HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

 目的建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究。方法以氟康唑为内标,血浆样品经预处理后,选用HypersilODS₂色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(49∶51)为流动相,流速1.0mL·min^-1,室温260nm处测定。结果黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L^-1,最低定量浓度为5μg·L^-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均<12%。黄豆苷元药动学参数t_1/2为(3.863±0.983)h,ρ_max(192.261±115.077)μg·L^-1,t_max(0.900±0.409)h,AUC_0～12(490.839±162.855)μg·h·L^-1,AUC_0～∞(535.279±163.190)μg·h·L^-1。结论本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究。     

RP-HPLC测定西洛他唑的血药浓度及药动学研究

 目的建立RP-HPLC测定人血浆中西洛他唑含量,并研究西洛他唑片在健康人体内的药动学。方法色谱柱为HypersilODS-2(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水(45∶55),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长254 nm。结果西洛他唑在25～2 000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 2),血浆最低检测浓度为10μg·L^-1,日内及日间RSD均小于6%,在3种不同浓度下,平均回收率分别为102.71%,102.03%和99.01%。人体药动学研究表明,药-时曲线符合二房室模型,主要药动学参数t_max 3.7 h,ρ_max749.2μg·L^-1,AUC_0～48 10 088.5μg·h·L^-1,t_1/2α 2.5 h,t_1/2β11.9 h。结论此法简便、灵敏、准确、稳定,可用于药物分析,其药动学参数可为临床合理用药提供理论依据。     

液质联用测定人血浆中泮托拉唑的浓度

 目的 测定人血浆中泮托拉唑的浓度,并评价国产和进口泮托拉唑钠肠溶片的生物等效性。方法 采用LC-MS/MS测定人血浆中泮托拉唑的浓度,以DAS2.0计算药动学参数考察其生物等效性。结果 受试制剂和参比制剂的泮托拉唑t_1/2分别为（1.96±0.66）和（1.98±0.59）h,t_max分别为（3.17±0.84）和（3.09±0.81）h,ρ_max分别为（3.53±0.78）和（3.41±0.79）μg·mL^-1,AUC_0-∞分别为（10.12±4.09）和（10.86±3.99）μg·h·mL^-1。生物利用度为（97.9±22.3）%。结论 该方法重复性好,灵敏度高,泮托拉唑钠肠溶片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

FLU-HPLC测定复方吴茱萸巴布膏中阿魏酸血药浓度及药动学研究

 目的建立大鼠血浆中阿魏酸的FLU-HPLC测定方法,研究大鼠透皮给药复方吴茱萸巴布膏的药物动力学。方法色谱柱Venusil ASB-C_l8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(35∶65∶0.6),流速0.8 mL·min^-1,激发波长352nm,发散波长467 nm。采用固相萃取法去除血浆中杂质,荧光检测-高效液相色谱法测定了血样中阿魏酸的浓度,并用3P97软件进行了药动学参数的计算。结果方法的最低检测浓度为1.5μg·L^-1(S/N=3),绝对回收率范围为87.82%～96.51%。透皮给药后,药-时曲线符合一室模型,主要药动学参数A457.569μg·L^-1,K_a 0.146 h^-1,K_e0.090 h^-1,ρ_max 81.581μg·L^-1,t_max 8.639 h,Lag time 0.290 h。结论与传统方法比较,本方法灵敏度高、准确,更适用于阿魏酸血药浓度的测定及药动学研究。     

反相高效液相串联质谱检测法测定人血浆中阿立哌唑的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中阿立哌唑浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马C18反相柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对阿立哌唑(m/z 448.3→285.0)和内标替米沙坦(m/z 515.3→497.3)进行测定。并用此法测定30例患者稳态血药浓度。结果阿立哌唑的高(400μg·L^-1)、中(125μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为94.27%、102.58%和97.97%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为1μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=0.5469ρ+0.0714,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

