RP-HPLC和UV-VIS法测定灵芝不同收获期的多糖肽和灵芝酸

目的 研究灵芝不同栽培方式和不同收获期中多糖肽和灵芝酸A、B的变化,为灵芝规范化栽培及制定产品质量标准提供依据。方法 RP-HPLC测定菌草灵芝和仿野生栽培的灵芝提取物的灵芝酸A、B的变化。色谱柱为XB-C₁₈柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为0.05%磷酸-乙腈（65∶35）,检测波长254 nm,常温,进样量50 μL。以灵芝多糖肽为对照品,采用Folin-酚试剂法,通过紫外-可见吸收光谱法检测菌草灵芝和仿野生栽培灵芝不同收获期提取物的多糖肽。结果 灵芝酸A、B线性范围分别为14.8～371.0和16.4～409.0 μg/mL,平均回收率为95.0%、100.5%,RSD分别为1.18%、3.37%（n＝6）。灵芝多糖肽在100～600 μg/mL与吸光度值呈线性关系,r＝0.999 5,回收率95%～100%。结论 该方法简便、快速,可用于灵芝及其产品中多糖肽和灵芝酸A、B的质量控制。菌草灵芝沸水提取能将多糖肽和灵芝酸分离,既简化了灵芝水、醇提取工艺,又提高经济效益。     

HP LC-ELSD法测定灵芝中灵芝酸A的含量

目的 建立测定灵芝药材中灵芝酸A质量分数的HPLC-ELSD法.方法 采用Welch XtimateTM-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数0.01%醋酸(体积比37:63),流速为1 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;蒸发光散射器漂移管温度为105℃,空气流速为2.8 L/min.结果 灵芝酸A的进样量在0.8928~5.3568μg范围内,峰面积的对数值与进样量的对数值具有良好的线性关系;平均加样回收率为95.81%;不同批次的灵芝样品中灵芝酸A的质量分数范围为0.2143~2.8942 mg/g,结果差异较大.结论 本法操作简单、结果准确、重复性好,为灵芝的质量控制提供参考方法.     

HPLC法和UV-VIS法测定灵芝孢子粉中灵芝三萜及灵芝多糖的含量

目的建立测定灵芝孢子粉中的两个有效成分灵芝三萜及灵芝多糖含量的方法,为进一步开发和应用灵芝孢子粉提供依据。方法以灵芝酸C2为标准品,通过HPLC法对灵芝孢子粉中灵芝酸C2的含量进行测定。色谱条件为：检测波长254nm;流动相为甲醇：水=55∶45,各加1%冰醋酸;柱温40℃;流速0.7mL/min。以葡萄糖为标准品,采用硫酸-蒽酮比色法,通过UV-VIS法对灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量进行测定。结果HPLC法测得三批灵芝孢子粉中灵芝酸C2含量约为0.129‰,0.108‰和0.094‰,灵芝酸C2在7.35～147μg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,回收率为95.9%,95.6%和96.4%。UV-VIS法测得三批灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量约为1.152%,1.129%和1.007%,葡萄糖在14.9～119.1μg/mL的范围内,浓度和吸光度呈线性关系,r=0.9991,回收率为95.0%,95.1%和95.2%。结论方法简便、准确,可用于灵芝孢子粉中灵芝三萜和灵芝多糖的含量测定。     

HPLC法测定灵芝子实体和孢子粉中灵芝酸C2、灵芝酸G和灵芝酸A

目的 建立灵芝子实体和孢子粉中3种灵芝酸类成分的HPLC测定方法,为全面评价灵芝药材和孢子粉的质量提供依据。方法 采用HPLC方法测定,Diamonsil（钻石）C8色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相乙腈–0.03%磷酸（28∶72）,体积流量1.2 mL/min,检测波长250 nm;柱温35 ℃。结果 灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝酸A分别在0.40～10.06 μg（r=0.999 99）、0.40～10.00 μg（r=0.999 99）、0.40～10.00 μg（r=0.999 99）线性关系良好,平均回收率分别为101.04%、99.39%、101.22%,RSD值分别为1.64%、1.86%、2.20%（n=6）;灵芝子实体中3种灵芝酸的质量分数分别在0.06～0.29 mg/g、0.12～0.37 mg/g、0.19～0.41 mg/g,灵芝孢子粉供试品中3种灵芝酸的质量分数分别在0～0.01 mg/g、0、0～0.03 mg/g。结论 本方法简便,稳定,可用于灵芝三萜类成分C2、灵芝酸G、灵芝酸A的定量分析。     

HPLC法测定复方灵芝颗粒中五味子甲素的含量

目的建立复方灵芝颗粒中五味子甲素含量测定的方法。方法用高效液相色谱法测定,色谱条件为:C18柱,(5μm,250×4.6mm),流动相为甲醇-水(体积比75∶25),检测波长为254 nm。结果五味子甲素在0.1608~6.432μg范围内呈现良好的线性关系(R=0.9996),平均加样回收率为99.27%,RSD=1.02%(n=6)。结论该法操作简便、准确,重复性好,建立的定量方法可用于复方灵芝颗粒质量的控制。     

