IQ23对豚鼠心室肌细胞复极和延迟整流钾电流两种成分的作用

采用膜片钳全细胞记录技术,研究了具有抗心律失常作用的苄基异喹啉衍化物IQ23对豚鼠心室肌单细胞动作电位（AP）和钾电流的作用,结果表明：IQ23在10,30,100umol.L^-1呈浓度依赖性的减慢AP复极,APD90分别延长15％,28％和31％,此效应不依赖细胞外Ca^2 ,电压钳制下记录延迟整流钾电流,IQ23对其两种成分,即Iks和Ikr,都有阻断作用,30和100umol.L^-1 IQ23阻断Iks达21％和26％,对Ikr为67％和86％, 即使在100umol.L^-1IQ23也不影响内向整流钾电流Ik1),本实验表明,IQ23能浓度依赖性的延长心室肌细胞动作电位时程（APD）,此效应与胞外Ca^2 无关;IQ23对Iks和Ikr两种成分都有阻断作用,无明显的选择性。     

Effects of Tetrandrine on Cytosolic Free Calcium in Cultured Bovine Aortic Smooth Muscle Cells

利用Ｆｕｒａ２技术和ＡＲＣＭＭＩＣ阳离子系统研究了粉防己碱对传代培养牛主动脉血管平滑肌细胞内游离钙的影响。粉防己碱（１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１）不影响血管平滑肌细胞的静息钙，但在有胞外钙存在时，对高钾，５羟色胺，ＡＴＰ，血管紧张素Ｉ，去甲肾上腺素引起的胞内钙升高有抑制作用；在无胞外钙存在时，粉防己碱对苯肾上腺素引起的胞内钙升高也有一定的抑制作用。粉防己碱对高钾升高内钙的抑制作用呈剂量依赖性，ＩＣ５０值为９．２（９５％可信限：５．７～１４．９）μｍｏｌ·Ｌ－１。上述结果提示粉防己碱对血管平滑肌细胞的电压依赖性钙通道和受体调控性钙通道均有阻滞作用，对受体调控性钙通道阻滞作用主要表现为阻滞钙离子内流。     

粉防己碱对分离的豚鼠心室肌单细胞动作电位及钙通道电流的影响

用自行研制的膜片钳实验系统，研究粉防己碱对分离的豚鼠心室肌单细胞动作电位及钙电流的影响。在电流钳制方式下，给予脉宽３ｍｓ，０．５Ｈｚ电流刺激，引出单细胞动作电位，粉防己碱３０μｍｏｌ·Ｌ－１可使ＡＰＤ５０缩短７２．２％，ＡＰＤ９０缩短４４．０％，而静息电住，动作电位幅值无明显改变，在电压钳方式下，保持电位－４０ｍＶ，给予脉宽１５０ｍ５、０．５Ｈｚ去极化刺激可记录到Ｌ型钙通道电流，０．３～３００μｍｏｌ·Ｌ－１粉防己碱浓度依赖性地阻滞钙电流，ＩＣ５０＝１３．３μｍｏｌ·Ｌ－１．粉防己碱对钙通道的电流－电压关系无明显影响。     

粉防己碱的心血管电生理作用

粉防己碱为一源于植物的钙通道阻滞剂,它的心血管电生理作用是:抑制心肌收缩力、张力最大变化速率和自律性,延长功能性不应期;具有负性肌力作用及负性频率作用,而对兴奋性无影响.粉防己碱直接阻滞心肌和血管平滑肌细胞的L型和T型钙电流,但并不移动钙电流的电流-电压曲线,以上作用对其治疗某些心血管疾病是非常有益的.此外粉防己碱还能分别抑制内皮细胞系及血管内皮细胞的 BK_(Ca)和 CRAC通道,此作用可能有助于改变血管内皮细胞的功能活动.     

豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性BK电流

目的研究豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱(ACh)-敏感性钾电流的特性。方法应用全细胞膜片钳技术检测新鲜单离的豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性钾电流的离子特性及其药理学特点。结果①细胞外ACh激活一缓慢持久的外向性电流,其效应呈浓度依赖性,半数激活浓度为45μmol.L-1。②ACh-敏感性钾电流对钾通道阻断剂TEA(tetraethylammon ium)、IBTX(ibe-riotoxin)和Cs+敏感,而对4-AP(4-am inopyride)和apam in不敏感。③细胞内应用钙离子螯合剂BAPTA[b is(2-am inophe-noxy)ethane-N,N,N,′N-t′etra-acetic ac id],ACh-敏感性钾电流的幅值迅速被抑制。④ACh-敏感性钾电流对细胞外液中钙离子浓度变化敏感,0.2 mmol.L-1低钙外液中ACh-敏感性钾电流被抑制,电流最大值由0~10 mV向-20 mV~-30 mV超极化方向移动。结论细胞外ACh激活豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞产生大电导钙依赖性钾电流(BK)。ACh-敏感性BK电流在豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞超极化保护机制中具有重要的作用。     

