大鼠后肢缺血/再灌注后肝细胞损伤及乌司他丁的保护效应

缺血/再灌注后,体内血清炎性因子的水平、肝脏血清酶学指标、肝细胞结构发生改变,大鼠后肢缺血/再灌注后引起肝脏功能损伤及肝细胞结构的改变,应用乌司他丁后对此有保护效应。本文探讨乌司他丁对大鼠后肢缺血/再灌注后肝脏功能的保护作用及可能的机制。     

乌司他丁抗肝缺血/再灌注损伤作用机制的研究进展

肝缺血/再灌注损伤(HIRI)是肝胆外科常见的生理病理现象,多年来一直是研究的热点和难点。乌司他丁(UTI)因其在提高机体耐受手术刺激等方面的良好疗效而受到关注,并逐渐被运用到防治HIRI的研究领域。国内外大量的动物及临床试验表明,UTI可通过抑制水解酶、抑制细胞因子的产生和释放、抑制并清除氧自由基、改善微循环,阻断全身炎症反应综合征发生,以及减轻肝缺血/再灌注引起其他器官的损害等多个环节减轻HIRI。     

乌司他丁对大鼠肝脏缺血再灌注后多器官损伤的保护作用

目的 研究乌司他丁对大鼠肝脏缺血再灌注后多器官损伤的保护作用.方法 随机将Wistar大鼠分成假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和乌司他丁保护组(U组).采用阻断肝动脉、门静脉30min,恢复血流行再灌注制作肝热缺血动物模型.各组于再灌注1.5h、3h、6h和12h分别采血,测定DAO、ALT、AST、BUN和Cr水平.同步切取肝、肾、肺、小肠,切片后行苏木素-伊红染色(HE)比较病理形态学差异.TUNEL法测定细胞凋亡,免疫组化法测定Caspase-3和NF-κB表达,进行量化分析.结果 I/R组与S组比较,DAO、AST、ALT、BUN、Cr水平明显升高(P＜0.05);凋亡指数明显升高(P＜0.05);肝、肾、肺、小肠病理损伤严重;Caspase-3和NF-κB表达也相应增加(P＜0.05).U组与I/R组比较,各项指标均明显降低(P＜0.05).结论 乌司他丁对大鼠肝脏缺血再灌注后多器官损伤具有明显的保护作用.     

乌司他丁对急性下肢动脉缺血术后再灌注损伤的治疗体会

目的观察乌司他丁对急性下肢动脉缺血术后再灌注损伤的临床疗效.方法本组28例急性下肢动脉缺血,对照组16例,行球囊取栓,常规治疗;治疗组12例,除上述方法,加用乌司他丁.结果对照组：小腿筋膜切开5例,截肢4例,死亡2例.治疗组：小腿肌筋膜切开3例,截肢1例,无死亡病例.结论及时实施手术是预防再灌注损伤的关键,术后结合乌司他丁的综合治疗能有效缓解再灌注损伤的发生.     

乌司他丁对大鼠单肺移植后缺血再灌注损伤的作用

目的研究乌司他丁(UTI)在大鼠原位异体左肺移植模型中对供肺缺血再灌注损伤的治疗作用。方法16只接受原位异体左肺移植的SD大鼠随机分为2组,每组8只。对照组受体在供肺通气和再灌注开始时静脉注射生理盐水,UTI治疗组大鼠也在供肺通气和再灌注开始时接受UTI10 000U/kg,静脉注射。2h再灌注后取供肺肺静脉血测血气,处死动物,取部分供肺行组织学观察,其余部分保存于液氮中,测量供肺干湿重比,提取肺匀浆,测量髓过氧化物酶浓度(MPO),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA表达和IL-8浓度。结果在UTI组,供肺肺静脉血气示PaO2/FiO2显著高于对照组[(38.62±0.75)kPavs(31.57±1.85)kPa,P<0.05)],移植肺干湿重比[(4.74±0.28)vs(5.00±0.12),P<0.05]、ICAM-1mRNA表达和MPO[(0.63±0.23)vs(0.84±0.22),P<0.05]浓度均低于对照组,病理示治疗组组织损伤轻于对照组。但治疗组IL-8[(173.43±27.64)vs(76.22±12.42),P<0.001]浓度显著高于对照组。结论UTI对大鼠单肺移植模型中移植肺的缺血再灌注损伤有保护作用。     

