高浓度姜黄素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响

目的研究高浓度姜黄素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(Ik1)的影响。方法采用急性酶解分离法获得大鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳技术记录Ito和Ik1,观察50μmol/L姜黄素对Ito和Ik1的影响。结果 50μm/L姜黄素对Ito和Ik1通道电流的抑制率分别是(84±11)%(P<0.05)和(59±8)%(P<0.01)。它使Ito和Ik1通道电流密度-电压曲线电流幅度减小,但不改变其整流特性。结论 50μmol/L姜黄素能明显抑制大鼠心室肌细胞Ito和Ik1电流,提示其可能存在心脏毒性作用。     

肾上腺素对布比卡因抑制大鼠心室肌细胞钠电流的影响

目的：研究肾上腺素对较低浓度布比卡因所抑制的大鼠心室肌细胞钠电流（INa）的影响。方法：采用急性酶解分离法获得Sprague-Dawley雄性大鼠心室肌细胞,随机分为2组（n=5）,以全细胞膜片钳技术记录INa,观察0.15 μg/mL肾上腺素对40 μmol/L布比卡因和50 μmol/L布比卡因所抑制的INa的影响。结果：40 μmol/L和50 μmol/L布比卡因对大鼠心室肌细胞INa抑制率分别为（50.2%±5.8%）和（62.7%±7.7%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。当加入0.15 μg/mL肾上腺素后,40 μmol/L布比卡因组抑制率变到（33.7%± 10.2%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;50 μmol/L布比卡因组抑制率变为（62.1%±7.3%）,差异无统计学意义（P＞0.05）,肾上腺素对I-V曲线无明显影响。结论：肾上腺素可以部分恢复较低浓度布比卡因所抑制的心室肌细胞INa,但其作用在较高浓度布比卡因中受到限制。     

厄贝沙坦电生理作用的实验研究

目的:研究厄贝沙坦(Irbesartan)对正常豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)、内向整流性钾电流(IK1)、快钠流(INa)以及跨膜动作电位的影响.方法:应用膜片钳全细胞记录方法记录各项离子流和跨膜动作电位.结果:①厄贝沙坦呈浓度依赖性阻断ICa-L,10,100和1000 nmol/L的厄贝沙坦分别使ICa-L密度 (pA/pF)从 (-9.8±1.1)减少到(-6.7±0.9),(-4.2±0.8)和(-2.1±0.4)(n=5,P<0.05或P<0.01).②厄贝沙坦可使ICa-L I-V曲线上移,但不改变其激活的电压依赖性和反转电位.③厄贝沙坦呈使用依赖性阻滞ICa-L.④厄贝沙坦对ICa-L激活曲线无明显影响,但可使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性失活,对照组V1/2和κ值分别为(-30±5)mV,(8.2±0.7),厄贝沙坦组为(-39±7) mV,(11.6±1.3)(n=5,P均<0.05).⑤厄贝沙坦100 nmol/L使ICa-L失活后再激活的恢复时间常数(τ)从对照组(62.5±2.3) ms延长至(126.4±2.6) ms(P<0.01).⑥厄贝沙坦对IK1和INa无明显影响.⑦厄贝沙坦(100 nmol/L)可使单个心室肌细胞动作电位时程(APD30,APD50,APD90)从(106±10),(125±16),(178±23)ms缩短至(82±16),(99±6),(122±18) ms(n=5,P<0.05),对静息电位、动作电位幅度无影响. 结论:厄贝沙坦作用于L-型钙通道的失活态从而阻断ICa-L.     

过氧化氢对大鼠心室肌细胞钠通道电流的影响

目的 研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响.方法 用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流,观察1 mmol/L H2O2引起单个大鼠心室肌细胞INa改变.结果 在1 mmol/L H2O2作用下,大鼠心室肌细胞INa峰值电流密度从(19.95±4.58)pA/pF减少至(15.19±4.15)pA/pF(n=8,P＜0.05),电流-电压曲线上移,翻转电位左移,但对激活电位、峰电位无明显影响;H2O2对INa稳态激活曲线无明显改变,V0 5从(-64.54±0.16)mV左移至(-66.28±0.32)mV(n=8,P＞0.05),对其稳态失活曲线无明显改变,V0 5从(-91.46±0.17)mV左移至(-94.52±0.25)mV(n=8,P＞0.05);H2O2对INa失活后再激活曲线有明显改变,对照组τ为(6.43±1.04)ms,H2O2组τ为(8.31±1.48)ms(n=6,P＜0.05).结论 过氧化氢可以减少大鼠心肌细胞INa,且使其复活明显减慢.     

