缺氧诱导因子-1α对体外模拟CO2气腹下人胃癌细胞凋亡的影响

目的 通过体外模拟CO2气腹环境,构建沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的RNAi表达载体,探讨HIF-1α对CO2气腹环境下人胃癌细胞MKN-45凋亡的影响及机制.方法 利用密闭培养箱模拟CO2气腹,气腹机维持培养箱内压力分别为0、5、10、15 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),采用RT-PCR方法和Western blot方法观察沉默HIF-1α前后MKN-45细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达变化.免疫组化技术观察沉默HIF-1α前后细胞bcl-2/bax表达变化.Annexin V-FITC/PI舣标染色、流式细胞仪检测沉默HIF-1α前后细胞凋亡比例变化.结果 沉默HIF-1α前15 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达(1.48±0.22和1.34±0.09)以及10 nnn Hg组细胞蛋门表达(1.25±0.10)均显著高于对照组(0.55±0.17和0.83±0.04)(P＜0.05).0、5、10 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA和0、5 mm Hg蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).沉默HIF-1α前15 mm Hg组细胞bcl-2/bax比值(0.78±0.05)较对照组(1.43±0.15)明显降低(P＜0.05),细胞凋亡比例(11.70±0.12)较对照组(0.22±0.07)显著增加(P＜0.01).而在沉默HIF-1α后15 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA表达(0.52±0.11)和蛋白表达(0.92±0.02)、bcl-2/bax比值(1.57±0.04)、细胞凋亡比例(0.45±0.11)与对照组比较均无显著差异(P＞0.05).结论 在CO2气腹环境压力为0、5、10 mmHg CO2时MKN-45细胞凋亡比例与对照组比较无显著差异,压力为15 mm Hg时CO2气腹可促进胃癌细胞凋亡,HIF-1α可能为促进细胞凋亡的重要因子.     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达

目的 探讨缺氧诱导因子（HIF）-1α与血管内皮生长因子（VEGF）在不同级别胶质瘤中的表达特点及其生物学特性。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和免疫组织化学法分别检测20例新鲜冷冻标本及117例多聚甲醛固定的不同级别胶质瘤标本中HIF-1α与VEGF的表达情况，并对实验结果进行半定量计算和统计学分析。结果 RT-PCR结果示正常脑组织和Ⅰ-Ⅳ级胶质瘤中HIF-1αmRNA平均吸光度值分别为11．99、12．18、48．31、80．96、112．77，正常脑组织和Ⅰ级胶质瘤间差异元统计学意义，其余各组间差异均有统计学意义（F=969．45，P〈0．01）；而VEGF mRNA平均吸光度值分别为29．50、37．97、60．33、84．61、112．97，各组间差异均有统计学意义（F=312．91，P〈0．01）。免疫组织化学结果示HIF-1α在正常脑组织和Ⅰ-Ⅳ级胶质瘤中的阳性表达率分别为10％、13．3％、53．5％、80．6％、100％，正常脑组织和Ⅰ级胶质瘤间差异无统计学意义，其余各组间差异均有统计学意义（χ^2=38．19，P〈0．05）；同样，VEGF在各组中的阳性表达率分别为0％、33．3％、62．8％、83．3％、100％，各组问差异均有统计学意义（χ^2=45．78，P〈0．05）。结论 HIF-1α与VEGF在胶质瘤中的表达与胶质瘤的病理分级密切相关，随着病理级别的升高，HIF-1α与VEGF无论是在mRNA水平还是在蛋白水平的表达均上调，并且两者间的表达也具有相关性。     

Survivin在肝癌中的表达和意义及其与血管内皮生长因子的相关性

目的　检测肝细胞癌中凋亡抑制蛋白Survivin的表达 ,研究其与肝癌临床特征的关系 ;同时研究Survivin与血管内皮生长因子 (VEGF)表达的相关性 ,探讨Survivin在肝细胞癌发生发展及转移中的作用及机制。方法　采用免疫组织化学技术和蛋白印迹技术 ,检测 3 8例肝癌组织及癌旁非癌组织中Survivin和VEGF蛋白的表达。结果　 3 8例肝癌组织中 2 3例表达Survivin蛋白 ,其中 18例VEGF表达阳性 ,5例VEGF表达呈阴性或弱阳性 ;15例不表达Survivin蛋白者VEGF的表达 3例阳性 ,12例阴性或弱阳性。而在癌周非癌组织未检测到Survivin蛋白的表达。Survivin的表达与肝癌的发病年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关 (均为P >0 .0 5 ) ,而与肝癌的转移有关 (P <0 .0 5 )。结论　Survivin在肝细胞癌中的表达能促进肝癌的发生发展 ,并可能通过上调VEGF的表达而促进肝癌转移。     