乌司他丁对大鼠全脑缺血再灌注后NF-kB的影响

[目的]观察乌司他丁对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织核转录因子kB（NF-kB）的影响，探讨乌司他丁在全脑缺血再灌注损伤时对大脑皮质的保护作用。[方法]建立大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型，予乌司他丁治疗干预，采用免疫组化法洲定脑组织海马CA1区NF-kB含量。石蜡切片胍染色光镜下观察该区神经细胞形态。[结果]再灌注损伤后，脑组织NF-kB表达均增高，与假手术组比较差异显著（P〈0．01）；NF-kB表达于再灌注6h达到高峰，异常神经细胞数随再灌注时间的延长而逐渐增多。乌司他丁干预后，NF-kB的表达显著下降（P〈0．01），异常神经细胞数减少。[结论]①NF-kB参与了全脑缺血再灌注损伤的病理过程；②在脑复苏救治过程中，乌司他丁可通过抑制NF-kB的表达，抑制炎症反应而发挥脑保护作用。     

局部应用乌司他丁对肝脏缺血再灌注损伤保护效应的临床研究

目的探讨局部应用乌司他丁对肝脏缺血再灌注损伤保护效应的临床研究。方法采用随机、对照、前瞻性队列研究的方法,排除年龄、性别、诊断、术前肝功能、血糖、基础疾病的影响,选择40例患者,并随机分为4组对照实验,A组为对照组（盐水组）;B组为阻断前门静脉乌司他丁组;C组为复流后门静脉应用乌司他丁组;D组为手术后24小时乌司他丁组。采集术后1、2、3、5、7d所有入选患者共5个时点的中心静脉血,测定患者血清中ALT、AST、r-GGT、ALP、TBil、Scr、Bun的含量在该过程中的变化。结果 ALT：B组、C组、D组与A组比较在3d时点有显著性差异（P〈0.05）;AST：B组、C组与A组比较在3d时点有显著性差异（P〈0.05）;C组、D组与A组比较在7d时点有显著性差异（P〈0.05）;B组、C组、D组与A组比较在5d时点有非常显著性差异（P〈0.01）;r-GGT：A组2d上升,3d下降,5d、7d恢复术前水平,B组、C组、D组无明显增高趋势,与A组比较在2d时点有显著性差异（P〈0.05）;TBil：A组、B组、C组变化趋势一致,有增高趋势,B组、D组增高幅度较小,与A组比较在2d、3d、5d、7d时点均有显著性差异（P〈0.05）;Bun：与A组比较,B组的2d、5d时点,C组的7d时点,D组的7d时点有显著性差异（P〈0.05）,C组的5d时点,D组的3d、5d时点有非常显著性差异（P〈0.01）;Na＋-K＋-ATP酶活性：D组、C组、B组较A组Na＋-K＋-ATP酶活性均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,A组较B组Na＋-K＋-ATP酶活性均增高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论局部应用乌司他丁对肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用。     

乌司他丁联合17β雌二醇对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 探讨乌司他丁联合17β雌二醇预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将60只健康雄性SD大鼠随机等分为五组：假手术组（A组）、缺血再灌注组（B组）、乌司他丁预处理组（C组）、17β雌二醇预处理组（D组）和乌司他丁联合17β雌二醇预处理组（E组）.采用Pringle法阻断入肝血流30分钟,检测再灌注5小时后血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量并观察肝组织病理学改变.结果 B、C、D和E组血清中ALT、AST、LDH和TNF-α含量明显高于A组（P＜0.01）;C、D和E组明显低于B组（P＜0.01）;C组和D组明显高于E组（P＜0.05）;C组和D组之间无明显差别（P＞0.05）.肝组织病理学损害B组最重,C、D组次之,E组最轻.结论 乌司他丁、17β雌二醇预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用,两药联合应用效果更好.     

