Npc1基因突变引起脂质代谢异常从而诱导肾脏细胞凋亡并促进纤维化

目的:研究Npc1基因突变小鼠肾脏细胞及组织功能异常情况,为C1型尼曼-匹克病(NPC1)患者的治疗提供借鉴。方法:取出生后60 d的Npc1~(-/-)与Npc1~(+/+)小鼠,HE染色检测肾脏组织形态变化;油红O染色检测肾脏组织中脂质代谢变化;TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡情况;Western blot检测肾脏组织中凋亡相关蛋白的表达变化;免疫荧光检测肾脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(vimentin)的表达变化。结果:形态学观察表明,与Npc1~(+/+)小鼠相比,Npc1~(-/-)组小鼠肾组织出现明显空泡,且无脂质沉积;随后,TUNEL染色结果显示Npc1~(-/-)小鼠肾脏中凋亡细胞数量显著增多(P0.01),并且凋亡相关蛋白Bax和Bad表达水平显著增高(P0.01),而抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著下降(P0.05);免疫荧光检测显示Npc1~(-/-)小鼠肾脏组织中α-SMA及vimentin染色阳性区域强度及面积均显著提高(P0.01)。结论:Npc1基因突变可引起小鼠肾脏结构变化及细胞脂质代谢异常,从而诱导肾脏细胞凋亡并促进肾脏组织纤维化。     

Tet1 对海分枝杆菌感染过程中宿主炎症反应及肥大细胞活化的影响

目的：探讨 Tet1 分子在海分枝杆菌(Mm)感染小鼠过程中对宿主炎症反应及肥大细胞活化的影响。方法：SPF 级 Tet1 野生型(Tet1^+/+)和 Tet1 基因敲除小鼠(Tet1^-/-)尾静脉接种相同数量的 Mm，建立小鼠尾静脉感染模型。观察记录小鼠尾部大体病变，取鼠尾组织匀浆铺板培养比较菌载量；HE染色观察组织病理学变化，抗酸染色检测细菌分布；甲苯胺蓝染色观察小鼠尾组织中肥大细胞的分布及形态差异；免疫组化检测肥大细胞活化标志物类胰蛋白酶和 5羟色胺(5-HT)的表达及分布差异。结果：尾静脉接种 Mm后，Tet1^+/+小鼠尾组织出现渐进性脓肿和明显溃烂，而 Tet1^-/-组小鼠尾巴仅发生散在性小面积肿胀；菌落计数发现Tet1^+/+小鼠细菌负荷逐渐增加，而Tet1^-/-小鼠菌载量显著降低(P<0.01)；组织病理学观察发现，Tet1^+/+小鼠尾组织中大量炎症细胞浸润，表皮及真皮层胶原纤维断裂，且形成肉芽肿样病变，而 Tet1...     

NF-E2相关因子2对糖尿病模型小鼠视网膜内细胞及血管的保护作用

目的 探讨NF-E2相关因子2（Nrf2）对糖尿病视网膜细胞及血管的保护作用。方法 8周龄雄性Nrf2^+/+（野生型）和Nrf2^-/- C57BL/6小鼠60只随机分为模型组和对照组,共4组,每组各15只。模型组小鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ,45mg/kg）,连续注射5 d;对照组小鼠注射同体积的枸橼酸缓冲液。模型组和对照组小鼠初次注射后每周测空腹血糖及体重,至第10周取视网膜。采用免疫印迹法检测视网膜内Nrf2激活的下游蛋白血红素加氧酶-1（HO-1）的表达情况;免疫荧光染色检测具有多种剪接形式的RNA结合蛋白（RBPMS）阳性的视网膜节细胞（RGCs）及胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性的无长突细胞（ACs）并计数;采用过碘酸-希夫和苏木素染色,观察视网膜内无细胞毛细血管并进行定量分析。 结果 STZ诱导1周后,野生型和Nrf2^-/-模型组小鼠血糖急剧升高,体重开始显著下降,随着周龄的增长体重无明显增加;对照组小鼠血糖值无明显升高,体重呈正常缓慢增长趋势。STZ诱导糖尿病10周后,RBPMS和ChAT染色发现,Nrf2^-/-糖尿病小鼠视网膜内RGCs和ACs数量显著降低（P<0.05）;过碘酸 希夫和苏木素染色显示,Nrf2^-/-糖尿病小鼠视网膜内出现无细胞毛细血管;免疫印迹法显示,野生型小鼠模型组中Nrf2激活的下游蛋白HO-1表达升高。 结论 Nrf2对糖尿病视网膜细胞及血管具有保护作用,其可能是通过诱导HO-1上调发挥作用。     

