灯盏花素对脓毒症性急性肾损伤保护作用的实验研究

目的观察灯盏花素对脓毒血症模型大鼠急性肾损伤的保护作用。方法清洁级Wistar雄性大鼠60只,随机分为假手术组、脓毒血症模型组和灯盏花素大、中、小剂量组,每组12只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制大鼠脓毒血症模型。灯盏花大、中、小剂量组在造模后立即分别给予灯盏花素5、10、20mg/kg尾静脉注射。术后24h处死大鼠,下腔静脉取血测定肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平,采用酶联免疫法（ELISA）测定血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤分子1（KIM-1）的水平;摘取肾组织标本进行病理组织学观察,免疫印迹法检测肾脏NGAL和KIM-1蛋白含量。结果与脓毒血症组比较,灯盏花素大、中剂量组大鼠血清Scr、BUN、NGAL和KIM-1水平及肾组织NGAL和KIM-1蛋白表达水平均显著降低（P均〈0.05）;肾脏病理改变好转。灯盏花素小剂量组肾脏病理改变未见好转（P〉0.05）。结论灯盏花素可以显著改善脓毒血症模型大鼠肾组织损伤,降低血清NGAL和KIM-1水平及肾组织NGAL和KIM-1蛋白表达量,对脓毒血症所致急性肾损伤具有保护作用。     

黄芪甲苷对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及机制

目的 探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用并探讨其分子机制。方法 将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组：假手术组(sham)、黄芪甲苷组(sham+AS-Ⅳ)、脓毒症组(CLP)和脓毒症+黄芪甲苷处理组(CLP+AS-Ⅳ),每组10只。采用盲肠结扎穿孔术构建脓毒症模型。所有动物在手术前12 h禁食,可自由饮水。通过腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉小鼠。sham组小鼠进行与CLP组相同的剖腹手术,但不结扎和穿刺盲肠。sham+AS-Ⅳ组和CLP+AS-Ⅳ组小鼠术后腹腔注射黄芪甲苷(100 mg/kg)治疗,sham组和CLP组小鼠术后给予腹腔注射等体积生理盐水处理。处理至术后24 h后,采集血、尿等样本并处死小鼠,检测小鼠血清中尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)及尿液中肾损伤分子-1(KIM-1)和尿白蛋白/肌酐(UAlb/Cr)的水平,观察小鼠肾组织形态结构,检测小鼠肾组织中IL-1β、IL-6和TNF-α以及Bax、Caspase-3的mRNA水平,MDA、ROS含量及SOD、GSH的活性,肾组织的细胞凋亡情况,SIR...     

Maresin 1对脓毒症相关急性肾损伤的保护作用及机制实验研究

目的:研究Maresin 1对脓毒症相关急性肾损伤(S-AKI)的保护作用及相关机制。方法:SPF级雄性SD大鼠，采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症大鼠模型。模型大鼠按随机数字表法分成CLP组、CLP+Maresin 1组、CLP+Maresin 1+Nigericin(NLRP3激活剂)组。另取正常大鼠作为Sham组。CLP+Maresin 1组、CLP+Maresin 1+Nigericin组大鼠于术后1 h单次腹腔注射Maresin 1(4 ng/g,溶于200μl 0.9%氯化钠溶液)。CLP+Maresin 1+Nigericin组在给予Maresin 1基础上联合单次Nigericin(1 mg/kg)给药。Sham组和CLP组给予200μl 0.9%氯化钠溶液。12 h后，采血用于血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)生化指标和血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM1)及炎症因子ELISA检测。HE染色检测肾脏病理改变。免疫组化和Western blot检测NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白...     

