肝素抑制低氧性肺动脉高压大鼠肺血管内皮生长因子1的表达

目的： 观察肝素抑制大鼠低氧性肺动脉高压过程中,血管内皮生长因子1（VEGF-1）在肺小动脉血管内皮细胞和肺组织中的表达变化。方法：成年雄性SD大鼠24只,随机分为对照组（A组）、低氧4周组（B组）和低氧+肝素4周组（C组）,每组8只。测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、右室肥大指数（RVHI）和血管形态学指标;HE染色观察肺动脉血管形态学改变,免疫组化法检测肺动脉血管内皮细胞VEGF-1蛋白表达;RT-PCR检测肺组织VEGF-1基因表达。结果：mPAP、RVHI、肺小动脉重塑指标、肺小动脉血管内皮细胞VEGF-1蛋白表达和肺组织VEGF-1基因表达水平在C组高于A组,低于B组。相关分析表明,VEGF-1蛋白表达与肺血管重塑呈正相关（r=0.974,P<0.01）。VEGF-1mRNA与VEGF-1蛋白呈正相关（VEGF120 mRNA,r=0.919, P<0.01;VEGF164 mRNA,r=0.896, P<0.01）。结论：肝素可能在转录和翻译水平抑制VEGF-1的表达,从而抑制大鼠低氧性肺动脉高压的形成。     

外源性HGF基因转染对肺动脉高压兔肺血流灌注及肺动脉压力的影响

目的: 探讨外源性肝细胞生长因子(HGF)基因转染高动力性肺动脉高压家兔后促进侧支肺血管生成、改善肺血流灌注、降低肺动脉压力的可行性。方法: 将肺动脉高压兔随机分为对照组、空病毒组和HGF基因转染组; HGF 基因转染组经气管内滴入法转染Ad-HGF, 对照组和空病毒组分别气管内滴入同体积PBS液和Adeno-Null; 4周后, 通过MacLab/8s多功能生理仪行血流动力学检测, 通过抗FⅧ+α-SMA抗体免疫荧光双标检测肺小动脉密度、FITC-lectin灌注+抗α-SMA荧光双标记了解肺血管灌注情况。结果: 气管内给药4周后, HGF基因治疗组含平滑肌细胞的小动脉密度较肺动脉高压对照组和空病毒组(12.5±2.7)/mm²明显增多(P<0.05); HGF组肺血流灌注获得有效改善, 而肺动脉高压对照组和空病毒转染组肺血管仍处于狭窄甚至闭塞状态; HGF治疗组肺动脉平均压明显低于肺动脉高压对照组和空病毒转染组(P<0.05)。结论: 肺动脉高压模型动物经气管滴入法转染外源性HGF, 可以促进肺侧支血管生成, 增加肺灌注并有效降低肺动脉压力。     

微小RNA-126靶向调控血管内皮生长因子对新生大鼠缺氧-缺血性脑病神经元损伤的影响

目的 探讨微小RNA-126（miR-126）靶向调控血管内皮生长因子（VEGF）对新生大鼠缺氧-缺血性脑病（HIE）神经元损伤的影响。 方法 选择清洁级新生7日龄SD雄性大鼠随机分为4组,假手术组（A组）、HIE组（B组）、HIE+阴性对照组（C组）和HIE+miR-126过表达组（D组）,每组18只。建立HIE模型后进行大鼠神经功能缺损评分及脑组织含水量测定;采用HE染色光学显微镜下观察各组大鼠脑海马组织CA1区病理形态学改变;采用Real-time PCR检测大鼠脑组织miR-126和VEGF的表达水平;采用免疫组织化学法检测各组大鼠脑海马组织CA1区VEGF蛋白表达情况;采用双荧光素酶靶标实验验证miR-126与VEGF基因的靶向关系;采用流式细胞术检测脑海马组织神经元凋亡水平;采用Western blotting检测各组大鼠脑组织剪切Caspase-3（cleaved-Caspase-3）蛋白表达水平。 结果 A组大鼠无神经功能损伤,神经行为学评分为0分,脑组织无损伤;B组和C组大鼠神经行为学评分分别为（2.50±0.55）分和（2.33±0.82）分,脑组织损伤明显;D组大鼠神经行为学评分为（1.50±0.55）分,脑组织损伤有改善;与A组相比,B组、C组和D组大鼠神经行为学评分（P<0.05）及脑组织含水量（P<0.05）升高;与B组相比,D组大鼠神经行为学评分（P<0.05）及脑组织含水量（P<0.05）降低。与A组相比,B组和C组大鼠脑组织miR-126的表达水平均显著降低,VEGF mRNA和蛋白表达水平、脑海马组织神经元凋亡率及脑组织cleaved-Caspase-3的表达水平均显著升高（P<0.05）;与B组相比,D组大鼠miR-126的表达水平均显著升高,VEGF mRNA和蛋白表达水平、脑海马组织神经元凋亡率及脑组织cleaved-Caspase-3的表达水平均显著降低（P<0.05）。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-126和VEGF能够靶向结合。 结论 过表达miR-126后可降低脑海马组织神经元凋亡水平,改善HIE的发展,其作用机制可能与miR-126靶向抑制VEGF基因表达有关。     

