盐酸戊乙奎醚对大鼠失血性休克致急性肺损伤肺组织CD40和CD40L表达的影响

目的观察盐酸戊乙奎醚对大鼠失血性休克致急性肺损伤肺组织CD40和CD40L表达的影响,探讨盐酸戊乙奎醚的肺保护作用机制及对预后的影响。方法选取健康成年大鼠40只,随机均分为对照组(S组),失血性休克模型组(A组),P1组、P2组、P3组分别于放血前即刻、放血完成后即刻、再灌注前即刻给予盐酸戊乙奎醚2mg/kg。除S组外其他组动物制作失血性休克再灌注急性肺损伤模型。采用免疫组织化学检测肺组织CD40、CD40L的表达,采用ELISA法检测血浆TNF-α、IL-10含量,用HE染色观察肺组织的病理改变。结果 A组肺组织明显增大,肺叶表面有散在的大小不等的红色斑点,切面可见粉红色液体渗出,镜下见肺泡壁增厚,肺间质水肿,肺泡腔内有大量的红细胞渗出及中性粒细胞浸润,病理形态证实急性肺损伤模型建立成功。P1组、P2组和P3组肺组织的炎症病理改变较A组减轻,炎性细胞浸润减少,S组肺组织形态正常。A组、P1组、P2组和P3组W/D明显大于、CD40和CD40L表达明显高于S组(P0.05)。而P1组、P2组和P3组W/D明显小于、CD40和CD40L表达明显低于A组(P0.05)。P1组、P2组W/D明显小于、CD40和CD40L表达明显低于P3组(P0.05),P1组、P2组差异无统计学意义。A组、P1组、P2组和P3组TNF-α、IL-10含量明显高于S组(P0.05),P1组、P2组和P3组TNF-α、IL-10含量明显低于A组(P0.05),P1和P2组TNF-α、IL-10含量明显低于P3组(P0.05),P1组和P2组差异无统计学意义。结论盐酸戊乙奎醚抑制大鼠失血性休克复苏肺组织CD40、CD40L的表达,进一步降低TNF-α、IL-10的合成和表达,从而减轻肺损伤,具有一定的肺保护作用。并且,早期给予盐酸戊乙奎醚对预后改善明显。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对新生大鼠内毒素性急性肺损伤时NF-κB活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对新生大鼠内毒索性急性肺损伤时NF-kB活性的影响.方法 健康新生Wistar大鼠30只,雌雄不拘,日龄7 d,体重18～21 g,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).采用腹腔注射内毒素3 mg/kg的方法制备急性肺损伤模型,P组腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.5 mg/kg,30 min后制备模型,C组腹腔注射等容量生理盐水.于腹腔注射内毒素4 h时处死大鼠取肺,称重后计算肺湿,干重比,电镜下观察肺组织病理学结果,采用免疫组织化学法检测NF-kB p65的表达水平,采用酶联免疫吸附法测定TNF-α、IL-1 β及IL-10的含量.结果 与C组比较,ALI 组和P组肺湿/干重比、TNF-α、IL-1β、IL-10含量及NF-KB p65表达水平升高(P＜0.05);与ALI 组比较,P组肺湿/干重比、TNF-α、IL-1β、IL-10含量及NF-kBp65表达水平降低(P＜0.05).病理学结果显示:P组肺组织损伤程度较ALI组明显减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过抑制肺组织NF-kB活化,降低炎性反应,减轻新生大鼠内毒素性急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚对正常人离体白细胞炎性介质的影响