抑制Pannexin1可能通过减少NLRP3炎症小体的激活减轻脓毒症小鼠脑损伤

目的：探究缝隙连接蛋白Pannexin 1(Panx1)是否参与脓毒症小鼠脑损伤的发生发展及其可能的作用机制。方法：清洁级健康成年雄性C57BL/6小鼠45只,采用随机数字表法分为以下3组：假手术（Sham）组、盲肠结扎穿孔（CLP）组、甘珀酸（Panx1通道抑制剂,CBX）预处理+盲肠结扎穿孔（CLP+CBX）组。除Sham组外,其余两组采用CLP法制备脓毒症脑损伤模型。CLP+CBX组于造模前30 min经双侧侧脑室各注射1μL CBX,对照组双侧侧脑室注射等剂量生理盐水。造模后24 h对各组小鼠行神经行为评分,后麻醉、处死小鼠,心脏灌流后取脑组织,HE染色切片观察海马组织病理损伤,ELISA试剂盒法测定海马组织IL-1β与TNF-α含量,Western Blot及免疫组化检测海马组织Panx1蛋白表达水平,Western Blot检测NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平,RT-PCR检测Panx1、NLRP3、Caspase-1及IL-1β与TNF-α mRNA表达水平。结果：与Sham组相比,CLP组神经行为评分明显降低,海马神经元病理损伤明显,IL-1β与TNF-α表达...     

白藜芦醇对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用和机制研究

目的探讨白藜芦醇对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及作用机制。方法将45只C57BL/6雄性健康小鼠随机分成3组：假手术组（Sham组）、脓毒症模型组[盲肠结扎穿孔（CLP）组]和白藜芦醇实验组（CLP+白藜芦醇组）,每组15只,采用CLP术构建脓毒症小鼠模型,术后72h每组选取存活的5只小鼠处死并取材,检测血肌酐、尿素氮、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤标志物-1（KIM-1）、沉默信息调节相关酶1（SIRT1）表达情况;观察小鼠肾脏结构、肾细胞凋亡情况,计算生存率,检测肾脏组织Caspase-3的表达。结果与Sham组相比,CLP组小鼠肾小球毛细胞血管扩张、充血,肾小管上皮细胞水肿、颗粒性变样,管腔缩小,大量炎症细胞浸润,血肌酐、尿素氮水平均升高（均P＜0.05）,血清NGAL、KIM-1水平均升高（均P＜0.05）;可见大量肾小管上皮细胞凋亡,SIRT1mRNA、蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）,Caspase3蛋白表达上调（P＜0.05）;小鼠7d成活率为0%。与CLP组相比,CLP+白藜芦醇组小鼠肾小球毛细血管扩张不明显,炎症细胞浸润有所减轻,血肌酐、尿素氮水平均降低（均P＜0.05）,血清NGAL、KIM-1水平均降低（均P＜0.05）;且肾小管上皮细胞凋亡明显减少,SIRT1mRNA、蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）,Caspase3蛋白表达下调（P＜0.05）,小鼠7d成活率为30%（P＜0.05）。结论白藜芦醇可能通过激活SIRT1信号抑制凋亡通路抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻脓毒症相关性急性肾损伤程度。     

西维来司他钠对脓毒症小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 通过观察西维来司他钠对肝组织炎症因子及肝损伤指标的影响,探讨其对脓毒症急性肝损伤的保护作用。方法 60只SPF级雄性C57小鼠随机分为4组,每组15只。假手术（Sham）组：只进行开腹缝合手术,不进行盲肠结扎;假手术+西维来司他钠（Sham+S）组：假手术后腹腔注射100 mg/kg注射用西维来司他钠溶液;脓毒症（CLP）组：盲肠结扎法造模后腹腔注射100 mg/kg生理盐水;脓毒症+西维来司他钠（CLP+S）组：盲肠结扎法造模后腹腔注射100 mg/kg注射用西维来司他钠溶液。观察各组小鼠手术后的状态及活动情况,术后3、6、18小时检测血清中天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）、谷氨酸氨基转移酶（ALT）的水平;ELISA法检测肝组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的水平;肝脏组织HE染色观察病理变化。结果 与同时间点Sham组比较,CLP组血清AST、ALT的水平均显著升高（P<0.05）,肝组织匀浆中TNF-α、IL-6、NE的水平显著增高（P<0.05）;与同时间点CLP组比较,CLP+S组血清AST、ALT的水...     