敲除toll样受体4基因对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响

目的:研究toll样受体4（TLR4）在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）发病中的作用。方法:C57BL/6野生型（WT）和Tlr4敲除(Tlr4^-/-)小鼠注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_35-55)建立EAE模型。定期记录神经功能评分及体重变化;苏木素-伊红（HE）和劳克坚牢蓝（LFB）染色观察脊髓组织内炎症细胞浸润及髓鞘脱失情况;免疫荧光染色检测髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达。结果:MOG_35-55免疫后,与WT组相比,Tlr4^-/-小鼠体重下降程度较轻、发病时间延迟、神经功能评分降低、炎性细胞浸润减少、髓鞘脱失减轻、MBP表达增加。结论:敲除Tlr4可减轻EAE小鼠的病理症状。     

血红素加氧酶1(HO-1)基因敲除影响小鼠肺脏免疫细胞组成平衡并加重脂多糖诱导的急性肺损伤

目的 评价血红素加氧酶1(HO-1)基因缺失对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠肺脏免疫细胞组成及炎症性损伤的影响。方法 选取C57BL/6野生型(WT)小鼠和同背景HO-1条件敲除(HO-1^-/-)小鼠,按照随机数字法分为WT对照组、 LPS处理的WT组、 HO-1^-/-对照组和LPS处理的HO-1^-/-组。LPS处理的WT组和LPS处理的HO-1^-/-组分别经尾静脉注射LPS(15 mg/kg)建立ALI模型,WT对照组和HO-1^-/-对照组经尾静脉注射同等体积生理盐水。造模12 h后,处死小鼠并收集各组肺组织。HE染色观察肺组织病理变化。PCR检测肺组织肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)和IL-6 mRNA表达。流式细胞术检测肺组织中性粒细胞(CD45⁺CD11b⁺Ly6G⁺Ly6C^-)、总单核细胞(CD45⁺CD11b     

Galectin-3缺失对银屑病小鼠模型中肥大细胞活化及皮肤损伤的影响

目的：探讨皮肤中半乳糖凝集素-3(Gal3)对银屑病小鼠模型中皮损处肥大细胞激活及银屑病皮炎损伤的影响及其潜在机制。方法：每日分别对SPF级Gal3野生型(Gal3^+/+)和Gal3基因敲除(Gal3^-/-)小鼠背部裸露皮肤处涂抹相同剂量咪喹莫特乳膏,连续5 d以构建银屑病小鼠模型。观察小鼠背部大体病变,并根据银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)进行评分,利用实时荧光定量PCR测定小鼠皮损组织细胞因子il-1、il-17表达,比较Gal3^+/+小鼠和Gal3^-/-小鼠银屑病炎症的严重程度;HE染色观察比较皮损组织病理学变化;甲苯胺蓝染色观察小鼠皮损组织中肥大细胞的形态和分布差异;免疫组织化学和图像分析技术检测肥大细胞活化标志物如类胰蛋白酶和5-羟色胺(5-HT)的表达、分布等差异。结果：连续应用咪喹莫特乳膏后,Gal3^-/-小鼠背部出现鳞屑、浸润斑块和红斑等典型银屑病临床表型,而Gal3^+/+小鼠背部出现细小鳞屑与少量浸润,Gal3^-/-     

