中缝核miR-16与5-羟色胺转运体在失眠模型大鼠中的表达

目的研究中缝核miR-16以及5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)的表达在失眠症发病机制中的作用。方法 20只雌性SD大鼠,随机分成对照组和失眠组。失眠组大鼠接受腹腔注射对氯苯丙氨酸(pchlorophenalanine,PCPA)350 mg/(kg·d),连续3 d,对照组给予等量生理盐水。取中缝核组织,测定其miR-16、SERT m RNA与SERT蛋白水平,进行注射前后的组间比较。结果失眠组大鼠中缝核miR-16相对水平(1.23±0.33)与对照组(0.71±0.25)比较明显升高,差异具有统计学意义(t=6.68,P=0.000);而失眠组SERT mRNA相对水平(0.68±0.14)以及SERT蛋白相对水平(0.28±0.11)显著低于相应的对照组(1.06±0.30,0.57±0.15)(t=3.94,P=0.004;t=4.69,P=0.002)。结论中缝核miR-16以及SERT的异常表达,可能参与了失眠症的发病机制。     

miR-16对神经病理性疼痛模型大鼠脑干中缝核SERT表达作用的研究

目的 通过研究miR-16对神经病理性疼痛模型大鼠脑干中缝核中5羟色胺转运体(SERT)表达的作用,探讨miR-16通过作用于5羟色胺(5HT)再摄取影响神经病理性疼痛的可能机制。 方法 选用雄性6周龄SD大鼠40只,采用慢性坐骨神经结扎法(chronic constriction injury,CCI)制备大鼠病理性神经痛模型。将大鼠随机分为4组:假手术组(S组),仅分离坐骨神经鞘不结扎;坐骨神经损伤组(CCI组),松弛结扎坐骨神经;坐骨神经损伤+氟西汀组(CCI/F组);对照组(C组),不做任何处理,每组10只。术前1 d及术后第1、3、5、7、14天测定机械缩足痛阈值(MWT);14 d后处死大鼠,取大鼠脑干中缝核组织,通过实时定量PCR法(qRT-PCR)检测miR-16表达情况;western blot检测SERT蛋白表达情况;组织匀浆后,ELISA法检测皮质组织内5羟色胺(5HT)浓度。 结果 与术前相比,CCI组大鼠第1天MWT即出现下降,与S组相比差异具有统计学意义(t=5.167,P<0.001),CCI/F组与S组相比MWT显著升高,差异具有统计学意义(t=4.664,P<0.001),而S组及C组未见明显变化。qRT-PCR实验显示,与S组相比CCI组大鼠脑干中缝核组织匀浆中内源性miR-16表达显著降低(t=11.840,P<0.001),CCI/F组升高(t=28.640,P<0.001);western blot显示CCI组大鼠脑干中缝核SERT蛋白表达升高,CCI/F组SERT表达降低;ELISA实验显示CCI组皮质中5HT水平较S组显著降低(t=17.920,P<0.001),而CCI/F组5HT水平升高(t=7.232,P=0.002),差异均具有统计学意义。 结论 miR-16能够通过抑制脑干中缝核SERT表达,减少5HT再摄取影响病理性神经痛的维持。      

抑郁模型大鼠不同部位miR-16表达及其与5-羟色胺转运体的关联性研究

目的 研究miR-16在慢性不可预知温和应激抑郁症模型大鼠神经系统不同部位的表达及其与5-羟色胺(5-HT)转运体的关联性。 方法 对照组和慢性不可预知温和应激抑郁模型组大鼠各10只,模型组大鼠接受21天的不可预知温和应激刺激,对照组大鼠正常饲养。两组大鼠麻醉后收集脑脊液,测定miR-16。然后断头处死,分离前额叶皮质、中缝核、海马,测定miR-16和5-HT转运体蛋白。 结果 模型组大鼠脑脊液和中缝核的miR-16相对表达量低于对照组,中缝核miR-16与5-HT胺转运体呈负相关;而前额叶皮质和海马中的miR-16、5-HT转运体分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论 中缝核miR-16可能通过调节5-HT转运体的表达,参与抑郁症的病理过程,脑脊液miR-16亦可能与抑郁症相关。     

