膝关节神经支选择性切断对膝骨性关节炎模型兔关节软骨病理变化的影响

目的:观察选择性切断膝关节神经支对膝骨性关节炎模型兔关节软骨病变的影响。方法:采用改良Hulth法复制兔膝骨性关节炎模型,通过外科显微镜下选择性切断兔膝关节神经支。利用"测定双足平衡设备"检测和评价兔膝关节功能变化,肉眼观察兔膝关节大体结构。组织切片H-E染色,光镜下观察关节软骨组织结构,应用显微电脑测量软件测量关节软骨厚度。运用TUNEL法检测软骨细胞的凋亡。结果:模型组右侧(患侧)膝关节蜷缩、无力,检测显示以左侧后足承重为主。治疗组右侧(患侧)后足承重分布情况较模型组有明显改善。模型组兔膝关节软骨出现退变的表现,软骨细胞过度凋亡,其凋亡指数明显高于正常组,而治疗组兔膝关节软骨退变有明显改善,细胞凋亡指数明显低于模型组。模型组和治疗组膝关节软骨厚度均较正常组有明显减小,但治疗组软骨厚度较模型组有明显增厚。结论;选择性切断膝关节神经支对膝骨性关节炎模型兔关节软骨细胞凋亡有抑制作用,并能改善病变关节软骨的结构,加强关节的功能。     

膝关节神经支选择性切断对膝骨性关节炎模型兔关节软骨Ⅱ型胶原的影响

目的观察选择性切断膝关节神经支对膝骨性关节炎模型兔关节软骨Ⅱ型胶原影响。方法采用改良Hulth法复制兔膝骨性关节炎模型,通过外科显微镜下选择性切断兔膝关节神经支。兔膝关节软骨组织切片HE染色,光镜下观察关节软骨组织结构;免疫组织化学检测软骨Ⅱ型胶原表达。结果模型组和治疗组关节软骨Ⅱ型胶原表达,在术后4周高于正常组;术后16周,明显低于正常组。治疗组术后16周软骨Ⅱ型胶原表达明显高于模型组。结论选择性切断膝关节神经支能增加膝骨性关节炎模型兔关节软骨Ⅱ型胶原的表达。     

兔膝关节神经支选择性切断后对关节软骨的影响

目的观察兔膝关节神经支选择性切断后关节软骨形态学变化。方法在外科显微镜下选择性切断兔膝关节神经支,术后4、8、16周取材,肉眼观察兔膝关节大体结构,组织切片HE染色,光镜下观察关节软骨组织结构,应用显微电脑测量软件测量关节软骨厚度。结果对照组兔膝关节软骨表面光滑,软骨细胞呈四层结构排列,软骨细胞为圆形或椭圆形,表层呈梭形。实验组兔膝关节软骨组织结构未见明显改变,软骨厚度与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论选择性切断兔膝关节神经支对关节软骨组织结构无明显影响,膝关节局部去神经化术治疗具有可行性。     

“双固一通”温针灸实验性膝骨性关节炎模型兔Bcl-2及Bax蛋白的表达

背景：软骨细胞凋亡在骨性关节炎的发生发展中起到关键作用。 目的：观察“双固一通”温针灸预防兔膝骨性关节炎过程中对兔膝关节软骨Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。 方法：采用结扎股静脉法建立兔膝骨性关节炎模型,造模后采用“双固一通”温针灸法进行干预,针灸穴位包括关元(CV 4)、足三里(ST 36)、内膝眼(EX-LE4)、犊鼻(ST 35)和阳陵泉(GB 34),1次/d,留针20 min,连续8周。 结果与结论：膝骨性关节炎后,兔的软骨细胞凋亡指数明显升高(P < 0.01),“双固一通”温针灸可降低软骨细胞凋亡指数(P < 0.01)。免疫组织化学染色显示：“双固一通”温针灸兔和模型兔关节软骨Bcl-2表达明显增高(P < 0.05),而“双固一通”温针灸兔和正常兔关节软骨Bax的表达明显低于模型兔(P < 0.05),“双固一通”温针灸兔Bcl-2/Bax高于模型兔和正常兔(P < 0.05)。说明“双固一通”温针灸可上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达抑制软骨细胞过度凋亡,对兔膝骨性关节炎起防治作用。     