HPLC法同时测定灵芝浸膏片中尿苷和腺苷的含量

目的:采用反相高效液相色谱法测定灵芝浸膏片中尿苷和腺苷的含量。方法:使用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.04mol/L磷酸二氢钾(6∶94),流速1.0 mL/min,检测波长260 nm。结果:尿苷、腺苷进样量分别在0.034~0.670μg和0.025~0.496μg范围内,与峰面积呈良好线性关系;尿苷及腺苷的平均回收率(n=6)分别为98.3%和98.6%,RSD分别为2.0%和2.0%。结论:本法简便、准确,重复性好,可为灵芝浸膏片的质量控制提供实验依据。     

GC-MS法测定灵芝孢子油中5种有机酸的含量

目的 建立灵芝孢子油中5种有机酸的含量测定方法 .方法 采用气相色谱-质谱联用方法 ,选用色谱柱为HP-5MS(5%苯基甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱,150 m×0.25 mm×0.25 μm);色谱柱程序升温条件:初始温度为165℃,保持40 win,以30℃/min的速率升至280℃,保持2 min.结果 十四酸、十五酸、十六酸、亚油酸和油酸分别在0.0126～0.0630mg、0.03680～0.1840mg、0.80230～4.0116mg、1.8528～9.2640mg、7.6225～38.113mg范围内线性关系良好;方法 的平均回收率为96.98%～98.32%,RSD为2.28%～2.52%.结论 该法简便、快速、准确、重现性好,可用于控制灵芝孢子油质量.     

高效液相色谱法测定灵芝饮片中腺苷

目的 建立灵芝饮片中腺苷的HPLC测定方法,用以控制该饮片的质量。方法 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-0.04 mol/L磷酸二氢钾溶液(5∶95,调节pH 6.5);体积流量：1.0 mL/min;柱温：30 ℃;检测波长：260 nm。结果 腺苷在0.634～3.170 μg线性关系良好;平均加样回收率为101.45%。结论 该方法可用于灵芝饮片的质量控制。     

HPLC-ELSD法测定灵芝孢子油中三油酸甘油酯的含量

目的 建立灵芝孢子油中三油酸甘油酯的HPLC-ELSD含量测定方法.方法 采用HPLC-ELSD法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)柱,流动相∶乙腈-异丙醇(体积比51∶49),流速:1 mL·min-1,ELSD漂移管温度:80℃,载气流速:2.0 L·min-1.结果 三油...     

灵芝胶囊质量标准的检测

目的 检测灵芝胶囊的质量标准。方法 采用TLC法对方中主要药味进行色谱鉴别，UV法测定灵芝多糖的含量。结果 灵芝多糖100-1000μg范围内有良好的线性关系，回收率为98．68％，RSD为1．18％。结论 本质量标准可有效地控制灵芝胶囊的质量。     

基于HPLC-MS/MS技术快速鉴定灵芝化学成分

〔目的〕采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC?MS/MS)对灵芝的化学成分进行快速鉴定.〔方法〕采用色谱柱Hypersil GOLD aQ(100 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为含0.1％甲酸的水溶液(A液)和含0.1％甲酸的乙腈溶液(B液).采用梯度洗脱方式,流速0.3 mL/min,柱温40℃,进样量为5μL.质谱分析采用电喷雾离子源(ESI)正负离子检测模式,质量扫描范围m/z 150～1500μ.使用Compound Discoverer 3.1(Thermo Fisher Scientific,USA)软件进行HPLC?MS/MS数据处理.〔结果〕从灵芝中鉴定了85个化合物,主要包括黄酮类、有机酸类、核苷类、氨基酸类、脂肪酸类、糖苷类、萜类、甾类、酚类、苯丙素类和生物碱类等.〔结论〕本研究方法快速鉴定了灵芝醇提物化学成分,为进一步研究灵芝的药效基础和作用机制提供理论基础.     

天麻灵芝颗粒的质量标准研究

目的:建立天麻灵芝颗粒的质量标准。方法:采用TLC法对处方中天麻、淫羊藿、灵芝进行定性鉴别;采用HPLC法测定天麻素和淫羊藿苷的含量。结果:薄层色谱上样品与对照品显相同的斑点,分离效果好,阴性对照无干扰;天麻素在0.0502μg~0.3012μg、淫羊藿苷在8.4480μg~84.4800μg与峰面积具有良好的线性关系;平均回收率分别为99.85%和99.78%,RSD分别为0.33%和0.90%(N=9)。结论:该方法简单、可靠、准确,可以作为控制天麻灵芝颗粒的质量标准。     