川芎嗪对脓毒症急性肾损伤小鼠血管内皮细胞的保护作用

目的探讨川芎嗪对脓毒症急性肾损伤（AKI）小鼠血管内皮细胞的保护作用。方法将54只C57BL/6小鼠按照随机化区组分为5组：假手术组10只,安慰剂组、川芎嗪低剂量组（10mg/kg）、川芎嗪中剂量组（30mg/kg）、川芎嗪高剂量组（60mg/kg）各11只。假手术组只做剖腹关腹,不行盲肠结扎穿刺（CLP）操作。安慰剂组先尾静脉注射0.9%氯化钠注射液0.15ml,30min后行CLP手术制作脓毒症AKI模型。川芎嗪低、中、高剂量组分别尾静脉注射10、30、60mg/kg川芎嗪（溶于0.9%氯化钠注射液0.15ml）,30min后行CLP造模。观察小鼠造模后6h、12h、24h、3d存活率,测定肾脏含水量,采用ELISA检测尿液中肾损伤分子1（Kim-1）水平,观察肾组织学改变,采用免疫组化检测肾组织中内皮细胞损伤标志物血管性血友病因子（vWF）的表达。结果CLP手术成功建立起了小鼠脓毒症AKI模型,安慰剂组和川芎嗪各剂量组小鼠均产生了不同程度的肾脏损伤。与安慰剂组比较,川芎嗪各组小鼠术后存活率提高,川芎嗪高剂量组3d存活率与假手术组相似。川芎嗪组肾脏含水量、尿液中Kim-1水平、肾组织病理损伤评分明显小于安慰剂组、vWF表达明显小于安慰剂组（均P＜0.05）。结论川芎嗪能保护脓毒症AKI小鼠血管内皮细胞,减轻脓毒症小鼠的急性肾损伤,保护肾功能,改善生存率。     

缺血再灌注及顺铂诱导小鼠急性肾损伤模型的建立及评估

目的 探讨缺血再灌注及顺铂诱导两种方式建立急性肾损伤小鼠模型的最适条件.方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为缺血再灌注组、顺铂诱导组;根据肾缺血再灌注不同时间0 min（sham,假手术）[30 min、40 min、45 min]及顺铂腹腔注射不同剂量0 mg/kg（control,对照）[12.5 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg单次及10 mg/kg两次]分不同亚组,检测血尿素氮（BUN）和肌酐（Scr）水平,HE染色观察肾组织病理变化并根据肾小管坏死程度进行评分（ATN评分）;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡.结果 缺血再灌注组建模24 h后血Scr、BUN和ATN评分明显升高,与Sham组比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,随着缺血时间的延长,凋亡阳性细胞数逐渐增多,肾组织损伤程度加重,45 min组部分肾小管坏死.顺铂诱导组建模后24 h Scr、BUN和ATN评分逐渐升高,与control组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,随着顺铂浓度的升高,Scr、BUN上升幅度相对较小,10 mg/kg两次注射组凋亡阳性细胞数相对较多,ATN评分显示肾小管中度损伤.结论 小鼠肾缺血30～40 min是缺血再灌注急性肾损伤模型较为理想的缺血时间;10 mg/kg两次注射是顺铂诱导的急性肾损伤模型较适宜剂量,缺血再灌注组肾组织损伤程度重于顺铂诱导组.     