目的 通过对正常人离体白细胞促炎和抗炎处理.观察盐酸戊乙奎醚对人离体白细胞炎性介质分泌的影响.方法 严格无菌抽取正常成年人静脉血10 ml,加入淋巴细胞分离液.2 000 r/min离心15 min,取出白细胞,加1 640培养液使白细胞浓度为106个/ml.平均分为五组,每组6个样本.Ⅰ组:对照组;Ⅱ组:加内毒素;Ⅲ组:加盐酸戊乙奎醚后20 min加内毒素;Ⅳ组:加内毒素1 h后加盐酸戊乙奎醚;V组:加阿托品(与盐酸戊乙奎醚等量)20 min后加内毒索.所有组加药后放置培养箱,4 h后加肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)检测试剂.结果 与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组TNF-α、IL-6、IL-lO水平均明显增高;与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组TNF-α、IL-6、IL-10水平均有不同程度的下降(P<0.01),且Ⅲ组下降程度较Ⅳ组更明显(P<0.05),Ⅴ组TNF-α、IL-6、IL-10水平虽有所变化,但差异无统计学意义.结论 抗胆碱药能作用于白细胞非神经性胆碱能受体,抑制白细胞炎性介质的分泌,盐酸戊乙奎醚的作用更明显,尤以提前干预为佳.     

雷帕霉素预处理对大鼠肢体缺血-再灌注诱发肺损伤的影响

目的探讨雷帕霉素预处理对大鼠肢体缺血-再灌注诱发肺损伤的影响及相关机制。方法健康雄性SD大鼠60只,4~5月龄,体重250~300g,采用随机数字表法分为五组:假手术组(S组)、肢体缺血-再灌注组(IR组)、雷帕霉素1、5、10mg/kg预处理组(R1、R5和R10组),每组12只。采用肢体缺血2h再灌注3h的方法制备肢体缺血-再灌注损伤模型。检测各组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度;取肺组织,光镜下观察肺组织病理学结果,并测定肺组织湿干比重(W/D)。结果 IR、R1和R5组SOD活性明显低于S组(P0.05);R1、R5和R10组SOD活性明显高于IR组,且R5和R10组明显高于R1组,R10组明显高于R5组(P0.05)。IR、R1和R5组血清MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α浓度和肺W/D明显升高(P0.05);R1、R5和R10组血清MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α浓度和肺W/D明显降低,且R5和R10组明显低于R1组,R10组明显低于R5组(P0.05)。与S组比较,IR组肺组织病理学损伤加重;与IR组比较,R1、R5和R10组肺组织病理学损伤逐渐减轻。结论雷帕霉素预处理可减轻大鼠肢体缺血-再灌注诱发的肺损伤,并且呈剂量依赖性,剂量越大,其减轻肢体缺血-再灌注诱发肺损伤的作用越强,其机制可能与抗氧化应激和抗炎反应有关。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤时缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤时缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 健康成年雌性SD大鼠120只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=40):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).采用腹腔注射内毒素5 mg/kg制备大鼠内毒素性急性肺损伤模型.C组腹腔注射等量生理盐水,P组于注射内毒素前30 min时腹腔注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg.于注射内毒素后2、4、8和24 h时各组随机取8只大鼠处死取肺,采用RT-PCR法检测肺组织HIF-1α mRNA的表达.于注射内毒素后6h时随机取8只大鼠处死取肺,测定湿干重比(W/D比),用ELISA法检测肺组织IL-6的含量,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组和P组注射内毒素后6h时W/D比、IL-6含量、各时点HIF-1α表达水平升高(P＜0.05);与ALI组比较,P组注射内毒素后6h时W/D比、IL-6含量、各时点HIF-1α表达水平降低(P＜0.05).P组肺组织病理学损伤程度较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药通过下调肺组织HIF-1α表达,抑制炎性反应,从而减轻大鼠内毒素性急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚后处理对肢体缺血-再灌注大鼠肝损伤的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚对肢体缺血-再灌注大鼠肝损伤的影响。方法健康雄性Wistar大鼠108只,随机分为三组:对照组(C组)、肢体缺血-再灌注组(LIR组)及盐酸戊乙奎醚组(PHC组)。用弹力橡皮筋完全阻断大鼠双后肢血流3h,PHC组在缺血177min自尾静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15mg/kg。三组分别在再灌注即刻(T0)、1h(T1)、3h(T2)、6h(T3)、12h(T4)、24h(T5)取血和肝组织,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)的浓度;检测肝组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性;光镜观察肝脏病理改变。结果 T3时LIR组及PHC组血清ALT、AST活性、肝脏组织MPO活性达到高峰;肝组织SOD活性最低,T1时血清TNF-α浓度达到高峰。与LIR组比较,T1～T3时PHC组血清ALT、AST活性下降,T1时血清TNF-α浓度下降,T1～T4时血清IL-10浓度升高,T1、T3时肝组织MDA含量降低,T1～T5时SOD活性升高,T1～T3时MPO活性下降(P<0.05)。光镜下,PHC组T3时肝组织病理学改变轻于LIR组。结论盐酸戊乙奎醚后处理对肢体缺血-再灌注大鼠肝脏具有一定保护作用,其机制可能与抑制活性氧生成及炎症反应有关。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB mRNA表达及SOD活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB mRNA表达及SOD活性的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,月龄2月,体重230～280 g,随机分为4组(n=8),对照组(C组)腹腔和尾静脉均注射生理盐水1 ml/kg;急性肺损伤组(ALI组):腹腔注射生理盐水1 ml/kg,30 min后经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;盐酸戊乙奎醚低剂量组(LP组)、高剂量组(HP组)分别腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.3和1 mg/kg,30 min后经尾静脉注射LPS 5 mg/kg.静脉注射生理盐水或LPS后6 h时,取肺组织,检测NF-κB mRNA的表达、TNF-α和MDA的含量和SOD活性,计算肺组织湿/干重比(W/D)及含水量,观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、LP组和HP组肺组织NF-κB mRNA表达上调,TNF-α及MDA含量升高,SOD活性降低,W/D和肺组织含水量升高(P＜0.05);与ALI组比较,LP组和HP组肺组织NF-κB mRNA表达下调,TNF-α及MDA含量降低,SOD活性升高,W/D和肺组织含水量降低(P＜0.05);与LP组比较,HP组肺组织NF-κB mRNA表达下调,TNF-α及MDA含量降低,SOD活性升高,W/D和肺组织含水量降低(P＜0.05).LP组和HP组肺组织病理学损伤较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制可能与下调肺组织NF-κB mRNA表达,降低肺局部炎性反应,增强机体抗氧化能力有关.     