血管内皮生长因子基因的表达及血管生成作用

构建新的血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）高效真核表达载体ｐｃＤ２／ＶＥＧＦ,体外转染ＶＳＭＣ〈发现其在ＶＳＭＣ中的表达效率较ｐｃＤＮＡ３／ＶＥＧＦ明显增高,体外和体内实验证实ＶＥＧＦ基因具有显著促进血管生成的作用。     

异甘草素对低氧诱导的大鼠肺动脉结构重建的影响

目的 观察异甘草素对缺氧性肺动脉高压（HPH）大鼠模型的肺动脉压力的变化,右心室肥厚程度及肺血管结构重建的影响,探讨异甘草素对HPH的抑制作用及其可能机制。方法 雄性SD大鼠30只随机分为对照组、HPH组、异甘草素组,每组各10只。HPH组和异甘草素组大鼠置于缺氧箱中建立大鼠HPH模型。异甘草素组中,每只大鼠腹腔注射异甘草素剂量为10 mg/(kg·d),从缺氧前1周开始给药直到缺氧结束。对照组和HPH组大鼠腹腔注射等体积0.5% DMSO。测定各组大鼠平均右心室压力(RVSP);称重法测得各组大鼠右心室游离壁（RV）及左心室加室间隔（LV+S）质量,以及RV/（LV+S）;HE染色观察肺动脉病理形态改变,计算血管厚度百分比(WT%)及面积百分比(WA%);ELISA法检测各组大鼠血清及肺组织中的超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量。Real-time PCR检测各组大鼠肺组织中的NADPH氧化酶4(NOX4) mRNA的表达。结果 HPH组大鼠RVSP、RV/LV+S、WT%,以及WA%明显高于对照组大鼠（P<0.01）,然而异甘草素组大鼠RVSP、RV/LV+S、WT%,以及WA%均明显低于HPH组大鼠（P<0.01）。HPH组大鼠肺组织及血清中的SOD含量较对照组明显降低,而MDA含量则明显增高（P<0.01）。异甘草素组大鼠肺组织及血清中的SOD含量较HPH组大鼠明显增高,而MDA含量则明显降低（P<0.01）。 Real time PCR结果显示,异甘草素有效抑制了低氧诱导的大鼠肺组织中NOX4 mRNA的高表达（P<0.01）。结论 异甘草素抑制由低氧诱导的HPH大鼠肺动脉压力升高、右心室肥厚,以及肺动脉管壁的增厚,可能与异甘草素抑制HPH大鼠体内的氧化损伤有关。     

卵泡刺激素与卵泡刺激素及黄体生成素共同干预对玻璃化冻存小鼠卵巢组织血管内皮生长因子表达的影响

目的 通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织卵泡刺激素（FSH）及FSH和黄体生成素（LH）共同干预,观察冻融卵巢组织的形态学改变以及两种激素干预对冻存卵巢组织血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,寻找最佳的提高冻融卵巢组织卵泡存活及VEGF表达的激素干预方式。 方法 4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组（CG）,玻璃化冻存对照组（VCG）,300IU/L FSH全程干预玻璃化冻存组（OG-FSH）,以及150IU/L FSH+150IU/L LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH),每组30个卵巢样本。通过常规组织学、Western blotting技术,观察并分析各组卵巢组织形态结构改变及VEGF蛋白表达量;通过荧光定量PCR技术(Real-time PCR)检测VEGF mRNA表达情况。 结果 OG-FSH+LH 组正常卵泡百分比最高,且显著高于OG-FSH组（P<0.05）;VEGF蛋白表达量在OG-FSH+LH组显著高于OG-FSH组（P<0.05）;荧光定量PCR检测结果表现为VEGF mRNA表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组,最低是VCG组（P<0.05）。 结论 玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式较单独FSH干预具有更高正常卵泡百分比和更佳的VEGF蛋白表达。     

