋白能够较好地反映乙肝病毒的复制情况,对病情的预后和疗效判断有较好的临床应用价值。     

老年慢性乙型肝炎患者肝组织内Pre－S2蛋白的表达及意义

用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测５７例老年慢性乙肝患者肝组织内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，并与６３例非老年患者进行比较。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白总阳性率为７５．４％（４３／５７），非老年组为５４．０％（３４／６３），两组差异显著。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组，膜型Ｐｒｅ－Ｓ２阳性率９３．０％（４０／４３），Ｐｒｅ－Ｓ２与ＨＢｓＡｇ符合占９１．２％（５２／５７）。４３例Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性标本中血清ＨＢｅＡｇ阳性５３．５％（２３／４３），ＨＢｅＡｂ阳性４１．９％（１８／４３）。认为老年慢性乙肝肝内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白表达高于非老年的，Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白免疫反应与ＨＢｓＡｇ相似并可能在ＨＢｓＡｇ免疫特性中起作用。     

乙肝五项、HBV-DNA定量及乙肝前S1抗原联合检测用于诊断乙肝的临床价值分析

目的分析乙肝五项与病毒(HBV)前S1抗原及病毒DNA的相关性,并探讨联合检测对乙肝诊断的临床价值。方法选取本院门诊部和住院部2013年10月至2015年10月期间收治的患者作为研究对象,收集其HBsAg阳性血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其前S1抗原和乙肝五项,采用荧光定量PCR法检测其HBV-DNA水平,对比分析不同模式下前S1抗原的表达水平和HBV-DNA的水平,并分析其相关性。结果乙肝前S1抗原阳性率与HBV-DNA阳性率在不同HBV-M模式下比较,差异无统计学意义(P>0.05)。此外1+3+5+组中HBV-DNA阳性拷贝数较高,多数高于105copies/m L;而1+4+5+、1+2+、1+3+、1+4+和1+5+组的前S1+与前S1-组相比,其HBV-DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。HBsAg阳性血清标本中前S1抗原在HBe Ag+组中阳性率明显高于HBe Ag-组,差异具有统计学意义(P<0.05),HBsAg阳性血清标本中前S1抗原与HBe Ag具有一定的相关性。HBsAg阳性血清标本中前S1抗原在HBV-DNA+组中阳性率明显高于在HBV-DNA-组,差异具有统计学意义(P<0.05),HBsAg阳性血清标本中前S1抗原与HBV-DNA具有一定的相关性。结论前S1抗原可较好反映乙肝病毒存在和复制的情况,将前S1与乙肝五项和HBV-DNA进行联合检测可较早发现较低水平病毒的感染,其可作为抗病毒疗效的评判指标,对乙肝的临床诊断和疗效评价均具有较好的应用价值。     

癌抗原15-3酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立癌抗原15-3(CA15-3)酶促化学发光免疫分析方法.方法 利用双抗体夹心法建立CA15-3化学发光检测体系,分别对该体系的最低检测限、线性、分析特异性、准确度和精密度进行评估,并与进口全自动化学发光检测结果进行对比.结果 本方法灵敏度为0.26 U/mL,线性范围为0～ 300 U/mL,与CEA和CA125无交叉反应,添加回收率在97.0％ ～105.6％之间,分析内与分析间CV均小于10％,与进口全自动化学发光试剂同时检测160份样本的CA15-3浓度,检测结果的线性相关系数为0.987.结论 成功建立了CA15-3酶促化学发光免疫分析方法.该方法灵敏度高、重复性好,在临床应用中可替代进口化学发光检测试剂.     

前列腺特异抗原化学发光免疫分析方法的建立及初步应用

建立的前列腺特异抗原(PSA)化学发光免疫分析(CLIA)使用2株抗PSAMcAb,一株McAb包被微孔板,另一株McAb与HRP连接。底物是鲁米诺/H2O2/对碘苯酚系统的双抗体夹心一步法,测定范围0.5～64ng/mL,最低检出值为0.13ng/mL,平均回收率为100.6%,批内和批间CV分别小于8.3%和11.5%,正常参考值小于3.5ng/mL。1000份血清临床考核,与参比试剂盒临床符合率一致,具有同等的临床诊断价值。