盐酸戊乙奎醚在大鼠急性重症胰腺炎相关肺损伤中的作用

目的探讨盐酸戊乙奎醚在大鼠急性重症胰腺炎相关肺损伤(PALI)中的作用及对缺氧诱导因子(HIF)-1α相关炎症因子表达的影响。方法 40只健康雄性成年SD大鼠,应用随机数字法分为三组:假手术组(S组,n=8)、PALI模型组(ALI组,n=16)、盐酸戊乙奎醚+PALI模型组(P组,n=16)。ALI组和P组采用4%牛磺胆酸钠1ml/kg逆行性胰胆管注射法建立大鼠PALI模型。P组在建立模型后即刻给予大鼠腹腔内注射盐酸戊乙奎醚,S组和ALI组经腹腔注射等量生理盐水。造模后12h处死大鼠,取肺组织称重后计算肺湿干重比(W/D),光镜下观察胰腺及肺组织病理学评分,ELISA法测定肺组织HIF-1α、IL-1β、IL-6蛋白含量和血清胰淀粉酶含量,Western blot检测肺组织TLR4、NF-κB p65蛋白含量。结果 ALI组和P组大鼠的胰腺组织均存在广泛的中性粒细胞浸润、腺泡出血坏死和脂肪坏死。与S组比较,ALI组与P组胰腺病理评分、肺损伤评分、肺W/D明显升高,胰淀粉酶含量明显降低(P0.01);与ALI组比较,P组肺损伤评分、肺W/D明显降低(P0.05)。与S组比较,ALI组和P组大鼠肺组织HIF-1α、IL-1β、IL-6含量明显升高,肺组织TLR4、NF-κB p65含量明显升高(P0.01);与ALI组比较,P组肺组织HIF-1α、IL-1β、IL-6含量明显降低,TLR4、NF-κB p65蛋白含量明显降低(P0.05)。结论盐酸戊乙奎醚在不改变急性重症胰腺炎的胰腺组织损伤的情况下能够显著减轻急性重症胰腺炎相关肺损伤,机制可能与抑制HIF-1α等相关炎性因子的表达相关。     