揉髌手法对兔膝关节软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Fas表达的影响

背景：现代研究证实细胞的过度凋亡加速软骨组织的退变,而手法的力学刺激对关节软骨影响的分子层面研究至今少有报道。 目的：观察揉髌手法对兔膝关节软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Fas表达的作用。 方法：50只新西兰兔随机等分为正常组、假手术组、模型组、手法组和针剂组,后3组建立右下肢骨内高压型膝关节骨性关节炎模型。造模1周后,手法组使用揉髌手法隔天治疗1次,每次10 min,共治疗5周共17次;针剂组关节内注射玻璃酸钠液0.6 mL,每周1次,共5次。 结果与结论：造模后8周末取兔右膝关节内侧胫骨平台软骨组织,苏木精-伊红染色提示模型组软骨组织退变明显,软骨细胞凋亡率明显增加(P < 0.01),胫骨平台软骨组织中Bcl-2、Bax、Fas表达率明显升高(P < 0.01),而手法组和针剂组软骨组织退变轻微,软骨细胞凋亡率及Bax、Fas表达率较模型组降低(P < 0.01),但胫骨平台软骨组织中Bcl-2表达升高(P < 0.01)。说明揉髌手法与关节内注射玻璃酸钠一样可以明显降低兔膝关节软骨细胞的凋亡率,其作用机制与上调Bcl-2表达,下调Bax、Fas表达有关。     

前交叉韧带切断诱导兔膝骨性关节炎模型:阿仑膦酸钠与盐酸氨基葡萄糖对其关节软骨和软骨下骨的保护作用

背景:氨基葡萄糖是骨关节炎特异性的治疗药物,有研究表明骨吸收抑制剂阿伦膦酸钠对骨性关节炎具有潜在的治疗作用。目的:探讨阿仑膦酸钠联合盐酸氨基葡萄糖对前交叉韧带切断诱导的兔膝骨性关节炎模型关节软骨和软骨下骨的保护作用及其作用机制。方法:将3月龄新西兰大白兔随机分为假手术组,模型组,盐酸氨基葡萄糖组,联合治疗组。除假手术组外,其余3组动物均右侧膝关节行前交叉韧带切断建立兔膝骨性关节炎模型。建模成功后,模型组用生理盐水治疗;盐酸氨基葡萄糖组给予盐酸氨基葡萄糖灌胃;联合治疗组给予盐酸氨基葡萄糖组灌胃同时,皮下注射阿仑膦酸钠。8周后观察膝关节外观,取所有组兔胫骨去除软骨后行软骨下骨生物力学检测,测定最大载荷和弹性模量,取股骨测量远端1/4骨密度后,用苏木精-伊红染色及"Mankin评分"观察关节软骨退变情况。结果与结论:建模后盐酸氨基葡萄糖组和联合治疗组膝关节出现了轻度骨性关节炎的表现。盐酸氨基葡萄糖组和联合治疗组Mankin评分显著低(P0.05)。联合治疗组股骨远端骨矿物质密度最高(P0.05)。盐酸氨基葡萄糖组的最大载荷和弹性模量均显著低于联合治疗组(P0.05)。实验结果提示,阿仑膦酸钠与盐酸氨基葡萄糖组联合应用可通过保护关节软骨及改善软骨下骨代谢的双重作用,抑制前交叉韧带切断术后兔膝骨性关节炎的发展,且效果优于单纯用盐酸氨基葡萄糖治疗。     