母爱剥夺诱导的抑郁大鼠海马miR-16的表达

目的:研究母爱剥夺是否诱发成年大鼠抑郁样行为表现,miR-16是否参与母爱剥夺诱发抑郁的病理过程。方法:在SD大鼠出生后第1天按窝随机分为母爱剥夺组(n=17)和正常对照组(n=17)。母爱剥夺组大鼠在出生后第1至14天每天接受6 h的母爱剥夺应激,正常对照组大鼠不接受任何实验处理。在大鼠13周龄时采用强迫游泳和糖水偏爱实验评定大鼠的抑郁水平;采用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠海马miR-16的表达水平。结果:在强迫游泳实验中,母爱剥夺组大鼠的被动漂浮时间显著长于对照组大鼠,糖水偏爱率显著低于对照组(P<0.05);与对照组比较,母爱剥夺组大鼠海马内miR-16的表达水平显著增加(P<0.05),miR-16表达水平与抑郁样行为水平显著相关(P<0.05)。结论:母爱剥夺能使大鼠成年后表现出抑郁样行为,海马内miR-16表达水平升高,miR-16可能参与母爱剥夺诱发大鼠抑郁样行为的病理过程。     

血清miR-711、miR-203对阿尔茨海默病的诊断效能评估

目的 探讨miR-711、miR-203在阿尔茨海默病(AD)患者血清中的表达水平及其临床意义。方法 收集18例正常对照(NC)、18例遗忘型轻度认知障碍(aMCI)和18例阿尔茨海默病(ADD)患者的血清学标本,采用荧光定量PCR技术检测血清中miR-711和miR-203的表达水平,分析两者与MoCA评分的相关性,并应用ROC曲线和Logistic回归模型评价血清miR-711及miR-203在aMCI和ADD中的诊断价值。结果 血清miR-711和miR-203在ADD患者中表达均明显增高(P=0.000);aMCI组血清miR-711表达与正常对照组比较有明显增高(P＜0.01)、与ADD组比较差异无统计学意义(P＞0.05);aMCI组血清miR-203表达与ADD组比较是减低的(P＜0.01)、与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。相关性分析显示血清miR-711和miR-203表达与MoCA评分均呈负相关(r=-0.52,P=0.000;r=-0.49,P=0.000)。血清miR-711用于诊断aMCI时,AUC为0.812;血清miR-203用于区分aMCI及ADD时,AUC为0.718;血清 miR-711及miR-203用于诊断ADD时,AUC分别为0.875、0.889,两者联合检测ADD时,AUC为0.948。结论 血清miR-711和miR-203可能成为诊断AD的潜在生物学标志物。     

免疫性血小板减少症患者外周血miR-326与IL-17的表达及其临床价值

目的探讨miR-326在免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血单个核细胞中的表达及与血浆中IL-17水平的关联性,评估miR-326在疾病早期诊断、疾病严重程度、治疗以及预后等的临床价值。方法选取2017年4月至2019年4月在我院住院的ITP患者共35例健康对照组30例,检测研究对象miR-326在外周血单个核细胞中表达量及血浆中IL-17的水平。结果 ITP患者外周血单个核细胞miR-326的表达水平与健康对照组相比升高(0.41±0.20 vs 0.18±0.40)(P0.05),血浆中IL-17水平与健康对照组相比升高(9.31±1.24 ng/L vs 6.89±2.36 ng/L)(P0.05),ITP患者接受糖激素治疗有效组治疗后miR-326在外周血单个核细胞中表达量(0.21±0.31 vs 0.43±0.19)(P0.05)及血浆中IL-17水平下降(6.74±1.21 vs 9.78±2.03)(P0.05)。结论 ITP患者外周血单个核细胞miR-326高表达,并且与血浆IL-17水平呈正相关,与外周血血小板水平呈负相关,miR-326可能与ITP的发生和发展相关。     