盐酸戊乙奎醚后处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚后处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响.方法 成年雄性Wistar大鼠144只,体重220～250 g,随机分为4组(n=36):对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IPO组)和盐酸戊乙奎醚后处理组(IPHC组).IR组、IPO组和IPHC组采用弹力橡皮筋环扎大鼠双后肢近心端3 h,再灌注24 h的方法建立肢体缺血再灌注模型.再灌注即刻IPO组于双下肢近心端进行后处理,再灌注30 s、缺血30 s,重复3次;IPHC尾静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15 mg/kg,用生理盐水稀释为1 m1.分别于再灌注即刻、1、3、6、12和24 h时,采集下腔静脉血样后,各放血处死大鼠6只,取后肢股四头肌组织,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性、TNF-α和IL-10含量,测定股四头肌组织MDA含量,SOD、氧化物酶(MPO)、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性及HIF-1α表达,光镜下观察病理学结果.结果 与C组比较,IR组、IPO和IPHC组血清LDH、CK的活性和TNF-α、IL-10的浓度升高,股四头肌组织SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性降低,MPO活性和MDA含量升高,HIF-1α表达上调(P＜0.05或0.01);与IR组比较,IPO组和IPHC组血清LDH、CK的活性和TNF-α浓度降低,IL-10浓度升高,股四头肌组织SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性升高,MPO活性和MDA含量降低,HIF-1α表达下调(P＜0.01),病理学损伤减轻;与IPO组比较,IPHC组血清LDH活性和TNF-α浓度降低,CK活性和IL-10浓度升高,股四头肌组织SOD、MPO的活性和MDA含量降低,HIF-1α表达下调(P＜0.05或0.01),Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 盐酸戊乙奎醚后处理可减轻大鼠肢体缺血再灌注损伤,其机制与其抑制炎性反应和脂质过氧化反应,减轻细胞内钙超载,改善细胞能量代谢等有关.     

盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁对体外循环心脏瓣膜置换术患者肺损伤的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁对体外循环(CPB)心脏瓣膜置换术患者肺损伤的影响.方法 择期行CPB心脏瓣膜置换术患者60例,年龄33～64岁,体重47～81 kg,性别不限,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,心功能分级Ⅱ或Ⅲ级,随机分为4组(n=15):对照组(C组)、乌司他丁组(U组)、盐酸戊乙奎醚组(P组)和盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁组(PU组).CPB结束后30 min时,C组将PEEP增至8 cm H2O;U组、P组和PU组分别静脉注射乌司他丁2万U/kg、盐酸戊乙奎醚0.05 mg/kg、盐酸戊乙奎醚0.05 mg/kg和乌司他丁2万U/kg,然后将PEEP增至8 cm H2O.于CPB结束后30 min、3、6 h、术后12和24 h时,测定PaO2,计算氧合指数;于上述时点记录气道峰压和气道平台压,计算肺顺应性;于上述各时点采用ELISA法测定血清TNF-αIL-6、IL-8及IL-10的浓度;于CPB结束后6 h和术后12、24 h时行肺损伤评分.结果 与C组比较,U组、P组和PU组氧合指数和肺顺应性升高,肺损伤评分降低(P＜0.05或0.01);与U组和P组比较,PU组氧合指数和顺应性升高,肺损伤评分降低(P＜0.05).与C组比较,U组、P组和PU组血清TNF-α、IL-6和IL-8的浓度降低,IL-10浓度升高(P＜0.05或0.01);与U组和P组比较,PU组血清TNF-α、IL-6和IL-8的浓度降低,IL-10浓度升高(P＜0.05).U组和P组间上述标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 盐酸戊乙奎醚复合乌司他丁可减轻CPB心脏瓣膜置换术患者肺损伤,其机制可能与抑制炎性反应有关.     