阻断Pannexin-1 可减轻肾脏组织炎症细胞浸润和缓解顺铂诱导的急性肾损伤

目的探讨阻断pannexin-1在顺铂致急性肾损伤中的作用。方法将26只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺 铂模型组、顺铂+Carbenoxolone 处理组。顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone 处理组予顺铂20 mg/kg 腹腔注射1 次,顺铂+ Carbenoxolone处理组于顺铂处理前30 min、处理后24、48 h分别腹腔注射Carbenoxolone 20 mg/kg,所有组于顺铂处理72 h处 死小鼠,留取血浆及肾组织样品进行下一步检测。RT-qPCR及Western blot 检测肾组织内pannexin-1 的表达水平;检测血浆 BUN、Scr水平评估肾功能;PAS 染色评估肾组织病理学改变;免疫组化检测肾损伤分子1（KIM-1）表达水平及RT-qPCR检测肾 损伤分子1与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）mRNA水平评估肾小管损伤情况;免疫荧光检测肾组织F4/80+巨噬 细胞及CD4+ T细胞浸润水平;RT-qPCR及Western blot检测肾组织pannexin-1的mRNA及蛋白表达水平;用终浓度50 μmol/L 顺铂刺激人近端小管上皮细胞株HK-2 细胞4、6、12、18、24 h 构建体外顺铂致急性肾损伤模型;RT-qPCR及Western blot 检测 HK-2细胞pannexin-1的表达水平。结果与对照组相比,顺铂模型组肾组织pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达上调（P< 0.005）;体外实验结果显示,与对照组相比,顺铂模型组的pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达水平上调（P<0.005）;与顺铂 模型组相比,体内应用pannexin-1抑制剂Carbenoxolone处理后,可减轻顺铂所致的肾脏损伤,肾小管损伤程度明显减轻,顺铂+ Carbenoxolone处理组的血浆BUN、Scr水平回降（P<0.01）,肾组织KIM-1、NGAL表达减少（P<0.05）,肾组织浸润的F4/80+巨噬 细胞（P<0.01）及CD4+ T 细胞（P<0.05）减少。结论在顺铂所致急性肾损伤小鼠模型中,Pannexin-1 表达显著上调,阻断 pannexin-1减少炎症细胞浸润,可减轻肾损伤。     

丙酸钠通过抑制NLRP3保护脓毒症大鼠的结肠组织

目的：探究丙酸钠（SP）对大鼠脓毒症模型结肠组织的保护作用并研究其与NLRP3炎性小体的关系。方法：采用盲肠结扎穿刺法建立脓毒症动物模型,随机分为假手术（Sham）组、模型（CLP）组、模型+SP（CLP+SP）组和假手术+SP（Sham+SP）组。建模24 h后处死各组大鼠,收集结肠组织。HE染色观察各组大鼠结肠结构变化,ELISA试剂盒检测结肠组织中IL-6、TGF-β和TNF-α含量,Western blot和免疫组化染色检测结肠紧密连接蛋白（claudin-1和occludin）和NLRP3炎性小体的表达情况。用同样的方法建立脓毒症模型,记录每组大鼠72 h生存率。结果：SP治疗能提高CLP组大鼠的生存率,减少病理损伤。CLP+SP组结肠组织中IL-6、TGF-β和TNF-α水平较CLP组低（P＜0.05）。相比CLP组,CLP+SP组结肠组织中claudin-1和occludin表达有所增加（P＜0.05）。CLP+SP组结肠组织中NLRP3、caspase-1、IL-β和IL-18表达与CLP组比较明显降低（P＜0.05）。结论：SP能提高脓毒症大鼠的存活率。此外,SP可能通过提高脓毒症大鼠结肠组织中紧密连接蛋白的表达,抑制NLRP3炎性小体的激活来减少结肠损伤。     

茶多酚对脓毒症大鼠肝损伤的作用研究

目的:探讨茶多酚(TP)对脓毒症大鼠肝损伤的作用.方法:将40只雄性SD大鼠随机分为4组:Sham组[术后每天300 mg/kg生理盐水灌胃]、Sham+TP组(术后每天300 mg/kg TP灌胃)、盲肠结扎穿刺法(CLP)组(CLP术后每天300 mg/kg生理盐水灌胃)、CLP+TP组(CLP术后每天300 mg...     

萝卜硫素减轻脂多糖诱导小鼠急性肾损伤的作用及机制研究

目的 研究萝卜硫素（SFN）减轻脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肾损伤（AKI）的作用及机制。方法 选取10～12周龄雄性C57BL/6J小鼠进行实验,采用腹腔注射15mg/kg LPS的方式诱导AKI,腹腔注射LPS前给予0.5 mg/kg SFN或等剂量0.9%氯化钠注射液、15 mg/kg ML385或等剂量对照溶剂二甲亚砜（DMSO）腹腔注射,1次/d,连续3 d。腹腔注射LPS后24 h检测血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,肾脏病理改变及肾损伤评分,肾脏中丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHd G）、总抗氧化力（T-AOC）的水平及核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)的表达水平。结果 LPS组小鼠的BUN、Scr、肾损伤评分及肾脏中MDA、8-OHd G的水平、Nrf2、HO-1的表达水平均高于对照组,肾脏中T-AOC的水平低于对照组（P <0.05）;SNF+LPS组的BUN、Scr、肾损伤评分及肾脏中MDA、8-OHd G的水平均低于LPS组,肾脏中T-AOC的水平及Nrf2、HO-1的表达水平均高于LPS组（P <0.05）...     