缺氧诱导因子2与肝癌的研究进展

缺氧诱导因子2（HIF-2）是bHLH-PAS超家族成员之一,能够应答细胞内氧气浓度的降低而对多种基因的表达进行调控,且与肿瘤的发生、发展关系密切。肝细胞癌（肝癌）是我国最常见的恶性肿瘤之一,治疗效果有限,病死率高,研究HIF-2在肝癌中的作用可有助于改进治疗手段,改善患者预后。     

缺氧诱导因子-1α在肝癌中的表达及其对肿瘤细胞周期的影响和临床意义

目的探讨缺氧诱导因子（HIF）-1α在肝癌中的表达及其对肿瘤细胞周期的影响和临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测62例肝癌标本中HIF-1α和Cyclin E的表达，同时应用流式细胞仪对S期细胞比（SPF）进行检测。结果随着肝癌分化程度的降低，出现门脉／胆管浸润或发生淋巴结／远处转移，HIF-1α、Cyclin E阳性表达率增加，SPF值也升高（Х^2值分别为6．32、3．90、7．09；4．41、4．85、10．61，t值分别为5．827、5．959、5．331，P〈0．05或P〈0．01）；在短、中期生存患者中，三者也高于长期生存者（Х^2值分别为8．85、11．78；t值为3．014，P均〈0．01）。Cyclin E阳性表达病例SPF值高于其阴性表达者（t值为4．191，P〈0．01）。HIF-1α表达与Cyclin E表达、SPF值呈明显相关（Х^2值为4．18，t值为4．318，P〈0．05或P〈0．01）。结论三者的检测对判断肝癌的恶性程度、侵袭转移能力及预后具有重要的临床意义。在肝癌中，HIF-1α可能通过影响肿瘤细胞G1／S调控点（Cyclin E调控），SPF值升高从而促进肿瘤的进展。     

干扰素-α抑制高转移潜能人肝癌裸鼠肝细胞生长因子及血管内皮生长因子的表达

目的 观察干扰素-α(IFN-α)对高转移潜能人肝癌裸鼠模型中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)mRNA表达的影响.方法 应用绿色荧光蛋白转染的人高转移肝癌细胞株HCC-LM3建立高转移潜能人肝癌裸鼠模型LCI-D20,种植后第2天开始分别使用IFN-α 1.5×104 U/(kg·d)(治疗组,n=12)或生理盐水(对照组,n=12)皮下注射,28 d后处死裸鼠,比较肝脏肿瘤的大小和肝内转移,免疫组织化学检测肿瘤微血管密度(MVD),实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测肿瘤HGF和VEGF表达的变化.结果治疗组、对照组的肝内肿瘤大小分别为(0.11±0.03)cm3、(0.99±0.37)cm3(P<0.05);肝内转移率分别为33.3%(4/12)、83.3%(10/12)(P<0.05);肝内转移数目分别为0.67±0.31个比1.91±0.43个(P<0.05);肿瘤内MVD分别为3.19±0.52、4.85±0.72(P<0.05);肿瘤VEGF mRNA表达(-△CT)分别为-8.16±0.54、-6.95±0.86(P<0.05);HGF mRNA表达分别为-11.62±0.63、-10.56±0.48(P<0.05).结论 IFN-α对HGF及VEGF表达的抑制可能是其抗肿瘤血管生成作用、抑制肿瘤生长转移作用的机制之一.     