盐酸戊乙奎醚对体外循环大鼠肝脏损伤的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚对体外循环大鼠肝脏损伤的影响.方法 健康清洁级成年雄性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),假手术组(Sham组)、模型组(Mod组)、盐酸戊乙奎醚低剂量组(L-PHC组)和高剂量组(H-PHC组).Sham组只置管不转流,Mod组体外循环预充液中不加入盐酸戊乙奎醚,L-PHC组和H-PHC组体外循环预充液中分别加入盐酸戊乙奎醚0.6mg/kg和2mg/kg.于停止体外循环即刻抽取左股动脉血2ml后处死,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝脏组织超微结构改变.结果 与Sham组比较,Mod组、L-PHC组、H-PHC组血清ALT,AST活性升高(P＜0.05);与Mod组比较,L-PHC组、H-PHC组血清ALT、AST活性降低(P＜0.01),病理损伤程度减轻;与L-PHC组比较,H-PHC组血清ALT、AST活性降低(P＜0.05),病理损伤程度减轻.结论 盐酸戊乙奎醚0.6mg/ks和2mg/kg可减轻体外循环诱发大鼠肝脏损伤的程度,2mg/kg的效果更明显.     

依达拉奉对大鼠心肌缺血再灌注诱发肺损伤的影响

目的 探讨依达拉奉对大鼠心肌缺血再灌注诱发肺损伤的影响.方法 健康清洁级雄性Wistar大鼠24只,体重250～300 g,随机分为4组(n=6):假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)和不同剂量依达拉奉组(E1组和E2组).IR组、E1组和E2组采用结扎冠状动脉左前降支(LAD)45 min,再灌注3 h的方法制备心肌缺血再灌注模型.S组仅LAD下穿线不结扎;IR组阻断LAD45 min后再灌注3 h;E1组和E2组分别于再灌注前1 min经右股静脉注射依达拉奉3或10 mg/kg.于再灌注3 h时放血处死大鼠,取肺组织、支气管肺泡灌洗液和动脉血样,测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,计算肺通透性指数(PPI),采用Western blot法检测肺组织β-防御素-2(BD-2)和TNF-α蛋白的表达,PCR法测定肺组织BD-2 mRNA表达.结果 与S组比较,IR组、E1组和E2组血清CK-MB活性和PPI升高,肺组织BD-2 mRNA、BD-2和TNF-α蛋白表达上调(P＜0.01).与IR组比较,E1组和E2组血清CK-MB活性和PPI降低,肺组织BD-2 mRNA、BD-2和TNF-α蛋白表达下调(P＜0.01).与E1组比较,E2组血清CK-MB活性和PPI降低,肺组织BD-2 mRNA、BD-2和TNF-α蛋白表达下调(P＜0.01).结论 依达拉奉可减轻大鼠心肌缺血再灌注诱发的肺损伤,其机制不仅与清除氧自由基有关,还与抑制肺组织炎性反应有关.     

不同血液pH值对大鼠肺移植时缺血再灌注损伤的影响

目的 评价不同血液pH值对大鼠肺移植时缺血再灌注损伤的影响.方法 纯种雄性SD大鼠64只(供体和受体鼠各32只),体重250～350 g,行同种异体左单肺移植术,32只受体鼠随机分为4组(n=8),移植肺再灌注前经股静脉注射1 mol/L HCl溶液和7.5%NaHCO3溶液,调整其血液pH值,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组pH值分别调整为7.4、7.2、7.3和7.5.移植肺再灌注2 h时取肺组织,测定肺湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)和SOD活性、MDA、TNF-α和IL-8的含量,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与Ⅰ组比较,Ⅲ组移植肺组织SOD活性明显升高(P＜0.01),MPO活性、MDA、TNF-α及IL-8含量均降低(P＜0.05),W/D差异无统计学意义(P＞0.05),与其它3组比较,Ⅲ组肺组织病理损伤减轻;Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅳ组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 降低血液pH值到7.3可减轻大鼠肺移植时缺血再灌注损伤.     