余甘子总酚对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠肝脏保护作用机制的研究

目的：研究余甘子总酚对载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化模型小鼠的肝脏保护作用,初步探讨其作用机制。方法：建立高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型,给予余甘子总酚灌胃8周后,酶联免疫法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）水平;观察小鼠肝脏病理模型切片;酶联免疫法检测小鼠肝脏组织匀浆中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Western blot法检测小鼠肝脏组织相关蛋白的表达。结果：余甘子总酚干预可降低ApoE-/-小鼠血清中AST和ALT水平（P<0.05）,减缓小鼠肝脏脂肪性病变及炎症细胞浸润现象;同时,余甘子总酚可显著降低肝脏组织匀浆中TC、TG和LDL-C水平,提高HDL-C水平（P<0.05）,显著降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量（P<0.05）;此外,余甘子总酚还可显著升高模型小鼠肝脏组织ATP结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白水平（P<0.0...     

1-磷酸鞘氨醇受体2抑制脂多糖诱导的急性肺损伤

 目的: 探讨1-磷酸鞘氨醇受体2(S1P2R)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)中的作用及机制。方法: 野生小鼠和S1pr2^-/-小鼠经气管滴注LPS,建立急性肺损伤动物模型。LPS注射24 h时观察肺组织的病理改变,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白浓度、总细胞数、中性粒细胞的比值及TNF-α、IL-6细胞因子的表达。为了观察S1P2R在肺损伤中的作用机制,LPS注射10 min前野生小鼠和S1pr2^-/-小鼠经尾静脉注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME,LPS注射12 h时,再观察肺的病理组织学变化以及BALF中的蛋白浓度,总细胞数及TNF-α、IL-6细胞因子表达的变化。结果: 与野生小鼠比较,S1pr2^-/-小鼠恶化LPS诱导的急性肺损伤,BALF中的蛋白浓度、总细胞数,中性粒细胞比值及炎症细胞因子表达显著增加。而L-NAME的预处理显著抑制在S1pr2^-/-小鼠LPS诱导加重的急性肺损伤。结论: S1P2R通过抑制NO合成,维持血管屏障,从而抑制急性肺损伤。     

IGF1R敲除通过AMPK减轻Ang Ⅱ诱导的小鼠心肌炎症及细胞凋亡

目的：探讨胰岛素生长因子1受体(IGF1R)敲除对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的小鼠心肌炎症和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建杂合子IGF1R敲除(Igf1r^+/-)小鼠。将野生型(WT)和Igf1r^+/-小鼠各20只按照随机数字表法各分为2组,共4组,即WT+saline组、WT+Ang Ⅱ组、Igf1r^+/-+saline组和Igf1r^+/-+Ang Ⅱ组,每组10只。Ang Ⅱ各组小鼠皮下注射Ang Ⅱ(2 mg·kg^-1·d^-1)2周构建心肌损伤模型,而saline各组小鼠皮下注射等体积的生理盐水2周。通过心脏指数检查心脏功能;ELISA方法检测心肌组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;RT-qPCR和免疫印迹分析检测相关mRNA和蛋白的水平。结果：Ang Ⅱ诱导的WT小鼠心功能显著下降且心脏损伤标志物和IGF1R表达显著...     

五味子乙素对过敏性哮喘小鼠IL-4/IL-13/STAT6 通路及气道杯状细胞 凋亡的影响

目的：探究五味子乙素对过敏性哮喘小鼠的治疗作用及对IL-4/IL-13/STAT6信号通路的影响。方法：BALB/c小鼠随机分为6组：空白对照组、模型组、五味子乙素低（20 mg/kg）、中（30 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量组和地塞米松组（2 mg/kg）,每组12只。除空白对照组外,其他各组均构建过敏性哮喘小鼠模型,造模同时分别灌胃给予相应药物。末次OVA激发24 h后,ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症因子IL-4、IL-13、IFN-γ水平。取出肺脏,计算肺/体质量指数。HE染色检测小鼠肺组织形态学变化,并进行炎症反应评分。TUNEL和PAS染色结合检测小鼠肺组织杯状细胞凋亡率;Western blot检测小鼠肺组织IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达。结果：与空白对照组相比,模型组小鼠肺组织结构损伤严重,有大量炎症细胞浸润,肺/体质量指数、炎症反应评分、气道杯状细胞凋亡率、BALF中IL-4、IL-13水平及肺组织中IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达显著升高（P<0.05）,IFN-γ水平显著降低（P<0.05）;与模型...     