人甲壳质酶蛋白40通过PI3K/Akt信号通路调控膝骨性关节炎兔软骨细胞的凋亡

文题释义：膝骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)：常发生在中老年人群，其病理过程涉及软骨基质退行性病变、软骨细胞性状显著性改变和数量明显减少。在外力及内部环境改变等因素影响下，软骨细胞外基质、软骨细胞及软骨下骨的合成和降解动态平衡出现紊乱，软骨细胞大量凋亡使得软骨修复、重塑等稳定状态出现异常，上述情况均可诱导膝骨关节炎的发生。人甲壳质酶蛋白40(YKL-40)：是一种广泛存在于关节滑膜细胞、软骨细胞中的软骨糖蛋白，具有多种生物学功能作用：①促进软骨细胞、成骨细胞的增殖生长及分化；②促进新生血管组织的形成；③调控细胞外基质的重构过程；④协助细胞适应生长环境的显著性改变及缺氧等病理损伤，此外在软骨细胞凋亡方面也发挥一定作用。背景：由于PI3K/Akt信号通路与骨组织生理代谢之间存在着密切的联系，而人甲壳质酶蛋白40(YKL-40)对乳腺癌发病机制中的PI3K/Akt信号通路具有一定调控作用，由此推测YKL-40可能通过PI3K/Akt信号通路对膝骨性关节炎软骨细胞凋亡进行调控。 目的：研究YKL-40通过PI3K/Akt信号通路调控膝骨性关节炎兔软骨细胞凋亡的作用机制。方法：①将新西兰大白兔随机分为2组，膝骨性关节炎模型组采用前交叉韧带离断术制作右后膝骨性关节炎动物模型，正常对照组仅切开右后膝关节囊，造模后第6周取材并分离软骨细胞，予以软骨组织苏木精-伊红染色及Mankin组织学评分，同时免疫组化染色检测软骨细胞Ⅱ型胶原表达；②正常对照组兔第2代软骨细胞为正常对照组；将膝骨性关节炎模型组兔第2代软骨细胞分为4组，模型组仅予以含体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM培养基培养，模型+YKL组培养基中加入100 μg/L YKL-40干预，模型+LY组培养基中加入50 µmol/L PI3K通路抑制剂LY294002干预，模型+YKL+LY组：培养基中加入100 μg/L YKL-40和50 µmol/L LY294002干预，采用免疫印迹法检测各组软骨细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶13、Akt、p-Akt、P53、Bcl-2蛋白表达水平。结果与结论：①经软骨组织苏木精-伊红染色、Mankin组织学评分及软骨细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色证实，膝骨性关节炎动物模型构建和软骨细胞培养均获得成功；②模型组Ⅱ型胶原、Bcl-2、p-Akt蛋白表达明显低于正常对照组(P < 0.05)，基质金属蛋白酶13、P53蛋白表达明显高于正常对照组(P < 0.05)；与模型组比较，模型+YKL组上述指标得到明显改善(P < 0.05)，而模型+LY组上述指标则进一步恶化(P < 0.05)，模型+YKL+LY组上述指标与模型组比较无显著性差异(P > 0.05)，但与模型+YKL组和模型+LY组比较有显著性差异(P < 0.05)；各组Akt蛋白表达水平比较无显著性差异(P > 0.05)。提示：YKL-40可通过激活活化PI3K/Akt信号通路，起到抑制兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡，加快软骨损伤修复和延缓软骨退行性改变的作用，可作为临床治疗膝骨性关节炎的新作用靶点。ORCID: 0000-0002-7889-445X(田胜兰) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程     

膝关节骨性关节炎生物力学模型及其软骨表面应力分析

背景：膝关节骨性关节炎主要以软骨退变,骨质增生进而影响到关节周围软组织致关节疼痛,负重后加重以及后期致关节变形的慢性疾病。 目的：实验收集膝关节骨性关节炎患者及正常人的膝关节影像学参数,再先后导入各种软件建立模型,然后在模型上模拟膝关节下蹲动作,并收集下蹲过程中膝关节骨性关节炎患者及正常人膝软骨表面的应力数据,并将两者进行对比从而得出膝关节骨性关节炎患者软骨表面应力特征。 方法：收集膝关节骨性关节炎患者及正常人各30例,通过影像学CT,MRI检查获得数据,将得到的数据通过Mimics软件、Simpleware软件分析后建立模型,通过模型获得膝关节软骨应力相关数据,最后进行膝关节骨性关节炎患者与正常人数据的对比分析,分析总结得出膝关节骨性关节炎患者关节软骨的应力特点。 结果与结论：膝关节骨性关节炎患者从站立到下蹲过程中膝软骨表面应力一般呈现非线性递增趋势。膝关节骨性关节炎患者下蹲过程中膝软骨表面中间外侧应力应力高于正常人体组(P < 0.05),而其下蹲过程中膝软骨表面靠近远端应力及前后侧应力与正常人相比差异无显著性意义(P > 0.05)。结果证实,成功建立膝关节骨性关节炎肌骨模型和有限元模型,建立的模型更接近真实膝关节的运动特征,通过模型为膝关节骨性关节炎疾病提供膝部组织定量的生物力学数据。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