灵芝提取物中多糖含量的测定

为探讨灵芝提取物中主要有效成分多糖的含量测定方法。采用姆松—华尔格法对灵芝提取物中的多糖进行含量测定。结果 :测得多糖平均含量为 16 .3% ,RSD =0 .75 % (n=5 ) ;平均回收率为 99.0 % ,RSD =1.0 2 % (n =5 )。认为姆松—华尔格法可作为灵芝提取物质量控制的有效方法。     

富锗灵芝和普通灵芝对小鼠强壮益智作用的影响

目的：探讨富锗灵芝和普通灵芝对小鼠的强壮益智作用,为富锗灵芝的临床应用提供实验依据。方法;将小鼠分为富锗灵芝组、普通灵芝和空白对照组,观察给药后对小鼠的体重、游泳能力和记忆力的影响。结果：富锗灵芝和普通灵芝均能明显增加中鼠体重,延长游泳时间,并增强小鼠的记忆力,两者之间无显著怀差异。结论：富锗灵芝和普通灵芝均对小鼠具有强壮益知作用。     

松杉灵芝的化学成分研究(Ⅱ)

目的研究松杉灵芝子实体的化学成分。方法采用硅胶、凝胶色谱法进行分离纯化,波谱法进行结构鉴定。结果从乙醇提取物的醋酸乙酯部分分离得到8个三萜类化合物。结构鉴定为:灵芝醇A(ganoderiol A,Ⅰ)、灵芝酮三醇(ganodermanontriol,Ⅱ)、灵芝三醇(ganodermatriol,Ⅲ)、灵芝酸C(ganodericacid C,Ⅳ)、灵芝酸A(gan-odericacid A,Ⅴ)、赤芝酮A(lucidone A,Ⅵ),赤芝酸C(lucidenicacid C,Ⅶ)、赤芝酸LM1(lucidenic acid LM1,Ⅷ)。结论化合物Ⅰ～Ⅷ均为首次从松杉灵芝中分离得到。     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分之一,具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老和降血糖等生物活性,对近年来研究灵芝多糖的超声法、微波法、复合酶法等提取方法和径向流色谱、柱色谱联用等分离纯化方法,含量测定及其在抗肿瘤和抗氧化等方面的药理活性进行综述,为灵芝多糖的进一步开发利用提供依据。     

紫外分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜含量

目的：建立紫外分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜含量。方法：以齐墩果酸为对照品,与5%香草醛-冰乙酸反应,在高氯酸环境下显色,在545 nm处测定样品吸光度。结果：齐墩果酸在0.02~0.12 mg范围内线性关系良好,Y=11.033X-0.0441,r=0.9998。重复性实验,RSD为2.84%（n=6）。平均回收率78.43%,RSD为3.5%（n=6）。结论：经过线性、重复性、精密度、回收率实验,确认本方法适用于灵芝孢子油总三萜的含量测定。     

RP-HPLC法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量

目的:建立胃康灵胶囊中甘草酸的含量测定方法。方法:高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Shim-PackVP-ODSC18(150.0mm×4.6mm,5!m),以乙腈-0.1%磷酸溶液(35∶65)为流动相,检测波长为250nm,柱温40℃。结果:甘草酸在0.15￣1.50!g(r=0.9999)范围内呈线性,平均加样回收率为99.7%(RSD=2.67%)。结论:RP-HPLC法简便、快速、可靠、可用于控制制剂质量。     

灵芝醇提生物活性物质的指纹图谱分析及质控评价

目的 采用HPLC法建立灵芝醇提生物活性物质指纹图谱的分析方法，通过中药指纹图谱相似度软件，对不同产地、不同种属、不同栽培方式的灵芝样品中所含生物活性物质的种类及数量进行综合评价。方法 采用Symmetry C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）反相柱，以1%醋酸水溶液-乙腈为流动相，体积流量1.0 mL/min，在250 nm波长下，进行二元梯度洗脱。结果 灵芝醇提生物活性物质的指纹图谱可达40多个指纹峰和15个共有峰，指纹图谱分离效果理想。结论 所建立的色谱法具有良好的精密度、重现性和稳定性，并能有效地对灵芝品质进行质量评价。     

润肠合剂质量标准的建立

目的:探讨润肠合剂的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对润肠剂中肉苁蓉、白术、芦荟、灵芝进行定性鉴别。采用高效液相色谱法测定润肠合剂中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量:色谱柱为Agilent ZORBAXDB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(70∶30,V/V),流速1.0 m L/min,柱温为25℃,检测波长为220 nm。结果:肉苁蓉、白术、芦荟、灵芝TLC鉴别具有较好的专属性,阴性对照无干扰。白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ的进样量分别在0.1649~0.9894、0.3075~1.8432μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r均为0.9999);二者精密度、稳定性、重复性试验的均RSD<3%;平均加样回收率分别为100.7%和99.9%,RSD分别为1.65%和2.03%(n=6)。结论:所建标准可用于润肠合剂的质量控制。