miR-124对胃癌细胞的生物学功能影响

目的:探讨miR-124对胃癌细胞增殖、凋亡与迁移的影响及其相关调控机制。方法:收集确诊为胃癌的癌组织和癌旁组织42组,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测癌和癌旁组织以及正常胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞株BGC-823、MGC-803、SGC-7901、AGS中miR-124的相对表达量;在胃癌细胞株BGC-823中过表达miR-124,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移,Western blot检测过表达miR-124前后磷酸化PI3K/AKT的变化。结果:胃癌组织中miR-124水平低于癌旁组织(0.70±0.15 vs. 1.14±0.27,t=10.14,P=0.000),胃癌细胞株中miR-124水平低于GES-1(F=38.012,P=0.000);过表达miR-124后细胞BGC-823的增殖与迁移能力均减低(0.94±0.09 vs. 0.62±0.06,t=6.615,P=0.000;152.33±14.05 vs. 53.67±12.58,t=9.061,P=0.001),而细胞凋亡率增加(2.10±0.56 vs. 8.30±0.31,t=16.777,P=0.000);过表达miR-124后p-AKT、p-PI3K蛋白表达均出现下调(118.90±10.51 vs. 34.87±4.23,t=12.847,P=0.000;158.53±10.94 vs. 71.07±4.51,t=12.802,P=0.000)。结论:miR-124在胃癌中低表达;miR-124抑制胃癌细胞的增殖、迁移,促进胃癌细胞凋亡,可能是靶向PI3K/AKT信号通路实现的。     

miR-200a和miR-155在狼疮性肾炎患者肾组织中的表达及其作用机制探讨

目的：探讨miR-200a及miR-155在狼疮性肾炎(LN)患者肾组织中的表达及其在LN发病机制中的作用。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应测定30例LN患者和15例健康对照组肾组织中miR-200a及miR-155的表达水平。结果 LN患者肾组织中miR-155的表达水平高于健康对照组,miR-200a的表达水平低于健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。LN患者肾组织中miR-200a的表达水平与狼疮评分呈负相关(r=-0.391,P=0.032),miR-200a的表达水平与尿蛋白呈负相关(r=-0.395,P=0.034)。miR-155与狼疮评分呈正相关(r=0.593,P=0.001),miR-155表达水平与尿蛋白呈正相关(r=0.375,P=0.045),miR-155的表达水平与eGFR呈负相关（r=-0.59,P=0.001）。miR-200a的表达水平与eGFR之间无明显相关性(r=0.22,P=0.242)。结论肾组织中miR-155和miR-200a在狼疮性肾炎患者与健康对照组之间的表达水平有差异,且它们的表达水平与蛋白尿、肾功能及狼疮评分均相关。提示LN患者组织中miR-200a与miR-155的表达与LN患者肾功能恶化和狼疮疾病活动程度密切相关,可作为预测LN进展的重要标志物。     