可注射性纤维蛋白凝胶/脱钙骨基质复合支架延缓兔骨关节炎软骨退变

背景:纤维蛋白凝胶及脱钙骨基质都有优良的生物相容性及生物降解性,因此可以作为软骨组织工程支架培养软骨种子细胞。这两种材料分别可以作为生长因子的载体缓慢释放生长因子,并达到持续发挥促软骨细胞生长的功能。目的:验证可注射性纤维蛋白凝胶/脱钙骨基质复合支架延缓骨性关节炎的可行性及有效性。方法:实验为同体对照动物实验。16只兔切断双后肢前交叉韧带制备兔膝关节骨性关节炎模型,兔一侧膝关节内注射复合支架材料与软骨细胞混悬液为实验组。另一侧膝关节内注射等量生理盐水为对照组,12周后取关节软骨,分别进行苏木精-伊红染色,Masson染色,Ⅱ型胶原免疫组化染色,并根据Wakitani标准及Outerbridge分类重新制定标准进行评分,评价实验组与对照组软骨退变的程度。结果与结论:实验组关节软骨表面尚光滑,可见软骨陷窝,结构软骨退变较对照组轻;软骨细胞及Ⅱ型胶原较正常软骨组织轻度减少,关节囊组织无明显Ⅱ型胶原表达。实验组综合评分低于对照组(P0.01)。表明可注射性纤维蛋白凝胶/脱钙骨基质复合支架为早期骨性关节炎及骨缺损修复提供了一种优良的复合支架材料。     

关节腔内注射医用臭氧对兔膝骨性关节炎模型基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的观察膝关节腔内注射医用臭氧对兔膝骨性关节炎模型关节软骨中基质金属蛋白酶-9表达的影响。方法健康家兔30只,随机分为对照组(空气组)、骨性关节炎组(OA组)和医用臭氧组(25μg/ml),使用Hulth法复制出膝骨性关节炎(OA)模型。分别在造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度,末次注射后3 d处死实验兔,免疫组化方法与Western blot方法检测关节软骨中MMP-9蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测关节软骨中MMP-9 mRNA水平的变化。结果造模成功后,OA组和医用臭氧组兔膝关节活动度均显著降低,但是采用医用臭氧治疗后,医用臭氧组兔膝关节活动度显著升高。OA组兔关节软骨中MMP-9蛋白与mRNA的表达水平比对照组显著升高,但臭氧组兔膝关节MMP-9蛋白与mRNA的表达显著降低。结论降低关节软骨中基质金属蛋白酶-9的表达可能是医用臭氧有效治疗膝关节炎的作用机制之一。     

超声对软骨细胞凋亡、caspase-8和caspase-3表达的影响

背景：超声治疗能够缓解疼痛,改善膝骨关节炎患者的运动功能,但目前关于超声治疗的文献缺乏一致性。 目的：进一步验证超声治疗的膝骨关节炎有效性。 方法：24 只兔子随机分为3组,正常组不干预;模型组兔行前交叉韧带离断诱导膝骨关节炎,不接受任何治疗;超声组兔建模后接受超声波治疗10 min/次,1次/d,0.3 W/cm2,1 MHz,共治疗10次。采用苏木精-伊红染色进行兔关节软骨组织学观察,运用免疫印迹和 RT-PCR技术检测兔软骨中的caspases3和caspases8 的表达,TUNEL技术检测兔膝骨关节软骨细胞凋亡率。 结果与结论：正常兔软骨组织软骨细胞呈柱状整齐的排列,模型中软骨层变薄,软骨细胞排列无序而少。超声治疗后软骨细胞重新排列,趋于整齐,细胞数增加。模型组为膝骨关节炎模型;与正常组比较,模型组和超声组改良Mankin 评分较高,模型组和超声组软骨细胞凋亡指数更高,模型组高于超声组。与正常组比较,模型组和超声组caspase-3 和caspase-8表达较高,超声治疗后两项指标表达下降。结果表明,超声可以改善软骨组织结构、降低caspase-3、caspase -8的表达,降低软骨细胞凋亡。提示超声治疗膝骨关节炎是有效的。     