Klotho对缺血再灌注急性肾损伤的影响研究

目的探讨基因Klotho对缺血再灌注急性肾损伤的影响及可能的作用机制。方法60只BALB/c小鼠按随机数字表法分为假手术+0.9%氯化钠注射液组（Sham+veh组）、假手术+Klotho补充组（Sham+kl组）、缺血再灌注急性肾损伤+0.9%氯化钠注射液组（I/R+veh组）、缺血再灌注急性肾损伤+Klotho补充组（I/R+kl组）,每组各15只。各组小鼠再按不同的处死时相（术后第1、2、7天）随机分为D1（5只）、D2（5只）、D7（5只）3个亚组。采用双侧肾蒂夹闭法建立缺血再灌注急性肾损伤模型。Sham+veh组和Sham+kl组小鼠定位肾蒂但不夹闭,其余操作同上。Sham+kl组和I/R+kl组予再灌注后30min腹腔注射360ngKlotho蛋白注射液,Sham+veh组和I/R+veh组腹腔注射0.2ml0.9%氯化钠注射液。于造模术后第1、2、7天收集小鼠血、尿、肾脏标本。分别检测血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）值,HE染色观察肾小管损伤程度,免疫组化法观察肾脏组织炎症细胞浸润情况及Klotho表达情况,ELISA法检测血Klotho和尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平,real-timePCR及Westernblot法分别检测肾脏组织Klotho、凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bax）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、裂解的半胱氨酸蛋白酶（cleavedCaspase）-3的mRNA及蛋白表达。结果I/R+veh组小鼠遭受缺血再灌注损伤后肾功能显著下降,肾小管上皮细胞变性、坏死,至术后第7天明显好转。与Sham+veh组比较,I/R+veh组小鼠血Klotho蛋白水平于术后第1天明显降低,至术后第7天仍未能恢复正常,肾脏组织KlothomRNA及蛋白表达水平于术后第1天同样明显降低（均P＜0.05）。I/R+veh组小鼠肾脏组织Bax/Bcl-2mRNA及蛋白、cleavedCaspase-3蛋白表达水平均于术后第1天较Sham+veh组明显升高（均P＜0.05）,CD68+细胞浸润增多。外源性补充Klotho蛋白后,I/R+kl组肾脏组织Bax/Bcl-2mRNA及蛋白、cleavedCaspase-3蛋白表达水平分别较I/R+veh组下降30%、45%、62%（均P＜0.05）,CD68+细胞浸润减少。结论缺血再灌注急性肾损伤时Klotho表达下调;外源性补充Klotho蛋白可能通过抑制细胞凋亡及炎症细胞浸润等途径发挥肾脏保护作用。     

炎性小体在右美托咪定减轻大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价炎性小体(NLRP3)在右美托咪定减轻大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用。方法 清洁级成年雄性Sprague-Dawley 大鼠32只,采用数字表法随机分为假手术组(Sham组,n=8)、肾缺血再灌注损伤组(I/R组,n=8)、肾缺血再灌注损伤+右美托咪定预处理组(I/R+Dex预处理组,n=8)(于缺血前1h腹腔注射右美托咪定10μg/kg)和肾缺血再灌注损伤+右美托咪定后处理组(I/R+Dex后处理组,n=8),于再灌注后1h腹腔注射右美托咪定10μg/kg。肾缺血再灌注损伤模型采用夹闭双侧肾动脉45min后,恢复灌注24h。采用全自动生化分析仪测定各组血肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α和IL-10的水平;TUNEL法检测各组凋亡细胞的数量;Western blot法检测NLRP3、凋亡信号(caspase-1、Cleaved caspase-1、Bcl-2)的表达。结果 与Sham组比较,I/R组血清Cr和BUN、炎性标志物(TNF-α和IL-10)水平及肾组织NLRP3、caspase-1和Bcl-2表达水平明显升高(P<0.05),同时肾小管凋亡细胞显著增多(P<0.05);与I/R组比较,I/R+Dex预处理组和I/R+Dex后处理组血Cr和BUN、TNF-α和IL-10水平均明显降低(P<0.05),肾组织NLRP3、caspase-1、Cleaved caspase-1和Bcl-2表达水平显著降低;肾小管凋亡细胞显著减少(P<0.05)。结论 右美托咪定可显著减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其可能与抑制NLRP3,降低炎性反应和细胞凋亡有关。     