急性冠状动脉综合征患者血清miR-27a、miR-34a表达及其临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清miR-27a、miR-34a表达及其与冠状动脉病变程度的相关性。方法选取2016年7月至2018年2月在解放军总医院第四医学中心进行冠状动脉造影术的患者为研究对象,其中ACS患者86例(ACS组)、稳定型心绞痛(SAP)患者70例(SAP组),另外同期选取72例体检健康志愿者为对照组。根据SYNTAX评分标准将ACS患者分为轻度病变组(22例)、中度病变组(27例)、重度病变组(37例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组血清miR-27a、miR-34a表达水平,并采用Pearson法分析ACS患者血清miR-27a、miR-34a与ACS患者临床指标的相关性。采用Logistic回归分析ACS患者冠状动脉病变程度的影响因素。结果与对照组相比,SAP组与ACS组患者血清miR-27a、miR-34a表达水平升高(P <0. 05),且ACS组高于SAP组(P <0. 05); Pearson分析显示miR-27a、miR-34a表达呈正相关(r=0. 492,P <0. 05),且均与总胆固醇、糖化血红蛋白、高敏C反应蛋白呈正相关(r=0. 413,0. 536,0. 415; r=0. 276,0. 395,0. 274,P <0. 05),而与高密度脂蛋白胆固醇呈负相关(r=-0. 560,-0. 372,P <0. 05);与轻度病变组相比,重度病变组与中度病变组ACS患者血清miR-27a、miR-34a表达水平显著升高(2. 23±0. 37、1. 85±0. 62比1. 22±0. 20; 2. 20±0. 37、1. 61±0. 27比1. 35±0. 23,P <0. 05),且重度病变组显著高于中度病变组(P <0. 05); Logistic回归分析结果显示,miR-27a(OR=2. 225,95%CI 1. 812～2. 732,P=0. 031)、miR-34a(OR=2. 072,95%CI 1. 629～2. 635,P=0. 022)均为ACS患者冠状脉病变的影响因素。结论 ACS患者血清miR-27a、miR-34a呈高表达,并与冠状动脉病变程度密切相关,且均可作为临床预测冠状动脉病变的重要指标。     

病毒性心肌炎患儿血清miR-133及miR-155水平的表达及临床意义

目的观察病毒性心肌炎(VMC)患儿血清微小RNA-133(miR-133)和微小RNA-155(miR-155)的表达及临床意义。方法选取2016年2月—2018年6月成都医学院第一附属医院儿科收治VMC患儿97例,根据患儿左心室射血分数(LVEF)和肌钙蛋白I(cTnI)分为轻度VMC亚组(56例)和重度VMC亚组(41例)。另选择同期于医院进行健康体检的健康儿童40例作为健康对照组。比较3组儿童血清miR-133、miR-155表达水平及心肌损伤指标[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、cTnI、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、可溶性凋亡相关因子配体(sFasL)]、炎性因子[白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)、白介素-21(IL-21)]、免疫功能指标(CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)水平,并分析VMC患儿血清miR-133和miR-155的表达与各指标间的相关性。结果与健康对照组比较,轻度VMC亚组、重度VMC亚组CD8~+及血清CK-MB、cTnI、sFasL、Caspase-3、IL-17、IL-21水平明显升高(F=1.658、2.571、1.958、2.306、1.834、1.745、1.941,P均<0.05),而CD4~+、CD4~+/CD8~+、IL-10明显降低(F=1.686、1.752、1.895,P均<0.05),与轻度VMC亚组患儿比较,重度VMC亚组患儿血清CK-MB、cTnI、sFasL水平明显升高,而CD4~+水平明显降低(P<0.05)。与健康对照组比较,轻度VMC亚组、重度VMC亚组患儿血清miR-133表达水平明显降低,miR-155表达水平明显升高(F=9.238、13.387,P<0.01),与轻度VMC亚组比较,重度VMC亚组血清miR-133表达水平明显降低,血清miR-155表达水平明显升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,VMC血清miR-133表达与CD4~+/CD8~+呈明显正相关(r=0.548,P=0.000),与CK-MB、cTnI呈明显负相关(r=-0.508、-0.496,P均=0.000),miR-155表达与CD4~+/CD8~+呈明显负相关(r=-0.567,P=0.000),与CK-MB、cTnI呈明显正相关(r=0.395、0.587,P=0.013、0.000)。结论 VMC患儿血清miR-133表达水平降低,miR-155表达水平升高,且两者表达水平与部分心肌损伤及免疫功能指标有关,可作为VMC病情判断的辅助指标。     