反复肺复张联合肺保护性通气对急性呼吸窘迫综合征家兔肺损伤的影响

目的 评价反复肺复张联合肺保护性通气对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)家兔肺损伤的影响.方法 家兔24只,雌雄各半,体重2.5～3.5 kg,采用随机数字表法,将兔随机分为4组(n=6):正常对照组(Ⅰ组)、ARDS模型组(Ⅱ组)、肺保护性通气组(Ⅲ组)和反复肺复张联合肺保护性通气组(Ⅳ组).麻醉下进行机械通气,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组采用静脉输注油酸0.1 ml/kg(经15 min输注)的方法 制备ARDS模型,模型制备成功后经3 min确定静态压力.容积曲线低位转折点.Ⅰ组和Ⅱ组的通气参数为:VT12 ml/kg,通气频率30次/min,呼气末正压(PEEP)0,FiO2 1.0,氧流量1 L/min,吸气时间0.6 s,吸呼比1.0∶2.3;Ⅲ和Ⅳ组通气参数为:VT6 ml/kg,PEEP为静态压力-容积曲线低位转折点对应气道力+2 cm H2O,其他通气参数同Ⅰ组和Ⅱ组,Ⅳ组分别在确定静态压力-容积曲线低位转折点后即刻、1、2和3 h时实施肺复张.肺复张的方法:吸气压力为30 cm H2O,吸气时间为30 s.分别于每次肺复张后采集动脉血样,测定PaO2,计算氧合指数.最后一次肺复张后1 h处死动物,取肺组织,测定TNF-α和IL-10的含量、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量和湿/干重比(W/D比),计算TNF-α与IL-10的比值(TNF-α/IL-10),光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组氧合指数降低,肺组织TNF-α/IL-10、MPO、MDA和W/D比升高(P＜0.05);与Ⅱ组比较,Ⅲ组氧合指数升高,肺组织TNF-α/IL-10、MPO、MDA和W/D比降低(P＜0.05);与Ⅲ组比较,Ⅳ组氧合指数升高,肺组织TNF-α/IL-10、MPO、MDA和W/D比降低(P＜0.05).Ⅳ组肺组织损伤程度轻于Ⅲ组.结论 与肺保护性通气比较,肺保护性通气期间反复肺复张可进一步减轻ARDS家兔肺损伤,其机制与抑制肺组织炎性反应有关.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of alveolar recruitment maneuvers (ARM) combined with lung protection mechanical ventilation on lung injury in a rabbit model of acute respiratory distress syndrome (ARDS) .Methods Twenty-four rabbits of both sexes weighing 2.5-3.5 kg were randomly divided into 4 groups (n=6 each):normal control group(group Ⅰ);ARDS group(group Ⅱ);ARDS+lung protection mechanical ventilation group (group Ⅲ) and ARDS + lung protection mechanical ventilation + ARM group (group Ⅳ). The animals were anesthetized with iv pentobarbital 20 mg/kg, tracheostomized and mechanically ventilated. Anesthesia was maintained with iv gammahydroxybutyrate infusion 100 mg·kg-1·h-1 and intermittent iv boluses of vecuronium. ARDS was induced with oleic acid 0.1 ml/kg injected iv over 15 min in Ⅱ ,Ⅲ and Ⅳ groups. In Ⅰand Ⅱ groups VT = 12 ml/kg, RR=30 bpm, I∶E=1.0=2.3, PEEP=0, FiO2=1, while in Ⅲ and Ⅳ groups VT=6 ml/kg, RR=30 bpm, I∶E=1.0=2.3, PEEP=airway pressure at lower inflection point+2 cm H2O, FiO2=1.ARM was performed by increasing the airway pressure to 30 cm H2O for 30 s once an hour in group Ⅳ. Arterial blood gas analysis was performed after each ARM. The animals were sacrificed at 1 h after the 3rd ARM. The lungs were removed for microscopic examination and determination of W/D lung weight ratio, TNF-α, IL-10 and MDA contents and MPO activity. TNF-α/IL-10 ratio was calculated. Results ARDS significantly decreased PaO2/FiO2 and increased TNF-α/IL-10 and W/D lung weight ratio, MPO activity and MDA content in the lung tissue. Lung protection mechanical ventilation significantly increased PaO2/FiO2 and decreased TNF-α/IL-10 and W/ D lung weight ratio, MPO activity and MDA content in the lung tissue. Lung protection mechanical ventilation + ARM significantly increased PaO2/FiO2 and decreased TNF-α/IL-10, W/D lung weight ratio, MDA content and MPO activity in group Ⅳ. Conclusion ARM combined with lung protection mechanical ventilation can further attenuate ARDS-induced lung injury by inhibiting inflammatory response.     