低渗膨胀增加豚鼠胃窦环行肌细胞钙激活钾电流和延迟整流型钾电流

目的:观察低渗膨胀对豚鼠胃窦环行肌细胞钙激活钾电流和延迟整流型钾电流的影响。方法:采用传统全细胞膜片箱技术,对以胶原酶急性分离的单细胞进行低渗灌流,观察钾电流的变化。结果:低渗 灌流液(200 Osmmol/kg)可增加钙激活钾电流和延迟整流型钾电流,钙激活钾电流的增加可被四乙基胺4mmol·L~(-1)和Charybdotoxin 200nmol·L~(-1)完全抑制;延迟整流型钾电流的增加可被四乙基胺4mmol·L~(-1)部分抑制,可被4-氨基吡啶10mmol·L~(-1)完全抑制。两种钾电流的增加幅度无显著性差异(P>0.05)。钙激活钾电流在施加低渗灌流(17.0±4.8)s后增加;延迟整流型钾电流在(30.7±13.7)s后增加,两者的潜伏期存在显著性差异(P<0.05)。结论:低渗膨胀可增加钙激活钾电流和延迟整流型钾电流,这种增加效应可能与细胞容积调节有关。     

山莨菪碱对乙酰胆碱受体通道的阻断作用

在非洲有爪蟾蜍胚胎神经和肌肉培养细胞上，用斑片钳技术研究了盐酸山莨菪碱（Ani)对乙酰胆碱（ACh)受体通道的作用，发现它在微终板电流和单通道水平上都有明显的可逆性阻断作用，完全阻断神经肌肉接点传递的剂量为60umol.L^-1，而阿托品和东莨菪碱所需剂量分别为和0．5mmol.L^-1，表明Ani有较强的抗Ｎ型ＡＣh的作用。     

异丙酚对人心房肌细胞ATP敏感性钾电流的影响

为观测不同浓度的异丙酚对人离体心房肌单一细胞ATP敏感性钾电流(IKATP)的影响。取行先天性心脏病手术时切取的右心耳组织．迅速置于100％氧饱和的无钙心肌细胞冷保护液中。将心肌标本剪成小块后用二步酶解法分离出单个心房肌细胞．利用全细胞记录技术观察异丙酚对单一心房肌细胞IKATP的作用。结果表明．在电极内液含0．3mmol&;#183;L^-1ATP条件下．可记录到一外向K^+电流．该电流能被KATP通道特异性阻滞药格列苯脲(10μmol&;#183;L^-1)所抑制．表明此电流为IKATP。用含两种浓度(3&;#215;10^-5mol&;#183;L^-1和3&;#215;10μmol&;#183;L^-1)异丙酚的细胞外液灌流。结果显示异丙酚使IKATP所增加的百分率分别为给药前的27％和42．4％。结论：异丙酚可通过对人心房肌细胞的IKATP浓度依赖性的激活作用，使动作电位时程缩短而产生对心肌的抑制作用.     

粉防己碱对培养乳牛基底动脉平滑肌细胞内游离钙浓度的影响

目的：研究粉防己碱对培养乳牛基底动脉平滑肌细胞游离钙浓度（[Ca^2 ]i)的影响。方法：利用AR－CM－MIC阳离子测定系统,采用Fura 2-AM为指示剂,测量单个细胞内[Ca^2 ]i。结果：粉防己碱10－100μmol/L对培养乳牛基底动脉平滑肌细胞静息[Ca^2 ]i无明显影响。在细胞外钙为1．3mmol/L,粉防己碱可浓度依赖性地抑制KC1引起[Ca^2 ]i的升高。咖啡因10mmol/L可诱导一次[Ca^2 ]i瞬间快速升高,随后自发回复到静息水平,粉防己碱10和30μmol/L对咖啡因诱导的[Ca^2 ]i瞬间升高没有作用,但高浓度（100μmol/L）粉防己碱抑制了[Ca^2 ]i瞬间升高。在细胞外钙为1.3mmol/L,苯肾上腺素10μmol/L可引起双相[Ca^2 ]i变化,包括快速升高相和持续升高相。在细胞外钙为零,苯肾上腺素仅引起[Ca^2 ]i的快速升高相。粉防己碱可浓度依赖性地抑制苯肾上腺素引起[Ca^2 ]i快速升高相。结论：在培养乳牛基底动脉平滑肌细胞,粉防己碱可能通过影响电压依赖性和苯肾上腺素受体介导的钙通道而抑制钙内流。高浓度粉防己碱也可能影响肌浆网钙释放或钙摄取。     