威灵仙提取物干预膝骨关节炎软骨细胞的生长活力

背景：近年来研究显示关节软骨细胞过度凋亡是骨性关节炎开始和进展的关键因素,利用药物抑制软骨细胞凋亡来控制骨性关节炎的进展是现在的研究热点。而威灵仙在国内临床治疗骨关节炎时取得了较确切的疗效,但是其具体的作用机制是否通过抑制软骨细胞凋亡来实现尚未见相关报道。 目的：观察中药威灵仙提取物对膝骨关节炎软骨细胞生长活力的影响。 方法：取骨关节炎晚期行膝关节置换的关节软骨,剪碎后,采用酶消化法消化细胞,将处于对数生长期第3代细胞随机分组,实验组分别加入0.01,0.05,0.1,0.5,1.0 g/L威灵仙提取物培养基,对照组仅加入普通培养基进行培养。Live/Dead染色法测定人软骨细胞活力指数,TUNEL染色法测定人软骨细胞凋亡指数。 结果与结论：0.05,0.1 g/L威灵仙提取物能明显提高软骨细胞活力,而0.5,1.0 g/L威灵仙提取物反而降低了软骨细胞活力,其活力指数与对照组比较差异均有显著性意义(P < 0.05);0.01,0.05,0.1 g/L威灵仙提取物能有效抑制软骨细胞凋亡,1.0 g/L威灵仙提取物反而促进了软骨细胞凋亡,其凋亡指数与对照组比较差异均有显著性意义(P < 0.05)。结果可见威灵仙提取物在合适的质量浓度时能有效提高人软骨细胞活力,抑制人软骨细胞凋亡,尤以0.1 g/L时效果最佳。     

Horizontally oriented clusters of multiple chondrons in the superficial zone of ankle, but not knee articular cartilage

Osteoarthritis is a progressive disease that is initiated at the surface of articular cartilage and proceeds to destroy the entire depth of the cartilage. The prevalence of osteoarthritis varies in different joints; e.g., the ankle joint has a very low prevalence of the disease compared to the knee joint. To better understand any inherent differences between the articular cartilage of the ankle and that of the knee that would account for the difference in occurrence of osteoarthritis, studies were undertaken to examine differences between the superficial zones in these two joint cartilages obtained from human donors. Chondrocytes in the superficial zones of the normal ankle (talocrural) and the normal knee (tibiofemoral) joints were identified with a monoclonal antibody specific for the superficial zone protein (SZP). When the chondrocytes from both joints were compared in serial horizontal sections, the chondrocytes in the superficial zone of the knee cartilage were seen either as isolated single cells or as doublets. However, the chondrocytes within the superficial zone of normal ankle cartilage were arranged in planar clusters containing multiple chondrons composed of 2-13 cells. There were no detectable differences in the chondrocyte clusters in the superficial zone of the ankle with respect to age, gender, or site on the cartilage surface. Adjacent to a lesion in an ankle joint with degenerative changes, the clusters were larger, containing up to 22 chondrocytes. This is the first report documenting the presence of multiple chondrons in the superficial zone of normal human adult articular cartilage.     

以关节不稳建立的大鼠骨关节炎模型

背景：骨性关节炎是一种复杂的多病因退变性关节疾病。早期进行骨性关节炎的防治尤其重要。但获取足量的适合研究的早期骨性关节炎的人类骨标本十分困难。 目的：观察关节不稳方法建立骨关节炎模型大鼠的关节软骨组织学变化。 方法：10周龄雄性SD大鼠随机分为2组：实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于术后1,2,4,6,8周取右膝关节标本,行病理组织学检查分析大鼠骨关节炎病程的变化情况。 结果与结论：①术后2,4,6,8周,实验组关节软骨退变程度呈现轻度糜烂、溃疡磨损、严重磨损、骨赘形成等病理变化。②术后1,2,4,6,8周,实验组关节软骨评分均明显高于对照组(P < 0.05)。结果显示该实验采用内侧副韧带切断+内侧半月板切除方法成功建立了大鼠膝关节骨关节炎模型,且造模后4周内的病理、形态学改变类似于人类早期膝关节骨关节炎表现,是研究早期骨关节炎的理想模型。     