C1型尼曼-匹克氏症小鼠的肾脏功能及病理变化

目的:探讨Npc1基因突变小鼠肾脏功能及病理生理的变化,为C1型尼曼-匹克氏症(NPC1)患者临床上药物的使用及肾功能的维持提供理论依据。方法:用PCR法确定小鼠基因型;选取出生后第60天(P60)的野生型NCPC1(Npc1~(+/+))和突变型NCPC1(Npc1~(-/-))小鼠,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及尿素(Urea)、尿酸(UA)和肌酐(Cr)的含量来评价Npc1-/-小鼠的肝肾功能变化;进一步常规冷冻切片后通过β-半乳糖苷酶染色及Masson染色来分别评价Npc1~(-/-)小鼠肾脏衰老及纤维化情况。结果:与P60的Npc1~(+/+)小鼠相比,Npc1~(-/-)小鼠的体重和肾脏重量显著降低(P0.01);肝肾功能明显减退:ALT、AST及LDH活性显著升高(P0.05),Urea、UA及Cr的含量显著增加(P0.05);冷冻切片染色结果表明肾脏组织衰老明显(P0.01),纤维化程度显著增强(P0.01)。结论:Npc1基因突变导致的脂质异常代谢可加速肾间质纤维化,促使肾脏衰老,最终导致肾功能减退。     

大叶秦艽花环烯醚萜类成分对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用及相关机制探讨

目的:探讨大叶秦艽花环烯醚萜类成分(GMI)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠的治疗作用并探讨相关机制。 方法:采用CIA 小鼠模型,观察GMI 组(30 mg/ kg 和15 mg/ kg)对关节炎指数的影响;HE 染色观察GMI 对小鼠关节滑膜组织 病理学变化的影响,ELISA 法检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6 的水平,Western blot 法检测滑膜中MMP1 和MMP3 的蛋白 表达。结果:GMI 能降低CIA 小鼠的关节炎指数,改善关节滑膜的组织病理学改变,抑制血清中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6 的分泌,降低滑膜中MMP1 和MMP3 的表达水平。结论:GMI 对CIA 小鼠有一定的治疗作用,其药理作用可能通过降低血清 中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6 的含量,并进一步抑制MMP1 和MMP3 的表达水平,从而减轻软骨损伤,发挥抗RA 的疗效。     

胍丁胺通过细胞因子介导多器官功能衰竭小鼠保护作用的研究

目的:通过探讨胍丁胺(AGM)对炎症因子表达水平的影响,研究胍丁胺对酵母多糖(ZYM)诱导小鼠多器官功能衰竭(MODS)的保护作用。方法:小鼠腹腔注射ZYM+AGM,建立ZYM 诱导的炎症模型,同时设立空白组、AGM 组、ZYM组,观察各组建模前后小鼠进食、白细胞计数、心率等以确定造模是否成功。造模成功后对各组小鼠的肝功能、肾功能、心肌酶等生化指标进行检测;并通过qPCR 和ELISA 方法检测血液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10 因子的基因和蛋白分泌水平。结果:注射ZYM 后的小鼠出现精神不振、活动和进食减少;检测小鼠各脏器功能血清学指标,显示脏器功能出现严重异常。与空白对照组相比,ZYM 组、ZYM+AGM 组小鼠血清学指标均明显增高;并伴随炎症因子TNF-α、IL1β、IL-6、IL-10 明显升高(P<0.05)。与ZYM 组相比,ZYM+AGM 组各脏器功能血清学指标降低,炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 明显下降(P<0.05),IL-10 无明显差异(P>0.05),而小鼠精神、活动和进食等无明显的改变。结论:腹腔注射500 mg/ kg 的ZYM 能够成功构建小鼠MODS 模型,AGM 通过降低炎症因子的释放,对MODS 小鼠各器官功能起到一定的保护作用。     

