HIF-1α对间充质干细胞SDF-1/CXCR4的调控作用研究

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）对间充质干细胞基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1,SDF-1）/CXC趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）的调控作用。[方法]贴壁法培养ICR小鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）;采用RNA干扰技术用SuperFectinTMⅡ转染HIF-1αsiRNA于MSCs;实验分为五组：常氧组、缺氧组、转染Control siRNA组、转染HIF-1αsiRNA常氧培养组、转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组;RT-PCR检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA表达水平;Western blotting检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4蛋白表达水平。[结果]同常氧组比较,缺氧组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平提高（P〈0.05）;同转染Control siRNA组比较,转染HIF-1αsiRNA常氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）;同缺氧组比较,转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）。[结论]缺氧可使MSCs的HIF-1α、SDF-1α、CXCR4的表达提高,常氧与缺氧条件下抑制HIF-1α的表达可使SDF-1α、CXCR4的表达降低,HIF-1α在间充质干细胞中对SDF-1/CXCR4有调控作用。     

基于MALAT1/HIF-1α/ITGαv轴研究扶正祛邪方对结肠癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 通过体外实验观察扶正祛邪方对结肠癌细胞增殖、侵袭的抑制作用及机制。方法 采用低、中、高浓度扶正祛邪方含药血清对结肠癌细胞SW480和LoVo进行干预，CCK-8和克隆形成检测其对结肠癌细胞增殖和克隆形成能力的影响，Transwell侵袭实验检测其对结肠癌细胞侵袭能力的影响，RT-qPCR检测其对长链非编码肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)，缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和整合素αv(ITGαv)mRNA表达的影响，Western-Blot检测其对HIF-1α和ITGαv蛋白表达的影响。结果 与对照组相比，低、中、高浓度组在48h和72h时450nm处吸光度A值较对照组显著降低（ P<0.01）；中、高浓度组结肠癌细胞的克隆形成数显著降低（ P<0.01）；低、中、高浓度组穿膜细胞数显著减少（ <0.01）。不同浓度含药血清干预结肠癌细胞，均能下调MALAT1、HIF-1α和ITGαv在RNA水平的表达；与对照组相比差异显著（均 <0.01）。Western-Blot结果显示，中、高浓度组HIF-1α和ITGαv蛋白表达显著下调（均 <0.01...     

肝星状细胞经趋化因子SDF-1/CXCR4轴途径促进肝癌细胞侵袭的作用及其机制

目的：探讨肝星状细胞（HSC）通过SDF-1/CXCR4轴对肝癌细胞侵袭的影响和可能机制,为研究肝癌的侵袭过程提供依据。方法: 采用Western blotting和RT-PCR检测HSC LX02和肝癌细胞MHCC97、SMMC7721、Hep3B、HepG2中SDF-1和CXCR4的表达。采用Transwell实验检测LX02共培养或外源性SDF-1干预对肝癌细胞HepG2以及CXCR4基因沉默后的HepG2侵袭的影响。Western blotting法检测上皮标志E-Cadherin和间质标志Vimentin的表达水平。结果：与肝癌细胞比较,LX02中趋化因子SDF-1呈高表达（P<0.05）。4株人肝细胞癌细胞均有CXCR4高表达。HSC或SDF-1均能促进肝癌细胞HepG2侵袭（P<0.05）,并诱导E-Cadeherin蛋白表达下调,Vimentin蛋白表达上调。通过RNA干扰技术靶向沉默肝癌细胞CXCR4基因后,HSC和SDF-1对肝癌细胞HepG2侵袭能力均无明显影响（P>0.05）,肝癌细胞E-Cadeherin、Vimentin蛋白及mRNA表达水平亦无明显变化。结论：HSC可通过SDF-1/CXCR4轴促进肝癌细胞侵袭,其机制可能与诱导肝癌细胞上皮-间质转化有关。     