鹿茸多肽干预膝骨性关节炎软骨细胞的增殖

背景：软骨细胞体外培养实验证实,鹿茸多肽其具有显著的促细胞有丝分裂活性,可刺激软骨细胞的增殖。 目的：观察鹿茸多肽对实验性骨性关节炎相关细胞因子的调节作用和对软骨细胞增殖的影响。 方法：将新西兰大白兔随机分成正常组,假手术组和模型组。正常组不予任何处理,假手术组左膝关节内侧皮肤切开后缝合,模型组建立左膝骨性关节炎模型。模型组建模成功后再将随机分为2组,鹿茸多肽组给予鹿茸多肽针剂生理盐水稀释液关节腔注射干预,生理盐水组给予生理盐水关节腔注射作为对照,干预后第1,7,15,30 天分别观察鹿茸多肽组和生理盐水组关节软骨形态学变化和软骨细胞结构变化;酶联免疫吸附法检测关节液中白细胞介素1β,肿瘤坏死因子α和转化生长因子β1的水平,免疫组织化学法检测关节软骨增殖细胞核抗原表达并计算细胞增殖指数。 结果与结论：在相同时间段内,与生理盐水组相比,鹿茸多肽组关节软骨增殖细胞核抗原表达,细胞增殖指数及关节液中转化生长因子β1含量均增高(P < 0.05),关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平明显降低 (P < 0.05)。结果证实鹿茸多肽可降低实验性骨性关节炎过程中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平,提高转化生长因子β1水平,并可促进关节软骨细胞的增殖。     

膝关节骨关节炎患者软骨炎症因子表达与病变程度的相关性

文题释义： 金属蛋白酶组织抑制因子1：是金属蛋白酶组织抑制因子家族成员,在人的细胞和组织中广泛表达,具有独特的分子特性和特征,已被证明在各种生物过程的调节中表现出多种活性,如细胞生长,凋亡和分化等。金属蛋白酶组织抑制因子1作为骨中的局部细胞因子,通过抑制成骨细胞分化和诱导成骨细胞凋亡来调节骨代谢。 Mankin评分：是学术界公认的对骨性关节炎软骨退变程度进行评价的通用标准。具体评价方法为：Ⅰ软骨结构：正常0分,表面不规则1分,血管翳形成和表面不规则2分,裂隙进入过渡层3分,裂隙进入辐射层4分,裂隙进入钙化层5分,结构完全破坏6分;Ⅱ软骨细胞：正常0分,弥漫性细胞增加1分,局部细胞增加2分,细胞数目明显减少3分;Ⅲ软骨基质染色：正常0分,轻度减少1分,中度减少2分,重度减少3分,无着色4分;Ⅳ潮线完整性：完整0分,被血管破坏1分。4项总和为Mankin评分结果,分数越高,软骨退变程度越严重。 背景：在骨性关节炎的发展过程中,导致软骨最终破坏的机制尚不清楚。研究表明,基质金属蛋白酶家族在软骨基质降解中起着重要作用。 目的：观察膝关节骨关节炎患者的基质金属蛋白酶3、金属蛋白酶组织抑制因子1表达与病变程度的相关性。 方法：研究经沈阳市骨科医院伦理委员会批准。收集行人工全膝关节置换的40例骨关节炎患者的胫骨平台,所有患者均自愿捐赠标本并签署知情同意书。根据Kellgren-Lawrence分级标准评价影像学骨关节炎的分级及分组：对照组6例;KL2级组11例;KL3级组15例;KL4级组14例。将标本行苏木精-伊红染色,采用Mankin病理评分对骨关节炎软骨病理学改变进行组织形态学评估,利用免疫组织化学方法检测各组软骨中的基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子1的水平。 结果与结论：①苏木精-伊红染色观察发现,对照组软骨层厚,软骨细胞数量多且排列整齐;KL2组软骨浅表层不平整,偶见裂隙形成;KL3组软骨层纤维化,软骨细胞排列紊乱;KL4组软骨层结构丧失,软骨细胞数量少且排列紊乱;②免疫组织化学方法检测发现,骨关节炎组基质金属蛋白酶3表达均显著高于对照组,并且骨关节炎组中KL2组、KL3组、KL4组的基质金属蛋白酶3表达呈上升趋势(均P < 0.05);骨关节炎组金属蛋白酶组织抑制因子1的表达均显著低于对照组,并且骨关节炎组中KL2组、KL3组、KL4组的金属蛋白酶组织抑制因子1表达呈下降趋势(均P < 0.05);③基质金属蛋白酶3表达水平与Mankin评分存在显著的正相关(r=0.899,P < 0.001);金属蛋白酶组织抑制因子1表达水平与Mankin评分存在显著的负相关(r=-0.903,P < 0.001);金属蛋白酶组织抑制因子1表达水平与基质金属蛋白酶3表达水平存在显著的负相关(r=-0.881,P < 0.001); ④结果说明,骨关节炎患者关节软骨基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子1水平与病变严重程度相关,可用作评价膝关节骨关节炎病程和进展的有效指标。 ORCID: 0000-0003-3357-1523(邬波) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

