正交试验优化冬凌草中冬凌草甲素的提取工艺

目的:进行冬凌草甲素的提取工艺筛选和含量测定,为其临床应用及生产提供实验依据。方法:以正交试验筛选冬凌草甲素的提取工艺,采用HPLC法测定冬凌草甲素的含量。结果:优选冬凌草甲素的提取工艺为75%乙醇回流提取2次(1 h,1 h),以药材质量2%的活性炭脱色10 min。结论:该提取工艺得到的冬凌草甲素含量较高且提取时间较短,经HPLC法检测冬凌草甲素,重现性好,回收率高。     

HPLC法测定冬凌草片中冬凌草甲素的含量

用HPLC法对不同厂家和自制冬凌草片中冬凌草甲素的含量进行了比较,采用HypersilODS2C18色谱柱,以甲醇－水（50：50）为流动相,检测波长为238nm,结果表明含量有较大差异。建议通过控制药材的含叶量来控制冬凌草片中冬凌草甲素的含量。     

HPLC法测定冬凌草萜含片中冬凌草甲素的含量

目的：对冬凌草萜含片中的冬凌草甲素进行含量测定。方法：采用ＨＰＬＣ法,以Ｃ１８－ＯＤＳ为色谱柱,甲醇－水（５５：４５）为流动相,检测波长为２４２ｍｍ。结果：回收率为９８．２３％,ＲＳＤ为２．１２％。结论：该方法简便、可靠,适合冬凌草及其制剂的质量控制。     

冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡

目的　研究冬凌草甲素诱导人白血病HL 6 0细胞凋亡的作用。方法　形态学观察 ,DNA凝胶电泳及流式细胞术。结果　冬凌草甲素能显著地诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的浓度效应关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯带 ;流式细胞仪检测到G1亚峰。结论　冬凌草甲素能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,并与其细胞杀伤活性相互平行 ,提示冬凌草甲素的抗癌活性与诱导肿瘤细胞凋亡相关     

HPLC法测定冬凌草萜含片中冬凌草甲素的含量

目的:对冬凌草萜含片中的冬凌草甲素进行含量测定。方法:采用HPLC 法,以C₁₈-ODS 为色谱柱,甲醇-水(55∶45) 为流动相,检测波长为242nm 。结果:回收率为98 .23 % ,RSD为2 .12 % 。结论:该方法简便、可靠,适合冬凌草及其制剂的质量控制     

高效毛细管电泳法测定冬凌草片中冬凌草甲素的含量

目的:建立用高效毛细管电泳测定冬凌草片中冬凌草甲素的含量测定方法.方法:样品用乙醚超声提取,缓冲液为20 mmol·L-1磷酸盐缓冲液,pH=7.0,分离电压15 kM,石英毛细管33 cm×75 μm,操作温度25℃,紫外检测波长238 nm,压力进样6.0 kV×10 s,内标法定量.结果:线性范围为50～400 mg·L-1,平均回收率为99.5%,RSD为3.9%.结论:该方法简便、快速且消耗试剂少,适合于冬凌草片剂的质量控制.     

冬凌草甲素的研究进展

冬凌草甲素是从冬凌草等植物叶子中提取出的一种贝壳杉烯二萜类化合物,具有好的抗肿瘤活性.对冬凌草甲素进行结构修饰,改善其水溶性得到了部分抗肿瘤活性更强的冬凌草甲素衍生物.本文试从药理作用、构效关系及其衍生物等方面对冬凌草甲素的研究概况作一综述.     

冬凌草甲素通过激活caspase诱导HeLa细胞凋亡

目的　研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果　冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase家族抑制剂 ,caspase 1和 3抑制剂能抑制冬凌草甲素诱导HeLa细胞的凋亡 ,6 8 7μmol·L-1冬凌草甲素作用HeLa细胞 12h使caspase 3的活力提高 2倍。 结论　适宜浓度以下 ,冬凌草甲素 (6 8 7μmol·L-1)诱导HeLa细胞凋亡具有浓度与时间依赖性 ,大剂量 (137 4 μmol·L-1)时 ,冬凌草甲素诱导HeLa细胞坏死的程度强于凋亡 ,且通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。     