白藜三醇对培养豚鼠心室肌细胞L-型钙电流密度的影响

目的:观察白藜三醇(RES)对培养的豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)密度的影响.方法:分离成年豚鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度RES孵育心室肌细胞不同时间的ICa-L密度.结果:①培养72 h时,RES 30 μmol/L和100μmol/L使ICa-L密度分别下降13%和27%,呈现浓度依赖性抑制趋势,且RES 100 μmol/L组与对照组比较有统计学差异(P<0.05);②RES 10 μmol/L,30 μmol/L和100μmol/L对ICa-L密度呈现时间依赖性抑制趋势.且RES 100 μmol/L在24 h和72 h之间有统计学差异(P<0.05);结论:白藜三醇对培养豚鼠心室肌细胞L-型钙电流呈现浓度和时间依赖性抑制趋势.     

莲心碱对大鼠心室肌细胞I_(Na)、I_(Ca-L)及稳态外向K~ 电流的影响

采用膜片钳技术,研究了莲心碱（Liensinine,Lien）对大鼠心室肌细胞动作电位及钠电流（INa）、L-型钙电流（ICa－L）及稳态外向K＋电流的影响,Lien30μmol／L可显著地降低动作电位幅度、静息膜电位,延长动作电位时程。Lien10,30μmol／L分别使INa及ICa－L从给药前的（7．9±2．2）nA和（699±175）pA降至（4．3±1．7）、（1．8±1．6）nA和（203±132）、（147±121）pA。Lien10μmol／L还抑制INa、稳态外向K＋电流和ICa－L的I－V曲线并使后者的峰值电流电位略右移。提示Lien有钠、L型钙通道阻滞作用并抑制稳态外向K＋电流,这些可解释Lien广泛的抗心律失常作用机制。     

间羟胺对大鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的观察α肾上腺素能受体激动剂间羟胺对大鼠心室肌动作电位及L-型钙电流的影响。方法采用全细胞膜片钳方法,记录离体大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙电流。结果 200μmol/L间羟胺可使心室肌细胞L-型钙电流增大（P〈0.05）,动作电位时程（APD）明显延长（P〈0.01）,动作电位复极50%和90%时间（APD50and APD90）明显延长（P〈0.01）。100μmol/L酚妥拉明可使增大的的L-型钙电流和APD、APD50、APD明显恢复。结论间羟胺可明显延长大鼠心室肌动作电位时程,而酚妥拉明可不同程度地拮抗此效应。     

血管紧张素Ⅱ及替米沙坦对大鼠心房肌细胞钾和钙电流的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和替米沙坦对SD大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)和L型钙电流(ICa-L)的作用。方法急性酶解法分离SD大鼠心房肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,观察AngⅡ、替米沙坦以及AngⅡ联合替米沙坦对大鼠心房肌细胞Ito和ICa-L的影响。结果 AngⅡ(0.1μmol/L)和替米沙坦(0.01μmol/L)以及两药联合均能抑制大鼠心房肌细胞Ito,AngⅡ组、替米沙坦组、联合组干预前后Ito的电流密度值比较差异有统计学意义[(22.48±2.75)vs(15.71±2.06)pA/pF,(24.16±2.36)vs(16.15±1.82)pA/pF,(24.41±2.27)vs(21.35±1.46)pA/pF,P<0.05]。AngⅡ(0.1μmol/L)能显著增强大鼠心房肌细胞ICa-L的峰值电流密度[(-4.51±0.38)vs(-5.16±0.29)pA/pF,P<0.01];替米沙坦(0.01μmol/L)对心房肌细胞ICa-L无明显作用[(-4.35±0.27)vs(-4.29±0.34)pA/pF,P>0.05],但联合组中替米沙坦可拮抗AngⅡ对ICa-L的增强效...     