重组人促红细胞生成素对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用。方法 SD大鼠40只,随机分为空白对照组、实验对照组、模型组、rhEPO 1组[造模前3天注射rhEPO 3 000 IU/（kg.d）]、rhEPO 2组[造模前3天注射rhEPO 600 IU/（kg.d）],观察造模前、造模后48、72 h血清肌酐（Scr）及尿素氮（BUN）的变化,观察肾脏病理标本。结果模型组注射对比剂后48 h和72 h Scr均较注射前升高大于25%;与空白对照组比较,模型组、rhEPO1组、rhEPO 2组造影后48、72 h Scr、BUN均明显上升（P〈0.05）;与模型组比较,rhEPO 1组、rhEPO 2组造影后48、72 h Scr、BUN均有明显下降（P〈0.05）,肾组织损害较模型组明显减轻。与rhEPO 2组比较,rhEPO 1组Scr、BUN降低更明显（P〈0.05）。结论重组促红细胞生成素对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤有保护作用,大剂量rhEPO保护作用优于小剂量。     

香豆素通过调控组蛋白去甲基化酶3和骨髓分化蛋白2改善脓毒症相关AKI的机制研究

目的探讨香豆素（Sco）通过调控组蛋白去甲基化酶3（JMJD3）和骨髓分化蛋白2（MD-2）改善脓毒症相关急性肾损伤（AKI）的作用机制。方法24只C57BL6小鼠根据随机数字表法分为对照组、脂多糖（LPS）组、LPS+40mg/kgSco组和LPS+80mg/kgSco组。除对照组外,其余3组小鼠腹腔注射LPS10mg/kg建立脓毒症相关AKI模型,LPS+40mg/kgSco组和LPS+80mg/kgSco组小鼠在造模成功后分别腹腔注射Sco40mg/kg和80mg/kg,对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液2mL/kg。采用HE染色和原位末端转移酶标记法染色检测小鼠肾脏组织损伤程度和细胞凋亡程度,ELISA法检测小鼠血清血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平,Westernblot法检测小鼠肾脏组织中JMJD3和MD-2蛋白表达水平。使用LPS（1μg/mL）处理人肾小管上皮细胞系HK-224h,建立脓毒症细胞模型,随机分为对照组、LPS组、LPS+30μmol/LSco组、LPS+60μmol/LSco组、LPS+60μmol/LSco+过表达对照组和LPS+60μmol/LSco+过表达JMJD3组。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测细胞中JMJD3和MD-2蛋白表达水平。结果与对照组小鼠相比,LPS组小鼠肾组织出现明显病理变化,部分肾小管变形,肾小管上皮细胞水肿,肾间质周围炎症细胞浸润,凋亡信号（棕褐色）增强,JMJD3和MD-2蛋白表达水平升高,血清中Scr、BUN水平均升高。而与LPS组相比,LPS+40mg/kgSco组和LPS+80mg/kgSco组小鼠肾脏组织以上病理变化明显改善,JMJD3和MD-2蛋白表达水平均降低,血清中Scr、BUN水平也均降低,并且LPS+80mg/kgSco组变化更明显。与对照组细胞相比,LPS组细胞凋亡水平升高,JMJD3和MD-2蛋白表达水平升高。而相较于LPS组,使用Sco处理后以上变化趋势发生逆转,且Sco浓度越高,趋势变化越显著。此外,过表达JMJD3后细胞凋亡水平升高,JM-JD3和MD-2蛋白表达水平均升高。结论Sco通过抑制肾小管上皮细胞JMJD3和MD-2表达,减少细胞凋亡,从而改善脓毒症相关AKI。     