α7nAChR激动剂-缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂-缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠50只,体重290～320 g,随机分为5组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IP组)、α7nAChR激动剂后处理组(P组)和α7nAChR激动剂-缺血后处理组(PIP组).IR组结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注180 min制备心肌缺血再灌注损伤模型;S组仅穿线不结扎;缺血30 min时IP组再灌注10 s缺血10 s,重复3次,P组腹腔注射PNU282987 2.4 mg/kg,PIP组腹腔注射PNU282987 2.4 mg/kg后行缺血后处理.于再灌注180 min时抽取右颈内静脉血样后处死大鼠,取心脏,采用ELISA法测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、TNF-α和高迁移率族蛋白Ⅰ(HMGB1)的浓度,采用伊文蓝和TTC双重染色法测定心肌梗死体积.结果 与S组比较,其余各组心肌梗死体积、IR组血清cTnI、TNF-α和HMGB1浓度升高(P＜0.05);与IR组比较,IP组、P组和PIP组心肌梗死体积、血清cTnI、TNF-α和HMGB1浓度降低(P＜0.05);与[P组比较,PIP组心肌梗死体积、P组和PIP组血清cTnI、TNF-α和HMGB1浓度降低(P＜0.05);与P组比较,PIP组心肌梗死体积、血清TNF-α和HMGB1浓度降低(P＜0.05).结论 α7nAChR激动剂-缺血后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的效应较单独应用时强.     

戊乙奎醚预先给药对大鼠急性肺损伤时NF-κB的影响

目的 探讨戊乙奎醚预先给药对大鼠急性肺损伤(ALI)时NF-κB的影响.方法 雄性SD大鼠35只,体重210～280 g,随机分为5组(n=7):对照组(C组)、ALI组和低、中、高剂量戊乙奎醚组(P1-3组).采用经尾静脉注射内毒素5 mg/kg的方法建立大鼠ALI模型.C组和ALI组经腹腔注射生理盐水0.5 ml,P1～3组分别经腹腔注射戊乙奎醚0.03、0.1和3 mg/kg,30 min后ALI组、P1～3组制备AU模型,C组不制备模型.于静脉注射LPS后4 h时,行血气分析,计算氧合指数;称量肺组织湿重(W)、干重(D),计算W/D;采用比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;采用RT-PCR法测定肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平;采用ELISA法测定肺组织TNF-α和IL-1β的含量;采用非放射性EMSA法测定肺组织NF-κB活性;采用免疫组织化学法测定肺组织NF-κB的表达水平.结果 与C组比较,其余各组氧合指数降低,肺组织W/D和MPO活性、TNF-α,IL-1β含量及其相应mRNA表达水平、NF-κB活性和表达水平均升高(P<0.05或0.01);与ALI组比较,P1～3组氧合指数升高,肺组织W/D和MPO活性降低,TNF-α、IL-1β含量及其相应mRNA表达水平降低,NF-κB活性和表达水平降低(P<0.05);P1～3组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 戊乙奎醚预先给药减轻大鼠急性肺损伤的机制可能与抑制NF-κB的活化,下调NF-κB的表达,降低肺组织炎性反应有关.     