GABA抑制鲫鱼视网膜双极细胞的轴突末梢和胞体内的钙信号(英文)

目的:研究GABA受体的激活对于鲫鱼视网膜ON-型双极细胞的胞体和轴突末梢内高钾引起的钙信号的影响。方法:急性分离的鲫鱼视网膜细胞经fluo-3AM孵育后,用激光共聚焦显微镜检测荧光变化。结果:GABA 100μmol/L可以完全抑制双极细胞胞体和轴突末梢内高钾35mmol/L引起的钙信号。仅激活GABA受体的一种亚型时,轴突末梢和胞体内出现了不同的结果。当GABA_A受体或GABA_C受体被单独激活时,尽管胞体内的钙信号仍旧被完全抑制,但轴突末梢的[Ca~(2 )]_i逐渐升高。GABA 10μmol/L仍旧可以完全抑制胞体内的钙信号且部分抑制轴突末梢内的钙信号。结论:激活GABA_A和GABA_C受体能够完全抑制鲫鱼视网膜ON-型双极细胞内高钾引起的钙信号。仅激活GABA_A或GABA_C受体时可以完全抑制胞体内的钙信号,而轴突末梢的[Ca~(2 )]_i逐渐升高,这可能与GABA_A或GABA_C受体的脱敏有关。     

粉防己碱对培养大鼠心肌细胞胞内游离钙的影响(英文)

目的:研究粉防己碱对心肌的作用。方法:采用Fura-2和AR-CM-MIC阳离子测定系统测定培养大鼠单个心肌细胞胞内游离钙。结果:外钙1.3mmol·L~(-1)时,细胞静息钙为90±12nmol·L~(-1)。粉防己碱不影响静息钙,但可明显抑制CaCl_2,KCl,哇巴因引起的胞内钙增高;对于去甲肾上腺素引起的胞内钙增高,粉防己碱只有在外钙存在时,方对其有抑制作用。结论;粉防己碱抑制钙离子的跨膜运动,但在心肌细胞,它并非是选择性的钙通道阻滞剂。     

Dauricine in hibited L-type calcium current in single cardiomyocyte of guinea pig

目的：研究蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流的阻断作用及其特性．方法：利用全细胞记录方法，记录单个豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流．结果：蝙蝠葛碱１，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ－１可使钙电流分别减少１５２％±２２％，４１％±５％，８２％±８％．冲洗后，可使钙电流部分恢复，蝙蝠葛碱具有浓度依赖性阻断钙电流的作用．在刺激频率３Ｈｚ与１Ｈｚ，其阻断钙电流的程度相似．结论：蝙蝠葛碱具有阻断Ｌ型钙电流的作用     

膜片箝方法研究蛙垂体促黑素细胞上腺苷引起的抑制效应的机制

本文介绍用膜片箝方法研究腺苷抑制蛙垂体中叶促黑素细胞激素分泌的分子电生理机制。研究结果表明，腺苷激活Ａ１型受体后，通过４条途径减少，α－ＭＳＨ分泌所需要的钙内流：１）激活电压不敏感的钾电导引起的膜电位超级化；２）增高延缓外向钾电流增加引起的细胞兴奋性降低；我们的结果已排除腺苷酸环化酶系统的途径。     

小鼠心房肌瘤AT-1细胞在心脏电生理学和药理学研究中的应用

小鼠心房肌瘤细胞 (AT 1)系从转基因小鼠体内分化出来的一种心肌样细胞 .AT 1细胞具有许多其他动物心脏细胞的典型特征 ,例如自发性搏动 ,多种离子通道和对许多药物起反应等 .AT 1细胞上的主要离子通道包括钠 ,钙和钾通道 .钠通道对阻滞剂河豚毒高度敏感 .L型和T型钙通道对典型的阻滞剂起反应 .AT 1细胞上的一种重要外向钾电流是快速激活型迟缓整流外向钾电流 (IKr) .IKr是AT 1细胞上主要的时间依赖性复极化钾电流 .研究证明 ,AT 1细胞可作为心脏电生理学和药理学研究中的一种非常有用的工具 .迄今为止 ,在AT 1细胞上已经测试了许多心脏作用和非心脏作用药物的IKr阻滞作用 .IKr阻滞药的一种严重副作用是可引起致死性的尖端扭转型室性心动过速     

蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞L型钙电流阻断作用

目的：研究蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流的阻断作用及其特性。方法：利用全细胞记录方法，记录单个豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流。结果：蝙蝠葛碱１，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１可使钙电流分别减少１５．２％±２．２％，４１％±５％，８２％±８％。冲洗后，可使钙电流部分恢复，蝙蝠葛碱具有浓度依赖性阻断钙电流的作用。在刺激频率３Ｈｚ与１Ｈｚ，其阻断钙电流的程序相似。结论：蝙蝠葛碱具有阻断Ｌ型钙电流的作用。     

粉防己碱对心血管的药理作用研究进展

目的：介绍粉防己碱对心血管新的药理作用,供进一步开发此药作参考。方法：对近年来国内外期刊中相关献进行检索、综述。结果：粉防己碱是钙通道阻滞剂,对钙激活钾通道有双向调节作用．对心血管系统除具有已熟知的抗高血压、抗心律失常、扩张冠脉等作用外,还具有抗心肌缺血-再灌注损伤、抗肺动脉高压、抗血管平滑肌增殖、抗心肌细胞肥厚和调节心血管活性物质释放等新型药理作用。结论：粉防己碱在心血管疾病的防治中有着广泛的应用前景,值得进一步开发。     

大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾通道的研究

目的　研究大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流。方法　用急性酶解分离法得到单个大鼠肺内动脉平滑肌细胞,采用膜片钳全细胞记录方式研究钾通道特性。结果　将平滑肌细胞钳制在-70 mV,给予-70～50 mV的斜坡刺激,时间为600 ms。可引出一随电压逐渐增大的电流,在+50 mV时其值为359±31 pA。细胞内用CsCl取代KCl后,该电流几乎完全消失;细胞外用无钙台氏液灌流,电极内液用高浓度的EGTA时,电流可被抑制50%±1%;细胞外给予特异性钙激活钾通道阻断剂TEA和延迟整流钾通道阻断剂4-AP均可使该电流明显下降。结论　大鼠肺内动脉平滑肌细胞的钾电流主要由钙激活钾电流和延迟整流钾电流组成。     

阿米洛利对豚鼠心肌细胞钾电流及钙电流的作用

目的研究阿米洛利（amiloride）对豚鼠心肌细胞钾电流及钙电流的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞钾通道及钙通道电流。结果阿米洛利在10~100 μmol·L^-1抑制L型及T型钙电流,不改变钙电流I-V曲线的形状，仅抑制这两型电流的幅度。当累积浓度达100 μmol·L^-1时，阿米洛利轻微抑制快激活延迟整流钾电流(I_Kr)，对慢激活延迟整流钾电流(I_Ks)无影响。阿米洛利在1~100 μmol·L^-1浓度依赖性地抑制内向整流钾电流(I_K1)。结论阿米洛利抑制电压依赖性的钾、钙电流，为其抗心律失常作用提供了离子基础。     

顺铂抑制豚鼠耳蜗外毛细胞钙激活的钾电流

目的　研究顺铂对豚鼠耳蜗外毛细胞钙激活的钾电流作用。方法　豚鼠被迅速断头处死 ,暴露耳蜗 ,在解剖显微镜下去除耳蜗侧壁 ,经胰蛋白酶消化并轻轻吹打 ,以获得单离的豚鼠耳蜗外毛细胞。静置后在倒置相差显微镜下观察。应用膜片钳制技术从单离的豚鼠耳蜗外毛细胞获得钙激活的钾通道记录 ,并观察顺铂对它的作用。结果　结果表明该通道活动受到细胞外浓度为 10 -5mol·L-1的顺铂的抑制。结论　顺铂可抑制豚鼠耳蜗外毛细胞的钙激活的钾电流     

膜片箝方法研究蛙垂体促黑素细胞上腺苷引起的抑制效应的机制

本文介绍用膜片箝方法研究腺苷抑制蛙垂体中叶促黑素细胞激素（αＭＳＨ）分泌的分子电生理机制．研究结果表明，腺苷激活Ａ１型受体后，通过４条途径减少αＭＳＨ分泌所需要的钙内流：１）激活电压不敏感的钾电导引起的膜电位超级化；２）增高延缓外向整流的钾电导引起动作电位时间缩短；３）瞬时失活外向钾电流增加引起的细胞兴奋性降低；４）抑制Ｌ和Ｎ型钙电流的内流．白日咳毒素敏感的Ｇ蛋白参与腺苷对离子通道的调节作用，究竟是通过直接的偶联还是经过细胞内第二信使的传递尚需进一步证明．我们的结果已排除腺苷酸环化酶系统的途径