盐酸右旋美托咪啶通过提高HIF-1α的表达减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤

目的本研究探讨盐酸右旋美托咪啶（Dex）是否通过提高HIF-1α的表达减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注后损伤。方法高 脂高糖饮食8周后的SD大鼠,30 mg/kg链脲佐菌素（STZ）腹腔注射,建立糖尿病大鼠模型。以大鼠双肾动脉结扎60 min再灌注 120 min 的方法制作肾缺血再灌注损伤模型。分为普通大鼠组（Con）,假手术组（sham）,普通大鼠肾缺血再灌注损伤模型组 （Con+I/R [ischemia-reperfusion, I/R]）,普通大鼠肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组（Con+I/R+Dex）,糖尿病大鼠组（DM）,糖尿 病大鼠Dex治疗组（DM+Dex）,糖尿病大鼠地高辛（Dig）灌胃组（DM+Dig）,糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤模型组（DM+I/R）,糖 尿病大鼠肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组（DM+I/R+Dex）,糖尿病大鼠地高辛灌胃后肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组 （DM+Dig+I/R+Dex）。夹闭双肾动脉前2 h给予腹腔注射Dex,其它组别腹腔注射等量生理盐水。地高辛作为HIF-1α的抑制 剂,对于地高辛组予地高辛片0.05 mg/（kg· d）灌胃1周。所有组别大鼠肾缺血再灌注后取血样,分离血浆,多功能生化仪检测肌 酐（Scr）和尿素氮（BUN）含量,Western blot 测定HIF-1α、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax,ELISA 检测HIF-1α、p-eNOS、eNOS, TUNEL法测定肾小球细胞凋亡比例。结果普通大鼠和糖尿病大鼠在肾缺血再灌注后Scr、BUN、HIF-1α、p-eNOS、eNOS表达 水平及细胞凋亡比例均显著升高（P<0.05）;肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗后Scr、BUN、p-eNOS、eNOS表达水平明显降低, HIF-1α表达水平明显升高,差异有统计学意义（P< 0.05）;与Con+I/R相比,DM+I/R组Scr、BUN、p-eNOS、eNOS进一步升高;与 DM+I/R组相比,DM+I/R+Dex组Scr、BUN、p-eNOS、eNOS、cleaved caspase-3、Bax表达水平及凋亡细胞比例明显降低,HIF-1α 及Bcl-2表达明显升高;与DM+I/R+Dex组相比,DM+Dig+I/R+Dex组cleaved caspase-3、Bax表达水平及凋亡细胞比例明显升 高,HIF-1α及Bcl-2表达水平显著下降。结论Dex可能通过提高2型糖尿病大鼠HIF-1α的表达,抑制肾脏细胞的凋亡,减轻肾脏 细胞缺血再灌注后损伤。     

地塞米松对脓毒血症大鼠脑皮层诱发电位及c-Fos蛋白表达的影响

目的：探讨脓毒血症大鼠皮层脑诱发电位的变化和大脑皮层c-Fos蛋白表达及地塞米松（DXM）的干预效应。方法：健康成年Wistar大鼠88只，随机分为假手术组（对照组）、盲肠结扎穿孔术（CLP）组和DXM（10mg／kg）给药组，观察1、2、4、6、10h时段体感诱发电位的动态变化，并进行大脑皮层c-Fos免疫组织化学方法测定。结果：对照组大鼠引出的皮层诱发电位波是以一个正相波为主的复合波。CLP组在10hP1波的潜伏期较对照组显著延长（P〈O．05），波幅显著降低（P〈0．05）；地塞米松1h给药组P1波潜伏期较CLP1h组显著缩短（P〈0．05），而波幅与CLP 1h组比较无统计学差异。地塞米松10h给药组P1波潜伏期较CLP10h组显著缩短（P〈0．05），波幅显著增大（P〈0．05）。c-Fos对照组有少量表达，在CLP1h开始增加，4h达高峰；在DXM注射后1～2h表达明显增加，并持续至用药后10h。结论：地塞米松对大鼠脓毒血症所引起的诱发电位的变化有所改善。c-Fos可能参与脓毒血症发病中机体对神经元损伤的应激机制，DXM通过上调c-Fos蛋白具有保护神经细胞的作用。     