乌司他丁对大鼠肺脏热缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 探讨乌司他丁对大鼠肺脏热缺血再灌注损伤的保护作用并比较两种不同剂量的保护效果。方法 30只清洁级SD大鼠,随机分成3组,每组10只。单纯热缺血再灌注组（ischemia-reperfusion group,IR group）阻断左肺门1 h后,开放左肺门再灌注2 h,取左肺静脉血行血气分析后,处死大鼠。左肺上段测湿干比（Wet/Dry Ratio,W/D）,中段做组织切片,下段检测MPO浓度;乌司他丁常规剂量组（ulinastatin conventional dose group,UC group）阻断左肺门前,阴茎背静脉注入乌司他丁10 000 IU/kg,其余程序同IR组;乌司他丁大剂量组（ulinastatin high-dose group,UH group）阻断左肺门前,阴茎背静脉注入乌司他丁20 000 IU/kg,其余程序同IR组。结果 IR组与UH组比较,血气分析中肺静脉血的氧分压（PO₂）与W/D的差异均有统计学意义［（109.5±18.3）mmHg vs.（128.5±17.7）mmHg,（5.30±0.13）vs.（5.08±0.25）,P<0.05］;MPO浓度检测结果,IR组、UC组与UH每两组间的差异均存在统计学意义［（57.36±10.51）ng/mL,（45.74±8.13）ng/mL与（28.30±6.28）ng/mL,P<0.05］;组织切片可见IR组较UC组和UH组炎性细胞浸润明显。结论 乌司他丁对大鼠肺脏的热缺血再灌注损伤有一定的保护作用,并且存在剂量相关性。     

乌司他丁对肝硬化患者腹腔镜术后的肝功能影响

目的 探讨乌司他丁对肝硬化患者腹腔镜治疗后的肝脏保护作用。方法 回顾分析60例肝硬化合并胆石症患者资料，随机分为治疗组和对照组，观察术前1d与术后第1、7天患者肝功能的变化及术后并发症。结果 治疗组术后肝功能的改善明显优于对照组，并发症的发生率明显亦低于对照组。结论 乌司他丁可保护肝硬化患者腹腔镜手术后肝功能，可促进肝胆手术后的恢复，减少并发症的发生。     

人工生物膜对大鼠肠缺血再灌注肠道及肝脏损伤的保护作用

目的 探讨人工生物膜对大鼠肠缺血再灌注所致小肠及肝脏损伤的保护作用。方法 选用健康Wistar大鼠32只,随机分成假手术对照组、缺血灌注组（I／R）、缺血前给药组和再灌注时给药组。夹闭大鼠肠系膜上动脉（SMA）60min造成缺血,再灌2h后分别取出小肠、肝组织制成匀浆,测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH－PX）、丙二醛（MDA）、Ca^2 -Mg^2 -ATPase的含量。结果 缺血前给药组和再灌注时给药组小肠、肝组织MDA含量明显低于缺血再灌注组（P＜0.01),SOD、GSH－PX、Ca^2 -Mg^2 -ATPase的含量均明显高于缺血再灌注组（P＜0.01),而缺血前给药组和再灌注时给药组各项指标比较无明显差异（P＞0.05)。结论 人工生物膜能减少大鼠脂质过氧化,改善ATPase功能,减轻大鼠肠缺血再灌注所致小肠及肝损伤。     

乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用。方法SD大鼠72只随机分为假手术组、缺血再灌注组和乌司他丁组。分别检测胰腺缺血再灌注0h、6h、12h及24h血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）的变化。结果缺血再灌注组的各时点上TNF-α含量明显高于假手术组和乌司他丁组（P〈0．05）；缺血再灌注组和乌司他丁组在6h、12h、24h的IL-1β含量较假手术组明显增加（P〈0．05），但乌司他丁组增高水平明显低于缺血再灌注组（P〈0．05）。结论乌司他丁可以抑制大鼠胰腺缺血再灌注损伤所致的急性炎性反应，对大鼠胰腺缺血再灌注损伤有保护作用。     