缺氧诱导因子-1α在腹主动脉瘤中的表达及其意义

目的　观察缺氧诱导因子 (HIF) 1α信号传导途径在腹主动脉瘤 (AAA)中的表达 ,探讨AAA的发病机制。方法　选取AAA标本 2 2例 ,以 5例正常腹主动脉 (NA )标本作对照。采用Northern杂交、Western蛋白印迹及免疫组织化学方法检测HIF 1α的mRNA及蛋白产物表达 ,Western蛋白印迹和免疫组织化学方法检测血管内皮生长因子 (VEGF)的表达 ,免疫组织化学抗CD3 4染色法检测微血管密度 (MVD)。结果　AAA组织中HIF 1α的mRNA及蛋白产物表达明显高于NA(P <0 .0 1) ;VEGF表达亦明显增强 (P <0 .0 1) ,与HIF 1α表达呈显著正相关 (r值为0 .783 ,P <0 .0 1)。HIF 1α表达主要分布在AAA中层血管平滑肌细胞 (VSMC)及外膜处 ,与VEGF的分布部位基本一致。AAA中微血管密度明显增加 (P <0 .0 1) )。结论　HIF 1α在AAA发病过程中可能发挥重要作用 ,其作用机制可能是通过促进VEGF的表达而实现的。     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的 初步探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在膀胱尿路上皮癌(BUV)中表达的临床意义及两者的相关性.方法 采用免疫组织化学S-P方法分别检测BUC组织和正常膀胱黏膜组织中的HIF-1α和VEGF蛋白的表达水平.运用统计学方法对比分析HIF-1α和VEGF在两种不同组织的表达和相关性以及与临床病理特征之间的关系.结果 HIF-1α、VEGF在BUC中的阳性表达率(57.1％、72.5％),都明显高于正常组织(4.1％、6.1％),差异有显著统计学意义(P＜0.01).BUC中HIF-1oα表达水平和VEGF表达水平呈现正相关(P＜0.01).两者表达水平与BUC肌层浸润、非肌层浸润、细胞级别以及淋巴结转移均有相关性(P＜0.05).结论 在BUC中HIF-1α与VEGF的表达密切相关,并且均与临床病理特征有很大关系.因此,联合检测HIF-1α和VEGF有助于BUC的预后判断及复发风险预测,对分子靶向治疗膀胱癌也可能具有一定指导意义.     

缺氧诱导因子1α与脯氨酸羟化酶3在肝癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和脯氨酸羟化酶3(prolyl hydroxylase 3,PHD3)的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测103例HCC组织、14例癌旁肝组织和13例正常肝组织中HIF-1α和PHD3的表达,并分析其与临床病理特点间的关系。结果:HIF-1α在HCC组织中的表达阳性率显著高于癌旁肝组织,其阳性表达与肿瘤最大径、脉管瘤栓、术后2年生存率、肿瘤分级和TNM分期显著相关(P<0.05)。正常肝组织不表达HIF-1α。PHD3在HCC组织中阳性表达明显高于癌旁肝组织和正常肝组织,其在HCC中阳性表达与脉管瘤栓、肿瘤分级和术后2年生存率显著相关(P<0.05)。生存分析显示,HIF-1α和PHD3阳性表达组病人术后生存期较阴性表达组明显缩短。COX多因素分析显示,HIF-1α和PHD3阳性表达是HCC的独立预后因素。结论:HIF-1α和PHD3可能在HCC的发生、发展、浸润和转移中起重要作用。对HCC中HIF-1α、PHD3表达的检测有助于判断HCC的恶性程度及预后分析。     