西拉普利对大鼠缺氧性肺动脉高压血管内皮保护作用的研究

目的：观察西拉普利对大鼠缺氧性肺动脉高压血管内皮的保护作用。方法：运用血液动力学方法、观察循环内皮细胞及血管紧张素转化酶、丙二醛的测定。结果：缺氧性肺动脉高压时右室压、肺动脉平均压升高（P＜0．01）,循环内皮细胞数量增加（P＜0．01）,丙二醛升高（P＜0．01）,西拉普利治疗后各值下降（P＜0．01）;缺氧时血管紧张素转化酶下降（P＜0．01）,西拉普利治疗后有上升（P＜0．01）。结论：西拉普利能降低肺动脉压,清除氧自由基,减少血CEC,对血管内皮细胞有保护作用。     

脑外伤小鼠海马血管内皮生长因子表达的变化

目的探讨脑外伤小鼠海马血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化。方法 40只Balb/c小鼠随机分为2组,假手术组(10只)和脑外伤组(30只)。脑外伤组依据脑外伤的不同时间点再分6h、1d、3d三个小组,每组10只。免疫组化和Western blot检测各组小鼠海马VEGF蛋白的表达。RT-PCR方法检测各组小鼠海马VEGF mRNA的表达变化。结果免疫组化和Western blot结果发现,脑外伤组小鼠海马VEGF蛋白表达量明显高于假手术组(<0.05);RT-PCR结果也发现,脑外伤组小鼠海马VEGF mRNA表达量明显高于假手术组(<0.05)。结论脑外伤小鼠海马VEGF表达明显升高。     

血管内皮生长因子165真核基因转染载体转染的骨骼肌细胞

背景：血管内皮生长因子基因转染治疗组织损伤的研究倍受关注,构建稳定可靠的人血管内皮生长因子真核表达载体有重要意义。 目的：克隆人血管内皮生长因子基因血管内皮生长因子165片段,构建pcDNA4-HisMax-C/VEGF165真核表达质粒,并验证其转染大鼠骨骼肌细胞的可靠性。 方法：采用反转录-聚合酶链反应技术,从人卵巢癌患者外周血中提取并扩增出血管内皮生长因子165基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA4-HisMax-C真核表达载体上,构建成pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒,聚合酶链反应扩增,分别用酶切电泳分析和DNA测序的方法对提取和重组DNA 进行鉴定。pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒转染骨骼肌细胞1周后反转录-聚合酶链反应提取血管内皮生长因子基因并酶切电泳鉴定。 结果与结论：构建的重组质粒目的基因片段为人血管内皮生长因子165 cDNA,对大鼠骨骼肌细胞转染后检测到血管内皮生长因子165基因片段。提示成功地克隆了血管内皮生长因子165基因并构建了其真核表达质粒,能以此为载体转染至骨骼肌细胞,并已整合到骨骼肌的基因组参与转录,证明了其转染的有效性。     

低氧诱导因子1和血管内皮生长因子与血管新生

在血管新生的过程中 ,血管内皮生长因子起关键作用。组织或细胞低氧后 ,生成的低氧诱导因子 1主要通过转录和转录后水平的调节 ,增加血管内皮生长因子mRNA的转录活化 ,并增加其mRNA的稳定性 ,以及上调血管内皮生长因子受体的表达 ,从而促进血管新生。     

不同间期慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠血管内皮生长因子的变化

目的：观察不同间期低O2高CO2大鼠肺循环中血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化。方法： 采用ELISA法、透射电镜、免疫组化和原位杂交等方法，观察低O2高CO22周组（T组）、低O2高CO24周组（F组）、低O2高CO28周组（E组）大鼠肺动脉平均压（mPAP）、右心室重量比（RV/LV+S）、血清和肺组织VEGF的含量、肺细小动脉的超微结构、肺组织VEGF及VEGF mRNA表达的变化。结果： T、F、E组大鼠的mPAP、RV/LV+S、血清和肺组织VEGF的含量以及VEGF及其mRNA的表达明显高于正常对照组。随低O2高CO2间期的延长，各组大鼠内皮细胞逐渐向管腔凸起，基底变窄，中膜平滑肌细胞、胶原纤维明显增多。结论：低O2高CO2刺激肺细小动脉壁VEGF mRNA表达增加，导致VEGF的合成和分泌增多，后者可能参与慢性低氧性肺动脉高压的形成和肺细小动脉壁的重建。     

