大鼠肝再生增强因子的基因克隆

目的克隆大鼠肝再生增强因子 (ALR)编码序列 ,并在原核细胞表达。方法按文献报道大鼠肝再生增强因子核苷酸序列合成引物 ,从2周龄大鼠肝组织提取RNA ,利用RT_PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区 ;将PCR扩增片断亚克隆到pBV221质粒 ,构建原核表达重组载体 ,导入到大肠杆菌后热诱导表达目的蛋白。结果从大鼠肝脏的RNA中扩增到长约400bp的ALRcDNA编码区基因 ,序列分析表明与文献报道一致 ;重组克隆经热诱导表达出分子量约15kD大小的蛋白质 ,与预期值一致。结论从2周龄大鼠肝组织中成功克隆肝再生增强因子基因 ,并获得了原核细胞高效表达     

鲨鱼肝再生因子对肝细胞再生的作用

通过给切除部分肝脏大鼠注射鲨鱼肝再生因子，观察其对肝脏细胞再生的促进作用，为临床用药提供依据。按Higgins和Anderson方法对大鼠行肝切除术，分别尾静脉注射鲨鱼肝再生因子（SHRF）12，6，3mg／kg，促肝细胞生长素（HGF6mg／kg），生理盐水（0．3ml／100g）术后10d取肝脏称重及记录。并对各时相点大鼠取血和肝细胞培养。比较各组大鼠血清甲胎蛋白（AFP）和肝细胞中一氧化氮（NO）含量的变化。结果给药组与模型组肝脏重量比较有极显著差异，给药组和阳性药组血清中AFP及肝细胞中N0含量与模型组相比均呈升高趋势，因此SHRF在短期内对大鼠肝脏部分切除术后再生有明显的促进作用。     

鲨鱼肝再生因子对大鼠酒精性肝损伤的保护作用

为探索鲨鱼肝再生因子(sHRF)对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用,采用白酒灌胃法建立大鼠酒精性肝病模型,给药5周后取血清及肝组织测定各项肝指标,结果表明sHRF能显著降低酒精所致的大鼠血清ALT、AST的异常升高,也能抑制酒精损伤后大鼠肝组织中甘油三酯含量的升高,此外,sHRF能在一定程度上增加白蛋白含量·但对总蛋白含量无明显影响,sHRF给药治疗组还可明显提高SOD活性,降低MDA含量,提高大鼠清除体内氧自由基能力,减少过氧化脂质对组织器官的损伤,组织切片发现各给药组肝脏总体病变程度较模型组轻,说明sHRF对大鼠慢性酒精性肝损伤有一定的防护作用.     

甲醇流加策略对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子的影响

考察了5L发酵罐中三种甲醇流加策略(恒溶氧、恒比生长速率和恒甲醇浓度)对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子(hALR)的影响。控制恒定甲醇浓度为10g/L诱导时,甲醇比消耗速率和hALR表达速率显著高于其它两种流加策略,最终hALR表达水平为360mg/L。     

鲨鱼肝再生因子对大鼠慢性肝损伤的治疗作用

目的:探讨鲨鱼肝再生因子(sHRF)对大鼠慢性肝损伤的治疗作用。方法:CCl4致大鼠慢性肝损伤模型,给药后取血清及肝组织测定各项肝指标。结果:当用药8周时,对CCl4引起的肝损伤大鼠血清中AST、ALT活性的升高和羟脯氨酸含量的升高均有抑制作用,且0.8、1.6mg/kg剂量组的作用差异均有统计学意义。此外,sHRF能在一定程度上增加白蛋白含量,并使白蛋白/球蛋白比值有一定程度的升高。肝组织病理切片亦显示sHRF能减轻CCl4所致大鼠肝细胞脂肪变性及纤维组织增生。结论:sHRF对CCl4所致大鼠慢性肝损伤有一定的治疗作用。     

肝再生的研究进展

肝脏再生是指肝因手术、创伤、中毒、感染坏死以及肝移植术后等致部分肝脏丧失后,肝细胞重新修复的过程。相对于其巨大的代谢负荷而言,肝脏在细胞增殖是一静止器官,因在任何时间仅0·0012%~0·01%肝细胞在进行分裂,但在重大创伤或中毒情况下肝脏具有很大的再生能力,通过DNA合成     