干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β在体外对人气管平滑肌细胞凋亡的作用

目的:研究是否干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)在体外能够诱导人气管平滑肌细胞(ASMCs)凋亡。方法:分离人ASMCs并在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中培养。用4-6代的细胞作实验。IFN-γ、TNF-α和IL-1β,每种细胞因子单独或一起用于处理人ASMCs。用MTT法在0、24、48、72h检测IFN-γ、TNFα和IL-1β对细胞生长的作用。用光镜和电镜观察形态学的改变。用琼脂糖电泳分析DNA片断。用SP-免疫组化染色方法检测p53、bcl-2、bax基因表达的改变。通过碎片DNA原位末端标记技术(TUNEL)检测凋亡细胞的百分率。结果①IFN-γ以时间依赖的方式单独或/和TNF-α和IL-1β一起减低存活的细胞数;②光镜和电镜检查显示人ASMCs细胞皱缩、膜出泡,核缩小,染色质浓聚和核破碎;③琼脂糖电泳显示在用上述细胞因子联合处理的人ASMCs,有代表寡核苷酸片断整倍数的特征性的DNA梯状条带(大约180-200bp);④在细胞因子联合处理组p53和bax基因表达显著高于对照组,但bcl-2基因表达低于对照组(P＜0.01);⑤用IFN-γ(4×10⁵U/L)、TNF-α(4×10⁵U/L)和/或IL-1β(10×10⁴U/L)同时刺激诱导人ASMCs凋亡。在用细胞因子联合处理组的人ASMCs的凋亡指数显著高于对照组(P＜0.01)。结论:用IFN-γ、TNF-α和/或IL-1β联合处理诱导人ASMCs凋亡。这些免疫性细胞因子在哮喘和慢性阻塞性肺疾病的气道重建中也许起了重要的作用。     

四氢嘧啶类衍生物ZL-5015抗内毒素作用的实验研究

目的:探讨1,3-二环戊基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(ZL-5015)对内毒素攻击小鼠的保护作用及机制。方法:腹腔注射脂多糖(70 mg/kg)制备小鼠内毒素中毒死亡模型和内毒素血症模型。脂多糖(10mg/L)刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生炎症相关细胞因子作为体外炎症模型。ELISA法检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。Real-time PCR检测细胞因子mRNA的表达水平。结果:ZL-5015(100和200 mg/kg)预防性灌胃给药能小幅提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间,在中毒早期能降低内毒素血症小鼠血清中IL-1β和TNF-α的水平,提高IL-10的水平。体外实验表明,ZL-5015(10、20和40μmol/L)能抑制内毒素刺激的腹腔巨噬细胞IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA的表达,促进IL-10蛋白及mRNA的表达。结论:四氢嘧啶类化合物ZL-5015能提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间,但作用较弱,其作用机制可能与抑制促炎细胞因子IL-1β和TNF-α、促进抑炎细胞因子IL-10的表达有关。     