Effect of vascular endothelial growth factor on retinal ganglion cells of rats with chronic intraocular hypertension

Aim: To investigate the effect of vascular endothelial growth factor (VEGF) on the expression of pigment epithelium-derived factor (PEDF) in retina and the protective effect of VEGF on retinal ganglion cells (RGCs) of rats with chronic elevated intraocular pressure (EIOP) and it’s potential mechanism. Methods: 30 females Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups: EIOP + VEGF group (A), EIOP + vehicle group (B) and sham operated + VEGF group (C). The EIOP was introduced by obstructing episcleral veins in Group A and Group B. In the Group C, only the bulber conjunctiva was opened without obstructing episcleral veins. Immediately after surgery, rats in the Group A and Group C were intravitreously injected with 2 μL of VEGF. In the Group B, rats were intravitreously treated with 2 μL of normal saline. At 3 and 14 days after injection, animals were sacrificed and the eyes were collected for preparation of frozen sections. Results: After surgery, the IOP increased significantly in the Group A and Group B. There was no significant difference in the IOP at day 3 and day 14 after operation. The PEDF expression in the Group A and Group B was higher than that in the Group C. TUNEL staining showed the apoptotic RGCs markedly reduced after VEGF treatment when compared with rats without treatment. Conclusion: Intravitreal treatment with VEGF may reduce the apoptosis of RGCs in rats with chronic intraocular hypertension.     

血管内皮生长因子基因多态性与克罗恩病的相关性CSCD

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因多态性与克罗恩病（Crohn’S disease,CD）易感性的关系。方法收集275例CD患者和495名性别、年龄相匹配的健康对照者,采用SNaPshot技术检测VEGF基因rs699947和rs3025039位点的等位基因和基因型频率。结果CD组与对照组之间整体比较,VEGF基因rs699947和rs3025039位点的变异等位基因和基因型频率差异无统计学意义（P均〉o．05）。分层分析发现,结肠型CD患者中rs699947的变异等位基因（A）和基因型（CA＋AA）频率显著高于对照组（P=0．006,95％CI：1．143～2．234;P=0．005,95％CI：1．203～2．900）。与对照组相比,回肠受累（回肠末段型＋回结肠型）的CD患者中,rs699947的变异等位基因（A）和基因型（CA4-AA）频率偏低（P=0．033,95％CI：0．524～0．974;P=0．043,95％CI：0．481～0．989）。此外,非狭窄非穿透型CD患者中rs3025039纯合子变异基因型（TT）频率低于对照组（0．62％vs．4．85％,P=0．036,95％CI：0．016～O．870）。结论VEGF基因rs699947位点基因变异可能增加结肠型CD的发病风险,但在回肠受累的CD患者中可能发挥保护作用。VEGF基因rs3025039位点的纯合子变异基因型（TT）携带者中非狭窄非穿透型CD的发病风险可能降低。     

Divergent regulation of vascular endothelial growth factor and of erythropoietin gene expression in vivo

There is accumulating evidence from in vitro experiments that the gene expression of the vascular endothelial growth factor (VEGF) is, like that of the erythropoietin (EPO) gene, regulated by the oxygen tension and by divalent cations such as cobalt. Since the information about the regulation of VEGF gene expression in vivo is rather scarce, this study aimed to examine the influence of hypoxia and of cobalt on VEGF gene expression in different rat organs and to compare it with that on EPO gene expression. To this end male Sprague-Dawley rats were exposed to carbon monoxide (0.1% CO), hypoxia (8% O₂ ) or to cobalt chloride (12 and 60 mg/kg s.c.) for 6 h. mRNA levels for VEGF- 188, -164, and -120 amino acid isoforms in lungs, hearts, kidneys and livers were semiquantitated by RNase protection. For these organs we found a rank order of VEGF mRNA abundance of lung >> heart > kidney = liver. EPO mRNA levels were semiquantitated in kidneys and livers. Hypoxia, CO and cobalt increased EPO mRNA levels 60-fold, 140-fold and 5-fold, respectively, in the kidneys, and 11-fold, 11-fold and 3-fold, respectively, in the livers. None of these manoeuvres caused significant changes of VEGF mRNA in lung, heart or kidneys. Only in the livers did hypoxia lead to a significant (50%) increase of VEGF mRNA. These findings suggest that, in contrast to the in vitro situation, the expression of the VEGF gene in normal rat tissues is rather insensitive to hypoxia. In consequence, the in vivo regulation of the VEGF and the EPO genes appear to differ substantially, suggesting that the regulation of the VEGF and EPO genes may not follow the same essential mechanisms in vivo. Received: 31 July 1995/Received after revision: 20 November 1995/Accepted: 27 November 1995     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的:研究血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(Vascular endothelial growth factor receptor1,VEGFR1)在子宫内膜异位症(内异症)患者子宫在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症中的作用机制.方法:采用免疫组织化学及Western blot方法检测34例异位症患者在位内膜、异位内膜(内异症组)及34例正常内膜(对照组)组织中VEGF及其受体VEGFR1蛋白的定位及表达.结果:异症组在位及异位子宫内膜组织腺上皮细胞及间质细胞中均有VEGF及VEGFR1蛋白表达,且均高于同期对照组内膜,差异有统计学意义;对照组分泌期内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达高于增生期,呈现周期性变化,而内异症组在位及异位内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达失去周期性变化,分泌期与增生期均高表达,差异无统计学意义.Western blot检测结果与免疫组化结果一致.结论:内异症患者在位及异位内膜组织中VEGF、VEGFR1蛋白高表达可能与内异症的发生发展有关.     

