LC-MS/MS法测定人血浆中阿奇霉素的含量

[目的]建立一种简便、快速的液相-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人血浆中的阿奇霉素浓度。[方法]采用API3000型LC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(100×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70︰30︰0.001,用氨水调pH=3.5),流速0.4ml·min-1。样品在碱性条件下用二氯甲烷提取浓集后进样,MRM模式检测(离子对794.5/591.4),莫沙比利(422.1/198.0)为内标,按内标法定量。[结果]阿奇霉素和内标的保留时间分别为2.8、3.6min,标准曲线在1～1024ng·ml-1范围内线性良好,最低定量限1ng·ml-1,日内、日间RSD分别小于6.6%和9.1%,方法回收率96.4%～108.9%,预处理回收率66.3～78.2%。[结论]本法具有快速简便、灵敏准确等特点,与已有文献报道相比有更好的灵敏度和特异性,适用于血浆中阿奇霉素含量测定及药代动力学、生物利用度研究用。     

LC-MS/MS法测定人血浆中格列吡嗪的含量

目的建立一种准确、灵敏的高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定格列吡嗪血药浓度。方法采用API3000型LC-MS/MS液质联用系统,Phenomenex C18分析柱(50 mm×3.0 mm,5μm),流动相为甲醇︰水︰甲酸(62︰38︰0.025),流速为0.2 ml/min,样品在酸性条件下用二氯甲烷提取浓集后进样,采用电喷雾离子源(ESI),正离子MRM模式测定,卡马西平作为内标。结果检测格列吡嗪在1~1 000μg/L浓度范围内线性关系良好,定量限为1μg/L,批内和批间精密度分别小于4.47%和6.00%,方法回收率在89.86%~94.50%。结论本法具有快速简便、灵敏、准确等特点,适用于血浆中格列吡嗪含量测定及临床药代动力学研究。     

大鼠血浆中阿托品的LC-M/SMS测定

目的:建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的阿托品。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白提取。采用C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸(60:40,v/v)为流动相,氯氮平为内标,采用电喷雾电离源(ESI),选择正离子多离子反应监测(MRM),质核比(m/z)为290.0→123.9(阿托品)和m/z 327.1→269.9(氯氮平)。结果:阿托品在5~1000 ng/ml浓度范围内线性关系良好。方法回收率大于97%,提取回收率大于85%,日内和日间RSD小于8%。结论:方法简便、快速、准确,可满足临床药动学研究的要求。     

血清中16种有机磷农药GC/MS/MS检测方法的研究

目的应用GC/MS/MS建立测定血清中敌敌畏、氧化乐果等16种有机磷农药的分析方法。方法首先做GC/MS全扫描分析,确定16种化合物的母离子,然后比较不同碰撞诱导裂解(CID)电压时二级质谱中特征离子的峰面积大小以及信噪比,对CID电压进行优化,从而确定各化合物的色谱质谱条件。样品用Oasis HLB小柱进行固相萃取后,用乙酸乙酯洗脱,浓缩后再用乙酸乙酯定容后上机测定。结果在0～1000ng/ml范围内,16种化合物的线性相关系数均大于0.995,加标回收率在75%～129%之间,RSD<10%;日内和日间相对标准偏差小于15%(n=6)。除敌敌畏的检测限为55ng/ml外,其余待测物均检出限均小于2ng/ml。结论该方法灵敏度高、准确性好,适合于血清中有机磷农药的分析测定。     

GC/MS外标法测定食品中18种有机磷农残的实验研究

目的　研究建立食品中18种有机磷农残的GC/MS同时测定方法。方法　采用GC/MS通过标准试验确定全扫描和检测离子扫描的测定条件,通过样品及样品及样品试验验证改进的样品前处理过程。结果　在实际样品含量的测定范围内各目标化合物标准曲线相关系数在0.9902-1.0000之间;方法定量检出下限(S/N=10,n=5)在:6.61×10ˉ3mg/kg~4.78×10ˉ2mg/kg之间;加标样品重复性条件下测定两次,测定结果的绝对误差小于算术平均值的5.2%-13.5%,回收率在76.3%--89.7%之间。结论　可代替现有国标气相色谱法进行实际样品测定,结果证实定性定量准确性优于气相色谱法。     

LC-M/SMS法测定大鼠血浆中的6,7-二甲氧基香豆素

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱方法测定大鼠血浆中6,7-二甲氧基香豆素浓度。方法:40μl血浆样品中药物经含内标的甲醇溶液蛋白沉淀,于12000 rpm离心取上清液稀释后,以乙腈-0.1%甲酸10 mmol/L甲酸铵溶液为流动相,梯度洗脱方式分离。使用电喷雾电离源以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:确定丰度最高的2对离子m/z 207.2→m/z 107.0(6,7-二甲氧基香豆素)和m/z 147.0→m/z 91.0(香豆素),用于定性定量分析。该方法在0.5 ng/ml~2500 ng/ml的浓度范围内线性良好,相关系数r=0.9951。结论:本文首次建立了简便、快速、灵敏、专属的测定大鼠血浆中6,7-二甲氧基香豆素的LC-MS/MS分析方法。     