大鼠血浆佐米曲普坦的HPLC测定方法学研究

 目的建立大鼠血浆中佐米曲普坦的高效液相测定方法,并研究大鼠不同途径给药后的药动学。方法采用甲基叔丁基醚为溶剂,提取药物。以0.05%三乙胺(用磷酸调至pH 2.70)-乙腈(92∶8)为流动相,色谱柱为Dikma Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流速1.2 mL·min_-1,荧光检测的激发波长225 nm,发射波长360 nm。结果佐米曲普坦在2.5～1 000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 7)。高、中、低3种浓度的提取回收率分别为90.10%,91.75%,86.79%,方法回收率分别为103.55%,94.49%,98.79%,日内和日间RSD均小于4%,最低检测限为1μg·L^-1。计算出灌胃、静注、鼻腔给药途径主要药动学参数分别为:t_1/2(2.03±0.88)h,ρ_max(144±28)μg·L^-1,t_max(0.85±0.14)h,AUC_0～t(442±110)μg·h·L^-1;t_1/2(1.40±0.12)h,ρ_max(567±55)μg·L^-1,AUC_0～t(1 075±128)μg·h·L^-1;t_1/2(1.48±0.23)h,ρ_max(304±34)μg·L^-1,t_max(0.65±0.14)h,AUC_0～t(685±43)μg·h·L^-1。结论该方法操作简单、快速、准确、重现性好,适用于大鼠血浆中佐米曲普坦浓度的检测及其药动学研究。     

反相高效液相色谱法同时测定血浆中10种苯二氮类药物

 目的建立反相高效液相色谱法同时测定人血浆中10种苯二氮类药物(氯氮、咪达唑仑、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑、劳拉西泮、阿普唑仑、氯硝西泮、地西泮和三唑仑)。方法血浆样品经二氯甲烷萃取后,采用Shim-pack CLC-C₈色谱柱,柱温35℃,流动相为0.01mol·L^-1磷酸盐缓冲液-乙腈-无水乙醇-甲醇(68.2∶31.2∶0.3∶0.3),流速为1.10mL·min^-1,紫外检测波长230nm。结果血浆中氯氮、咪达唑仑、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑、劳拉西泮、阿普唑仑、氯硝西泮、三唑仑和地西泮在40～2000μg·L^-1内线性关系良好(r≥0.9992),平均方法回收率均在97%～104%,萃取回收率均在70%以上,日内和日间RSD均≤11%(n=5)。结论本方法准确快速、简便易行,适用于人血浆中10种苯二氮类药物的同时检测。     

LC-ESI-MS/MS测定人血浆中氨氯地平的含量

 目的建立高灵敏度的LC-ESI-MS/MS测定人血浆中氨氯地平浓度的方法。方法血浆样品经氢氧化钠溶液碱化,乙醚液-液萃取后进行分析。色谱柱COSMOSIL C₁₈柱(2.0mm×150mm,5μm),流动相甲醇-水-甲酸(60∶40∶0.1),流速0.25mL·min^-1,通过电喷雾离子化四极串联质谱,以选择离子反应监测(SRM)扫描方式进行检测。用于定量分析的监测离子分别为m/z409→238(氨氯地平)和m/z237→194(内标,卡马西平)。结果回收率为86%～95%,线性范围为0.1～6μg·L^-1,定量下限为0.1μg·L^-1,检测限为0.01μg·L^-1,应用此法测定了20名健康受试者交叉口服5mg氨氯地平剂量的试验制剂和参比制剂后的血药浓度经时过程。结论该法具有更高的灵敏度,适用于测定口服低剂量药物后人血浆中氨氯地平的浓度。     

健康人单次和多次口服阿立哌唑片的药动学研究

 目的建立测定阿立哌唑血浆药物浓度的HPLC-UV检测法,研究国产阿立哌唑片在人体的药动学。方法12名健康志愿受试者和14名健康志愿受试者分别单剂量和多剂量po 20 mg国产阿立哌唑片,采用HPLC测定给药后不同时间点血浆中阿立哌唑浓度,用DAS1.0(3P97药动学程序Windows升级版)处理经时血药浓度数据,计算主要药动学参数。结果单次口服阿立哌唑片后的主要药动学参数:ρ_max为(108.4±22.5)μg·L^-1,t_max为(4.9±0.7)h,AUC_{0～192 h}为(5 748.2±874.5)μg·h·L^-1,t_1/2β为(107.43±29.03)h,CL/F和V/F分别为(3.56±0.55)L·h^-1和(261.60±49.14)L。多次口服阿立哌唑片共14 d达稳态,稳态血药浓度期间给药后(4.0±0.9)h达到峰浓度(480.3±126.2)μg·L^-1,AUC_{0～360 h}为(38 166.6±13 241.2)μg·h·L^-1,t_1/2β为(91.0±21.1)h,CL/F和V/F分别为(0.62±0.36)L·h^-1和(60.9±43.7)L。结论国产阿立哌唑的血药浓度-时间曲线符合二室开放模型,为今后的合理用药打下基础。     

