激光共聚焦显微镜诊断棘阿米巴角膜炎

目的探讨激光共聚焦显微镜(LSCM)在棘阿米巴角膜炎(AK)快速诊断及随访中的价值。方法回顾分析4例(4眼)AK患者的临床表现、角膜组织刮片镜检及培养、LSCM检查结果。结果 4例患者中,2例裂隙灯检查见角膜混浊、浸润,基质雾状水肿,后弹力层皱褶,角膜溃疡形成;2例表现为典型角膜基质环形浸润。角膜真菌刮片镜检及培养均无阳性病例。LSCM显示,棘阿米巴包囊位于角膜上皮下或浅层基质150μm以内;1例患者角膜内查见多个包囊,余均见1个包囊;包囊形态为圆形至椭圆形高回声结构,双层囊壁,大小为25～150μm,内核形态类圆形。经治疗,2例患者包囊消失、基质炎症减退;2例包囊变小,形态发生改变,双层囊壁结构不清;仅在1例中查见滋养体。结论 AK检查手段较多,传统角膜刮片镜检及培养等方法易受角膜取材等因素影响,阳性率较低。LSCM可用于感染角膜快速无创的活体检查,具有高分辨率、准确深度定位、动态观察、纵向断层扫描等优势,是AK病原学快速诊断及随访的重要手段。     

激光共聚焦显微镜观察新生鼠海马齿状回神经干细胞的增殖

目的 观察新生鼠海马齿状回神经干细胞的形态及其分布.方法 新生7 d SD大鼠每天2次腹腔注射Brdu,至出生20 d及32 d分别取脑片标本,用Tritc(罗丹明)标记的麦芽凝集素及FITC标记的小鼠抗大鼠Brdu单克隆抗体行免疫荧光双染色,在激光共聚焦显微镜下观察大鼠海马齿状回神经干细胞的形态、分布特点及数量变化.结果 激光共聚焦显微镜观察显示,出生20 d大鼠海马齿状回Brdu阳性细胞主要聚集在颗粒下层,呈条带状分布,在海马的其他区域也有呈散在的阳性细胞存在,而出生32 d大鼠海马齿状回的神经干细胞呈散在分布,数目明显少于20 d大鼠.结论 新生SD大鼠海马齿状回存在一定数量的神经干细胞,其数量随着大鼠年龄的增大而减少.     

激光共聚焦显微镜在细胞内ROS研究中的激光干扰问题

目的 对激光共聚焦显微镜在细胞内ROS研究中的激光干扰问题进行探讨.方法 ROS探针标记ECV-304及BAW264.7细胞后,激光共聚焦显微镜488nm波长检测器分别进行连续和间隔观测1200s,比较两种观测方式下细胞荧光强度的变化;外源性加入H2O2,证实间隔观测时系统的灵敏性.结果 在连续观测方式下,细胞荧光强度短时间内显著增强,改为间隔观测后细胞荧光强度变化缓慢,但维持在低水平且在外源性加入H2O2后细胞荧光强度迅速增强.结论 激光共聚焦显微镜激发激光可引起细胞大量产生ROS,对检测系统造成干扰,采用间隔观测的方法可显著改善系统自身的这种缺陷,并能保持系统的检测灵敏性.     

激光共聚焦显微镜在骨计量学中的应用

激光共聚焦显微镜(LSCM)是九十年代初出现的一种可用荧光标记进行微形态观察的高分辨显微镜,与传统方法比较,具有精确、清晰、动态和三维成像等突出优点。骨计量学是研究代谢性骨病的重要方法。本研究将激光共聚焦显微技术引入骨计量学中,达到了精确定位和定量分析骨微结构的目的,具有无须染色,对厚片可进行荧光染色观察的特点,其清晰度高,制片易,可与组织化学、免疫组织化学等方法结合,从多个角度、多个层次同时观察骨微结构与各种骨细胞的形态与功能。为代谢性骨病的研究和诊断提供了新的方法和途径。     