SGK1抑制剂EMD638683对膀胱出口梗阻小鼠肾组织细胞焦亡的作用及机制研究

目的:确定小鼠膀胱出口梗阻(bladder outlet obstruction,BOO)模型引起下尿路梗阻介导的肾脏炎性损伤;研究血清和糖皮质激素调节激酶1(serum and glucocorticoid-regulated kinase 1,SGK1)抑制剂EMD638683抗梗阻性肾病炎症的作用机制,探讨SGK1与NLRP3-caspase-1-IL-1β/细胞焦亡(pyroptosis)通路诱导细胞损伤的关系。方法:构建小鼠BOO模型,HE染色观察肾组织病理变化及炎症细胞浸润,PAS染色观察肾脏的组织病变,Masson染色法检测肾小管的胶原沉积,免疫组化法和Western blot法检测NLRP3、caspase-1、F4/80、gasdermin D-N末端片段(GSDMD-N)、IL-1β和SGK1的表达。醛固酮(aldosterone,ALD)处理小鼠肾小管上皮细胞(mouse renal tubular epithelial cells,mRTECs),EMD638683进行干预,Western blot法检测NLRP3、caspase-1、IL-1β、SGK1及GSDMD-N的表达水平;ELISA法检测各组细胞上清液IL-1β含量。结果:梗阻3周的小鼠肾脏中HE染色观察到炎症细胞浸润,PAS染色出现肾脏组织病变,Masson染色检测到肾小管间质有胶原沉积。与正常组小鼠比较,梗阻3周小鼠组NLRP3、caspase-1、F4/80、GSDMD-N、IL-1β和SGK1含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。细胞实验中,与正常组比较,ALD组NLRP3、caspase-1、IL-1β、SGK1及GSDMD-N含量显著升高(P<0.05或P<0.01);与ALD组相比,ALD加EMD638683组NLRP3、caspase-1、IL-1β、SGK1及GSDMD-N含量显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论:成功构建小鼠BOO模型引起下尿路梗阻介导的肾脏炎性损伤;EMD638683通过抑制NLRP3-caspase-1-pyroptosis通路阻断细胞焦亡,从而发挥抗炎作用。     

香叶木素对非酒精性脂肪肝病幼鼠的保护作用

目的　探索香叶木素对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病幼鼠的影响。 方法　高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝病大鼠模型。酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血脂及炎症因子水平。苏木素伊红（hematoxylin- eosin, HE）染色和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase- mediated dUTP nick labeling, TUNEL）染色分析肝脏组织病变及细胞凋亡。蛋白印记检测p-AMPKα1,AMPKα1,CPT-1, PPAR-α,SREBP-1c,FAS,p-P38,P38,p-AKT,AKT,p-AKT,AKT表达。 结果　与对照组相比,高脂饮食组大鼠TC, TG, LDL-c水平升高,HDL-c水平下降（P<0.01）。与高脂饮食组相比,香叶木素（10, 20, 50 mg/kg）组大鼠TC, TG, LDL-c水平降低,HDL-c水平上升（P<0.01）。香叶木素可缓解高脂饮食诱导的肝脏组织病变。高脂饮食组大鼠肝脏组织细胞凋亡高于对照组（P<0.01）。香叶木素（10, 20, 50 mg/kg）组大鼠肝脏组织细胞凋亡低于高脂饮食组（P<0.01）。高脂饮食组大鼠p-AMPKα1,CPT-1 和PPAR-α 表达低于对照组（P< 0.01）。与高脂饮食组相比,香叶木素（20, 50 mg/kg）组大鼠p-AMPKα1,CPT-1 和PPAR-α 表达升高（P< 0.01）。高脂饮食组大鼠SREBP-1c 和FAS表达高于对照组（P<0.01）。与高脂饮食组相比,香叶木素（10, 20, 50 mg/kg）组大鼠SREBP-1c 和FAS表达下降（P<0.01）。而且,高脂饮食组大鼠IL-6, IL-1β和TNF-α水平高于对照组（P<0.01）。与高脂饮食组相比,香叶木素（20, 50 mg/kg）组大鼠IL-6, IL-1β和TNF-α水平下降（P<0.01）。另外,香叶木素可逆转compound C对AMPK通路的抑制作用。 结论　香叶木素激活AMPK通路减轻高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病幼鼠脂质代谢异常,肝脏组织病变,细胞凋亡及炎症反应。     