二十二碳六烯酸对大鼠心肌细胞通道的影响

目的:探讨二十二碳六烯酸(DHA)对大鼠心室肌细胞动作电位(AP)及钠通道电流(INa)的影响。阐述DHA抗心律失常的机制。方法:采用酶消化法获得大鼠心室肌细胞,用膜片钳技术分别记录0、20、40、60、80、100和120μmol/L DHA对大鼠心室肌细胞AP复极25%、50%和90%时程(APD25、APD50和APD90),对AP最大上升速率(Vmax)、幅值(APA)、超射值(OS)及INa的影响。结果:①不同浓度DHA对APD25、APD50和APD90呈浓度依赖性延长(P<0.05,n=20),对Vmax、APA和OS的影响无显著性差异(P>0.05,n=20)。②不同浓度DHA对INa呈浓度依赖性阻滞、I-V曲线上移、稳态失活曲线左移、失活后恢复时间延长,对稳态激活曲线无影响。在指令电压-30 mV时,上述浓度DHA对INa阻滞分别为(1.51±1.32)%、(21.13±4.62)%、(51.61±5.73)%、(67.62±6.52)%、(73.49±7.59)%和(79.95±7.62)%(P<0.05,n=20),DHA对INa的半效作用浓度(EC50)为(47.91±1.57)mol/L。结论:DHA对APD的延长及对钠通道的抑制作用可能是其抗心律失常机制之一。     

右美托咪定对布比卡因抑制大鼠心室肌细胞钠电流的影响研究

目的探讨右美托咪定对布比卡因抑制的大鼠心室肌钠电流（INa）的影响。方法选择SD雄性大鼠,建立Langendorff模型灌流酶解获得心室肌细胞32个,采用随机数字表法分为4组：Bupi组、Dex组、Bupi+Dex组以及空白对照组,每组心室肌细胞8个,分别灌流含50滋mol/L布比卡因的细胞外液、含50ng/ml右美托咪定的细胞外液、含50滋mol/L布比卡因复合50ng/ml右美托米咪定的细胞外液及空白细胞外液,采用全细胞膜片钳技术测定灌流前后的INa峰值、INa原始电流图、INa峰值抑制值和灌流前后INa的I-V曲线。结果Bupi组、Dex组和Bupi+Dex组的INa灌流后峰值[(6.4±1.0）、(13.8±3.3)、（10.4±3.0）nA/pF]均低于空白对照组（19.5±2.7nA/pF）,Dex组、Bupi+Dex组的INa灌流后峰值均高于Bupi组,Bupi+Dex组的INa灌流后峰值低于Dex组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。Bupi组、Dex组和Bupi+Dex组的INa峰值抑制值均高于空白对照组,Dex组和Bupi+Dex组的INa峰值抑制值低于Bupi组,Bupi+Dex组的INa峰值抑制值高于Dex组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论右美托咪定可以减轻布比卡因对大鼠心室肌细胞INa的抑制作用。布比卡因和右美托咪定对INa的激活和反转电位无影响。     

兔心肌梗死后右心室肌细胞离子通道电流的变化

目的探讨心肌梗死后右心室肌细胞离子通道电流的变化.方法该研究采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死动物模型,应用膜片钳全细胞记录方法,记录心肌梗死后2个月右心室心肌细胞钠通道电流(INa)、L-钙通道电流(ICa-L)、瞬间外向钾电流(Ico)的变化.结果心肌梗死后2个月,心肌梗死组INa电流密度峰值[(20.42±1 73)pA/pF,n=15]较对照组[(35 40±3.43)pA/pF,n=16]明显下降(P＜0.05);心肌梗死组ICa-L电流密度峰值[(5.71±0.93)pA/pF,n=12]与对照组[(6.28±1.03)pA/pF,n=10]略下降,但无明显差异(P＞0.05);心肌梗死组Ito电流密度( 60 nV时)[(8.61±0.95)pA/pF,n=16]较对照组[(14.38±1.24)pA/pF,n=17]明显下降(P＜0.05).结论心肌梗死可引起右心室肌细胞INa和Ito的下降,造成心肌传导速度下降和动作电位时程相对延长、复极异常,可能是导致心肌梗死后出现室性心律失常的离子机制.     