缺氧诱导因子-1α上调Cx43表达造成星形胶质细胞损伤的作用机制研究

目的研究在糖氧剥夺（OGD）条件下,缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）上调缝隙连接蛋白（Cx43）表达造成星形胶质细胞损伤的作用机制。方法采用HIF-1α过表达质粒转染星形胶质细胞HA细胞株构建过表达细胞株,HIF-1α小干扰RNA（siRNA-HIF-1α）转染构建低表达细胞株。同时设置对照组（Con）,在OGD条件下培养细胞。采用RT-qPCR和Westernblot法检测过表达/沉默后HIF-1α和Cx43mRNA和蛋白水平。CCK-8法检测细胞活力,Annexin-FITC/PI染色后流式细胞术检测细胞凋亡率,试剂盒检测谷氨酸水平,ELISA法检测培养基中炎症因子NO、TNF-α、IL-6水平,Westernblot法检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因相关启动子（Bad）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、细胞色素C（Cyt-C）的表达水平。结果HIF-1α过表达后,OGD条件下,HIF-1α-lent组细胞凋亡率显著高于Con组,细胞中HIF-1α、Cx43mRNA和蛋白表达水平显著增高,培养基中谷氨酸、NO、TNF-α、IL-6表达水平也显著高于Con组,细胞凋亡相关蛋白Bad、Caspase-3、Cyt-C表达水平均上调,Bcl-2表达水平下调。而HIF-1α沉默后,OGD条件下,siRNA-HIF-1α组细胞凋亡率显著低于Con组,细胞中HIF-1α、Cx43mRNA和蛋白水平显著降低,培养基中谷氨酸、NO、TNF-α、IL-6表达水平也显著低于Con组,细胞中凋亡相关蛋白Bad、Caspase-3、Cyt-C表达水平均下调,Bcl-2表达水平上调。结论HIF-1α可以通过调控Cx43的表达,调控缺血缺氧下星形胶质细胞的损伤,这是HIF-1α在缺血性脑病发生、发展中的作用机制之一。     

吡非尼酮抑制肿瘤相关成纤维细胞促进结肠癌细胞系HT29上皮间质转化的作用及机制

目的:探讨吡非尼酮在肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）诱导的HT29结肠癌细胞系侵袭、迁移、增殖、上皮-间质转化（EMT）中的作用及机制。方法:利用共培养小室将CAFs与HT29共培养后CCK-8测定HT29增殖效率;Real time-PCR和Western blot检测HT29结肠癌细胞系E-cadherin和Vimentin转录及蛋白表达水平;Transwell实验检测HT29结肠癌细胞的迁移和侵袭能力。ELISA技术检测CAFs细胞上清液中细胞因子的表达。结果:吡非尼酮抑制CAFs对HT29增殖促进作用（P＜0.05）;CAFs条件培养基培养HT29后,Vimentin表达水平显著升高（P＜0.05） ,E-cadherin显著降低（P＜0.05）;吡非尼酮处理CAFs的条件培养基对HT29细胞中两种蛋白无明显影响;Transwell实验表明CAFs与HT29共培养后,其侵袭和迁移能力明显增强（P＜0.05）;ELISA结果提示CAFs分泌TGF-β1功能受吡非尼酮抑制且存在剂量关系。结论:吡非尼酮通过抑制CAFs分泌TGF-β1抑制CAFs诱导HT29结肠癌细胞系侵袭、迁移、增殖、上皮-间质转化。     

下调HIF-1α/PLOD2信号通路对缺氧肾透明细胞癌786-0和ACHN细胞株增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨缺氧条件下缺氧诱导因子1α(HIF-1α)影响肾透明细胞癌（ccRCC）细胞迁移、侵袭和增殖的机制。方法 体外培养人ccRCC细胞,分为正常对照组（NG组）、缺氧组（Hypoxia组,1%O2）和缺氧+HIF-1α抑制剂组（Hypoxia+PX-478组,55μmol·L-1/45μmol·L-1）。用CCK-8法检测细胞活力;用Western blot实验检测各组ccRCC细胞中HIF-1α、2-酮戊二酸5-双加氧酶2(PLOD2)蛋白表达量;用细胞划痕实验检测ccRCC细胞迁移能力;用Transwell实验检测ccRCC细胞迁移、侵袭能力;用克隆形成实验检测ccRCC细胞增殖能力。结果 HIF-1α抑制剂加入后的细胞活力降低,且随着药物浓度升高而降低;与NG组相比,Hypoxia组HIF-1α、PLOD2蛋白表达量均增加（P均<0.05）,与Hypoxia组相比,Hypoxia+PX-478组HIF-1α、PLOD2蛋白表达量发均降低（P均<0.05）;与NG组相比,Hypoxia组ccRCC细胞786-0的迁移、侵袭和增殖能力均提高（P均<0.01）,...     