孟鲁司特对过敏性紫癜小鼠炎性因子的影响及其作用机制

目的:探讨孟鲁司特对过敏性紫癜小鼠炎性因子的影响及其作用机制。方法:采用灌胃给予0.1% 麦胶蛋白 (溶于6 mmol/ L HCl 酸化水),尾静脉注射印度墨水(40 mg/ kg)封闭网状内皮系统的方法建立过敏性紫癜小鼠模型,采用印度 墨水小鼠碳粒廓清法检测网状内皮系统(RES)功能,采用微量聚乙二醇沉淀法测定血清循环免疫复合物(CIC)含量,采用分 光光度法测定晚期氧化蛋白产物(AOPPs),采用酶联免疫吸附实验测定IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果:与空白组比较,模型 组小鼠RES 功能显著降低,血清CIC、AOPPs、IL-1β、IL-6、TNF-α的水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,低、中、高浓度孟 鲁司特组小鼠RES 功能显著提高,血清CIC、AOPPs、IL-1β、IL-6、TNF-α的水平显著降低(P<0.05)。结论:孟鲁司特可以减轻 过敏性紫癜小鼠症状,其作用机制与降低氧化应激反应、降低血清AOPPs 的含量水平、抑制炎症反应、提高RES 功能和增强循 环免疫复合物的消除能力有关。     

苦参碱对oxLDL 诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制研究

目的:探讨苦参碱对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制。方法:oxLDL 处理人主动脉血管平滑肌细胞建立动脉粥样硬化模型。CCK-8 实验分析细胞活力和增殖。实时定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10 和IL-13 的mRNA 水平。流式细胞术分析细胞凋亡。蛋白印迹检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和增殖细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡标记蛋白B 细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) 和Bcl-2 相关蛋白X(Bax),信号转导及转录激活子3(STAT3)和信号转导及转录激活子5(STAT5)的表达。结果:与对照组相比,造模组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA 水平大大提高,抗炎因子IL-10 和IL-13 mRNA 水平则显著降低(P<0.01)。与造模组相比,模型加药组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA 水平显著降低,抗炎因子IL-10 和IL-13 的mRNA 水平明显升高(P<0.05)。造模组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显高于对照组,模型加药组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显低于造模组(P<0.05)。与对照组相比,造模组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达显著升高,Bcl-2 显著降低(P<0.01)。与造模组相比,模型加药组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达明显减少,Bcl-2 表达明显增多(P<0.05)。造模组p-STAT3 和p-STAT5 相对蛋白表达量显著高于对照组(P<0.01)。模型加药组p-STAT3 和p-STAT5 相对蛋白表达量明显低于造模组(P<0.05)。与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib 组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达明显减少,Bcl-2 表达明显增多(P<0.05);模型加药+Ruxolitinib 组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达显著减少,Bcl-2 表达显著增多(P <0.01)。与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib 组及模型加药+Ruxolitinib 组IL-1β和TNF-α的mRNA 水平都明显降低,IL-10 和IL-13 的mRNA 水平都明显升高(P<0.05)。结论:苦参碱可通过抑制JAK/ STAT3 通路的活化起到抗炎和抑制血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用。     

米诺环素后处理通过抑制PARP过度活化减轻心肌缺血/再灌注损伤

目的:探讨米诺环素后处理能否通过抑制多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)过度活化减轻大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支45 min,再灌注2 h,建立心肌I/R模型。将90只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组,I/R组,低、高剂量米诺环素组及PARP抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)组。氯化三苯基四氮唑(TTC)和伊文思蓝双染法检测心肌梗死范围,HE染色观察心肌组织形态学改变,TUNEL法评估心肌细胞凋亡程度,酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量,Western blot法检测再灌注心肌及外周血白细胞内PARP-1活化产物多腺苷二磷酸核糖(PAR)的表达。结果:与sham组比较,心肌、外周血白细胞内PAR表达及血清TNF-α、IL-1β含量明显升高。与I/R组比较,米诺环素低、高剂量及3-AB后处理组均能显著减少梗死范围及心肌细胞凋亡程度,同时明显降低心肌、外周血白细胞内PAR表达及血清TNF-α、IL-1β含量。米诺环素高剂量组与3-AB组比较无显著差异。结论:米诺环素后处理可能通过抑制心肌及外周血白细胞PARP过度活化减轻大鼠心肌I/R损伤。