膝关节股骨远端软骨硬化前后力学性能分析

目的建立膝关节有限元模型,研究正常及软骨硬化情况下膝关节的应力、应变变化,为临床治疗膝关节骨性关节炎提供参考。方法通过Mimics、ANSYS等软件结合正常膝关节CT扫描图像数据,建立膝关节三维有限元模型,并施加350 N压力载荷,设定软骨硬化前后相关的材料参数,分析膝关节主要组织的应力、应变改变情况。结果膝关节股骨远端软骨硬化后,关节软骨的减震和传递负荷等作用基本消失;股骨应力、应变变化量最大,受力分布极不均匀,股骨前端应力、应变较内、外侧髁明显,整体受力也有明显增加;半月板的应力、应变值最大。结论长期的软骨破坏会影响关节软骨营养代谢,导致骨性关节炎疾病进一步恶化。研究结果可以较好阐释骨性关节炎发病过程和机理,同时为建立参数化研究系统提供相关数据。     

当归-牛膝对兔骨关节炎PI3K/AKT通路的影响

目的：为探讨当归注射液-牛膝总皂甙对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡及PI3K/AKT通路的影响。方法：60只新西兰兔随机分为6组,每组10只,分别为：正常组、模型组、当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组、布洛芬组、当归-牛膝中药颗粒配伍组,正常组常规饲养余各组采用改良Hulth法复制膝骨关节炎模型。取材前14d灌胃,造模术后45d处死。流式细胞术检测软骨细胞的凋亡率,应用免疫印迹法检测关节软骨PI3K/AKT通路AKT的Thr308表位活化程度。结果：①软骨细胞凋亡率检测：模型组软骨细胞凋亡率高于正常组;当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组、布洛芬组分别与模型组比较有统计学差异（P〈0.01）,组间比较无差异;中药颗粒组与模型组比较有统计学差异（P〈0.01）;中药颗粒组低于布洛芬组有统计学差异（P〈0.05）;当归注射液-牛膝总皂甙组和牛膝总皂甙组的凋亡率均低于当归-牛膝中药颗粒配伍组有统计学差异（P〈0.05）。②软骨组织AKT1的表达量：模型组的软骨组织AKT的Thr308表位活化程度低于正常组,当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组和布洛芬组与正常组接近,中药颗粒组低于正常组。当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组和布洛芬组软骨组织AKT的Thr308表位活化程度高于模型组,中药颗粒组与模型组相近。当归注射液-牛膝总皂甙组、牛膝总皂甙组和布洛芬组软骨组织AKT的Thr308表位活化程度几近相等,以当归注射液-牛膝总皂甙组稍高,比中药颗粒组高。结论：当归注射液-牛膝总皂甙组及布洛芬组可以有效的减少骨关节炎病变过程中软骨细胞的凋亡,一定程度改善骨关节炎病理,其机制可能与其干预兔早期膝骨关节炎软骨组织PI3K/AKT信号通路有关。