UPLC-MS/MS法同时测定蔬菜中11种有机磷和10种新烟碱类杀虫剂

目的 建立同时测定蔬菜中11种有机磷和10种新烟碱类杀虫剂的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)。方法 样品用乙腈提取,经无水硫酸镁、PSA和C₁₈净化,采用HSS T3色谱柱分离。在正离子多反应监测模式下检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果 21种杀虫剂在0.50～100 ng/ml范围内相关系数大于0.999。21种杀虫剂的平均回收率为76.0%～119.3%,相对标准偏差小于10%,方法检出限为0.02～1.7μg/kg,定量限为0.06～5.7μg/kg。对从市场采集的76份蔬菜进行检测,在26份蔬菜中检出了9种目标组分,浓度在0.012～3.16 mg/kg之间。结论 该方法简便、灵敏、准确,适用于蔬菜中有机磷和新烟碱类杀虫剂的检测。     

液相色谱串联质谱法定量检测血清中8种有机磷农药

目的建立了液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)法测定血清中8种有机磷农药含量的方法。方法血清样品经乙酸乙酯液液萃取,以pH3.5的乙酸铵缓冲溶液,甲醇和水为流动相混合梯度洗脱,滤液经C185μm(2.1 mm#150mm柱)分离,经在线电喷雾离子源(ESI)正离子化后,采用多反应离子监测方式(MRM)选择离子对测定。结果目标化合物的线性范围为0～1000ng/ml,8种化合物相关系数均大于0.990,加标回收率为95%～129%,RSD<7.9%;日内日间相对标准偏差小于12%(n=6)。结论 LC-MS-MS方法高效、准确,特异性强,样品处理简单,可准确定量血清中有机磷农药。     

血浆置换术在急性重症有机磷中毒治疗中的应用

目的探讨治疗性血浆置换术(Therapeutic Plasma exchange,TPE)在急性重症有机磷中毒中的作用。方法对常规治疗中毒症状缓解不明显的11例急性重症有机磷中毒患者进行TPE治疗,观察患者TPE前后患者部分生化指标变化,患者神志开始恢复时间及完全恢复时间。结果患者TPE治疗后ChE、CK、CK-MB、LDH指标均较TPE治疗前有显著改善(P<0.01),ALT、AST、BUN、ALB有明显改善(P<0.05)。结论用TPE治疗急性重症有机磷中毒疗效显著,能及时、有效去除毒素,补充有活力的胆碱脂酶及血浆有效成分,改善病人症状。     

有机磷农药中毒患者血浆中cAMP,cGMP浓度的变化

环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸乌苷(cGMP)为人体内重要的生物活性物质。其含量的高低与许多疾病密切相关。有关有机磷农药中毒患者血浆中环核苷酸浓度的变化尚未见有报道,为此,我们于1990年3月对某农药厂有机磷农药中毒患者进行了血浆中环核苷酸浓度的测定,现将结果报道如下:     

液相色谱-串联质谱法同时测定化妆品中的甲基异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮

目的:建立超高效液相色谱-电喷雾离子化-三重四极杆串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)同时测定化妆品中的甲基异噻唑啉酮(MIT)和甲基氯异噻唑啉酮(CIT)。方法:样品以甲醇为溶剂,涡旋混匀后超声提取,12000 rpm、4℃离心10 min,上清液再经0.22μm微孔滤膜滤过,滤液经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(10 cm×2.1 mm,1.7μm)分离后,以正离子、多反应监测(MRM)模式进行定性定量分析。结果:MIT和CIT的线性范围分别为32.0 ng/ml～800 ng/ml和47.6 ng/ml～952 ng/ml,相关系数均大于0.995,回收率均在85%～115%之间,精密度均小于12%。结论:该方法灵敏、专属、准确,可用于化妆品中MIT和CIT的检测。     

液相色谱串联质谱法定量检测尿中有机磷农药代谢物

目的建立了液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定尿中二乙基磷酸酯、二硫代磷酸二甲酯、二硫代磷酸二乙酯、4-硝基酚、3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素和TCPY 6种有机磷农药代谢物含量的方法。方法尿样中加入酶解液,37℃水浴4h后经oasis HLB柱固相萃取,用甲醇洗脱后离心浓缩,乙腈定容;以乙酸铵做缓冲溶液,乙腈和水为流动相等梯度洗脱,经Waters Symmetry C185μm(2.1mm×150mmcolumn)分离,经在线电喷雾离子源(ESI)负离子化后,采用多反应离子监测方式(MRM)选择离子对测定。结果目标化合物的线性范围为0～1000ng/ml,6种化合物的相关系数有5种大于0.990,加标回收率在79%～130%之间,RSD<8.2%;日内、日间相对标准偏差小于15%(n=6)。结论该方法样品采集简单,特异性强,能准确、高效地检测尿样中有机磷农药代谢物。     