低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞骨架微丝影响的激光共聚焦显微观察

目的：观察低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）骨架微丝的影响。方法：采用胶原酶Ⅰ消化法原代培养PASMCs,免疫荧光法进行平滑肌α肌动蛋白（α-SM actin）鉴定。然后分别低氧（5%O2,5%CO2）培养2、6、12、24 h后,用鬼笔环肽标记细胞骨架F-actin,用激光共聚焦显微镜观察F-actin的变化。结果：免疫荧光鉴定结果表明培养细胞为PASMCs,低氧状态和常氧条件下培养的PASMCs形态上有明显区别,低氧组细胞骨架蛋白F-actin发生重排,微丝排列混乱,存在时间依赖性。结论：低氧能造成PASMCs形态的改变和细胞骨架微丝的重排。     

共聚焦激光显微内镜对Barrett食管诊断价值的研究

目的 观察Barrett食管在共聚焦激光显微内镜下的形态学特征,评价共聚焦激光显微内镜对Barrett食管的诊断价值.方法 选取普通胃镜检查疑诊Barrett食管的患者,进行共聚焦激光显微内镜检查.对可疑或病变部位进行共聚焦内镜扫描,检查后即刻进行预测组织学诊断,即共聚焦激光显微内镜诊断.最后对扫描部位黏膜活检,将共聚焦激光显微内镜诊断与病理组织学诊断进行对比分析.结果 对入选的23例患者的73个部位进行共聚焦激光显微内镜扫描,结果显示共聚焦激光显微内镜诊断Barrett食管的灵敏度为95.6%,特异度为96.4%,阳性预测值为97.7%,阴性预测值为93.1%,诊断符合率为95.9%.结论 共聚焦激光显微内镜可以在内镜检查同时快速准确的诊断Barrett食管.     

激光共聚焦显微镜观察神经细胞孤啡肽受体的分布

目的：介绍激光共聚焦显微镜技术及其在观察受体细胞分布实验中的应用。方法：采用原位杂交、免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜技术。结果：孤啡肽受体ORL1在成年大鼠的皮层，海马及下丘脑区域的神经元，星型胶质细胞，小胶质细胞上均有表达。结论：激光共聚焦显微镜技术及免疫荧光双标技术在检测受体的细胞分布方面是一种实用的、简单的方法。     

共聚焦激光显微内镜在消化系统疾病诊断中的应用

共聚焦激光显微内镜是新近出现的一种内镜,其通过获得消化道黏膜层高度放大的图像以达到"光学活检"目的,不需组织活检和组织病理检查即可诊断某些消化系统疾病。本文就共聚交激光显微内镜在消化道疾病诊断中的应用予以简要回顾。     

激光共聚焦扫描显微镜技术在脑卒中针刺机制中的应用进展

激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)作为一种非侵入性图像分析仪器,有标本制备简单、分辨率高、实时动态成像等特点,可清晰地对活体细胞进行无损伤性动态观察、空间定位、定量检测等。针刺疗法治疗脑卒中具有良好的临床疗效,其机制研究也越来越受到重视。CLSM作为新一代的研究工具,也广泛应用于针刺机制的基础研究中,该文就CLSM技术在脑卒中针刺机制研究中的应用情况予以综述。     

共聚焦激光显微内镜对上消化道疾病的诊断价值

共聚焦激光显微内镜是内镜学技术上的一项新突破,它将共聚焦显微镜与普通内镜整合,使其能在人体进行组织学检查,并在行内镜检查时快速诊断疾病种类,尤其对于消化道肿瘤的良恶性鉴别、早期胃癌的诊断等有着重要价值。许多临床研究均证实其对上消化道疾病具有有效的诊断价值。现对共聚焦激光显微内镜在上消化道的临床应用予以综述。     

激光共聚焦显微镜技术在心脑血管疾病实验研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜技术已经成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学等领域新一代的研究工具,近年来已在治疗心脑血管疾病的药物研究中得到了越来越广泛的使用。本文主要综述了激光共聚焦显微镜在心脑血管疾病实验研究中的应用现状。     

共聚焦激光扫描显微技术在寄生虫学研究中的应用

共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)是新颖的分子细胞生物学分析仪器,较传统荧光显微镜有着不可比拟的优势。它的高分辨率、无损伤连续光学切片、三维图像重建等功能已广泛应用于医学、细胞生物学的研究,在寄生虫学领域中的应用也正在逐步开展。若结合其他的生物学技术,其应用范围将进一步扩大。因此。了解它的基本性能、特点将有助于更深入的应用。     