丹参酮IIA通过抑制RIP3/FUNDC1信号通路减轻LPS诱导的小鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的 探讨丹参酮IIA在防治脓毒血症急性肾损伤（AKI）方面的作用及潜在机制。方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组（10 mg/kg LPS等体积无菌生理盐水）、LPS组（10 mg/kg LPS作用24 h）、LPS+丹参酮IIA组（10 mg/kg 丹参酮IIA预处理15 min再给予10 mg/kg LPS作用24 h）（10只/组）。给药后检测小鼠血肌酐(Scr)、血尿素氮水平(BUN),PAS染色观察小鼠肾组织病理变化,Western blot检测小鼠肾组织RIP3、Cleaved-caspase3、p18-FUNDC1表达水平。将体外培养正常的人肾小管上皮细胞（HK-2）分为空白对照组、LPS 刺激组（LPS,10 μg/mL）、LPS+siNC 组（LPS 10 μg/mL+50 nmol/L siNC）、LPS+siRIP3 组（LPS 10 μg/mL+50 nmol/L siRIP3）、丹参酮IIA干预组（LPS 10 μg/mL+ 丹参酮IIA 10 mg/L）,分别给予以上干预措施。采用TUNEL方法检测各组HK-2细胞的凋亡情况,Western blot检测各组RIP3、Cleaved-caspase3、p18-FUNDC1表达水平,qT-PCR检测RIP3基因表达水平。结果 与对照组相比,LPS作用小鼠24 h后,小鼠Scr及血BUN水平升高,PAS染色提示近段肾小管损伤,肾组织中RIP3、Cleaved-caspase3、p18-FUNDC1蛋白表达上调（P<0.001）。与LPS组相比,丹参酮IIA预处理后,小鼠Scr及BUN水平下降,PAS染色显示近段肾小管损伤减轻,肾组织中RIP3、Cleaved-caspase3、p18- FUNDC1蛋白表达下降（P<0.001）。体外研究显示,与对照组相比,LPS刺激的HK-2细胞后,TUNEL染色显示细胞凋亡水平明显增加,Cleaved-caspase3、RIP3、p18-FUNDC1表达上调（P<0.05）。应用丹参酮IIA预处理或体外沉默RIP3表达后再次予以LPS刺激细胞,TUNEL染色显示细胞凋亡水平较LPS组明显减少,Cleaved-caspase3、RIP3、p18-FUNDC1表达水平较LPS组下降（P<0.05）。结论 丹参酮IIA可能通过抑制RIP3/ FUNDC1信号通路来改善LPS诱导的肾小管上皮细胞凋亡。     

姜黄素对脓毒症大鼠血浆ICAM-1水平和预后的影响

目的 探讨姜黄素(curcumine,Cur)治疗脓毒症大鼠的疗效及可能机制。 方法 120只SPF 级SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔组（CLP组）、姜黄素治疗组（Cur组）,CLP组和Cur组进行盲肠结扎穿孔术,Cur组予姜黄素液2ml/kg （即100mg/kg）腹腔注射,Sham组、CLP组给予2ml/kg生理盐水腹腔注射。各组大鼠于术后0、3、6、12、24、48 小时（h）各时点随机活杀5只动物取血清检测ICAM-1水平,各组剩下10只观察96h内生存时间。动物活杀前进行严重程度评分。 结果 CLP组大鼠术后脓毒症表现最强,Cur组明显减轻,而Sham组没有相关表现或表现轻微。CLP组血浆ICAM-1水平于术后3 h显著升高,至24 h达高峰;而Cur组上升的幅度明显低于CLP组（P﹤0.05）,但明显高于Sham组。Cur组生存时间较CLP组明显延长(P<0.01)。结论 姜黄素减轻大鼠脓毒症表现,延长脓毒症大鼠生存时间,改善其预后可能与姜黄素抑制ICAM-1表达有关。