缺氧诱导因子-1α在喉癌中的表达及其与凋亡和增殖的关系

目的：探讨喉鳞癌中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及其与肿瘤细胞凋亡和增殖的关系。方法：运用免疫组化二步法检测喉鳞癌组织中HIF-1α与增殖细胞核抗原的表达,同时用DNA末端标记法检测喉鳞癌原位细胞凋亡。结果：59例喉鳞癌组织标本中,HIF-1α阳性表达率为54.2%（32/59）,显著高于喉部良性病变（P〈0.05）,并与肿瘤临床分期和淋巴结转移均显著相关（均P〈0.05）,与组织学分级无显著相关（P〉0.05）。HIF-1α阳性表达组的增殖指数（55.50±16.37）显著高于阴性表达组（P〈0.05）,凋亡指数（3.01±1.19）低于阴性表达组,无显著性差异（P〉0.05）。结论：HIF-1α在喉鳞癌的发生发展中起到一定的作用,并与肿瘤细胞的增殖有关,但与凋亡无关。     

极度低氧条件下基质细胞衍生因子-1α过表达对间充质干细胞迁移的影响

目的 研究极度低氧条件下基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)过表达对间充质干细胞（MSCs）迁移的影响。方法 将来源于两只普通级雄性日本大耳白兔[2周龄,体重（250±30）g]的MSCs分为空白组（不进行干预）,AMD3100组[加入SDF-1α受体（CXCR4）特异性抑制剂AMD3100],SDF-1α腺病毒（Ad-SDF-1α）组（进行AdSDF-1α转染）和Ad-SDF-1α+AMD3100组（进行Ad-SDF-1α转染并添加AMD3100）。四组在极度低氧（1%）条件下培养48 h,通过Transwell实验检测其迁移能力,采用实时荧光定量PCR及Western blot检测迁移信号轴缺氧诱导因子-1(HIF-1α)、血管内皮生长因子（VEGF）、CXCR4的mRNA及蛋白表达情况。结果 MSCs贴壁后为梭形、多角形,呈克隆式生长,Ad-SDF-1α转染后可观察到均一且明亮的绿色荧光。AMD3100组光密度（OD）值低于空白组,Ad-SDF-1α组OD值高于空白组,Ad-SDF-1α+AMD3100组OD值高于AMD3100组且低于Ad-SDF-1α组,差异均有统计学意义（...     

缺氧诱导因子-1α在垂体腺瘤中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在垂体腺瘤中的表达及与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法收集的42例垂体腺瘤标本中侵袭性垂体腺瘤27例,非侵袭性垂体腺瘤15例,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1αmRNA的表达;免疫组化染色检测HIF-1α蛋白的表达。并对侵袭组与非侵袭组的HIF-1α蛋白、HIF-1αmRNA表达及不同大小肿瘤HIF-1α蛋白表达进行分析比较。结果非侵袭组垂体腺瘤中HIF-1α蛋白表达阳性率与侵袭组比较,差异有统计学意义(χ2=9.15,P=0.005);而HIF-1αmRNA在侵袭组的表达水平与非侵袭组比较,差异无统计学意义(t=1.041,P=0.329);垂体腺瘤直径>30 mm者HIF-1α蛋白表达阳性率与直径10～30 mm者比较,差异有统计学意义(χ2=4.89,P=0.041)。结论 HIF-1α蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达增加,并且与垂体腺瘤侵袭行为的产生有关。     

缺氧诱导因子-1α过表达可使卵巢癌细胞株SKOV3的E-钙黏蛋白下调

目的探讨缺氧诱导因子-1α（Hypoxia—inducible factor 1α，HIF-1α）和E-钙黏蛋白（E—cadherin，E—cad）在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系。方法在细胞缺氧培养不同时间段，分别采用Western blotting和RT—PCR技术检测HIF-1α和E-cad的蛋白和RNA表达变化；同时用HIF-1α抑制剂雷帕霉索作用于细胞，检测上述各指标的变化。结果随着缺氧时间的延长，HIF-1α蛋白表达逐渐上升，缺氧16h达到高峰，24h仍处于较高水平（P〈0．05），而HIF-1α的mRNA表达变化无明显改变（P〉0．05）；E-cad缺氧8h表达明显下降（P〈0．05），缺氧24h表达仅为对照组的6．37％（P〈0．05）；雷帕霉索可以从蛋白水平抑制HIF-1α表达，防止E-cad在缺氧环境中的降低。结论HIF-1α过表达可通过下调E-cad从而降低SKOV3细胞的黏附能力，由此可能启动肿瘤细胞从原发灶脱落继而转移的第一步。     