LC-M/SMS法测定人血清中西布曲明的浓度及其临床应用

目的:利用高效液相色谱-质谱联用仪(LC-MS/MS)建立血清中西布曲明的快速定性定量分析方法,为临床中毒患者的快速诊治提供依据。方法:选用Sh im-pack XR-ODS色谱柱,以乙腈-10 mmol.L-1醋酸铵为流动相,采用等度洗脱进行分离,流速:0.3 m l.m in-1;柱温:40℃;进样量:10μl。样品用乙腈进行蛋白沉淀后进样,选用3200型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。结果:西布曲明的线性范围为0.1 ng.m l-1~1000 ng.m l-1,定量下限和最低检测限分别为0.5 ng.m l-1和0.05 ng.m l-1。日内精密度RSD为3.6%,日间精密度RSD为4.0%。结论:本研究所建立的方法快速、灵敏,重复性好,适用于西布曲明中毒患者血液标本的快速定性定量检测。     

气相色谱法同时测定叶菜中16种有机磷农药残留量

目的:建立气相色谱法测定叶类蔬菜中16种有机磷农药残留量的分析方法。方法:蔬菜捣碎用乙腈提取,盐析,用氮吹仪吹干,丙酮溶解定容,采用HP-5毛细管柱分离,FPD检测器测定。结果:16种有机磷类农药能较好地分离,峰面积与其浓度均具有良好线性,低水平加标回收率除了敌敌畏在44.0%～58.8%之间,其余均在62.8%～128.8%之间,高水平加标回收率除了敌敌畏在40.6%～59.2%之间,其余均在69.3%～123.3%之间,相对标准偏差均小于20%。结论:本方法简便、快速、灵敏、准确,可以满足叶类蔬菜中有机磷类农药检测的需要。     

LC-MS/MS法分析海洛因吸食者毛发中的阿片类化合物

目的评价海洛因吸食者毛发样本的洗涤过程,并对酶解提取方法和匀碎提取方法进行比较。方法毛发样品共洗涤3.15小时后选择一种温和的酶解方法(pH6.6)和一种缓冲液提取方法(48℃、18小时),使用混合型吸附柱(MCX Oasis)进行固相萃取,通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,检测海洛因、6-MAM、乙酰可待因、可待因和吗啡等化合物的含量。结果在酶解的毛发样本中,海洛因在总吗啡中的含量是21.82%,吗啡/6-MAM的值为0.9875。在匀碎提取方法中,吗啡/6-MAM的值为0.3948。结论洗涤过程不能有效地将从外界渗透到毛发中的污染物去除。     

高效液相色谱-串联质谱联用法测定饮用水中5种微囊藻毒素

目的建立液相色谱-串联质谱法同时测定饮用水中5种微囊藻毒素(MC-LR、MC-LW、MC-RR、MC-LF、MC-YR)检测的方法。方法采用直接进样方式,用高效液相色谱-串联质谱(HPLC/MS/MS)测定饮用水和水源水中的微囊藻毒素。水样经0.22μm微孔滤膜过滤,采用HPLC/MS/MS电喷雾电离阳离子(ESI+),多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。结果方法的线性范围为0.5～50.0μg/L,线性相关系数0.9994～1.0000,检出限0.06～0.08μg/L;高低两个水平的平均加标回收率分别为91.2%～102%和93.0%～99.0%;相对标准偏差(RSD)2.11%～3.264%;日内重复取样测定的RSD≤3.26%,日间重复取样测定的RSD≤4.36%。结论该方法可用于测定水中5种微囊藻毒素,方法操作简单、干扰少、快速、准确可靠,检测方法的检出限、精密度和加标回收率符合国家生活饮用水标准检验方法对质量控制的要求。     

液相色谱-质谱/质谱联用技术在氧化应激指标测定中的应用

目的机体的氧化应激状态与许多疾病有关,科研和临床上对氧化应激非常感兴趣,但用于氧化应激标志物定量分析的方法还有很多局限性。近年来,液相色谱-质谱/质谱联用(LC-MS/MS)成为一些氧化应激标志物的首选定量测量方法。与其他方法相比LC-MS/MS灵敏度高、特异性强,一次可以测定多个指标。LC-MS/MS的灵敏度范围是fg-pg水平。本文综述了LC-MS/MS在氧化应激指标定量检测中的应用,讨论了异构前列腺素(Iso-PGs)、蛋白质和氨基酸以及DNA氧化损伤标志物的定量分析进展。