Verapamil modulating arsenic trioxide-induced QT interval rolongation in guinea pig

Objective To investigate therapeutic action of verapamil on QT prolongation induced by arsenic trioxide (As2O3) in guinea pig and to further explore its possible mechanism. Methods Different doses of As2 O3 was infused intravenously to observe the changes of QT interval on the electrocardiogram (ECG) at different times in guinea pig. Patchclamp technique and laser scanning confocal microscopy were utilized to study the action of As2 O3 on action potential duration (APD),L-type calcium current (ICa-L ), rapid delayed rectifier potassium current (IKr) and intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) of guinea pig myocytes. At the same time, verapamil was applied preliminarily to evaluate effects of verapamil on changes of the above index induced by As2O3. Results Intravenous administration of As2 O3 at the dose of 1.6mg/kg and 0.8mg/kg prolonged QT interval on ECG obviously in guinea pig hearts dose dependently and time dependently. QTc (corrected QT interval) was progressively prolonged in the 2-hour period of intravenous infusion of 1.6mg/kg As2O3 from (328.5 ± 30.9)ms of control to (388.4 ± 31.3)ms at 2h following As2O3 ( P ＜ 0.01) .When verapamil was pretreated for 5min, then 1.6mg/kg As2 O3 was added, the results showed that QTe was shorter in verapamil-treatment group (357.3±21.4)ms than that in As2O3 group (388.4±31.3)ms (P＜0.05) at 2h. Confocal experiments showed that in normal Tyrode solution, As2 O3 (1μmol/L and 10μmol/L) had no obvious effects on resting [Ca2+]i (P＞0.05) in guinea pig cardiomyocytes, however, 10μmol/L As2 O3 could markedly enhance [Ca2+]i increase induced by KCl 60mmol/L and the peak value increased from 903.4±369.4 to 1674.6±563.2 ( P＜0.05). The action of elevating [Ca2+]icould be blocked by 10μmol/L verapamil incompletely. The patch-clamp studies indicated that As2 O3 at concentration of 10μmol/L prolonged APD50 from (263.6 -±75.2)ms to (523.9±47.8)ms (P＜0.01) and APD90 from (277.5 ± 77.5)ms to (536.3 ±49.6)ms (P ＜0.01) ,and increased ICa-L from (- 6.0±1.5)pA/pF to (-8.7±2.0)pA/pF (P＜0.01) at 0mV and also reduced IKr from (6.7±1.8)pA/pF to (4.5±1.8)pA/pF (P＜0.05). However, 10μmol/L verapamil could modulate prolonging APD50 from (523.9 ± 47.8) ms to (340.4±83.8) ms ( P＜0.01) and APD90 from (536.3 ±49.6)ms to (348.9 ± 85.5)ms (P＜0.01) and correct increasing Ica-L induced by 10μmol/L As2O3 from (-8.7±2.0)pA/pF to ( - 6.6±1.4)pA/pF (P＜0.05) at 0mV. Conclusion As2O3 could induce prolongation of the QT interval on the ECG in guinea pig hearts and the ionic mechanism is associated with increasing Ica-L and inhibiting IKr/HERG. Verapamil may be useful in normalizing QT prolongation during As2 O3 therapy by decreasing Ica-L and [Ca2+]iof ventricular myocytes in guinea pig.     

胡椒碱对H2O2所致兔心房肌细胞瞬时外向钾电流异常的保护作用

目的研究胡椒碱对H2O2引起的兔单个心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)异常的保护作用。方法采用全细胞膜片钳技术分析50μmol/L的H2O2对兔单个心房肌细胞Ito的影响,并研究预先应用7μmol/L的胡椒碱对其的保护作用。结果 7μmol/L胡椒碱对正常兔心房肌细胞Ito及其通道动力学无显著影响。在50μmol/L H2O2作用下,兔心房肌细胞Ito峰值由(39.3±5.4)pA/pF降低至(32.8±2.0)pA/pF(P<0.05),电流-电压曲线下移,通道稳态激活曲线右移,通道稳态失活曲线及恢复时间不变,关闭态失活加速。预先给予7μmol/L胡椒碱,明显减轻H2O2对Ito的抑制作用(P<0.01),并可减轻H2O2对瞬时外向钾通道动力学的异常影响。结论胡椒碱可减轻氧化应激对心房肌细胞Ito的影响。     

枳实提取液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

OBJECTIVE: To determine the effect of citrus aurantium extract (CAE) on L-type calcium currents (ICa-L) in ventricular myocytes of guinea pigs. METHODS: Single myocytes were dissociated by enzymatic dissociation method. The whole-cell patch-clamp recording technique was used to record the change of calcium current after the administration of CAE. RESULTS: 1. CAE 4 x 10(-3), 2 x 10(-2), 4 x 10(-2), and 1 x 10(-1) g/ml increased the ICa-L by 15.89%, 29.01%, 52.03% and 59.76% (P < 0.05), respectively. 2. CAE 2 x 10(-1) and 4 x 10(-1) g/ml decreased the ICa-L by 16.61% and 30.87% (P < 0.05), respectively. CAE changed the ICa-L significantly, but did not change the shape of I-V curves. CONCLUSIONS: CAE 4 x 10(-3)-1 x 10(-1) g/ml can increase the L-type calcium current in guinea pig ventricular myocytes significantly in a concentration-dependent manner, and promote the opening of calcium channel. CAE 2 x 10(-1)-4 x 10(-1) g/ml may inhibit the L-type calcium channels of ventricular myocytes, and depress the opening of calcium channel.     