干扰素-γ消除肿瘤相关成纤维细胞介导非小细胞肺癌细胞辐射抵抗的实验研究

目的探讨干扰素-γ消除肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）介导的非小细胞肺癌细胞辐射抵抗的效果。方法从2020年12月至2021年6月温州市中心医院胸外科行根治性切除的15例肺癌患者临床标本中提取CAFs,通过流式细胞术、HE染色、免疫组化对分离出的CAFs进行鉴定。将肺腺癌细胞A549和肺鳞癌细胞H460置于直线加速器中辐射。采用Transwell和CAFs细胞上清液培养两种方法对CAFs与辐射后的A549和H460共培养,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡占比,CCK-8法检测肿瘤细胞活性;高效液相色谱法检测CAFs细胞上清液中谷胱甘肽（GSH）、半胱氨酸、胱氨酸水平;Westernblot检测CAFs细胞内胱氨酸转运蛋白xCT、肿瘤细胞内DNA损伤修复蛋白γH2AX、信号传导及转录激活蛋白1（STAT1）表达情况。结果CAFs与辐射后肿瘤细胞共培养后,辐射后肿瘤细胞凋亡占比下降,细胞活性增加;CAFs提高了肿瘤细胞内GSH水平,而干扰素-γ降低CAFs细胞上清液中GSH、半胱氨酸水平,提高胱氨酸水平,进而减少肿瘤细胞活性;干扰素-γ下调xCT在CAFs中表达,干扰素-γ作用后CAFs组的肿瘤细胞中γH2AX表达相应增加,CAFs细胞内STAT1获得激活并使其成为磷酸化STAT1。结论CAFs通过释放GSH来诱导非小细胞肺癌细胞对辐射抵抗,而干扰素-γ则下调xCT在CAFs中表达,进而消除其介导的辐射抵抗。     

miR-155-5p mimic靶向HIF-1α对非小细胞肺癌A549细胞生长和运动能力的调节作用和机制

【摘要】 目的 探讨miR-155-5p mimic靶向缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对非小细胞肺癌A549细胞生长和运动能力的调节作用和机制。 方法 取对数期生长的A549细胞,将未经转染的细胞设为Control组,miR-155 mimic及HIF-1α分别转染至A549细胞,设为miR 155 mimic组和HIF-1α组;再将两者共同转染于A549细胞,设为mimic+HIF-1α组。采用荧光素酶报告基因检测miR 375与SLC7A11的靶向关系,利用RT PCR检测各组细胞miR 155-5p及HIF-1α mRNA表达水平,Edu染色检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室实验检测细胞侵袭,Western blot检测细胞中各蛋白表达。结果 HIF-1α是miR 155-5p-mimic的靶向基因。与Control组相比,miR-155-mimic组HIF-1α-mRNA水平、HIF-1α和Ki67蛋白表达量及增殖细胞数、侵袭细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）,HIF-1α组HIF-1α mRNA水平、HIF-1α和Ki67蛋白表达量及增殖细胞数、侵袭细胞数及划痕愈合率均升高（P＜0.05）。与HIF-1α组相比,mimic+HIF-1α组HIF-1α mRNA水平、HIF-1α和Ki67蛋白表达量及增殖细胞数、侵袭细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）。与Control组相比,miR-155-mimic组N cadherin、VEGF、VEGFR2、P38蛋白表达量降低,E cadherin蛋白表达量升高（P＜0.05）,HIF-1α组N cadherin、VEGF、VEGFR2、P38蛋白表达量升高,E cadherin蛋白表达量降低（P＜0.05）。与HIF-1α组相比,mimic+HIF-1α组N cadherin、VEGF、VEGFR2、P38蛋白表达量降低,E cadherin蛋白表达量升高（P＜0.05）。结论 miR-155-5p可通过靶向抑制HIF-1α表达抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移,其作用机制可能与抑制上皮间质转化及VEGF/P38通路相关。     