VEGF逆转miR-200b促进非小细胞肺癌增殖的作用

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)在miR-200b抑制非小细胞肺癌(NSCLC)增殖中的作用及机制。方法选择2013年2月至2014年5月在本院经手术治疗的65例NSCLC患者的肿瘤组织,qRT-PCR检测NSCLC组织中miR-200b与VEGF的表达,并统计分析NSCLC组织中miR-200b与VEGF表达的相关性;常规培养A549、H460及16HBE细胞,qRT-PCR检测各组细胞中miR-200b与VEGF的表达;将常规培养的A549细胞随机分为四组,即 miR-200b mimics+vector、miR-200b mimics+VEGF组、miR-200b inhibitor+scramble组、miR-200b inhibitor+VEGF-siRNA组,其中miR-200b mimics+vector组与miR-200b inhibitor+scramble组作为阴性对照,采用MTT法检测各组吸光度值(OD值)。结果 qRT-PCR结果显示,miR-200b在NSCLC组织的表达水平为(0.682±0.106),VEGF在NSCLC组织的表达水平为(2.731±0.597),相关性分析显示在NSCLC组织中miR-200b与VEGF的表达呈负相关(r=-0.514,P<0.001);miR-200b在A549、H460细胞中的表达显著低于16HBE细胞,差异有统计学意义(P=0.000),而VEGF在A549、H460细胞中的表达明显高于16HBE细胞,差异有统计学意义（P=0.000）;MTT结果显示,miR-200b mimics+VEGF组A549细胞在48 h、72 h的细胞增殖率明显高于miR-200b mimics+vector组, miR-200b inhibitor+VEGF-siRNA组A549细胞在48 h、72 h的细胞增殖率明显低于miR-200b inhibitor+scramble组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-200b与VEGF在NSCLC组织及细胞中表达呈负相关;VEGF逆转miR-200b对NSCLC细胞增殖的作用。     

miR-30a-5p对肺癌细胞增殖与迁移的影响及其机制

研究miR-30a-5p 对非小细胞肺癌（NSCLC）增殖和迁移的影响,并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组,miR-30a-5p组和对照组,分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble,MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力,实时聚合酶链反应（real time-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别测定两组泛素蛋白连接酶（UBE3C）mRNA 和蛋白质表达水平。结果培养48 h后,miR-30a-5p 组相对活细胞百分比低于对照组[（203.7±16.8）% vs（330.4±20.7）%（p =0.000）];培养72 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比（258±30.2）%,对照组相对活细胞百分比（403.4±28.4）%,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（p =0.001）。细胞划痕实验示：miR-30a-5p组划痕愈合率为（23.2±2.7）%,对照组划痕愈合率为（89.2±4.8）%,miR-30a-5p 组划痕愈合率低于对照组（p =0.000）。real time-PCR显示,miR-30a-5p 组UBE3C mRNA 表达水平为（0.15±0.02）,对照组UBE3C mRNA 表达水平为（1.03±0.09）,miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组（p =0.000）;Western blot显示,miR-30a-5p组UBE3C 蛋白表达水平为（1.57±0.26）,对照组UBE3C 蛋白表达水平为（5.32±0.42）,miR-30a-5p 组UBE3C 蛋白表达水平低于对照组（p =0.000）。结论miR-30a-5p抑制NSCLC 增殖和迁移,其机制与下调UBE3C表达有关。     

miR-155在甲状腺乳头状癌组织及血浆中的表达

目的:检测miR-155在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)组织及血浆中的表达差异,评价其对PTC的诊断价值?方法:应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测52例PTC?32例结节性甲状腺肿患者组织中miR-155的表达水平及对应患者血浆?30例同期于本院行体检健康者血浆miR-155表达水平?应用受试者工作曲线(ROC)分析血浆miR-155的诊断价值,并分析其在 PTC 血浆与癌组织中表达的相关性?结果:miR-155在PTC与结节性甲状腺肿组织中的相对表达量分别为8.43 ± 6.14 和1.14 ± 0.41,PTC组高于结节性甲状腺肿组,差异有统计学意义(P < 0.01)?PTC组?结节性甲状腺肿组?对照组血浆miR-155表达量分别为3.35 ± 1.85?1.30 ± 0.30和1.41 ± 0.24,PTC组高于结节性甲状腺肿组及对照组,差异有统计学意义(P < 0.01)?PTC组与对照组区分的ROC曲线下面积(AUC)为0.932(95%CI:0.851~0.970,P < 0.001),PTC组与结节性甲状腺肿组区分的AUC为0.887(95%CI:0.811~0.961,P < 0.001)?miR-155在PTC组织表达与血浆中的表达呈正相关(r=0.589,P < 0.000 1)?其表达量与患者临床病理参数无相关性(P > 0.05)?结论:PTC患者血浆中miR-155表达量升高,有可能成为一种新的血液学标志物用于PTC的诊断?     