新型重组海葵毒素hk2a对大鼠心室肌细胞离子通道的影响

目的观察新型基因重组海葵毒素rhk2a对大鼠心室肌细胞离子通道的影响。方法采用全细胞膜片钳技术分别记录rhk2a对大鼠心室肌细胞钠电流、L型钙电流和钠-钙交换电流的影响。结果与对照组相比,新型重组海葵毒素rhk2a能够明显减慢大鼠心室肌细胞钠通道的时间依赖性失活(τh)(14.15±4.6 ms vs2.03±0.30 ms, P<0.05),而rhk2a对大鼠心室肌细胞钙通道电流(-8.86±0.35 PA/PF vs-8.99±0.64 PA/PF,P>0.05)和钠-钙交换电流(-0.65±0.2 PA/PF vs-0.69±0.15 PA/PF, P>0.05)无明显直接作用。结论rhk2a对大鼠心室肌细胞钠通道的时间依赖性失活的减慢是rhk2a对心脏具有正性肌力效应的重要机制。     

利多卡因对家兔左右心室外膜心肌细胞电不均一性的影响

目的:探讨利多卡因对家兔左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和钠电流(INa)的影响,阐明利多卡因引起左、右心室心外膜心肌细胞电不均一性机制。方法:酶解法分离家兔单个左、右心室心外膜心肌细胞,全细胞膜片钳技术记录左、右心室心外膜心肌细胞动作电位和INa在应用利多卡因前后变化。结果:在电流钳制下,对照组中的左、右心室心外膜心肌细胞上记录动作电位都具有典型的0至4期的形态,2相平台期有心外膜心肌细胞特有的穹窿样凸起;但在利多卡因组,左、右心室心外膜心肌细胞动作均明显地失去2相平台期穹窿样凸起和高度,右室心外膜心肌细胞动作电位失去2相平台期立即复极,形似三角形,左、右心室心外膜心肌细胞动作电位的幅度(APA)和复极化50%和90%(APD50和APD90)均明显减少(P<0.05),且右室心外膜心肌细胞的APA和APD50以及APD90受利多卡因影响后减小最为严重(P<0.05或0.01)。通过电压钳制方式,利多卡因使左、右心室心外膜心肌细胞的INa在各个指令电位下明显减小,而且右室心外膜心肌细胞INa减小的幅度要显著强于左室心外膜心肌细胞INa的减小幅度,当钳制电压为-20mV时,左、右心室心外膜心肌细胞的INa分别由(62.1±4.5)和(54.2±2.9)减小为(40.8±3.2)和(26.5±2.1)(P<0.05或0.01)。利多卡因还使左、右心室心外膜心肌细胞INa的I-V曲线明显上抬,尤其是使右室心外膜心肌细胞INa的I-V曲线处在其他曲线最上面,同时引起左、右心室心外膜心肌细胞的INa电流密度的最大峰值由-20mV略向右偏为-10mV。结论:利多卡因可以引起左、右心室心外膜心肌细胞电不均一性,其可能原因是利多卡因对右室心外膜心肌细胞动作电位和INa的影响程度明显强于左室相同情况。     

细辛配伍附子含药血清对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

【目的】观察细辛和细辛配伍附子含药血清对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨其抗心律失常的作用机制。【方法】连续给药7 d后制备大鼠含药血清,采用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞L型钙通道电流。【结果】细辛和细辛配伍附子含药血清均能增加大鼠心室肌L型钙通道电流,在0 m V钳制电压下,细辛含药血清使电流增加约(28.36±0.37)%,细辛配伍附子含药血清使电流增加(75.07±0.28)%。细辛含药血清使激活曲线、失活曲线左移,对恢复曲线无明显作用;细辛配伍附子含药血清使激活曲线、失活曲线左移,使失活后恢复时间延长。【结论】细辛配伍附子较单味细辛含药血清对心肌细胞L型钙通道的激活作用更强,表明药物配伍可增加疗效。