冬凌草甲素的结构修饰研究进展

冬凌草甲素为贝壳杉烯型二萜类化合物,具有良好的体外抗肿瘤活性,虽然体外活性强,但由于水溶性差、生物利用度低、口服难以吸收等缺点,极大地限制了其临床应用。为了寻找具有更高活性和更好生物利用度的化合物,以开发新的抗肿瘤药物,综述研究者对冬凌草甲素进行的结构改造和修饰的进展。     

微米冬凌草甲素对小鼠H22肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究不同浓度的微米冬凌草甲素对小鼠H22肿瘤细胞凋亡的影响。方法：以腹水瘤（H22）小鼠为对象,观察对照组和高、中、低三个浓度的微米冬凌草甲素对小鼠H22肿瘤细胞凋亡的关系。结果：小鼠H22肿瘤细胞对微米冬凌草甲素较敏感,不仅能明显延长小鼠生存期（P〈0.01）,与丝裂霉素结果相近（P〉0.05）;而且实验后小鼠体重没有明显下降,肿瘤细胞的凋亡率随浓度升高而增大。结论：不同浓度的微米冬凌草甲素能够诱导肿瘤细胞的caspase3基因表达,引起细胞的凋亡,并呈剂量依赖性。     

冬凌草甲素纳米结晶黏附性缓释片的制备及体外评价

目的制备冬凌草甲素纳米结晶黏附片,考察其体外释放性、黏附性和结晶药物形态。方法采用高压均质法将冬凌草甲素制成纳米结晶,以羟丙甲纤维素(HPMC)和卡波姆为生物黏附材料,甘露醇为稀释剂和支架剂制备冬凌草纳米结晶生物黏附性缓释片。采用紫外分光光度法测定冬凌草甲素的含量,采用正交设计结合多元线性回归,以累计释放率为主要考察指标,考察了HPMC、卡波姆、甘露醇的用量对药物溶出的影响,确定了片剂的优化处方,并对片剂的黏附性和体外药物释放做了考察。结果最佳处方含HPMC31.0%,卡波姆21.7%,甘露醇7.44%。片剂中药物以纳米结晶形式从片剂中溶出,而且具有黏附和缓释作用。结论以最佳制备工艺条件制备纳米结晶片,制备工艺简单,重现性好。同时体外实验表明,冬凌草甲素纳米结晶生物黏附性缓释片显示了纳米结晶与生物黏附的双重优点。     

冬凌草甲素片对醋酸诱导的小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

目的考察冬凌草甲素片口服给药对醋酸诱导的小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。方法醋酸诱导的溃疡性结肠炎小鼠分别给予不同剂量的冬凌草甲素片灌胃给药,给药7 d后,考察冬凌草甲素片对溃疡性结肠炎小鼠病变活动(体质量、便潜血及粪便性状)的影响,以及对结肠病理组织学变化,结肠髓过氧化物酶活性及胸腺和脾脏指数的影响。结果冬凌草甲素片口服给药可剂量依赖性的降低结肠炎小鼠的病变活动、减轻结肠炎症、降低髓过氧化物酶活性,改善免疫器官脏器指数,以冬凌草甲素片高剂量给药组的作用更为显著。结论高剂量冬凌草甲素片口服给药对醋酸诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有治疗作用,其机制可能与冬凌草甲素的抗炎和免疫调节作用有关。     

冬凌草叶和茎中冬凌草甲素含量的对比研究

目的：建立了冬凌草叶及茎中冬凌草甲素的高效液相色谱测定法。方法：采用Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２Ｃ１８色谱柱,以甲醇－水（５０：５０）为流动相,在２３８ｎｍ波长处检测。结果：叶和茎中冬凌草甲素的含量分别约为０．５５％和０．０２５％,平均回收率为９７．４５％。结论：该方法准确、灵敏、简便。     

茵陈素减弱顺铂导致原代兔肾小管上皮细胞DNA链间交联和DNA—蛋？…

目的 研究顺铂与肾近端小管ＤＮＡ的作用机制,和茵陈素的干预作用。方法 原代培养兔肾近端小管细胞（ＰＴＣ）,溴乙锭荧光测ＤＮＡ链间交联,＾１２５Ｉ标记测ＤＮＡ－蛋白交联,顺铂与ＰＴＣ保温２４ｈ,茵陈素与ＰＴＣ提前２４ｈ保温后,加入顺铂２６μｍｏｌ．Ｌ＾－１再保温２４ｈ结果：顺铂１３到７８μｍｏｌ．Ｌ＾－１和２６到７８μｍｏｌ．Ｌ＾－１可使ＰＴＣ形成ＤＮＡ链间交联和ＤＮＡ－蛋白交联。茵陈素（０．４,４     