反相高效液相串联质谱法快速测定人血浆中齐拉西酮的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中齐拉西酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马公司C18反相柱(Dialmonsil C₁₈ column,4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1 mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对齐拉西酮(m/z 413.2→194.1)和内标替米沙坦(m/z 515.3→276.2)进行测定,并用此法测定20例患者稳态血药浓度。结果齐拉西酮的高(250μg·L^-1)、中(100μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为100.33%,94.31%和104.70%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=1.367 7ρ-0.024 5,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

LC-MS/MS 测定大鼠血浆中香柑内酯及其药代动力学研究

目的:建立测定香柑内酯(berg)血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-ESI-MS)联用的分析方法,并探讨其在大鼠体内的药动学。方法:采用Hypersil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相甲醇-水(77.5∶2.5),流速0.8mL.min-1,柱温30℃,检测波长300 nm。结果:Berg在8.12～162.4μg.L-1(r=0.999 9)线性关系良好。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于berg的体内定量分析,berg在大鼠体内药动学过程属于一级吸收二室模型。     

HPLC测定复方龟鹿颗粒中甜菜碱的含量

目的:建立测定复方龟鹿颗粒中甜菜碱含量的方法。方法:采用HPLC柱前衍生化来测定复方中的甜菜碱,shim-pack CLC-ODS色谱柱(6.0 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-水(35∶65,其中含有0.1 mol.L^-1NaClO₄),流速1 mL.min^-1,检测波长254 nm。结果:甜菜碱在0.090～0.585μg线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率98.4%,RSD 2.5%(n=5)。结论:本法准确可靠,可用于复方龟鹿颗粒的质量控制。     

HPLC-ESI-MS测定冬虫夏草和蚕蛹虫草中腺苷和虫草素含量

目的 :建立测定冬虫夏草及蚕蛹虫草中腺苷和虫草素的方法。方法 :HPLC-ESI-MS法 ,用甲醇为提取溶剂 ,采用选择性离子检测 (SIM)和电喷雾离子化 (ESI) ;色谱条件 :ShimadzuVP-ODS色谱柱 ;流动相水 甲醇 甲酸(94∶5∶1) ,以 2 氯腺苷为内标。结果 :腺苷回归方程Y=0 .1346X +0.0129,r=0.9984 ,线性范围 0.5～124.5mg·L^-1;虫草素回归方程Y=0.2164X +0.0215 ,r=0.9991,线性范围 0.5～ 136 .5mg·L^-1;腺苷和虫草素加样回收率分别为 95 .8%及 98.1%。结论 :方法灵敏、快速和选择性好 ,可用于冬虫夏草及其代用品中腺苷和虫草素的分析及质量控制。     

HPLC法测定夏桑菊颗粒中熊果酸的含量

目的　建立夏桑菊颗粒中熊果酸的含量测定方法。方法　高效液相色谱法。结果　采用 DiamonsilC1 8柱 ,流动相为 :甲醇 -水 -冰乙酸 -三乙胺 (95∶ 5∶ 0 .3∶ 0 .0 2 ) ,流速为 0 .8m L· min- 1 ,检测波长为 2 15 nm,理论塔板数按熊果酸色谱峰计不低于 6 0 0 0。熊果酸在 16 .8～ 5 0 .4μg· m L- 1 范围内呈良好的线性关系 ,r =0 .9998,平均回收率为 97.5 8% ,RSD为 1.5 8% (n=5 )。结论　该方法简单易行 ,结果准确、重现性好     

全自动在线固相萃取-高效液相色谱法快速测定中药复方中小檗碱的含量

目的:建立在线固相萃取-HPLC方法测定中药复方中小檗碱的含量.方法:通过双梯度高效液相系统中的一个泵(上样泵)实现净化,再经过阀切换将目标物从固相萃取柱中切换至分析柱中进行测定.上样泵以乙腈-500 mmol· L-1醋酸铵溶液为流动相,采用硅胶基质强阳离子交换小柱(4.6 mm×50 mm,300(A))为在线固相纯化柱,采用梯度洗脱方式进行样品净化;分析泵以乙腈-30 mmo1·L-1磷酸二氢钾为流动相,采用Acclaim C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,柱温35℃,流速1.0mL· min -,UV检测波长为345 nm.结果:小檗碱在1.24 ～ 124 mg·L-1线性关系较好(r =0.999),平均回收率99.5％.结论:方法快速、简便,专属性、重复性较好,测定结果准确.     