激光共聚焦显微镜在睑缘炎患者蠕形螨感染诊断中的应用

目的:评价激光共聚焦显微镜在睑缘炎患者眼睑毛囊蠕形螨感染诊断中的作用及优势。方法:选取2017年4-12月在武汉大学人民医院眼科中心确诊为睑缘炎患者64例(128眼),每位患者先用激光共聚焦显微镜检查眼睑睑缘毛囊蠕形螨感染情况,再采用睫毛采样直接光镜检查眼睑睑缘毛囊蠕形螨感染情况,比较两者区别。结果:激光共聚焦显微镜检查中,睑缘炎患者眼睑蠕形螨感染阳性率为54. 69%,睫毛采样直接光镜检查睑缘炎患者眼睑蠕形螨感染阳性率为45. 30%,激光共聚焦显微镜检查对蠕形螨感染阳性检出率显著高于睫毛采样直接光镜检查(P<0. 05);激光共聚焦显微镜检查中,睑缘炎患者眼睑蠕形螨感染可疑阳性率为28. 10%,睫毛采样直接光镜检查睑缘炎患者眼睑蠕形螨感染可疑阳性率为34. 38%,睫毛采样直接光镜检查蠕形螨感染可疑阳性率高于激光共聚焦显微镜检查(P<0. 05)。结论:激光共聚焦显微镜可在活体状态下对多个毛囊进行快速检测并计数,在睑缘炎患者眼睑蠕形螨感染诊断中有效降低可疑阳性率及假阴性率,能够更好帮助睑缘炎患者确诊蠕形螨感染,为蠕形螨性睑缘炎患者的诊疗提供依据。     

激光共聚焦扫描显微镜与多光子激光扫描显微镜之比较

激光共聚焦显微镜是 80年代随着光学、视频、计算机等技术的飞速发展而诞生的新一代显微镜。自从 195 7年马文·闵斯基在他的美国专利上首次阐明扫描共聚焦显微镜技术的某些基本原理 ,激光显微镜技术得到逐步发展。 1970年牛津和阿姆斯特丹同时向科学界推荐了一种新型的扫描共聚焦显微镜[1 ] ,它是在荧光显微镜成像的基础上加装了激光扫描装置 ,利用计算机进行图像处理 ,使用紫外或激光激发荧光探针。能够得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像 ,由于它采用激光作光源 ,发射角小 ,方向性好 ,在发射光检测光路上放置了一个与入射光针孔共轭的…     

激光共聚焦显微镜在骨计量学中的应用

激光共聚焦显微镜 (LSCM)是九十年代初出现的一种可用荧光标记进行微形态观察的高分辨显微镜 ,与传统方法比较 ,具有精确、清晰、动态和三维成像等突出优点。骨计量学是研究代谢性骨病的重要方法。本研究将激光共聚焦显微技术引入骨计量学中 ,达到了精确定位和定量分析骨微结构的目的 ,具有无须染色 ,对厚片可进行荧光染色观察的特点 ,其清晰度高 ,制片易 ,可与组织化学、免疫组织化学等方法结合 ,从多个角度、多个层次同时观察骨微结构与各种骨细胞的形态与功能。为代谢性骨病的研究和诊断提供了新的方法和途径。     

共聚焦激光显微内镜对萎缩性胃炎诊断价值

目的慢性萎缩性胃炎伴有肠上皮化生是胃腺癌的癌前病变,临床上主要通过内镜检查与病理检查结合对其进行诊断和随访观察。传统方法依赖内镜医师经验发现病变,活检部位随机选取,所以存在局限性。本研究只在评价新型共聚焦激光显微内镜在萎缩性胃炎和胃粘膜肠上皮化生诊断中的应用价值。 方法46名经传统内镜检查疑诊为萎缩性胃炎患者经过共聚焦激光显微内镜检查胃粘膜萎缩和肠上皮化生隋况,并在共聚焦显微内镜检查同一部位活检病理检查该部位粘膜萎缩和肠上皮化生情况。 结果共聚焦激光显微内镜诊断萎缩性胃炎与病理诊断具有较高的一致性（Kappa=0．0．495,0．4〈k〈0．75）,敏感性为83．00％,特异性为67．50％。共聚焦激光显微内镜和病理检查诊断肠上皮化生一致性较高（Kappa=0．557,0．4〈k〈0．75）,敏感性85．98％,特异性70．59％。 结论共聚焦激光显微内镜在诊断萎缩性胃炎和肠上皮化生与病理检查相比具有较高的一致性,并且具有无创性实时显示活体胃肠道粘膜光学断层图像的优势,可以反复观察和随访对比。共聚焦激光纤维内镜在诊断消化道疾病方面有着巨大优势和潜力。     

