肿瘤坏死因子－α抑制离体大鼠黄体细胞孕酮生成

用大鼠黄体细胞长期培养和放射免疫分析法观察肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对雌激素、孕激素分泌和ｃＡＭＰ生成的影响。结果表明，ＴＮＦ－α显著抑制基础孕酮分泌和ｃＡＭＰ生成，其抑制作用随作用时间的延长而增加。ＴＮＦ－α对雌二醇的生成无显著影响。３Ｈ－亮氨酸和３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入实验证实ＴＮＦ１α对黄体细胞孕酮生成的抑制作用并非毒性作用。     

肿瘤坏死因子对正常和甲亢甲状腺细胞功能调控的对比观察

采用细胞单层培养方法，以ｃＡＭＰ为观察指标，研究肿瘤坏死因子对正常和甲亢甲状腺细胞功能调控的特征。结果显示：（１）１０＾－３和１０＾－１Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ－α对其状态下正常甲状腺细胞生成ｃＡＭＰ的值无显著影响，当其浓度为１０和１０＾３Ｕ／ｍｌ时，ｃＡＭＰ释放明显增加。ＴＮＦ－α在１０＾－３－１０Ｕ／ｍｌ的剂量范围内，对甲亢甲状腺细胞基础ｃＡＭＰ的生成无明显影响，但１０＾３Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦ－α则显著促     

胰岛素对黄体细胞孕酮分泌及凋亡的影响

关于胰岛素对卵巢功能的影响近来受到广泛的关注，本实验观察了胰岛素对大鼠离体培养黄体细胞孕酮生成的影响，并对其作用机制进行了探讨。结果显示；１．胰岛素显著促进大鼠离体黄体细胞基础孕酮生成而对ｈＣＧ促孕酮作用没有影响．２．胰岛素对大鼠黄体细胞内源性ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量均无影响。３．胰岛素促黄体细胞孕酮作用可被Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ抑制，而Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ却无作用。     

干扰素和肿瘤坏死因子调节甲状腺细胞分泌甲状腺球蛋白

采用甲状腺细胞培养方法，研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＩＮＦ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对甲状腺细胞生成甲状腺球蛋白（Ｔｇ）的调节作用。结果显示：在１０＾－３～１０＾３ｕ／ｍｌ的浓度范围内，ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α均可显著抑制甲状腺细胞基础状态下Ｔｇ的分泌；ＩＦＮ－α不影响ＴＳＨ的刺激效应，但ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α对ＴＳＨ诱导的Ｔｇ释放具有双重调节作用，低浓度时（１０＾     

干扰素和肿瘤坏死因子和调节甲状腺细胞分泌甲状腺球蛋白

采用甲状腺细胞培养方法,研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）对甲状腺细胞生成甲状腺球蛋白的调节作用。结果显示：在１０＾－３－１０＾３ｕ／ｍｌ的浓度范围内,ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ－α均可显著抑制甲状腺细胞基础状态下Ｔｇ的分泌;ＩＦＮ－α不影响ＴＳＨ的刺激效应,但ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α对ＴＳＨ诱导的Ｔｇ释放具有双重调节作用,氏深度时（１０＾－３－１     

TNF-α的合成分泌机制不同于一般的分泌型蛋白

目的 拟借助微粒体膜和体外转录翻译系统来研究分泌型ＴＮＦα（Ｓ－ＴＮＦ－α）的产生机制及Ｓ－ＴＮＦ－α和跨模型ＴＮＦα（ＴＭ－ＴＮＦ－α）的关系。方法 首先将分子量为１７×１０＾３Ｓ－ＴＮＦ（不含编码ＴＮＦ信号肽的基因）、２６×１０＾３ＴＭ－ＴＮＦ（含信号肽基因）和１７×１０＾３Ｓ－ＴＮＦ突变体（Ｓ－ＴＮＦｍ,用ＩＬ－２信号肽密子转换ＴＮＦ信号肽序列）的全长ｃＤＮＡ片段分别亚克隆于含Ｔ７启动子的ｐ     

表皮生长因子对人绒毛膜促性腺素诱导的黄体细胞孕酮生成的影响

本实验用体外培养的大鼠黄体细胞，研究了ＥＧＦ对ｈＣＧ和ＰＫＡ系统激活剂诱导的黄体细胞孕酮与ｃＡＭＰ生成的影响。     

秋水仙碱对肿瘤坏死因子—α基因表达的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌ，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ刺激ＰＵ５－１．８细胞的ＴＮＦ－ａ基因表达，以前工作曾证实Ｃｏｌ主要抑制ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的转录。本研究进一步证实这种抑制作用呈延迟性，即Ｃｏｌ需作用３小时才能充分表现其负性影响。而且这种抑制作用可被蛋白合成抑制剂放线菌酮（ＣＨＸ）完全阻断。单用Ｃｏｌ对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ稳定性无明显影响，而与ＣＨＸ联用时则可明显延长ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ半衰期。以上资料堤示，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α基因表达的影响可能是对其在转录及转录后水平综合影响的结果。     