汉防己甲素干预HIF-1α/PD-1/PD-L1轴抑制口腔鳞癌侵袭潜能的机制研究

目的 探讨汉防己甲素（tetrandrine, TET）对口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）细胞侵袭潜能的影响及其相关机制。方法 将OSCC细胞随机分为4组：对照组（不加药物处理）、低剂量组（10μmol/L TET）、中剂量组（20μmol/L TET）、高剂量组（30μmol/L TET）。采用MTT法、划痕实验和Transwell实验分别测定各组细胞的活力、迁移及侵袭能力。对OSCC细胞分别转染缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)、程序性细胞死亡蛋白1(programmed cell death protein 1, PD-1)及程序性细胞死亡蛋白1配体（programmed cell death ligand 1, PD-L1）模拟物及抑制剂,均连续转染24 h。采用RT-qPCR检测正常口腔上皮细胞、OSCC细胞以及转染HIF-1α、PD-1、PD-L1模拟物及抑制剂OSCC细胞中HIF-1α、PD-1、PD-L1 mRNA表达水平。通过Western blot检测各组细胞中...     

低氧诱导因子-1α对毛囊细胞的作用

目的探讨外源性人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在成纤维细胞中表达的可行性及其对毛囊周围细胞活性的影响。方法通过脂质体将含有HIF-1αcDNA的真核表达载体pcDNA3.0稳定转染成纤维细胞,应用RT-PCR及Westernblot方法检测HIF-1α在成纤维细胞中的表达,ELISA法检测转染细胞上清液中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达,RT-PCR方法检测转染后细胞中成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达。将该上清加入成纤维细胞及真皮鞘细胞中,MTT法检测加入上清后成纤维细胞及真皮鞘细胞活性。结果RT-PCR及Westernblot可检测出转染后细胞中HIF-1α的表达,MTT检测加入转染上清后成纤维细胞及真皮鞘细胞活性增强（P〈0.05）,并且该上清液VEGF的表达显著高于未转染组（P〈0.01）。转染后成纤维细胞的bFGF的mRNA表达显著高于未转染组（P〈0.01）。结论应用脂质体能够成功地将外源性人HIF-1α基因转染成纤维细胞,并进行有效表达,其表达的HIF-1α可增强细胞活性且可诱导转染细胞上清液中VEGF的表达,并增加bFGF的mRNA表达,且转染细胞上清可增强成纤维细胞及真皮鞘细胞活性。推测HIF-1α通过其下游因子VEGF及bFGF促进毛囊相关细胞的活性,为HIF-1α对毛囊作用的进一步研究打下了基础。     

缺氧诱导因子及其抑制因子调控肾癌细胞生长的实验研究

目的 检测缺氧诱导因子抑制因子（FIH-1）在肾癌细胞中的基因和蛋白表达情况,以进一步了解FIH-1对肾癌细胞生长调控的机制。方法 选取人肾癌细胞株786-0及OS-RC-2,运用real-time PCR（RT-PCR）和Western blot方法检测细胞株中FIH-1、缺氧诱导因子1α（HIF- 1α）、 缺氧诱导因子2α（HIF- 2α）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达水平。并人工构建FIH-1过表达质粒,将其转入上述的两种细胞株中,运用RT-PCR和Western blot方法观察转染后FIH-1、HIF及VEGF的表达情况;同时运用MTT方法分析转染后两种肿瘤细胞的增殖情况。结果 RT-PCR和Western blot检测结果都显示,786-0和OS-RC-2细胞中都能检测到FIH-1和VEGF的表达;OS-RC-2细胞中同时存在HIF-1α和HIF-2α表达,而786-0细胞中只有HIF-2α的表达;786-0细胞中FIH-1表达比OS-RC-2细胞高,VEGF的表达比OS-RC-2低; 转染FIH-1过表达质粒后,OS-RC-2细胞内的FIH-1表达量明显升高,下游蛋白HIF-1α的表达量降低,VEGF的表达量也降低,而HIF-2α的表达量前后不变;在786-0细胞内的FIH-1表达量明显升高时,HIF-2α的表达量不变,VEGF的表达量也不变。在OS-RC-2细胞中,转染FIH-1过表达质粒后细胞的增殖变缓,而786-0细胞的增殖则没有明显的变化。结论 在肾癌细胞中存在FIH-1/HIF-1α/VEGF信号通路,FIH-1反向调节HIF-1α的表达,HIF-1α正向调节VEGF的表达。在HIF-1α及HIF-2α都存在时,FIH-1可通过对HIF-1α调控影响HIF-1α下游基因表达,抑制肾癌细胞的增殖。     