缺氧诱导因子-1α在前列腺癌中的表达及意义

目的　探讨缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)蛋白在前列腺癌 (CaP)中的表达及意义。　方法　应用免疫组化SP法检测 42例CaP和相应癌旁组织 ,12例高分级前列腺上皮内瘤 (PIN )以及 9例正常前列腺组织 (NP)中HIF 1α的表达 ,免疫印迹技术分析不同氧浓度诱导下CaP细胞株PC 3M的HIF 1α蛋白水平。　结果　 3 3例 (78.6% )CaP和 9例PIN组织HIF 1α蛋白表达阳性 ,有远处转移的CaP组织中HIF 1α表达显著高于无转移者 (P <0 .0 5) ,癌旁组织及正常前列腺组织中无阳性表达 ;PC 3M细胞株中HIF 1α表达水平随氧浓度减小而明显升高 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　HIF 1α表达是CaP形成的早期事件 ,其水平升高可能导致肿瘤向恶性发展表型 ,HIF 1α可作为CaP的早期诊断指标和治疗新靶点     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮素-1及血管内皮生长因子在胃肠道间质瘤中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮素-1(ET-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达关系及其对患者预后判断的价值.方法 收集2003年1月至2006年12月中南大学湘雅医院(50例)、湖南省邵阳市中医院(36例)行手术治疗的86例GIST患者肿瘤标本,采用免疫组织化学染色方法检测标本中HIF-1 α、ET-1和VEGF的表达.计数资料采用x2检验,应用Spearman等级相关分析处理HIF-1α、ET-1和VEGF之间的相关性.Kaplan-Meier法计算患者生存率,生存分析比较采用Log-rank检验.结果 86例患者中,HIF-1α阴性23例、阳性30例、强阳性33例,阳性表达率为73.3％(63/86);ET-1阴性29例、阳性28例、强阳性29例,阳性表达率为66.3％ (57/86);VEGF阴性24例、阳性26例、强阳性36例,阳性表达率为72.1％(62/86).HIF-1α、ET-1和VEGF的表达两两均呈正相关(r=0.594,0.655,0.347,P＜0.05);上述3种检测指标与GIST的美国国立卫生研究院(NIH)危险度分级、浸润转移、肿瘤直径和核分裂象有关(x2=15.565、10.841、12.574、21.125,8.171、10.002、10.354、17.317,14.710、16.230、11.116、18.886,P＜0.05);而与患者的性别、年龄、肿瘤原发部位无关(x2=0.059、0.071、5.070,0.468、0.074、1.665,0.231、0.370、3.712,P＞0.05);进一步分析发现:上述3种检测指标阳性表达率随GIST NIH危险度分级的升高、出现浸润转移和肿瘤直径的增大而增加.86例患者随访率为91.9％(79/86),3、5年生存率分别为82％和69％.中位随访时间为40.2个月(2～66个月).HIF-1α、ET-1和VEGF阳性患者的5年生存率分别为42％、45％和42％,显著低于阴性患者的64％、65％和63％(x2=6.325,6.124,6.287,P＜0.05).结论 HIF-1α、ET-1和VEGF在GIST中的表达两两呈正相关,这3种检测指标提示肿瘤的恶性程度及患者预后.     

缺氧诱导因子-α和血管内皮素-1及血管内皮生长因子在胃肠道间质瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮素-1（ET-1）和血管内皮生长因子（VEGF）在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达关系及其对患者预后判断的价值。方法收集2003年1月至2006年12月中南大学湘雅医院（50例）、湖南省邵阳市中医院（36例）行手术治疗的86例GIST患者肿瘤标本,采用免疫组织化学染色方法检测标本中HIF-1α、ET-1和VEGF的表达。计数资料采用r检验,应用Spearman等级相关分析处理HIF-1α、ET-1和VEGF之间的相关性。Kaplan—Meier法计算患者生存率,生存分析比较采用Log—rank检验。结果86例患者中,HIF-1仅阴性23例、阳性30例、强阳性33例,阳性表达率为73．3％（63／86）;ET-1阴性29例、阳性28例、强阳性29例,阳性表达率为66．3％（57／86）;VEGF阴性24例、阳性26例、强阳性36例,阳性表达率为72．1％（62／86）。HIF-1α、ET-1和VEGF的表达两两均呈正相关（r=0．594,0．655,0．347,P〈0．05）;上述3种检测指标与GIST的美国国立卫生研究院（NIH）危险度分级、浸润转移、肿瘤直径和核分裂象有关（,=15．565、10．841、12．574、21．125,8．171、10．002、10．354、17．317,14．710、16．230、11．116、18．886,P〈0．05）;而与患者的性别、年龄、肿瘤原发部位无关（X2=0．059、0．071、5．070,0．468、0．074、1．665,0．231、0．370、3．712,P〉0．05）;进-步分析发现：上述3种检测指标阳性表达率随GISTNIH危险度分级的升高、出现浸润转移和肿瘤直径的增大而增加。86例患者随访率为91．9％（79／86）,3、5年生存率分别为82％和69％。中位随访时间为40．2个月（2—66个月）。HIF-1仪、ET．1和VEGF阳性患者的5年生存率分别为42％、45％和42％,显著低于阴性患者的64％、65％和63％（,=6．325,6．124,6．287,P〈0．05）。结论HIF-1d、ET-1和VEGF在GIST中的表达两两呈正相关,这3种检测指标提示肿瘤的恶性程度及患者预后。     

肝癌的微血管密度与血管内皮生长因子表达

目的 研究肝癌组织连续切片中微血管密度（ＭＶＤ）及血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）两者之间的关系。方法 肝癌组织标本５０例,采用抗人Ⅷ因子相关抗原、抗人ＶＥＧＦ进行免疫组织化学染色显示组织中微血管及ＶＥＧＦ阳性表达细胞。结果 ５０例肝癌组织中,ＶＥＧＦ表达阳性者２８例,阳性率为５６％。肝癌及癌旁正常肝组织ＭＶＤ测定结果显示,ＶＥＧＦ阳性表达组明显谪于阴性表达组,其差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论 肝     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子在肝硬化、肝癌组织中的相关性研究