抗细菌核心糖脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放TNF…

用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ和ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１，ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＴＮＦ－α的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能分别降低细胞ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可能通过与ＬＰＳ的结     

高糖、肿瘤坏死因子促进血管内皮细胞表面整合素（α_vβ_3）表达

本文采用ＥＬＩＳＡ方法检测培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表面玻璃连接蛋白受体（ＶｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒＶｎＲ即整合素家庭的α＿ｖβ＿３）的表达改变；用（５１）Ｃｒ－标记血小板（（５１）Ｃｒ－ｐｌａｔｅｌｅｔｅ，（５１）Ｃｒ－ｐＬ）检测ＨＵｖＥｃ的粘附功能；Ｆｕｒａ－２／Ａｍ负载ＥＣ，测定ＨＵＶＥＣ胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ（２＋）］），观察了高糖、肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）对ＥＣ粘附功能的影响。结果表明：①高糖（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）可明显促进ＥＣ与ＰＬ的粘附（ＣＰＭ值：３６１±２ｌ．９３ＶＳ２ｌ９．６７±１６．２６，ｎ＝６Ｐ＜０．０１），抗β３亚单位单抗（β３ＭｃＡｂ）可部分阻断ＥＣ与ＰＬ粘附。ＴＮＦ－α（１０００μ／ｍ１）也有相同作用（ＣＰＭ值：４ｌ０．７±１７．６ＶＳ２１９．６７±１６．２６１ｎ＝６Ｐ＜０．０１），β３ＭｃＡｂ也部分阻断ＴＮＦ－α诱导的ＥＣ－ＰＬ间的粘附。②不同浓度高糖和ＴＮＦ－α不同时间可影响ＥＣ表面的α＿ｖβ＿３表达，并且在一定范围内有浓度和时间依赖性。③高糖和ＴＮＦ－α可明显增加ＥＣ的［Ｃａ（２＋）］ｉ，上述资料提示?     

秋水仙碱对巨噬细胞分泌TNF－α的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．）能剂量依赖性地抑制ＬＰＳ刺激的大鼠巨噬细胞（Ｍψ）分泌ＴＮＦ－α。Ｃｏ１的衍生物β－ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无影响，对ＴＮＦ－α的分泌亦无影响；其他微管抑制剂如长春新碱等亦能抑制Ｍψ分泌ＴＮＦ－α。间接免疫荧光染色和原位杂交法显示，ＬＰＳ能促进微管聚合，并使ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及蛋白质表达明显增加；当ＬＰＳ与Ｃｏｌ．联用时，微管解聚，ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达及其蛋白质合成减少，ＴＮＦ－α失去原有的胞浆定位，弥散分布于胞浆。说明ＴＮＦ－α的合成需要完好的微管结构与功能，并提示在生理或病理条件下微管功能的变化可能直接或间接参与对ＴＮＦ－α生物合成的调节。     

抗细菌核心糖脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放TNF－α和IL－6及其mRNA表达的影响

用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能分别降低细胞ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可能通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ，从而降低或阻碍了效应细胞炎性细胞因子ｍＲＮＡ的表达，达到降低相应细胞因子的作用。     

TNF-α单抗Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达

目的进行ＴＮＦ－α单抗Ｆａｂ段基因的克隆并在大肠杆菌中表达。方法用逆转录－聚合酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）从分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆重链Ｆｄ段和κ链基因；并用ＥＬＩＳＡ和免疫印迹分析证明表达的Ｆａｂ段特异结合ＴＮＦ－α。结果从分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆出了重链Ｆｄ段和κ基因。经ＤＮＡ序列测定表明，ＶＨ、Ｄ、ＪＨ分别属于ＶＨ３Ｄ、ＤＳＰ２和ＪＨ４；Ｖκ和Ｊκ分别属于Ｖκ１和Ｊκ１。将该Ｆｄ和κ链ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＣｏｍｂ３Ｈ中，在大肠杆菌中获得了表达。结论ＥＬＩＳＡ和免疫印迹分析表明，表达的Ｆａｂ段可特异地和ＴＮＦ－α结合。     

缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其传递途径

本文观察了低氧对离体培养成年牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的影响，并用异搏定、Ｈ７、ＰＭＡ和ＥＧＦ进行干预实验，对ＭＳＣ增殖中信息传递途径作了初探。结果显示：（１）缺氧２４ｈ，ＰＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入显著增高。（２）异搏定及Ｈ７显著降低低氧Ｈ－ＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，而ＰＭＡ及ＥＧＦ显著增加ＨＳＭＣ＾３ＨＴｄＲ参入。（３）Ｈ－ＳＭＣ对ＰＭＡ和ＥＧＦ反应强于常氧Ｎ－ＳＭＣ；     