缺氧诱导因子1α过表达对人前列腺癌细胞体外侵袭能力的影响

目的观察转染缺氧诱导因子1α(HIF-1α)能否增强人前列腺癌细胞的体外侵袭能力,并探讨其分子机制。方法用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3．1(-)／HIF1α后转染人前列腺癌细胞LNCaP,600μg／ml G418筛选稳定表达HIF-1α的抗性克隆。免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α过表达,Western印迹法检测侵袭相关蛋白E-钙黏素、波形纤维蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织蛋白酶D(cathepsin D)及尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)的表达,Transwell验证细胞侵袭能力。结果与未转染细胞LNCaP相比,转染细胞LNCaP／HIF1α中出现明显的HIF-1α蛋白条带,并激发出较强荧光,E-钙黏素表达缺失,而vimentin、MMP-2、cathepsin D及uPAR表达增加。Transwell试验进一步证实,LNCaP／HIF1α穿透Matrisel滤膜的细胞数比LNCaP细胞显著增多(4．6±0．4 vs 3．2±0．3,P<0．05)。结论HIF-1α过表达能够诱导人前列腺癌LNCaP细胞的侵袭相关蛋白表达增多,进而显著增强其体外侵袭能力。     

胃癌患者外周血缺氧诱导因子-1α的表达及其意义

目的：检测胃癌患者外周血缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α） mRNA的表达情况,探讨其临床意义。方法采用荧光定量RT-PCR技术检测50例胃癌患者及30例健康对照者外周血中HIF-1αmRNA表达情况。结果胃癌患者HIF-1αmRNA表达阳性率为54．0％（27/50）,高于对照组的0％（0/30）,两组比较差异有统计学意义（P＜0．01）;T3～T4期胃癌患者HIF-1αmRNA阳性表达率为64．7％（22/34）,高于T1～T2期患者的31．3％（5/16）,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论胃癌患者外周血HIF-1αmRNA的表达可作为检测肿瘤细胞转移的分子标志物之一,有助于预后的判断。     

IL-8诱导卵巢癌细胞发生上皮-间质转化初探

目的 初步探讨白细胞介素-8（Interleukin-8,IL-8)在诱导卵巢癌细胞发生上皮-间质转化（EMT）中的作用,为进一步深入研究卵巢癌恶性转移的分子机理奠定基础。方法 实时无标记细胞技术（RTCA）定量分析外源性人重组IL-8诱导卵巢癌细胞株SKOV3的动态迁移情况; Western blot检测IL-8（100 ng/mL）诱导处理SKOV3细胞48 h后EMT相关蛋白的表达变化情况;采用Transwell分析经IL-8诱导处理后的SKOV3细胞侵袭情况。结果 RTCA定量结果显示,IL-8处理SKOV3细胞48 h后细胞的迁移达到平台期;IL-8可使SKOV3细胞的上皮细胞标志物E-cadherin下调,而间质细胞标志物Vimentin和snail的表达上调,促进卵巢癌细胞发生EMT,SKOV3细胞的侵袭能力明显增强（P<0.05）。结论 IL-8可促使卵巢癌细胞获得EMT特性,从而增强其侵袭、迁移能力。     

外周血缺氧诱导因子-1αm RNA表达与结直肠癌侵袭转移的关系

目的探讨外周血缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达与结直肠癌侵袭转移的关系。方法采用荧光RT-PCR技术检测我院2010年1月～2010年10月间40例结直肠癌患者及20例健康对照者外周血中HIF-1αmRNA表达情况。结果 40例结直肠癌患者中检测出HIF-1αmRNA表达的17例,检出率为42.5%(17/40),两组比较差异有统计学意义(P<0.01);且HIF-1αmRNA表达与肿瘤分期密切相关(P<0.05)。结论外周血HIF-1αmRNA可作为检测结肠癌患者肿瘤细胞转移的分子标志之一。