The effect of epidermal growth factor on vascular endothelial growth factor secretion by endometrial stromal cells

Endometrial stromal cells undergo morphological and functional changes to facilitate oocyte implantation under regulation of various hormones and growth factors. We studied physiological induction by epidermal growth factor (EGF) of vascular endothelial growth factor (VEGF) in these cells. In human endometrial stromal cells, the effect of EGF, genistein, tryphostin AG1478 (a tyrosine kinase inhibitor), and wortmannin (a phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor) on production of VEGF was examined: Total RNA was extracted and VEGF mRNA expression was quantified by Northern analysis. EGF induced production of VEGF by stromal cells in a time-dependent manner; the effect became significant after 12 h and increased further between 24 and 48 h (P<0.05). Dose dependency was also significant (P<0.01). Genistein, tryphostin AG1478, and wortmannin partially suppressed the increase in production induced by EGF (P<0.01, P< 0.01, P<0.01), respectively. Production of EGF by fertilized oocytes and trophoblasts has been reported in early pregnancy. VEGF is believed to be induced by EGF through mechanisms involving tyrosine kinase and phosphatidylinositol 3-kinase. The increase in VEGF may contribute to neovascularization that promotes proliferation of endometrium and placentation. Received: 6 September 2001 / Accepted: 21 May 2002     

血管内皮生长因子基因多态性与先天性心脏病相关性的Meta分析

目的 评价血管内皮生长因子（VEGF）等位基因、基因型、基因单倍型多态性与先天性心脏病（CHD）的相关性.方法 检索Cochrane图书馆、Medline、PubMed、EMBASE、中国期刊全文数据库、万方数据库及中国生物医学文献数据库,检索起止时间均为建库至2011年12月,并且对重要文献的参考文献采取手工回溯检索.获取VEGF与CHD相关性的病例对照研究和传递不平衡检验文献.对文献进行质量评价.采用RevMan 5.1.1软件进行异质性检验,根据检验结果选择适当的效应模型进行Meta分析.结果 6篇文献共10项独立研究纳入分析,漏斗图检验存在发表偏倚.Meta分析结果显示：① VEGF C-2578A和G-1154A位点等位基因变异显著增加DiGeorge综合征患者的CHD易感性,OR分别为1.40（95%CI：1.04～1.16）和1.87（95%CI：1.27～2.75）;G-634C位点的等位基因变异显著增加普通病例的CHD易感性,OR=1.29,95%CI：1.02～1.62.② G-1154A位点（AA＋AG）为DiGeorge综合征患者合并CHD的危险因素,OR=2.10,95%CI：1.32～3.34.③单倍型AAG在DiGeorge综合征患者中显著增加CHD易感性,OR=1.82,95%CI：1.31～2.54;单倍型CGC显著降低普通病例CHD风险的保护作用,OR=0.79,95%CI：0.63～0.99.结论 VEGF等位基因、基因型、基因单倍型多态性与CHD易感性存在一定的相关性,且在DiGeorge综合征患者与普通患者间存在差异;在不伴DiGeorge综合征的人群中,特定单倍型（CGC）则有显著降低CHD风险的保护作用,其作用机制尚需进一步明确.