前列腺癌细胞内冬凌草甲素的浓度动态变化

建立了高效液相色谱法测定人前列腺癌PC-3细胞内的冬凌草甲素.采用C<,18>色谱柱,以甲醇-水(53:47)为流动相,检测波长238 nm.细胞内冬凌草甲素在10～300 ng/ml浓度范围内线性关系良好,绝对回收率为77.79%～81.32%,RSD为3.29%～4.09%;日内和日间RSD均小于8%.人前列腺癌PC-3细胞与冬凌草甲素溶液或冬凌草甲素纳米粒孵育后,采用该法测定胞内药物浓度动态变化过程.结果表明,纳米粒可显著提高细胞内冬凌草甲素的聚集并减慢其消除.     

HPLC测定毛叶香茶菜中迷迭香酸和冬凌草甲素含量

目的 建立高效液相色谱法测定毛叶香茶菜中迷迭香酸和冬凌草甲素含量的方法。方法 采用Kromasil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速：1 mL·min^-1,检测波长：239 nm,柱温30 ℃。结果 迷迭香酸和冬凌草甲素的线性范围分别为9.53~4 765 ng和13.66~6 830 ng,平均加样回收率分别为103.3%和95.8%,RSD%分别为1.4%和1.9%。结论 该法简便、稳定、可靠、耐用性良好,可用于毛叶香茶菜的质量控制。     

中压柱层析法提取分离冬凌草甲素的新工艺

采用中压柱层析法提取分离冬凌草甲素,具有洗脱速度快,分离效率高,溶剂无毒无污染,安全、价廉、易得等优点。经重结晶后用薄层扫描法测定含量达99.28%,是一种简便易行的方法。     

中压柱层析法提取分离冬凌草甲素的新工艺

采用中压柱层析法提取分离冬凌草甲素，具有洗脱速度快、分离效率高、溶剂无毒无污染，安全、价廉、易得等优点。经重结晶后用薄层扫描法测定含量达９９．２８％，是一种简便易行的方法。     

冬凌草甲素脂质体的制备及影响因素考察

目的制备冬凌草甲素脂质体,考察各因素对其包封率的影响。方法以包封率为指标,对冬凌草甲素脂质体的处方和工艺因素进行了单因素考察,以确定最佳制备工艺条件。结果冬凌草甲素脂质体的最佳处方为:磷脂质量浓度为20 g.L-1、磷脂与胆固醇质量比为4∶1、磷脂与药物的质量比为20∶1。最佳制备条件为:吐温80的用量为水化介质体积的2%、水化介质为pH值6.5的PBS水溶液、水化时间为30 min、水化温度为50℃。优化后的包封率为(65.25±3.63)%(n=3)。结论磷脂质量浓度、药脂比、吐温80用量对包封率的影响较大。通过处方和工艺的优化,可以制备具有较高包封率的冬凌草甲素脂质体。     

生物素修饰的冬凌草甲素脂质体的处方工艺优化

目的制备生物素修饰的冬凌草甲素脂质体,考察处方和工艺各因素对包封率的影响。方法以包封率为指标,应用L_9(3~4)正交实验设计优化生物素修饰的冬凌草甲素脂质体的处方和工艺。结果最佳处方组成为磷脂的质量浓度为30 g·L~(-1),氢化大豆卵磷脂(hydrogenated soybean phospholipids,HSPC)与大豆卵磷脂(soybean phospholipids,SPC)的质量比为1∶1,pH6.8的磷酸盐缓冲液,药物与磷脂的质量比为1∶18,磷脂与胆固醇的质量比为6∶1。生物素-甲氧基聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(Biotin-PEG2000-DSPE)摩尔浓度为6 mol·L~(-1)。最佳制备工艺为二氯甲烷10 mL,成膜温度40℃。包封率为(81.52±2.21)%(n=3),平均粒径为(131±26)nm,Zeta电位为-(26.2±1.1)mV。结论优化得到最佳处方,制得的生物素修饰的冬凌草甲素脂质体粒径较小,包封率较高。