激光共聚焦显微镜法分析载药微球的结构

目的　验证激光共聚焦显微镜 (CL SM)可否作为研究微球结构的工具 ,并用以获取微球内部结构的信息。方法　微球用复凝聚法制备 ,牛血清白蛋白 (BSA)为模型蛋白药物和聚合物 (明胶与阿拉伯胶 )为成球材料 ,在制备微球前均共价标记了荧光物。应用 CL SM将微球在不同荧光通道下呈像 ,并将微球切割成一系列平行切面分别成像 ,对微球进行三维重建和图像分析。结果　在 CL SM下微球中 BSA与聚合物均呈均匀分布 ,加入BSA不影响聚合物的分布。结论　 CL SM可观察载药微球的内部结构 ,而不需事先破坏样品即可获得被包裹药物的定位和成球材料所构成微球的结构资料。     

激光共聚焦显微镜观察三磷酸肌醇对大鼠逼尿肌细胞内钙的影响

目的 探讨IP3/Ca2 信号转导过程与逼尿肌细胞内游离Ca2 浓度[Ca2 ]i的关系.方法 建立逼尿肌过度活动大鼠模型,利用激光共聚焦显微镜观察原代培养的逼尿肌稳定及逼尿肌过度活动大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的变化以及10-5 mol/L IP3及其抑制剂肝素影响逼尿肌稳定大鼠逼尿肌培养细胞后细胞内钙荧光强度在有钙液及无钙液中的变化.结果 逼尿肌过度活动鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度较逼尿肌稳定鼠显著增强(P＜0.01),经10-5 mol/LIP3处理后,逼尿肌稳定大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度较处理前显著增强(P＜0.01),且有钙液中细胞内钙荧光强度显著高于无钙液中细胞(P＜0.01).肝素能显著抑制由IP3引起的逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的增强.结论 由IP3激活引起的逼尿肌细胞内游离钙浓度的升高可能是逼尿肌过度活动发生的重要原因之一.     

TUNEL技术原位检测肝癌细胞凋亡激光共聚焦显微镜观察

目的 用缺口末端标主技术（ＴＵＮＥＬ）对肝硬变,肝细胞肝癌及培养肝细胞癌细胞系的细胞凋亡进行形态学观察。方法 采用德国宝灵曼公司生产的原位末端标记试剂盒对福尔马林固定,石蜡包埋的肝组织和培养肝细胞进行ＴＵＮＥＬ染色,激光共聚焦显微镜观察会细胞凋亡的形态特征。结果：ＴＵＮＥＬ阳性信号为黄绿色或黄色强荧光,位于胞核,呈环行,小圆形或颗粒状,提示凋亡细胞有典型的新月体状染色质边集,核浓缩以及有大量微核体     

激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V/PI双染色法检测人肺癌细胞凋亡

目的激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V／PI双染色法检测人肺癌细胞凋亡的形态。方法对不同剂量含药血清处理的体外培养人肺癌PGLH7细胞株进行Annexin V／PI双染,激光共聚焦显徽镜观察细胞凋亡的形态特征。结果Annexin V／PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察,经含药血清作用的人肺癌细胞ee,凋亡早期细胞呈AnnexinV高染而PI低染,细胞膜呈绿色而细胞核不着色;凋亡中、晚期细胞则AnnexinV和PI均为高染,细胞膜呈绿色而细胞核呈红色;部分细胞的核呈碎片状或梅花状,为典型的细胞凋亡形态。结论FITC—AnnexinV／PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞是目前观察凋亡的理想方法,特别适用于凋亡细胞的早期检测。