乌司他丁对大鼠肝脏冷缺血-再灌注肺损伤的影响

目的 研究乌司他丁（UTI）预处理对肝缺血-再灌注肺损伤（IRI）的影响.方法 将SPF级SD大鼠30只随机分为3组：假手术组（S组,n=10）大鼠仅进行单纯开关腹手术,游离相应血管;模型对照组（M组,n=10）大鼠采用肝脏冷缺血-再灌注模型手术,不给予任何干预措施;UTI组（U组,n=10）大鼠采用肝脏冷缺血-再灌注模型,在切皮时经尾静脉给予UTI,10万U/kg.各组于缺血再灌注后12 h收集血清和肺组织标本,利用ELISA检测TNF-α和IL-6表达水平;切取肺组织,测定肺组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量,光学显微镜下观察肺组织病理学结果.结果 与S组相比,M组和U组大鼠血清TNF-α和IL-6浓度及肺组织MDA含量均升高（P＜0.05）,肺组织SOD活性均降低（P＜0.05）;与M组相比,U组血清TNF-α和IL-6浓度及肺组织MDA的含量均降低（P＜0.05）,肺组织SOD活性均升高（P＜0.05）.结论 UTI预处理可明显减轻大鼠肝脏冷缺血-再灌注后肺损伤;肝脏移植.     

乌司他丁在肝动脉化疗栓塞中保护肝功能的疗效观察

目的：探讨乌司他丁对肝癌介入治疗后肝功能的保护作用。方法：96例原发性肝癌患者随机分为两组,对照组给予常规护肝治疗,治疗组加用乌司他丁治疗1周,20万u/日,监测两组肝功能变化情况。结果：两组病例治疗后均出现肝功能损害,术后d3治疗组ALT、AST、GGT、TB il上升幅度较对照组低,术后1周治疗组ALT、AST、TB il恢复至术前水平（P〈0.05）。结论：乌司他丁在肝癌介入治疗中有显著的护肝作用。     

雷竹笋汁对肝损伤大鼠肝功能的改善作用

目的 探讨雷竹笋汁对肝损伤的防治作用。方法 采用四氯化碳（CCl4）制备肝损伤大鼠模型，以两种不同剂量的雷竹笋汁（436．70mg／kg和205．50mg／kg）灌胃9周，并另取健康大鼠作正常对照。检测各组大鼠血清丙氨酸氪基转移酶（ALT）、天冬氪酸氨基转移酶（AST）和超氧化物歧化酶（SOD）活性，丙二醛（MDA）、血糖（Glu）、甘油三酯（TG）、总胆红素（BiD、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）的含量，计算白蛋白／球蛋白（A／G）比值。结果 大剂量雷竹笋汁能显著降低肝损伤大鼠血清札T、AST活性，升高SOD活性，降低MDA和Bil含量，升高Glu、Alb含量和A／G比值，且其降低肝损伤大鼠血清ALT、MDA和升高SOD、Glu、Alb的作用随着剂量增加而增强。结论 雷竹笋汁对CCl4肝损傀大鼠肝功能有明显的改善作用。     

大鼠创伤性脑损伤后肝肾功能的变化

目的通过测定创伤性脑损伤后大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)含量变化,观察脑创伤对肝、肾功能的影响。方法采用自由落体打击装置制备大鼠创伤性脑损伤模型,分别于伤后12小时和24小时在股静脉取血测定血清ALT、AST、BUN和Cr含量。结果与假手术组相比,脑损伤组在损伤后12小时、24小时ALT和AST均显著升高;BUN和Cr在脑损伤后24h显著升高。结论创伤性脑损伤发生后会出现肝肾功能的障碍。     

乌司他丁对重度脓毒症患者心功能的影响

目的探讨乌司他丁对重度脓毒症患者心功能的影响。方法将40例重度脓毒症患者,随机分为对照组和治疗组,每组20例,对照组给予脓毒症一般治疗,治疗组在对照组基础上加用乌司他丁,30万单位,静推,每8 h一次,连用5 d。治疗组和对照组分别在入ICU后和治疗后第5天抽静脉血,测心肌钙蛋白(cTnI)、B-型钠尿肽前体(NT-proB-NP)、白介素-6(IL-6)等指标变化,抽动脉血测乳酸(Lac)的变化,同时记录两组患者心指数(CI)、急性生理和慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)的变化。结果治疗组治疗第5天后各项检测指标与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),两组APACHEⅡ评分均较治疗前下降,且治疗5 d后治疗组较对照组下降明显。结论乌司他丁对重度脓毒症患者心功能具有保护作用,从而能够改善重度脓毒症患者的预后。