目的　观察肝硬化、肝癌组织中缺氧诱导因子 (HIF) 1α的表达以及和血管内皮生长因子 (VEGF)相关性。方法　对 14 6例手术切除后的肝硬化和肝癌标本进行连续切片和免疫组织化学检测 ,比较同一组织细胞中HIF 1α表达的临床病理意义 ,并分析HIF 1α和VEGF表达的相关性。结果　HIF 1α普遍表达在肝硬化、肝癌组织中 ;较来源的肝硬化组织而言 ,肝癌组织中HIF 1α的表达显著下调 (P <0 .0 5 )并与组织分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,与癌栓形成、预后无关 (P >0 .0 5 ) ;HIF 1α与VEGF在肝硬化、肝癌组织中的表达显著相关 (r =0 .92 3 ,P <0 .0 5 )。结论　肝硬化、肝癌组织中VEGF的表达依赖于HIF 1α ;肝细胞癌变后缺氧程度减轻。     

肝细胞肝癌Survivin与血管内皮生长因子表达相关性及其临床意义

目的　探讨肝细胞肝癌 (HCC)Survivin与血管内皮生长因子 (VEGF)的表达相关性及其临床意义。方法　应用链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶免疫组织化学 (SP)法检测 5 6例HCC中Survivin与VEGF的表达。结果　HCC中 3 4例Survivin表达阳性 ,阳性率为 60 .7%。 3 5例VEGF表达阳性 ,阳性率为 62 .5 %。HCC组织Survivin与VEGF的表达阳性率高于癌旁组织及正常肝组织 (P <0 .0 5 )。Survivin的表达与HCC肿瘤镜下门静脉癌栓发生密切相关 (P <0 .0 5 )。VEGF的表达与HCC肿瘤大小、肿瘤镜下门静脉癌栓发生以及肿瘤病理分期密切相关 (P <0 .0 5 )。相关性检验示Survivin与VEGF之间有相关性 (χ2 =4.491,P <0 .0 5 )。结论　HCC中Survivin、VEGF蛋白表达均上调 ,共同参与HCC发生和发展 ,VEGF与Survivin有协同表达关系。     

Bcl-2转录抑制因子1在肝癌组织中的表达及意义

背景与目的:已有研究显示,Bcl-2转录抑制因子1(Bit1)在多种肿瘤中异常表达并在肿瘤进展中发挥重要作用,Bit1在肝细胞癌(HCC)中的表达水平及临床意义值得探讨。本研究通过检测Bit1在HCC组织中的表达,分析其与HCC患者临床病理特征及预后的关系,从而探讨Bit1在HCC中的临床意义。方法:采用q RT-PCR、Westernblot检测34例HCC患者手术切除癌组织及对应癌旁组织Bit1m RNA及蛋白表达情况,用免疫组化法检测组织芯片中90例HCC患者癌组织与对应癌旁组织Bit1蛋白表达情况并分析其表达与HCC患者临床病理参数及预后的关系。结果:q RT-PCR与Westernblot检测结果显示,与癌旁组织比较,Bit1在HCC组织中的m RNA及蛋白表达水平均明显上调(P0.05)。免疫组化结果显示,Bit1蛋白定位于细胞质,其在癌组织中的高表达率明显高于癌旁组织(P0.05),且Bit1在HCC组织中的表达与HCC患者肿瘤的复发及病理分级明显有关(均P0.05),Kaplan-Meier分析显示,Bit1蛋白高表达患者总生存率和无病生存率低于Bit1蛋白低表达患者,但差异均未达统计学意义(P=0.547、0.414)。结论:Bit1在HCC组织中高表达,且Bit1表达与肿瘤的复发及病理分级密切相关,提示Bit1可能是影响肿瘤进展的重要分子,其有望成为HCC患者个体化治疗靶点。     