大肠杆菌分泌表达重组人肝再生增强因子的纯化、鉴定与活性研究

目的建立一种大肠杆菌分泌表达型重组人肝再生增强因子(rhALR)的纯化工艺,并对产品进行鉴定和活性研究。方法通过沉淀、色谱等方法的条件优化,建立纯化工艺,通过电泳、HPLC、N-末端氨基酸测序、免疫杂交、同位素掺入、全波长扫描等方法对纯化产品进行鉴定和活性测定。结果建立了rhALR的纯化工艺路线,40%(NH4)2SO4沉淀,Butyl-S FF疏水色谱,CM-S FF离子交换色谱,Superdex-75分子筛色谱纯化,重组蛋白质的纯度大于95%。该蛋白质稳定存在的形式为二聚体,其单体的相对分子质量为15 000。该蛋白质结合辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),对损伤后的肝细胞具有明显的促进作用,明显优于以包涵体形式表达的rhALR。结论从大肠杆菌分泌表达体系能分离纯化得到高纯度、具有生物学功能和活性的rhALR,是潜在的临床治疗肝病药物。     

肝脏再生增强因子cDNA的克隆及稳定细胞株的建立

目的通过对人源肝脏再生增强因子（ALR）cDNA进行克隆及活性的初步鉴定，为基因工程制备重组人肝脏ALR（hALR）提供资料。方法提取人胎肝总RNA，通过RT—PCR获得hALRcDNA，构建真核表达质粒pcDNA3．1-ALR，转化大肠杆菌扩增质粒。将质粒pcDNA3．1与pcDNA3．1-ALR分别转染HepG2细胞，G418筛选建立稳定细胞株，MTT法检测hALR的生物学活性。结果测序证实克隆得到的hALR序列完全正确。MTT比色结果，转染hALR的细胞增殖高于转染空质粒和未转染细胞（P〈0．05）。结论hALR具有促肝细胞增殖的作用。     

注射用鲨鱼肝再生因子对小鼠免疫性肝损伤的影响

观察鲨鱼肝再生因子 (sHRF)对小鼠免疫性肝损伤的影响。小鼠注射BCG后再注射低剂量LPS ,造成免疫性肝损伤模型。测定血清中ALT、AST、NO的含量及对肝组织进行病理组织学检查。sHRF能显著降低BCG和LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST和NO含量的升高 (P <0 .0 5 ) ;并减轻对肝脏细胞的病理性损伤。实验表明sHRF对小鼠免疫性肝损伤有保护作用。     

注射用鲨鱼肝再生因子对小鼠急性化学性肝损伤的影响

观察鲨鱼肝再生因子(sHRF)对小鼠急性化学性肝损伤的影响。采用化学药物引起小鼠急性肝损伤，测定血清中ALT、AST的含量以及对肝组织进行病理组织学检查。sHRF能显著降低四氯化碳、硫代乙酰胺及D-半乳糖胺所致的急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量的升高；减轻对肝脏细胞的病理性损伤。实验表明sHRF对小鼠急性化学性肝损伤有保护作用。     

吉马酮的药理作用及其作用机制的研究进展

吉马酮是莪术中重要活性成分,现多从莪术油中提取分离.吉马酮具有广泛的药理活性,近年来成为研究的热点,国内外学者对其作用机制进行了深层次研究.综述吉马酮的抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、神经保护作用、调节糖脂代谢、抗菌、抗纤维化作用及其机制的研究进展,以期为其更深入的开发研究和更好的应用于临床提供借鉴意义.     