α—干扰素对正常与甲亢甲状腺细胞生成c—AMP的调节作用

采用甲状腺细胞单层培养及标记免疫分析法，对比研究α－干扰素（ＩＦＮ－α）对正常与Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）甲状腺细胞生成ｃＡＭＰ的影响，结果显示：（１）基础状态下，１０＾－３、１０＾－１和１０ｕ／ｍｌ的ＩＦＮ－α可刺激正常甲状腺细胞产生ＣＡＭＰ，刺激强度随ＩＦＮ－α浓度的增大而减弱，当试验剂量达１０＾３ｕ／ｍｌ时，ＣＡＭＰ的生成量与无刺激的对照组比较无统计学差异，此浓度区间的ＩＦＮ－α对ＧＤ甲状腺细胞     

脂多糖诱导地鼠肺泡巨噬细胞中一氧化氮对TNF—α的调节作用

对地鼠肺进行灌洗,利用灌洗液分离纯化出肺泡巨噬细胞（ＡＭ）,并进行培养。脂多糖（ＬＰＳ）刺激后,分 别加入一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂和一氧化氮（ＮＯ）供体,观察ＮＯ和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的变化,探讨ＮＯ 对ＴＮＦ－α的作用关系。结果显示：ＬＰＳ刺激ＡＭ使ＮＯ和ＴＮＦ－α含量均增加（Ｐ＜０．０１）,特异性ｉＮＯＳ抑制剂使活化 的ＡＭ分泌产生ＴＮＦ－α上调,ＮＯ供体可显著抑制ＴＮＦ－α的释放。不同的ＮＯ抑制剂和ＮＯ供体使ＮＯ和ＴＮＦ－α含 量变化不同。提示 ＮＯ和 ＴＮＦ－α是 ＡＭ分泌的炎症细胞因子, ＮＯ对 ＴＮＦ－α存在着调节作用。     

肿瘤坏死因子-β抑制人胰腺癌细胞增殖的病理学研究

目的：探讨肿瘤坏死因子－β（ＴＮＦ－β）对人胰腺癌ＪＦ３０５细胞增殖的抑制作用。方法：采用免疫细胞化学染色方法观察增殖细胞核抗原、ｂｃｌ－２蛋白的表达、３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入经放射自显影显示ＤＮＡ合成、核仁组成区嗜银蛋白染色及末端脱氧核苷转移酶标记法凋亡原位染色，观察ＴＮＦ－β的作用。结果：ＰＣＮＡ及ｂｃｌ－２蛋白的表达，在ＴＮＦ－β处理前后变化不甚明显；ＡｇＮＯＲ染色后，银染颗粒的数量差异无统计学意义，但颗粒面积减少显著（Ｐ＜０．０５）；３Ｈ－胸腺嘧啶核苷放射自显影表明，Ｓ期细胞数明显减少，且差异显著。凋亡原位染色显示，在ＴＮＦ－β处理后的较短时间内即出现多量染色阳性细胞，与对照片比较，变化明显。结论：ＡｇＮＯＲ染色颗粒面积减少及凋亡原位染色出现多量凋亡细胞，能较敏感地反映ＴＮＦ－β处理对人胰腺癌细胞的增殖抑制作用。     

血小板活化因子对B淋巴细胞及巨噬细胞免疫功能的影响

血小板活化因子（ＰＡＦ）对免疫应答的影响日益被重视。本文观察了血小板活化因子（ＰＡＦ）对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠Ｂ淋巴细胞抗体生成能力的影响及对小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的影响。实验证明，ＰＡＦ（浓度为７．３×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ～３．６５×１０－１２ｍｏｌ／Ｌ）能明显促使Ｂ细胞抗体生成能力上升和Ｍφ产生ＴＮＦ能力上升。实验组小鼠的溶血空斑数均明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），且实验组Ｍφ产生的ＴＮＦ对细胞杀伤率明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。     

长期HBV携带者IFN—γ的诱生和TNF—α的检测

应用免疫放射量度分析和ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法分别检测了６８例长期ＨＢＶ携带者ＰＢＭＣ诱生ＴＮＦ－γ和ＴＮＦ－α的含量。结果表明：①ＨＢＶ无症状携带者和肝炎携带者诱生ＩＦＮα活性显著低于正常对照（Ｐ〈０．０５或０．０１）；②肝炎携带者血清和培养上清中ＴＮＦ－α的含量均高于正常对照和无症状携带者，而无症状携带者诱生ＴＮＦ－α的含量又比对照组低；③各组的ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α之间相关性检验无显著意义。提     

分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（Ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（Ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（Ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