肝癌组织中乙肝病毒x蛋白与缺氧诱导因子-1α的相关性

目的　探讨乙型肝炎病毒x蛋白 (HBx)与缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)在肝癌组织中表达的相关性及其在肝癌的发生和发展中的作用。方法　采用免疫组织化学染色方法检测 14 1例福马林固定、石蜡包埋的原发性肝癌组织标本HBx和HIF 1α表达 ;用Lipofectamine2 0 0 0将 pHA HBx质粒转染HepG2细胞 ,G418筛选阳性克隆 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测转染后细胞HBx基因和HIF 1α基因转录 ;免疫细胞化学染色检测转染细胞HIF 1α表达。结果　 14 1例肝癌组织标本中 ,HBx和HIF 1α免疫组织化学染色阳性者分别为 98例和 116例 ;转染HBx基因后的HepG2细胞RT PCR结果表明 ,HIF 1α基因呈阳性表达 ,而未转染细胞则为阴性 ;免疫细胞化学染色显示 ,转染后的细胞 75 %HIF 1α表达阳性 ,未转染细胞几乎未见阳性细胞。结论　肝癌组织中HBx与HIF 1α的表达明显相关 (P <0 .0 1) ,HBx可以明显上调肝癌组织中HIF 1α的表达 ,两者的共同表达对原发性肝癌细胞的生物学行为可能有重要影响。     

低氧诱导因子2和血管内皮生长因子在膀胱癌中的表达及意义

目的　探讨低氧诱导因子 2 (EPAS1/HIF 2α)和血管内皮生长因子 (VEGF)在膀胱移行细胞癌中的表达意义。　方法　应用免疫组织化学技术检测 6 0例膀胱移行细胞癌 [Ⅰ级 2 8例 ,Ⅱ级 12例 ,Ⅲ级 2 0例 ;浅表性膀胱癌 (Tis～T1) 2 9例 ,浸润性 (T2 ～T4) 31例 ]和 8例正常膀胱组织中EPAS1/HIF 2α和VEGF的表达情况 ,χ2 检验分析其表达与膀胱癌分级和分期间的关系。　结果　EPAS1/HIF 2α和VEGF在正常膀胱组织中不表达 ,而在膀胱癌组织表达较强。 6 0例膀胱癌标本中EPAS1/HIF 2α阳性表达 34例 ,阴性 2 6例。病理分级Ⅰ级标本阳性表达 4例 (14 .3% ) ,Ⅱ级 11例 (91.7% ) ,Ⅲ级 19例(95 .0 % )。浅表性癌中阳性 5例 (17.2 % ) ,浸润性癌中阳性 2 9例 (93.5 % )。EPAS1/HIF 2α与肿瘤的病理分级 (r =0 .86 2 ,P <0 .0 0 1)和临床分期 (r=0 .80 5 ,P <0 .0 0 1)密切相关。 6 0例膀胱癌标本中VEGF阳性表达 4 4例。病理分级Ⅰ级标本阳性表达 12例 (42 .8% ) ,Ⅱ级 12例、Ⅲ级 19例均阳性表达。浅表性膀胱癌中阳性表达 14例 (48.3% ) ,浸润性癌中阳性表达 30例 (96 .8% ) ,VEGF表达与肿瘤病理分级 (r=0 .84 1,P <0 .0 0 1)和临床分期 (r =0 .819,P <0 .0 0 1)密切相关。EPAS1/HIF 2α表达与VEGF表达密切相关 (r=     

趋化因子受体在肝癌细胞中的表达及其意义

目的 观察趋化因子受体(CCR1 CCR7 CXCB3 CXCR4)在人肝癌细胞系(Hep3BHepG2 HLE和HLF)的表达,并探讨其作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫组织化学、流式细胞仪测定趋化因子受体在肝癌细胞表面的表达,通过肝癌细胞Hep3B体外侵袭实验即重组大鼠巨噬细胞激动蛋白(CCL3)-1对Hep3B细胞穿透人工重组基底膜能力的影响来检测趋化因子受体在肝癌侵袭转移时所起的作用,并通过激光共聚焦显微镜观察趋化因子受体在肝癌细胞侵袭转移过程中的作用机制.结果 通过RT-PCR,流式细胞术可检测到CCR1 mR-NA及蛋白在肝癌细胞中表达,免疫组织化学显示CCR1在肝癌细胞包膜和胞质内都有表达.细胞侵袭实验提示Hep3B在CCL3的刺激下,实验组Hep-3B细胞通过基底膜的数量(213±12)多于对照组细胞通过基底膜的数量(102±11),差异有统计学意义(P<0.01).运用激光共聚焦检测到实验组胞内钙离子的浓度增加到.结论 肝癌细胞系(Hep3B HepG2 HLE和HLF)的表面的表达CCRl,且CCR1在肝癌细胞侵袭转移中发挥重要的作用,其作用机制与细胞内钙离子浓度有很关.