miR-21、Caveolin-1、Gal-9在病毒性脑炎患者的表达及相关性研究

目的 探讨病毒性脑炎(viral meningitis, VM)患者脑脊液微小核糖核酸21(micro ribonucleic acid-21,miR-21)表达、陷窝蛋白1(Caveolin-1)、半乳糖凝集素9(galectin-9,Gal-9)水平特点,分析miR-21、Caveolin-1、Gal-9与VM复发的关系。方法 选择VM患者(VM组)132例和经检查证实无神经系统损伤的患者(对照组)136例。根据病情将VM患者分为重症组(58例)和轻症组(74例),所有患者出院后随访3个月,根据是否VM复发分为复发组(26例)和无复发组(106例)。治疗前后检测血清miR-21表达、Caveolin-1、Gal-9以及炎性因子水平,分析miR-21、Caveolin-1、Gal-9与VM病情、炎性因子以及复发的关系,受试者工作特征曲线(receiver-operating characteristic curve, ROC)分析miR-21、Caveolin-1、Gal-9预测VM复发的价值。结果 VM组miR-21表达、Caveolin-1、Gal-9、肿瘤坏死因子α(tumor...     

miR-579在肾癌中表达的临床意义及其对肾癌细胞增殖的影响

目的 探讨微小RNA-579(miR-579)在肾癌中表达的临床意义及其生物学功能.方法 选取2012年1月—2014年3月四川省内江市第一人民医院泌尿外科手术治疗肾癌患者92例,收集其癌组织及癌旁正常组织,检测miR-579表达水平;比较不同临床病理特征癌组织中miR-579水平;对不同miR-579水平的肾癌患者进...     

房颤射频消融术前后血浆miR-328表达变化

目的 探讨血浆miR-328在不同类型房颤患者的射频消融术前后的表达变化,为进一步探讨房颤发病机制提供新方向.方法 选取从2015年3月至2016年1月期间在大连医科大学附属第一医院行射频消融术的心房颤动患者60例作为房颤组,选择同期大连医科大学附属第一医院体检中心的健康体检者20例作为正常对照组.使用实时荧光定量PCR技术检测正常对照组及不同类型房颤组手术前后血浆miR-328表达水平的变化.结果 房颤组血浆miR-328同对照组比较表达上升.血浆miR-328在房颤组射频消融术前后相对表达量分别为2.04±0.31和1.12±0.06,术后同术前比较表达下降,差异均有显著性意义,P＜0.05;血浆miR-328在阵发性房颤、持续性房颤和永久性房颤中相对表达量分别为1.85±0.23、2.13±0.36和2.72±0.93,表达逐渐升高,组间比较差异均有统计学意义,P ＜0.05.结论 miR-328同房颤病情发展密切相关,可能参与调控房颤的发病机制.     

miR-21和miR-146 a在癫痫患者中的表达及临床意义

目的 分析微小RNA-21(miR-21)和miR-146a在癫痫患者血清中的表达及临床意义.方法 选择2017年4月—2019年5月成都中医药大学附属第五人民医院/成都市第五人民医院神经内科诊治的癫痫患者99例作为癫痫组,选择同期在医院进行体检的健康者99例作为健康对照组.比较2组血清miR-21和miR-146a表...