戊乙奎醚对肝移植术患者新肝期炎性反应的影响

目的 探讨戊乙奎醚对肝移植术患者新肝期炎性反应的影响.方法 择期肝移植术患者60例,ASAⅡ或Ⅲ级,年龄20～64岁,体重46～83 kg,随机分为3组(n=20):对照组(C组)、戊乙奎醚0.1 mr,/kg组(Ⅰ组)和戊乙奎醚0.2 mg/kg组(Ⅱ组).均采用静吸复合全麻,于无肝期30 min开始,Ⅰ组和Ⅱ组分别静脉输注戊乙奎醚0.1、0.2 mg/kg,C组静脉输注等容量生理盐水.分别于无肝期30min(T0)、再灌注1、2、3、24 h(T1～4)时取上腔静脉血3 ml,放免法测定血清TNF-α及IL-1浓度,于T3时取新肝组织,测定肝细胞NF-κB蛋白表达及其活性;光镜下观察新肝病理学结果 .结果 与C组比较,Ⅰ组T1、Ⅱ组T1～3时血清TNF-α浓度降低,Ⅰ组和Ⅱ组T1,3时血清IL-1浓度降低,肝细胞NF-κB蛋白表达下调、活性降低(P<0.05);与Ⅰ组比较,Ⅱ组T1,2时血清TNF-α浓度降低,肝细胞NF-κB蛋白表达下调(P<0.05);Ⅰ组和Ⅱ组肝缺血再灌注损伤较C组减轻.结论 戊乙奎醚可通过抑制肝细胞NF-κB蛋白表达及其活性,降低肝移植术患者新肝期的炎性反应,从而减轻肝缺血再灌注损伤.     

盐酸戊乙奎醚对体外循环致大鼠急性肺损伤的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)致大鼠急性肺损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠40只,4～6月龄,体重330～420 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=10):假手术组(S组)仅进行动脉和静脉穿刺置管;急性肺损伤组(ALI组)、低剂量盐酸戊乙奎醚组(PL组)和高剂量盐酸戊乙奎醚组(PH组)建立CPB模型;PL组和PH组分别在预冲液中加入盐酸戊乙奎醚0.6和2.0 mg/kg,ALI组加入等容量生理盐水,进行CPB1h.于CPB前和CPB结束后2h采集动脉血样,进行血气分析;于CPB结束后2h时采集上腔静脉血样,测定血浆TNF-α和IL-6的浓度;取肺组织测定含水量、MDA含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性,光镜下观察病理学改变.结果 与S组比较,ALI组、PL组和PH组CPB结束后2h时PaO2降低,肺组织含水量、MDA含量和血浆TNF-α和IL-6的浓度升高,肺组织GSH-px活性降低(P＜0.05);与ALI组比较,PL组和PH组CPB结束后2h时PaO2升高,肺组织含水量、MDA含量和血浆TNF-α和IL-6的浓度降低,肺组织GSH-px活性升高(P＜0.05),病理学损伤减轻;与PL组比较,PH组CPB结束后2h时PaO2升高,肺组织含水量、MDA含量和血浆TNF-α和IL-6的浓度降低,肺组织GSH-px活性升高(P＜0.05),病理学损伤减轻更明显.结论 盐酸戊乙奎醚0.6和2.0 mg/kg可减轻CPB致大鼠急性肺损伤,且与剂量有关,其机制与抑制脂质过氧化反应和炎性反应有关.