地特胰岛素的作用机制与安全性研究进展

胰岛素是有效降糖的关键手段，其中基础胰岛素的应用是持续稳定控制血糖的重要方面。新型基础胰岛素类似物地特胰岛素以其独特的作用特点受到广泛关注，并具有一定的临床应用前景。本文将对其作用机制及安全性等方面的研究进展进行总结。     

纳米银抗菌活性及生物安全性研究进展

本文通过分析纳米银的呼吸系统毒性、皮肤毒性、发育和遗传毒性等在体生物毒性以及体外细胞毒性,对纳米银的抗菌活性和生物安全性方面的研究进展进行了综述,以期提供全面的毒理学评价资料,为建立评价纳米银生物安全性的标准方法,并以此为基础制备高效低毒的纳米银制剂提供参考。     

DNA去甲基化药物作用机制的研究进展

癌症被认为是一种表观遗传疾病。表观遗传异常改变导致参与细胞正常生长的关键基因失活,促进癌症发生和发展,这使得对癌症治疗上可采取一些主动性表观遗传调节。DNA去甲基化药物通过化学逆转重新激活高甲基化的肿瘤抑制基因,已成为一个令人兴奋的癌症治疗方法。其作用机制主要有:抑制DNA甲基转移酶,干扰甲基转移反应途径和影响三羧酸循环途径。介绍了近年来DNA去甲基化药物作用机制的研究进展。     

抗抑郁药物的作用机理与研究进展

本文通过查阅国内外有关文献,对抗抑郁症药物的作用机理与研究进展进行阐述,为抗抑郁药物的进一步研究提供参考。     

铝佐剂的性质及作用机制研究进展

佐剂是多种人用和兽用疫苗的重要成分,疫苗中加入佐剂可以增强机体对抗原的免疫应答。铝佐剂是开发最早、应用最广的疫苗佐剂。铝佐剂对抗原的吸附受其自身理化性质、溶液的离子强度和抗原的浓度等多种因素影响,其通过抗原储库效应、刺激树突状细胞成熟和T细胞分化、促进危险信号分子释放等来增强免疫应答。此文根据近年国内外研究,对铝佐剂的理化性质、吸附机制和作用机制进行综述。     

甲基丁香酚的生物学活性及其作用机制的研究进展

甲基丁香酚是一种广泛存在的苯丙素类天然化合物,具有镇痛、麻醉、抗过敏、抗炎、抗氧化和抗肿瘤等多种生物学活性,可能在促进细胞再生、抗衰老和炎症、肿瘤相关性疾病的防治中具有重要研究价值.充分了解甲基丁香酚的结构和作用特点,避免不必要的毒副作用发生,对其开发利用具有重要意义.综述了甲基丁香酚的生物学活性及其作用机制,以期为甲...     

透明质酸的作用机制及临床应用研究进展

透明质酸广泛存在于人体中,是细胞外基质的重要成分,具有独特的流体力学性质、良好的黏弹性和应变性.目前透明质酸被广泛用于生物材料、药物靶向制剂、美容以及腹部手术后预防黏连等.随着透明质酸应用范围的扩展及新型医用材料的不断涌现,近年来对透明质酸的研究日益增加.本文对透明质酸的临床应用及其作用机制进行综述,以期为透明质酸产品...     

小檗碱抗动脉粥样硬化作用机制研究进展

小檗碱是黄连的主要成分,属于异喹啉类生物碱,具有调血脂、抗血栓形成、降血糖、抗氧化、抗炎、抑制血管平滑肌细胞增殖、保护血管内皮细胞和促血管内皮舒张因子释放等多种作用,且能从多个环节抑制动脉粥样硬化的形成与发展。综述研究近年来有关小檗碱对动脉粥样硬化作用机制的相关文献,发现其作用机制主要包括调控炎症因子相关基因的表达、抗氧化应激、减少脂质合成、改善血管内膜细胞等几方面,从而为小檗碱临床应用及研发新的天然药物提供理论基础。     

胃癌的分子生物学机制研究进展

<正>1998年Guilford等揭示了CDH1基因突变在遗传性弥漫型胃癌中的作用,这一发现成为肿瘤基因学研究中最成功的事件之一[1]。Marshall和Warren因发现螺旋杆菌(Helico-bacter pylori,Hp)在慢性胃炎、消化性溃疡中主导性致病作用和它的潜在致癌作用而获得了2005年诺贝尔医学奖[2]。过