高效液相色谱法测定锦灯笼药材中维生素C含量

目的:建立一种测定锦灯笼药材中维生素C含量的方法。方法:色谱柱采用Agilent TC-18(4.6mm×150mm,5μm),柱温为25℃,以0.1%草酸水为流动相,流速为0.5 mL.min-1,UV检测器,检测波长为265nm。结果:样品进样量在4.72～23.6μg时呈良好的线性关系(r=0.9997);加样回收率分别为99%和97%,RSD为2.52%和2.12%。结论:本法操作简便,分离效果好。     

HPLC同时测定冠心宁冻干粉针中丹参素和原儿茶醛的含量

目的：建立同时测定冠心宁冻干粉针中丹参素和原儿茶醛含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Hypersil ODS₂C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相甲醇-0.5%冰醋酸水溶液（4.5∶95.5）,检测波长280 nm。结果:丹参素和原儿茶醛分别在3.004～45.06 μg·mL^-1（r=0.999 5,n=6)和0.300 6～4.509 μg·mL^-1（r=0.999 3,n=6)呈良好线性关系,平均回收率分别为99.1%和97.9%。结论:测定方法准确、重复性好,可作为评价冠心宁冻干粉针质量的依据之一。     

HPLC测定血浆中葛根素

 目的:建立血浆中葛根素的高效液相色谱测定方法，为含葛根素中药复方体内代谢研究提供基础。方法:血浆用0.58 mol· L^-1高氯酸沉淀蛋白质，采用Shimpack CLC-ODS柱(5μ, 150 mm x 4.6 mm )，预柱为YWG-C₁₈H₃₇,流动相为甲醇-5 . 625 mol· L^-1醋酸-水(25:3:72)，流速为1.00 ml·min^-1，检测波长为247 nm。结果:该法回收率91.0%，方法重现性RSD=0.93%(n=6)。结论:本文建立的高效液相色谱测定方法为动物体内葛根素的测定提供了一个可靠的方法。     

鞣花酸片在家兔体内药代动力学研究

目的:建立鞣花酸片血药浓度的高效液相色谱测定方法,并进行该药物在家兔体内的药代动力学研究.方法:采用Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1％磷酸水(23∶77)为流动相,流速0.8 mL· min-1,检测波长254nm,柱温30℃.结果:家兔血浆中,鞣花酸的线性范围为0.013～1.635 mg·L-1(r=0.998 9),方法回收率＞95％,最低检测限为0.010 mg·L-1,家兔口服给药后,鞣花酸的药时曲线出现双峰,在家兔体内存在肝肠循环.结论:实验建立了家兔血浆中鞣花酸含量的HPLC测定方法,专属性强,可用于该药在家兔体内的药动学研究.     

LC-ESI-MS/MS 快速测定人血浆中奥氮平的浓度及临床应用

 目的 建立快速测定人血浆中奥氮平浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法 (LC-ESI-MS/MS) 。 方法 以 Dikma diamonsil^TM C₁₈ 反相柱（ 4.6 mm × 150 mm , 5 μm ）为色谱柱,流动相为甲醇 -5 mmol·L^-1 甲酸铵（ 90 ∶ 10 ）,流速为 1 mL·min^-1 ,柱温： 25 ℃ ,以乙酸乙酯 - 二氯甲烷（ 4 ∶ 1 ）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（ SRM ）对奥氮平（ <> m/z 313 → 256 ）和内标替米沙坦（ <> m/z 515.3 → 497.3 ）进行测定,并用此法测定 36 例患者稳态血药浓度。 结果 奥氮平的高（ 50 μg · L^-1 ）、中（ 25 μg · L^-1 ）、低（ 1 μg·L^-1 ） 3 个浓度的平均回收率分别为 100.14% 、 100.33% 和 100.21% ,日内（ <> n =5 ）、日间（ <> n =3 ） RSD 均小于 15% ;分析方法的最低定量限为 0.5 μg · L^-1 。线性范围为： 0.5~100 μg · L^-1 ,回归方程为 <> F =1.529 5 <> ρ - 0.014 3 , <> r =0.999 （ <> n =8 ）,权重系数为 1/ <> ρ 。 结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。